检索结果-内蒙古大学图书馆

南京农业大学学报 1999年第4期22卷 69-72页

作者：许冬青陆承平陈怀青南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室南京210095

致病性嗜水气单胞菌(Aerom onashydrophila, Ah) J-1 株具有S层结构。用甘氨酸缓冲液处理AhJ-1 株菌体细胞,离心, 上清即为粗提的S蛋白。用自制兔抗AhJ-1 株S蛋白抗体建立间接ELISA法, 检测结果显示, 20～30 h S蛋白表达量较高。粗提的... 详细信息

致病性嗜水气单胞菌(Aerom onashydrophila, Ah) J-1 株具有S层结构。用甘氨酸缓冲液处理AhJ-1 株菌体细胞,离心, 上清即为粗提的S蛋白。用自制兔抗AhJ-1 株S蛋白抗体建立间接ELISA法, 检测结果显示, 20～30 h S蛋白表达量较高。粗提的S蛋白经离心、Sephadex G100 凝胶层析获纯化的S蛋白。经SDS-PAGE电泳分析为单一多肽, 相对分子质量51 500。等电聚焦分析为单一条带, 等电点 (pI) 为5.01。氨基酸组分分析表明, S蛋白由天门冬氨酸等16种氨基酸组成, 其中疏水性氨基酸占42.1% , 不含半胱氨酸。N端序列分析结果为ADFQLNEKSA。

关键词：嗜水气单胞菌 S蛋白 N端测序生化特性

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细菌亚单位疫苗免疫小鼠的细胞免疫指标检测

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南京农业大学学报 1999年第4期22卷 73-76页

作者：秦磊陆承平陈怀青南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室南京210095

将嗜水气单胞菌的胞外毒素(HEC) 和胞外蛋白酶(ECPase) 与迟缓爱德华氏菌脂多糖(LPS)、脱毒多糖(PS) 偶联, 制成3 种亚单位偶联疫苗 (HEC-PS、HEC-LPS、ECPase-PS), 分别免疫小鼠。另设这两种细菌的全菌灭活苗免疫及注射生理盐水对照组,... 详细信息

将嗜水气单胞菌的胞外毒素(HEC) 和胞外蛋白酶(ECPase) 与迟缓爱德华氏菌脂多糖(LPS)、脱毒多糖(PS) 偶联, 制成3 种亚单位偶联疫苗 (HEC-PS、HEC-LPS、ECPase-PS), 分别免疫小鼠。另设这两种细菌的全菌灭活苗免疫及注射生理盐水对照组, 每组8 只。在第2 次免疫后第7 天用四甲基偶氮唑盐比色法 (MTT), 检测脾淋巴细胞转化率与腹腔巨噬细胞吞噬活性, 并检测各组小鼠的全菌凝集抗体。结果表明, 亚单位疫苗的这两项细胞免疫指标明显高于对照组,但略低于全菌灭活苗免疫组, 而细胞免疫指标与抗体水平无对应的平行关系。

关键词：亚单位偶联疫苗淋巴细胞转化率吞噬活性 MTT

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陆龟疱疹病毒对中华鳖不致病

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畜牧与兽医 1999年第S1期31卷 3-4页

作者：聂玉春陆承平南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室南京210095

用在龟心细胞系(TortoiseHeartCellLine,THC)上增殖的陆龟疱疹病毒(Testudoherpesvirus,THV),分别腹腔接种巴西彩龟(Trachemysscriptasliders)和中华鳖(Trionyxsinensis)。水温21～28℃,饲养82d。感染彩龟出现明显的呼吸道症状及眼睑肿胀,继而死亡,取死亡彩龟内脏匀浆,用THC分离病毒,出现与接种THV完全一致的CPE。接种THC冻融液的对照彩龟正常。中华鳖饲养115d,对照及感染鳖均无异常。

关键词：陆龟疱疹病毒龟心细胞系中华鳖人工感染

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中国华东地区猪生殖-呼吸道综合征病毒(S_1株)ORF_(5～7)基因特征研究

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中国预防兽医学报 1999年第3期21卷 194-198页

作者：姜平陈溥言姜志华蔡家利董永毅蔡宝祥南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室

本研究对我国华东地区猪生殖和呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）分离株Ｓ１主要结构蛋白基因（ＯＲＦ５～７）进行了ＰＣＲ扩增和ＤＮＡ测序分析。结果表明，长度为１５２０ｂｐＤＮＡ序列含有３个阅读框ＯＲＦｓ，即ＯＲＦ５、ＯＲＦ６和... 详细信息

本研究对我国华东地区猪生殖和呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）分离株Ｓ１主要结构蛋白基因（ＯＲＦ５～７）进行了ＰＣＲ扩增和ＤＮＡ测序分析。结果表明，长度为１５２０ｂｐＤＮＡ序列含有３个阅读框ＯＲＦｓ，即ＯＲＦ５、ＯＲＦ６和ＯＲＦ７，ＯＲＦ５和ＯＲＦ６及ＯＲＦ６和ＯＲＦ７间有部分碱基重叠，且与欧洲型和美洲型ＰＲＲＳＶ相似。ＯＲＦｓ推导的氨基酸序列与美国ＶＲ２３３２和欧洲ＬＶ毒株同源性分析为９９％～１００％和５９％～７８％。ＯＲＦｓ预测的蛋白质分子量、等电点、糖基化位点、亲水性分布图及跨膜螺旋区与ＶＲ２３３２毒株相似。

关键词：猪生殖-呼吸道综合征 ORF5-7基因 PRRSV

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传染性法氏囊病病毒抗原和毒力变异的分子基础

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中国预防兽医学报 1999年第2期21卷 159-160,F003页

作者：姜平陈溥言南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室

传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）是目前危害世界养鸡业的重要病原之一，除引起３～６周龄易感鸡直接发病死亡外，可致雏鸡免疫抑制，导致鸡群对新城疫、马立克氏病及传染性支气管炎等多种重要疫病免疫失败，故已引起世界禽病工作者的高... 详细信息

传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）是目前危害世界养鸡业的重要病原之一，除引起３～６周龄易感鸡直接发病死亡外，可致雏鸡免疫抑制，导致鸡群对新城疫、马立克氏病及传染性支气管炎等多种重要疫病免疫失败，故已引起世界禽病工作者的高度重视。ＩＢＤＶ属双ＲＮＡ病毒科禽...

关键词：鸡 IBDV 抗原毒力

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绿色荧光蛋白标记可移动载体质粒的构建及其在嗜水气单胞菌的表达

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农业生物技术学报 1999年第4期7卷 329-332页

作者：陈营夏晓勤陆承平南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室!南京 210095

以多寄主可移动载体质粒pSUP1011为基础载体，构建了绿色荧光蛋白（GFP）标记的重级质粒，通过细菌接合，将重组质粒转移到嗜水气单胞菌J－l中。经紫外光检测和SDS－PAGE电泳分析，证实重组质粒在该富中可表达GFP。在无选择压力的培养... 详细信息

以多寄主可移动载体质粒pSUP1011为基础载体，构建了绿色荧光蛋白（GFP）标记的重级质粒，通过细菌接合，将重组质粒转移到嗜水气单胞菌J－l中。经紫外光检测和SDS－PAGE电泳分析，证实重组质粒在该富中可表达GFP。在无选择压力的培养条件下，24h后，重组质粒的稳定率在72．2％；36h后，稳定率在50％。显示GFP作为报告基因在嗜水气单胞菌致病机理研究的应用前景。

关键词：绿色荧光蛋白嗜水气单胞菌可移动载体质粒

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猪繁殖和呼吸综合征病毒膜蛋白和核衣壳蛋白基因序列分析

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畜牧兽医学报 1999年第4期30卷 358-364页

作者：蔡家利姜平蔡宝祥马志永农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室南京农业大学动物医学院重庆北碚西南农业大学动物养殖学院

猪繁殖和呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）弱毒疫苗株（ＰＲＭＶ）基质膜（Ｍ）蛋白和核衣壳（Ｎ）蛋白基因克隆于ｐＢＶ２２０载体，然后将ＭＮ基因亚克隆于ｐＳＫ＋（ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＳＫ＋）载体，构建成重组质粒ＰＢＳＭＮ进... 详细信息

猪繁殖和呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）弱毒疫苗株（ＰＲＭＶ）基质膜（Ｍ）蛋白和核衣壳（Ｎ）蛋白基因克隆于ｐＢＶ２２０载体，然后将ＭＮ基因亚克隆于ｐＳＫ＋（ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＳＫ＋）载体，构建成重组质粒ＰＢＳＭＮ进行序列测定，共测得９５８ｂｐ，Ｍ和Ｎ基因分别位于ＯＲＦ６和ＯＲＦ７。将所测序列和推导的氨基酸序列进行计算机分析，并与其它ＰＲＲＳＶ毒株进行比较，发现ＰＲＭＶ毒株与美洲毒株的ＭＮ基因同源性为９２９％～９７０％，而与欧洲毒株的同源性为６８０％。ＰＲＭＶ和ＬＶ毒株Ｍ和Ｎ基因所推导的氨基酸同源性分别为７９１％和５８５％，说明Ｍ基因相对保守。分析了常见的４６种限制性内切酶酶切位点，发现其中１７种酶在ＭＮ基因段有３４个酶切位点。本研究将为我国进行ＰＲＲＳ基因诊断技术研究、毒株分型、疫苗研制及Ｍ和Ｎ抗原的制备等提供有价值的资料。

关键词：蓝耳病 PRRS 膜蛋白核衣壳蛋白病毒序列分析

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用PCR、斑点杂交及间接免疫荧光试验诊断鸡传染性贫血的初步研究

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南京农业大学学报 1999年第3期22卷 69-72页

作者：孙伟吴中勤胡青海李树香李刚南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室南京210095 江苏省家禽研究所扬州225007 安徽省贵池市兽医站贵池247100

利用地高辛标记的０８５ｋｂ的鸡传染性贫血病毒（ＣＡＶ）核酸探针，对江苏某地区疑为ＣＡＶ的１５～３０日龄病鸡的肝ＤＮＡ样品进行斑点杂交。结果在被检的２０份样品中有６份为阳性，阳性率为３０％。对相同样... 详细信息

利用地高辛标记的０８５ｋｂ的鸡传染性贫血病毒（ＣＡＶ）核酸探针，对江苏某地区疑为ＣＡＶ的１５～３０日龄病鸡的肝ＤＮＡ样品进行斑点杂交。结果在被检的２０份样品中有６份为阳性，阳性率为３０％。对相同样品根据已知引物（特异性扩增出ＣＡＶ的０５８ｋｂＤＮＡ）进行ＰＣＲ扩增，所得结果与斑点杂交相同。对应的病鸡血清经间接免疫荧光试验（ＩＦＡ），有７份为ＣＡＶ抗体阳性，与ＰＣＲ扩增结果的符合率为８３％。初步结果表明，江苏某地区存在ＣＡＶ感染。

关键词：鸡传染性贫血病毒核酸探针间接免疫荧光 PCR

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克氏原螯虾的血淋巴细胞原代培养

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畜牧与兽医 1999年第5期31卷 11-12页

作者：魏静陆承平黄捷杨丛海南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室南京210095 中国水产科学研究院黄海研究所农业部海水增养殖病害与生态重点开放实验室青岛266071

取克氏原螯虾（Ｐｒｏｃａｍｂａｒｕｓｃｌａｒｋｉｉ）血淋巴液，与抗凝剂混匀后离心，去上清，用含１５％犊牛血清及１００Ｕ／ｍＬ青霉素、１００ μｇ／ｍＬ链霉素的Ｌ１５培养液悬浮血淋巴细胞，移至培养瓶，（２... 详细信息

取克氏原螯虾（Ｐｒｏｃａｍｂａｒｕｓｃｌａｒｋｉｉ）血淋巴液，与抗凝剂混匀后离心，去上清，用含１５％犊牛血清及１００Ｕ／ｍＬ青霉素、１００ μｇ／ｍＬ链霉素的Ｌ１５培养液悬浮血淋巴细胞，移至培养瓶，（２８ ±１） ℃培养。细胞于１２ｈ内贴壁，形态不一，可见透明细胞、小颗粒细胞及大颗粒细胞３种类型，多数不分裂，可维持１５ｄ以上。上述方法重复至少２５次，

关键词：螯虾血淋巴细胞细胞培养病毒

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家禽肠道细菌性传染病的发生与防制

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动物医学进展 1999年第2期20卷 13-16页

作者：刘永庆郭继英胡泰山南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室山东省农业科学院家禽研究所中国科学院上海生物工程研究中心

对于家禽肠道细菌性传染病传统的防治方法是大量使用抗菌药物，随着病原菌耐药性的不断增强，抗菌药物的防治效果愈来愈差，二重感染的发病率明显提高，药物残留及耐药菌株对人类的影响也愈来愈明显，由家禽产品所引发的食物中毒的发病... 详细信息

对于家禽肠道细菌性传染病传统的防治方法是大量使用抗菌药物，随着病原菌耐药性的不断增强，抗菌药物的防治效果愈来愈差，二重感染的发病率明显提高，药物残留及耐药菌株对人类的影响也愈来愈明显，由家禽产品所引发的食物中毒的发病率也呈明显上升趋势，迫使人们不得不寻找新的控制该类传染病的方法。随着人们对肠道正常菌群区系研究的不断加深，对肠道传染病的发病机理也有了更加深刻的认识，维持肠道正常菌群的稳定性是防治该类传染病的关键。近年来，一股以微生态制剂、中草药制剂和生物活性制剂来防治肠道传染病的热潮正在升起，但该类制剂目前尚处于起步阶段，还有许多理论和技术问题需要不断完善。在我国现阶段，在一个相当长的时期内，抗菌药物仍会与其他各种制剂长期共存，取长补短，共同来维持肠道正常菌群区系的稳定。

关键词：家禽肠道细菌性传染病防制

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