检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学报 2007年第5期47卷 838-842页

作者：汪洋郑会明杨梦华钟增涛朱军南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

通过携带有mariner转座子的质粒pJZ290随机插入诱变中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)建立突变子文库,并从中筛选到自体诱导物(autoinducer,AI)部分缺失突变株YW1。Arbitrary PCR扩增、DNA测序得到YW1基因组DNA中mariner转座子两端侧... 详细信息

通过携带有mariner转座子的质粒pJZ290随机插入诱变中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)建立突变子文库,并从中筛选到自体诱导物(autoinducer,AI)部分缺失突变株YW1。Arbitrary PCR扩增、DNA测序得到YW1基因组DNA中mariner转座子两端侧翼序列,经DNA序列拼接在GenBank上进行同源性分析后获得一个621bp的完整的开放阅读框(ORF),该ORF编码的酶具有206个氨基酸,与草木樨中华根瘤菌(Sinorhizobium medicae)WSM419的LuxI类自体诱导物合成酶(autoinducer synthase)TraI的同源性高达99%。因此,也将该基因命名为traⅠ。将该基因克隆到广宿主范围表达载体pYC12并在大肠杆菌Escherichia coli DH5α中成功表达,C18反相薄层层析(TLC)在阳性重组子培养上清中检测到四种自体诱导物分子,其中的两种正是AI缺失突变株YW1所缺失的AI,这些结果表明该traⅠ基因在苜蓿中华根瘤菌负责合成两种自体诱导物分子,为进一步研究其群体感应系统奠定了理论基础。

关键词： Sinorhizobium meliloti 群体感应自体诱导物合成酶 mariner转座子

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3株高温蛋白酶产生菌的分离与鉴定

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应用与环境生物学报 2007年第4期13卷 561-564页

作者：张燕新赵印许敬亮吴莹胡冰沈标南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 南京农业大学-天美电镜技术合作示范试验室南京210095

从云南温泉的污泥样品中分离到3株产蛋白酶的高温菌SB11、SB31和SC5,通过其形态特征、生理生化特征和16S rDNA序列比对分析等,初步鉴定这3株菌都属于土芽孢杆菌属(Geobacillus),其最适生长温度为60℃,最适pH为6.三者的蛋白酶活力分别可... 详细信息

从云南温泉的污泥样品中分离到3株产蛋白酶的高温菌SB11、SB31和SC5,通过其形态特征、生理生化特征和16S rDNA序列比对分析等,初步鉴定这3株菌都属于土芽孢杆菌属(Geobacillus),其最适生长温度为60℃,最适pH为6.三者的蛋白酶活力分别可达35.6、26.1和26.6UmL-1,最适酶反应温度都在70℃以上,其中菌株SB31的蛋白酶其最适酶反应温度高达80℃,远高于一般动植物来源的蛋白酶.

关键词：高温蛋白酶高温菌土芽孢杆菌属

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检测致畸物的gfp基因工程菌的构建

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应用与环境生物学报 2007年第1期13卷 83-86页

作者：顾立锋蒋建东何健黄星贾开志李顺鹏南京农业大学生命科学学院微生物学系/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

RecA与UvrA是细胞SOS系统中重要的修复蛋白,在细胞DNA损伤后诱导表达.将报告基因绿色荧光蛋白基因(gfpmut3a)分别置于recA和uvrA启动子调控下,构建成质粒pRecAgfp和pUvrAgfp,并转化***5α,构建成检测菌株ERS101和EUS101.试验发现,菌株ER... 详细信息

RecA与UvrA是细胞SOS系统中重要的修复蛋白,在细胞DNA损伤后诱导表达.将报告基因绿色荧光蛋白基因(gfpmut3a)分别置于recA和uvrA启动子调控下,构建成质粒pRecAgfp和pUvrAgfp,并转化***5α,构建成检测菌株ERS101和EUS101.试验发现,菌株ERS101和EUS101在致畸物吖啶橙处理后,GFP的表达量增高,菌悬液经507nm的蓝光激发后产生的绿色荧光明显增强,且与吖啶橙的浓度具有一定的相关性,即使在0.5μgmL-1的吖啶橙诱导下也能检测到荧光增强效应.对硝基酚等多种致畸物处理后的检测菌株均有荧光增强效应.

关键词： GFP 致畸物基因工程菌构建

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利用偶联反应光度法检测甲磺隆

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农药 2007年第2期46卷 107-109,115页

作者：潘继杰黄星孙笑非何健崔中利李顺鹏南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

在pH值为7.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠体系中,甲磺隆与亚硝酸钠反应生成重氮盐,重氮盐与α-萘胺进行偶联反应生成红棕色化合物,该产物在500nm处有最大吸光值,据此,建立了利用偶联反应测定甲磺隆残留的新方法。在最佳条件下,甲磺隆质量浓... 详细信息

在pH值为7.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠体系中,甲磺隆与亚硝酸钠反应生成重氮盐,重氮盐与α-萘胺进行偶联反应生成红棕色化合物,该产物在500nm处有最大吸光值,据此,建立了利用偶联反应测定甲磺隆残留的新方法。在最佳条件下,甲磺隆质量浓度与吸光值呈良好的线形关系,线性范围为10￣150mg/L。平均回收率为98.10%,相对标准偏差为2.12%。

关键词：甲磺隆偶联反应分光光度法

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运用mRNA差异显示技术研究黄伞发育相关基因

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菌物学报 2007年第2期26卷 243-248页

作者：季哲李玉祥赵明文潘迎捷南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 上海水产大学上海200090

采用mRNA差异显示技术对黄伞菌丝体、原基、菇蕾、子实体菌柄和子实体菌盖进行研究,获得了在生殖生长阶段差异表达的4条cDNA片段T_(11)G B0304、T_(11)G B0304-2、T_(11)G B0322与T_(11)C B0310,经过回收、重扩增、克隆与鉴定后进行测... 详细信息

采用mRNA差异显示技术对黄伞菌丝体、原基、菇蕾、子实体菌柄和子实体菌盖进行研究,获得了在生殖生长阶段差异表达的4条cDNA片段T_(11)G B0304、T_(11)G B0304-2、T_(11)G B0322与T_(11)C B0310,经过回收、重扩增、克隆与鉴定后进行测序分析,结果发现T_(11)G B0322的序列在GenBank中与氧类固醇结合蛋白(oxysterol-binding protein)基因序列的同源性达到41％。再经过半定量PCR方法验证,表明T_(11)G B0322基因片段是在生殖生长阶段差异表达的基因片段。

关键词：差异cDNA片段氧类固醇结合蛋白半定量PCR

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一株毒死蜱降解菌株Sphingomonas sp. Dsp-2的分离鉴定及降解特性

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土壤学报 2007年第4期44卷 734-739页

作者：李晓慧贾开志何健李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

从长期受毒死蜱污染的污水处理池中分离到一株毒死蜱高效降解菌株,命名为Dsp-2.经生理生化和16S rDNA 序列同源性分析,鉴定其为鞘胺醇单胞菌属（Sphingomonas sp.）细菌.该菌株能在24 h内完全降解100 mg L^-1的毒死蜱,降解特性的研究表... 详细信息

从长期受毒死蜱污染的污水处理池中分离到一株毒死蜱高效降解菌株,命名为Dsp-2.经生理生化和16S rDNA 序列同源性分析,鉴定其为鞘胺醇单胞菌属（Sphingomonas sp.）细菌.该菌株能在24 h内完全降解100 mg L^-1的毒死蜱,降解特性的研究表明：随着农药浓度的加大,绝对降解量也增大,但高浓度的毒死蜱会导致不能完全降解;起始接种量和降解毒死蜱的速率呈正相关;外加氮源营养能够明显促进降解;1 mmol L-1的Fe^3＋和Ni^2＋等对其降解性能有抑制作用.研究了Dsp-2在土壤中降解毒死蜱的效果.结果表明,Dsp-2在三种供试土壤中都能有效的降解毒死蜱,其中在潮土中降解的速率最快,且当毒死蜱的浓度范围在1～100 mg kg^-1内Dsp-2都能有效的降解毒死蜱,7 d降解率达到85%～98%.

关键词：毒死蜱鞘氨醇单胞菌降解特性土壤

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蜜蜂螺原体南京分离株M10形态的多样性

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南京农业大学学报 2007年第3期30卷 58-62页

作者：阮康勤于汉寿张晶纪燕玲王志伟陈永萱南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京农业大学生物学实验中心江苏南京210095

为进一步了解蜜蜂螺原体的生长、生殖及致病特点,以分离自患"爬蜂病"蜜蜂体内的螺原体菌株M10为研究对象,测定了其生长曲线,利用透射电镜观察其不同生长期的形态。结果表明:在R-2培养基中,不同生长期的蜜蜂螺原体M10形态差异... 详细信息

为进一步了解蜜蜂螺原体的生长、生殖及致病特点,以分离自患"爬蜂病"蜜蜂体内的螺原体菌株M10为研究对象,测定了其生长曲线,利用透射电镜观察其不同生长期的形态。结果表明:在R-2培养基中,不同生长期的蜜蜂螺原体M10形态差异很大,但其形态变化又具有一定的规律性。延滞期的M10以粗短的形态为主;在对数期和稳定期,M10具有丰富的形态多样性,如芽状、分支状、串珠状等;到达衰亡期,M10则变得细长,菌体自身及菌体之间极易缠绕并聚集成团。此外,观察到M10具有尖端结构和纤毛状结构,大多数菌体具有"一尖一圆"结构,纤毛状结构长度差异显著。本研究首次描述了不同生长期蜜蜂螺原体的形态变化,发现螺原体纤毛状结构最长可达1 860.5 nm,并首次在人工培养基中发现螺原体具有类似纤毛接合现象。

关键词：螺原体生长曲线形态多样性尖端结构纤毛状结构

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蜜蜂螺原体的分离鉴定及致病性研究

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微生物学通报 2007年第4期34卷 695-699页

作者：阮康勤周秀文张晶于汉寿纪燕玲王志伟陈永萱南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京农业大学生物学实验中心南京农业大学生物学实验中心南京210095

从患"爬蜂病"的蜜蜂体内分离到一株螺原体M10,具有典型的螺原体形态和运动性,能透过0.22μm孔径的滤膜,在含青霉素浓度为2000U/mL的R-2培养基中生长良好。该菌株生长需要血清,能利用葡萄糖、精氨酸、不能利用尿素,其16S rDNA... 详细信息

从患"爬蜂病"的蜜蜂体内分离到一株螺原体M10,具有典型的螺原体形态和运动性,能透过0.22μm孔径的滤膜,在含青霉素浓度为2000U/mL的R-2培养基中生长良好。该菌株生长需要血清,能利用葡萄糖、精氨酸、不能利用尿素,其16S rDNA序列与Spiroplasma melliferum BC-3(=ATCC33219)同源性为99.86%。通过饲喂菌液的方式,发现供试蜜蜂4d开始出现"爬蜂病"病症,15d内71%的蜜蜂死亡,说明M10对蜜蜂具有较强的致病性,且感染致死的蜜蜂体内螺原体的分离率为100%,利用螺原体特异性16S rDNA引物在感染致死的蜜蜂的不同部位(头、胸、腹、足)均能扩增出螺原体16S rDNA,反映了螺原体对蜜蜂的系统性侵染。

关键词：螺原体生物学特性 16S rDNA 致病性

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辛硫磷降解菌XSP-1的分离、鉴定及其降解特性研究

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环境科学 2007年第12期28卷 2833-2837页

作者：沈雨佳洪源范洪青蒋新李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 中国科学院南京土壤研究所土壤与农业可持续发展国家重点实验室南京210008

从农药厂污泥中分离到1株能以辛硫磷为唯一碳源生长的细菌,命名为XSP-1.根据其生理生化特征和16S rRNA基因序列相似性分析,将该菌株初步鉴定为戴尔福特菌属(Delftiasp.).该菌株能在7 h内完全降解100 mg/L的辛硫磷.XSP-1降解辛硫磷的最... 详细信息

从农药厂污泥中分离到1株能以辛硫磷为唯一碳源生长的细菌,命名为XSP-1.根据其生理生化特征和16S rRNA基因序列相似性分析,将该菌株初步鉴定为戴尔福特菌属(Delftiasp.).该菌株能在7 h内完全降解100 mg/L的辛硫磷.XSP-1降解辛硫磷的最适pH为7.0,最适温度为35℃,降解速率与初始接种量呈正相关,该菌株对甲基对硫磷、毒死蜱、杀螟硫磷也有较好的降解能力.根据已报道有机磷农药降解基因mpd的保守序列设计引物,未从该菌株中扩增到目标条带,但是该菌株是否带有新的有机磷农药降解基因仍需要进一步研究.

关键词：辛硫磷生物降解戴尔福特菌属 XSP-1

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自然土壤中苯酚降解菌的分离和系统发育分析

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环境科学 2007年第3期28卷 623-626页

作者：王云端董小军王茜洪青蒋新李顺鹏中国科学院南京土壤研究所土壤与农业可持续发展国家重点实验室南京210008 南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

采用富集培养的方法,从未受苯酚污染的自然土壤中分离得到5株能以苯酚为唯一碳源生长的细菌.根据生理生化特性和系统发育分析对它们进行了初步鉴定,菌株PHD-2为Ralstonia sp.,菌株PHD-4为Acinetobacter sp.,菌株PHD-5为Microbacterium s... 详细信息

采用富集培养的方法,从未受苯酚污染的自然土壤中分离得到5株能以苯酚为唯一碳源生长的细菌.根据生理生化特性和系统发育分析对它们进行了初步鉴定,菌株PHD-2为Ralstonia sp.,菌株PHD-4为Acinetobacter sp.,菌株PHD-5为Microbacterium sp.,菌株PHD-1和PHD-3均为Pseudomonas sp.,16S rRNA基因序列的同源性比较和系统发育分析表明自然土壤中的苯酚降解菌具有丰富的多样性.

关键词：自然土壤苯酚降解菌系统发育分析

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