检索结果-内蒙古大学图书馆

中华检验医学杂志 2012年第3期35卷 212-215页

作者：兰小鹏王开宇南京军区福州总医院全军临床检验医学研究所 350025

适配子是能通过特定三维结构与多种靶标紧密结合的寡核苷酸或肽。由于具有亲和力高，特异性好，分子量小，免疫原性低，结构稳定，易合成等优点，适配子替代传统抗体，在多种疾病的基础研究、药物筛选、临床诊断及疾病治疗中具有广泛的... 详细信息

适配子是能通过特定三维结构与多种靶标紧密结合的寡核苷酸或肽。由于具有亲和力高，特异性好，分子量小，免疫原性低，结构稳定，易合成等优点，适配子替代传统抗体，在多种疾病的基础研究、药物筛选、临床诊断及疾病治疗中具有广泛的应用前景。现对适配子技术在自身免疫性疾病的诊断、治疗和致病机制研究中的应用现状及进展进行阐述。（中华捡验医学杂志，2012，35：212．215）

关键词：自身免疫疾病适体核苷自身抗体 SELEX适体技术

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MYH9异常的实验室和临床诊断策略

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中华检验医学杂志 2013年第5期36卷 475-478页

作者：李卫滨兰小鹏南京军区福州总医院全军临床检验医学研究所 350025

肌球蛋白重链9（MYH9）异常是一组由MYH9基因突变引起的遗传性血小板减少症，包括May—Hegglin异常、Epstein综合征、Fechtner综合征和Sebastian综合征。MYH9异常常被误诊为原发性血小板减少性紫癜。本文对其发病机制、临床体征、实验... 详细信息

肌球蛋白重链9（MYH9）异常是一组由MYH9基因突变引起的遗传性血小板减少症，包括May—Hegglin异常、Epstein综合征、Fechtner综合征和Sebastian综合征。MYH9异常常被误诊为原发性血小板减少性紫癜。本文对其发病机制、临床体征、实验室检查和鉴别诊断进行阐述，以进一步加深临床和实验室对MYH9的认识，同时引起临床的足够重视。

关键词：血小板减少肌球蛋白重链血小板计数

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适配体技术及其在医学检验研究中的作用

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临床检验杂志 2012年第10期30卷 765-768页

作者：兰小鹏南京军区福州总医院全军临床检验医学研究所福州350000

适配体是利用指数富集配体的系统进化技术从含有大量序列的随机文库中筛选出来,能通过特定三维结构与靶标紧密结合的单链DNA或RNA。适配体不仅能与各种有机物或无机物靶标分子高特异性、高亲和力结合,还具有分子量小,免疫原性低,稳定性... 详细信息

适配体是利用指数富集配体的系统进化技术从含有大量序列的随机文库中筛选出来,能通过特定三维结构与靶标紧密结合的单链DNA或RNA。适配体不仅能与各种有机物或无机物靶标分子高特异性、高亲和力结合,还具有分子量小,免疫原性低,稳定性好,制备和标记方便等优点。适配体将有可能替代抗体,在疾病的诊断和治疗中发挥重要的作用。本文就适配体作用和筛选的原理及策略、适配体技术在医学检验研究中的作用以及面临的挑战作简要的述评。

关键词：适配体指数富集配体的系统进化技术信号识别疾病标志物

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氧化、丙二醛修饰低密度脂蛋白的ELISA检测法及临床应用

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临床检验杂志 2007年第6期25卷 404-406页

作者：周助权汪俊军付丽张春妮南京军区南京总医院全军临床检验医学研究所

目的建立血浆氧化、修饰低密度脂蛋白(LDL)ELISA检测法并进行临床研究。方法采用自制的多克隆抗体建立ELISA分别测定铜离子氧化型(Ox)和丙二醛(MDA)修饰型LDL,并对方法进行考核;对冠心病(CHD)患者、键康对照人群Ox-LDL、MDA-LDL水平进... 详细信息

目的建立血浆氧化、修饰低密度脂蛋白(LDL)ELISA检测法并进行临床研究。方法采用自制的多克隆抗体建立ELISA分别测定铜离子氧化型(Ox)和丙二醛(MDA)修饰型LDL,并对方法进行考核;对冠心病(CHD)患者、键康对照人群Ox-LDL、MDA-LDL水平进行分析。结果抗Ox-LDL与MDA-LDL几乎没有反应性;Ox-LDL和MDA-LDL测定平均批内变异(CV)分别为6.1%和6.8%,平均批间CV分别为9.7%和10.1%;Ox-LDL和MDA-LDL测定平均回收率分别为95.1%和93.7%;两法检测限均为:0.05～1.5mg/L。CHD患者较正常人血浆Ox-LDL[(178.1±73.8)mg/Lvs.(82.7±29.1)mg/L,P<0.01]、MDA-LDL[(48.7±25.6)mg/Lvs.(39.2±32.9)mg/L,P<0.05]水平均升高;Ox-LDL作为预测动脉粥样硬化发生指标的价值优于MDA-LDL。Ox-LDL、MDA-LDL分别同TC、TG、LDL-C呈正相关,而与HDL-C呈负相关。结论建立的方法特异、灵敏、准确,适于临床检测。高Ox-LDL、MDA-LDL与CHD密切相关。

关键词：低密度脂蛋白氧化修饰酶联免疫吸附试验动脉粥样硬化

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抗人Id3蛋白多克隆抗体的制备及其在肿瘤细胞内的定位研究

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细胞与分子免疫学杂志 2010年第9期26卷 871-873页

作者：李晓军仲爱芳王凯贾丽陈芳芳虞伟南京军区南京总医院全军临床检验医学研究所江苏南京210002

目的:表达及纯化重组人分化抑制因子3(Id3)蛋白,制备兔抗人Id3多克隆抗体。方法:在大肠杆菌BL21(DE3)中表达并纯化重组人Id3融合蛋白,以纯化Id3重组蛋白为免疫原,免疫新西兰家兔,制备兔抗人Id3多克隆抗体,通过亲合层析实验去除抗血清中... 详细信息

目的:表达及纯化重组人分化抑制因子3(Id3)蛋白,制备兔抗人Id3多克隆抗体。方法:在大肠杆菌BL21(DE3)中表达并纯化重组人Id3融合蛋白,以纯化Id3重组蛋白为免疫原,免疫新西兰家兔,制备兔抗人Id3多克隆抗体,通过亲合层析实验去除抗血清中非特异性成分,免疫双向扩散、间接ELISA及Western blot法检测抗体效价和特异性。用间接免疫荧光试验(IFA)对人乳腺上皮癌细胞(MCF7)、人前列腺癌细胞(PC-3M)、人肺腺癌细胞(A549)细胞内Id3表达进行定位研究。结果:SDS-PAGE电泳、Western blot分析证实,表达载体Id3/pET-32a在大肠杆菌BL21中经诱导可大量表达His-Tag Id3融合蛋白;表达产物通过镍离子亲和层析法纯化得到相对分子质量(Mr)为34 000的Id3融合蛋白;Id3重组蛋白免疫家兔获得的抗血清效价分别为1∶8(双向扩散)和1∶8 000(ELISA),Western blot分析表明抗体具有抗人Id3的良好特异性。IFA结果发现,A549细胞内Id3表达量很低;在MCF7和PC-3M细胞内,Id3呈高水平表达,且主要定位于核浆。结论:重组人Id3蛋白的表达纯化及抗人Id3多克隆抗体的研制为进一步研究该蛋白的功能及其临床应用研究提供了有利工具。

关键词：分化抑制因子3(Id3) 抗体 A549细胞

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表观遗传因素在类风湿关节炎中的作用

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中华检验医学杂志 2013年第8期36卷 677-680页

作者：李晓军奚海燕南京军区南京总医院全军临床检验医学研究所 210002

表观遗传是指基因组DNA序列不发生变化，但基因表达发生了可遗传的改变。其涉及机制包括DNA甲基化、组蛋白修饰及非编码RNA调控等。研究表观遗传因素在自身免疫病中的作用已成为目前热点研究领域之一。类风湿关节炎（RA）是一种慢性自... 详细信息

表观遗传是指基因组DNA序列不发生变化，但基因表达发生了可遗传的改变。其涉及机制包括DNA甲基化、组蛋白修饰及非编码RNA调控等。研究表观遗传因素在自身免疫病中的作用已成为目前热点研究领域之一。类风湿关节炎（RA）是一种慢性自身免疫性疾病，全球发病率为0．5％～1．0％，发病机制目前尚不明确。近年来的研究发现，表观遗传学改变在RA发病中有重要作用，其中DNA甲基化和组蛋白修饰异常是造成免疫耐受功能受损和RA发生的主要表观遗传学机制，这些表观遗传变化可能为治疗自身免疫病提供新的个性化治疗方案。

关键词：关节炎类风湿表观基因组学 DNA甲基化组蛋白类微RNAs

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Id3-EGFP融合基因表达载体的构建及其在人肺癌细胞A549中的表达

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中华检验医学杂志 2006年第12期29卷 1111-1115页

作者：李晓军汪萍贾丽马百坤夏欣一虞伟武建国南京军区南京总医院全军临床检验医学研究所 210002

目的构建人分化抑制因子3(Id3)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合基因表达载体pEGFP/Id3,使Id3-EGFP融合蛋白在人肺癌细胞A549中得到表达。方法扩增并克隆人Id3cDNA,构建Id3和EGFP的融合基因表达载体pEGFP/Id3。用脂质体转染技术将pEGFP... 详细信息

目的构建人分化抑制因子3(Id3)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合基因表达载体pEGFP/Id3,使Id3-EGFP融合蛋白在人肺癌细胞A549中得到表达。方法扩增并克隆人Id3cDNA,构建Id3和EGFP的融合基因表达载体pEGFP/Id3。用脂质体转染技术将pEGFP/Id3导入A549细胞,使Id3-EGFP融合蛋白在A549细胞得到表达。结果经转化细菌、抽提质粒、酶切鉴定和DNA序列分析证实,Id3基因已正确插入pEGFP-N1中EGFP基因的上游,获得融合基因表达载体pEGFP/Id3。利用脂质体转染技术将pEGFP和pEGFP/Id3转入A549细胞,24h后,在激光共聚焦荧光显微镜下可观察到表达EGFP的细胞发出绿色荧光,流式细胞术分析表明,转染48h时EGFP阳性表达细胞率最高,分别可达65·40%和60·50%。pEGFP/Id3转染的A549细胞S期细胞和G2期细胞比例均明显高于pEGFP转染细胞组和未转染细胞组,表明Id3基因的导入可诱导细胞从G1期向G2期发展,从而促进细胞增殖。结论真核表达载体pEGFP/Id3的成功构建及其在A549细胞中的表达,为研究Id3的细胞定位表达及Id3在细胞生长调控中的作用奠定了实验基础。

关键词：分化抑制因子肺肿瘤重组融合蛋白

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荧光定量RT-PCR检测去下颌下腺大鼠睾丸annexin 5 mRNA和Bax mRNA的表达

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解剖学报 2008年第1期39卷 106-110页

作者：王晨阳马百坤侯林徐会茹黄祝蒋超黄宇烽姚兵南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所

目的观察下颌下腺切除对大鼠睾丸膜联蛋白5(annexin 5)和Bax mRNA表达的影响。方法切除大鼠下颌下腺,分别于术后14d、28d和42d处死大鼠,提取睾丸总RNA,反转录,设计特异性引物和Taqman探针,荧光定量RT-PCR检测annexin 5和Bax mRNA的表达... 详细信息

目的观察下颌下腺切除对大鼠睾丸膜联蛋白5(annexin 5)和Bax mRNA表达的影响。方法切除大鼠下颌下腺,分别于术后14d、28d和42d处死大鼠,提取睾丸总RNA,反转录,设计特异性引物和Taqman探针,荧光定量RT-PCR检测annexin 5和Bax mRNA的表达。结果荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,切除下颌下腺14d和28d后,实验组大鼠睾丸annexin 5 mRNA分别升高了38.5%和55.3%,但无显著性差异;实验组大鼠睾丸Bax mRNA分别升高了70.6%和80.5%,其升高具有显著性差异(P<0.05和P<0.01);切除下颌下腺42d时,实验组大鼠睾丸annexin 5和Bax mRNA分别升高5.6%和2.3%,几乎恢复到与对照组相同的水平。结论下颌下腺切除后14d和28d可造成大鼠睾丸annexin 5和Bax mRNA的表达升高;切除后42d,annexin 5和Bax mRNA又恢复到正常水平。

关键词：下颌下腺睾丸 annexin 5 Bax 荧光定量RT-PCR 大鼠

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有关HBV血清标志物模式的几个问题

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临床检验杂志 2007年第4期25卷 241-243页

作者：武建国南京军区南京总医院全军临床检验医学研究所南京210002

《全国临床检验操作规程》第3版中,有关HBV血清标志物(HBVM)模式的解释引起了一些读者的质疑。质疑的主要是HBsAg、抗HBs同时阳性(规程中未列入)和HBeAg、抗HBe同时阳性两种少见模式。我们向关心本版规程并不吝赐教的读者表示由衷的谢... 详细信息

《全国临床检验操作规程》第3版中,有关HBV血清标志物(HBVM)模式的解释引起了一些读者的质疑。质疑的主要是HBsAg、抗HBs同时阳性(规程中未列入)和HBeAg、抗HBe同时阳性两种少见模式。我们向关心本版规程并不吝赐教的读者表示由衷的谢意和敬意。作为编者之一,愿就HBVM相关的几个问题略陈浅见,就教于知者。[第一段]

关键词：乙型肝炎病毒血清标志物反应模式

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一个2p25与12p13隐匿性重排家系的遗传学诊断及基因分析

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中华医学遗传学杂志 2014年第4期31卷 444-448页

作者：涂向东曾健丛学文严爱贞林宇翔张晓丘丽萍周游兰风华南京军区福州总医院全军检验医学研究所实验科福州350025

目的对1例智力低下与精神发育异常的患儿及其双亲进行染色体畸变分析。方法应用染色体G显带分析、亚端粒区多重连接依赖探针扩增（multiplex ligation-dependent probe amplification，MLPA）、荧光原位杂交（fluorescence in situ hybr... 详细信息

目的对1例智力低下与精神发育异常的患儿及其双亲进行染色体畸变分析。方法应用染色体G显带分析、亚端粒区多重连接依赖探针扩增（multiplex ligation-dependent probe amplification，MLPA）、荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）及单核苷酸多态性芯片（single nucleotide polymorphisms array，SNP-array）等技术分析该家系染色体及相关基因的异常。结果染色体G显带检测显示患儿染色体核型为46，XX，母亲核型为46，XX，add（12）（p13），父亲核型为46，XY。亚端粒区MLPA检测提示患儿2p25区ACP1基因拷贝数减少，12p13区SLC6A12、KDM5A基因拷贝数增加，父母MLPA未见异常。SNP-array显示患儿12p13．33-p12．3区15．142Mb重复，造成SLC6A12等9个基因重复，2p25．3区3．194Mb杂合性缺失，造成sNTG2等11个基因缺失。FISH分析提示患儿46，XX，ish，der（2），t（2；12）（p25；p13）mat，即2p25部分单体和12p13部分三体，患儿母亲46，XX，isht（2；12）（p25；p13），为染色体隐匿性平衡易位携带者。SNTG2、MYTIL基因缺失，SLC6A12基因重复可能与患儿精神发育异常、智力低下有关。结论MLPA、FISH和SNP-Array等技术联合应用可以更好地从基因组水平诊断隐匿性染色体重排。

关键词：隐匿性重排多重连接依赖探针扩增单核苷酸多态性芯片荧光原位杂交

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