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脑胶质瘤分子标志物IDH1、IDH2、p53基因突变和Ki-67蛋白表达与病理分级临床特征的关系

实用医学杂志 2018年第9期34卷 1455-1459页

作者：孙怡李惠吴颐李健申龙树王耀辉王剑蓉章宜芬南京中医药大学附属江苏省中医院病理科国家中医药管理局分子生物学三级实验室南京210029 南京中医药大学附属江苏省中医院神经外科南京210029

目的通过联合检测脑胶质瘤样本异柠檬酸脱氢酶1、2(IDH1、IDH2)基因突变/p53基因突变以及Ki-67蛋白表达情况,明确不同脑胶质瘤基因型特征,探讨其表达与胶质瘤病理分级和临床特征的相关性,为临床诊断与治疗提供分子病理学依据。方法采用... 详细信息

目的通过联合检测脑胶质瘤样本异柠檬酸脱氢酶1、2(IDH1、IDH2)基因突变/p53基因突变以及Ki-67蛋白表达情况,明确不同脑胶质瘤基因型特征,探讨其表达与胶质瘤病理分级和临床特征的相关性,为临床诊断与治疗提供分子病理学依据。方法采用直接测序法检测46例胶质瘤样本IDHl基因第132位密码子、IDH2基因第172位密码子突变及p53基因第5~8外显子突变,免疫组织化学方法检测样本Ki-67蛋白表达,分析分子标志物与样本临床特征和病理分级相关情况。结果共检出32.6%(15/46)的样本发生IDH1基因R132H突变,WHOⅡ~Ⅳ级样本中突变率分别为40.0%、58.3%、17.4%,IDH1基因突变与较低年龄(P=0.028)、肿瘤位置发生于额叶(P=0.002)、WHOⅡ~Ⅲ级组织学分级(P=0.047)、Ki-67蛋白低表达(P=0.034)显著相关;检出4例胶质母细胞瘤样本发生p53基因突变,突变位点位于第7、8外显子,并伴IDH1基因野生型;所有样本Ki-67均有阳性表达,在Ⅱ~Ⅳ级胶质瘤中Ki-67表达呈上升趋势,不同级别胶质瘤间Ki-67阳性表达程度有统计学差异(P<0.01),Ki-67低表达组IDH1突变率高于Ki-67高表达组,IDH1基因突变与Ki-67表达呈负相关。结论不同病理分型胶质瘤的IDH1基因突变比例存在差异,在WHOⅡ~Ⅲ级中最高,IDH1、Ki-67表达水平与胶质瘤分级密切相关,p53基因突变在原发性胶质母细胞瘤中更常见,IDH1、p53、Ki-67联合检测有利于胶质瘤的诊断分级和预后评估,具有一定的临床价值。

关键词：胶质瘤突变 IDH1 IDH2 p53 Ki-67

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EGFR第一内含子(CA)n多态与非小细胞肺癌EGFR TKIs治疗敏感性的关系

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临床和实验医学杂志 2014年第17期13卷 1426-1429页

作者：王剑蓉李惠王耀辉刘春样王露司海鹏韩梅赖仁胜南京中医药大学附属医院病理科国家中医药管理局三级分子生物学实验室江苏南京210029

目的探讨表皮生长因子受体（EGFR）基因第一内含子（CA）n双核苷酸重复序列多态性与非小细胞肺癌（NSCLC）患者EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗敏感的相关性。方法用基因测序的方法检测了NSCLC患者274例肿瘤标本、13例血液标本EGFR基因第一内... 详细信息

目的探讨表皮生长因子受体（EGFR）基因第一内含子（CA）n双核苷酸重复序列多态性与非小细胞肺癌（NSCLC）患者EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗敏感的相关性。方法用基因测序的方法检测了NSCLC患者274例肿瘤标本、13例血液标本EGFR基因第一内含子（CA）n重复多态,并随访了其中76例患者EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗情况,统计学分析（CA）n多态性与EGFR-TKIs治疗疗效的相关性。结果 274例NSCLC患者中共检测到12种不同的（CA）n重复多态,包含的CA重复序列数为9~23。118例（43.07%）患者为CA短重复（n≤16）,156例（56.93%）为CA长重复（n〉16）。13例NSCLC患者血液标本,5例（38.46%）为CA短重复（n≤16）,8例（61.54%）为CA长重复（n〉16）。携带短CA重复序列的患者EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗后的疾病控制率为80.56%,而在长CA重复序列的患者为50%,（CA）n多态性与近期疗效具有显著的相关性（P=0.005）。结论 EGFR基因第一内含子区（CA）n多态性可以应用于临床预测NSCLC患者EGFR酪氨酸激酶抑制剂的近期疗效。

关键词：非小细胞肺癌 EGFR基因基因多态性分子靶向治疗

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宁心红杞胶囊对围绝经大鼠卵巢颗粒细胞凋亡及Bcl-2和Bax表达的影响

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中药药理与临床 2009年第4期25卷 58-60页

作者：谢玲赖仁胜朱长乐马红吕晔南京中医药大学附属医院病理科/国家中医药管理局分子生物学三级实验室南京210029 南京中医药大学南京210029 中国科学院江苏省植物研究所南京210029

目的:探讨宁心红杞胶囊对围绝经大鼠卵巢颗粒细胞凋亡及其相关基因Bax和Bc l-2表达的影响。方法:选用4月龄雌性大鼠为正常对照组,14月龄阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为衰老大鼠模型。模型动物随机分别给宁心红杞胶囊或补佳乐... 详细信息

目的:探讨宁心红杞胶囊对围绝经大鼠卵巢颗粒细胞凋亡及其相关基因Bax和Bc l-2表达的影响。方法:选用4月龄雌性大鼠为正常对照组,14月龄阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为衰老大鼠模型。模型动物随机分别给宁心红杞胶囊或补佳乐治疗。采用原位末端核苷酸标记法(TUNEL)检测卵巢细胞凋亡,免疫组化法检测凋亡相关因子Bc l-2、Bax。结果:宁心红杞胶囊高、中剂量组卵巢细胞凋亡阳性表达与模型组比较有显著性差异,同时可使卵巢抑凋亡基因Bc l-2表达增强,促凋亡基因Bax表达减弱,Bc l-2/Bax比例增加。结论:宁心红杞胶囊通过抑制Bax蛋白的表达,上调Bc l-2蛋白表达,延缓卵巢颗粒细胞凋亡,进而改善卵巢功能。

关键词：宁心红杞胶囊围绝经大鼠细胞凋亡

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EGFR第一内含子(CA)n双核苷酸重复多态性和基因突变与肺癌分子靶向治疗的反应

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现代肿瘤医学 2009年第11期17卷 2113-2118页

作者：王剑蓉张树鹏赖仁胜南京中医药大学附属医院病理科国家中医药管理局三级分子生物学实验室江苏南京210029

目的:对肺癌组织EGFR基因突变和第一内含子(CA)n双核苷酸重复多态性与分子靶向药物治疗反应相关性进行初步研究。方法:用基因测序的方法检测了观察组共116例肺癌体细胞标本;对照组20例肺癌患者血液标本。对全部标本的EGFR基因18、19、2... 详细信息

目的:对肺癌组织EGFR基因突变和第一内含子(CA)n双核苷酸重复多态性与分子靶向药物治疗反应相关性进行初步研究。方法:用基因测序的方法检测了观察组共116例肺癌体细胞标本;对照组20例肺癌患者血液标本。对全部标本的EGFR基因18、19、21外显子,以及其中48例第一内含子(CA)n重复序列进行基因测序分析并随访了45例肺癌患者分子靶向药物(易瑞沙)治疗情况。结果:观察组116例标本中共发现20例(17.25%)EGFR基因突变,其中17例为外显子突变,3例为内含子杂合突变。对照组20例肺癌患者血液标本均未发现突变。肺腺癌的突变率为21.62%,比鳞癌(8.33%)、其它类型癌(11.11%)略高,但无统计学差异。EGFR基因突变在女性患者中(7/36,19.45%)所占比例比男性患者(13/80,16.25%)略高,但无统计学差异。观察组中,随访外显子突变患者服用易瑞沙的有效率(62.5%)显著高于未突变者(0%)(P<0.01),疾病控制率(100%)高于未突变组(44.4%)(P<0.05)。外显子突变患者服用易瑞沙治疗的疾病控制率(100%)高于未服用者(40%)(P<0.05)。内含子杂合的3例中有2例服用易瑞沙,有效率为0%,疾病控制率50%。观察组与对照组有23例(CA)n短重复(CA≤16)(47.9%),25例(CA)n长重复(CA>16)(52.1%)。EGFR第一内含子(CA)n重复片段长短与基因突变无明显相关,OR(OddsRatio)(2。观察组中,16例突变患者与18例未突变患者(CA)n重复片段的长短与分子靶向药物治疗有效率、疾病控制率均无统计学差异(P>0.05)。结论:EGFR基因突变组患者分子靶向药物治疗有效率(62.5%vs0)、疾病控制率(100%vs44.4%)要明显优于无突变组。在肺癌中,EGFR基因体细胞突变是决定表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂敏感性的最重要的因素。(CA)n重复片段长短与EGFR基因突变无明显相关。分析突变因素关联的(CA)n短重复患者与(CA)n长重复患者的分子靶向药物治疗有效率、疾病控制率无统计学差异。由于部分未突变肺癌患者使用易瑞沙出现一定的疾病控制率,有关分子靶向药物疗效与(CA)n重复的关系有待进一步单因素研究。

关键词：表皮生长因子受体基因突变多态分子靶向治疗肺癌易瑞沙

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胃癌石蜡包埋组织的miRNA实时荧光定量PCR表达

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现代肿瘤医学 2009年第10期17卷 1853-1856页

作者：吴晓斌赖仁胜刘丽王剑蓉谢玲张树鹏杨林森南京中医药大学附属医院病理科/国家中医药管理局三级细胞分子实验室江苏南京210029 美国应用生物系统公司上海市场部上海200000

目的:研究miRNA在胃癌石蜡包埋组织和新鲜组织的表达。方法:应用实时荧光定量PCR检测6例石蜡包埋胃癌组织及其正常胃黏膜组织、新鲜胃癌组织及其正常黏膜组织的miRNA表达(let-7a,miR-21,miR-155),以U-6为内参对照。结果:胃癌石蜡包埋组... 详细信息

目的:研究miRNA在胃癌石蜡包埋组织和新鲜组织的表达。方法:应用实时荧光定量PCR检测6例石蜡包埋胃癌组织及其正常胃黏膜组织、新鲜胃癌组织及其正常黏膜组织的miRNA表达(let-7a,miR-21,miR-155),以U-6为内参对照。结果:胃癌石蜡包埋组织与胃癌新鲜组织中miRNA表达呈平行性高表达。结论:可以利用石蜡组织进行miRNA相关指标表达研究。

关键词：胃癌石蜡 miRNA表达实时荧光定量PCR

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宁心红杞胶囊对围绝经大鼠卵巢局部自分泌及旁分泌因子的调节作用

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中国中西医结合杂志 2008年第3期28卷 242-244页

作者：谢玲赖仁胜王黎马红吕晔南京中医药大学附属医院病理科国家中医药管理局分子生物三级实验室南京210029 南京中医药大学中国科学院江苏省植物研究所

目的探讨宁心红杞胶囊对围绝经大鼠卵巢局部自分泌及旁分泌因子的调节作用。方法选用4月龄雌性大鼠(正常组),14月龄阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠(作为老年大鼠模型)。模型大鼠随机分为宁心红杞大、中、小剂量组、阳性药(雌二醇)... 详细信息

目的探讨宁心红杞胶囊对围绝经大鼠卵巢局部自分泌及旁分泌因子的调节作用。方法选用4月龄雌性大鼠(正常组),14月龄阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠(作为老年大鼠模型)。模型大鼠随机分为宁心红杞大、中、小剂量组、阳性药(雌二醇)组和模型组,分别给予相应药物。HE染色观察卵巢生长卵泡、黄体等情况;免疫组化检测卵巢雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、促卵泡激素(FSH)、促黄体激素(LH)、抑制素α(INHα)、激活素(ACT)α-β、卵泡抑制素(FS)、胰岛素样生长因子(IGF)-1的表达。结果与模型组比较,宁心红杞大、中剂量组卵巢指数、生长卵泡数增加(P<0.05),FSH、LH水平表达降低(P<0.05);宁心红杞大剂量组和阳性药物组ER表达水平上升(P<0.05),宁心红杞大、中剂量组IGF-1和INHα表达水平升高(P<0.05),而ACTα-β和FS表达水平下降(P<0.05)。结论宁心红杞胶囊可使卵巢局部自分泌、旁分泌系统调节因子相互协调平衡,进而改善卵巢功能。

关键词：宁心红杞胶囊围绝经大鼠自分泌旁分泌

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非小细胞肺癌表皮生长因子受体双向基因测序研究

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中华肿瘤杂志 2006年第8期28卷 599-602页

作者：赖仁胜谢玲申龙树朱长乐钱军南京中医药大学附属医院病理科国家中医药管理局分子生物学三级实验室 210029 南京全军肿瘤中心肿瘤科

目的探讨中国人非小细胞肺癌表皮生长因子受体(EGFR)第18、19、21外显子基因突变状态。方法32例病理证实的非小细胞肺癌组织标本,通过模板DNA提取、定量和Touchdown PCR扩增EGFR exon 18、19、21序列,进行正、负链基因测序分析,并与10... 详细信息

目的探讨中国人非小细胞肺癌表皮生长因子受体(EGFR)第18、19、21外显子基因突变状态。方法32例病理证实的非小细胞肺癌组织标本,通过模板DNA提取、定量和Touchdown PCR扩增EGFR exon 18、19、21序列,进行正、负链基因测序分析,并与10例非小细胞肺癌患者血液标本对照。结果32例非小细胞肺癌组织发现7例共9种突变,即已报道的5例19外显子缺失和未见报道的21exon T>G(L833V)及A>T(H835L)杂合性突变,另有2例内含子多态改变。中国人非小细胞肺癌突变率为28．1％(9／32),肺腺癌突变率为31．6％(6／19)。结论中国人非小细胞肺癌的EGFR突变率与已报道的亚洲人女性肺腺癌的突变率相似,但存在中国人自身新的突变位点(L833V和H835L)及内含子改变,该突变率与国内易瑞沙治疗非小细胞肺癌有效率基本吻合。

关键词：非小细胞肺癌表皮生长因子受体第18、19、21外显子基因突变

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