检索结果-内蒙古大学图书馆

南京农业大学学报 2007年第3期30卷 58-62页

作者：阮康勤于汉寿张晶纪燕玲王志伟陈永萱南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京农业大学生物学实验中心江苏南京210095

为进一步了解蜜蜂螺原体的生长、生殖及致病特点,以分离自患"爬蜂病"蜜蜂体内的螺原体菌株M10为研究对象,测定了其生长曲线,利用透射电镜观察其不同生长期的形态。结果表明:在R-2培养基中,不同生长期的蜜蜂螺原体M10形态差异... 详细信息

为进一步了解蜜蜂螺原体的生长、生殖及致病特点,以分离自患"爬蜂病"蜜蜂体内的螺原体菌株M10为研究对象,测定了其生长曲线,利用透射电镜观察其不同生长期的形态。结果表明:在R-2培养基中,不同生长期的蜜蜂螺原体M10形态差异很大,但其形态变化又具有一定的规律性。延滞期的M10以粗短的形态为主;在对数期和稳定期,M10具有丰富的形态多样性,如芽状、分支状、串珠状等;到达衰亡期,M10则变得细长,菌体自身及菌体之间极易缠绕并聚集成团。此外,观察到M10具有尖端结构和纤毛状结构,大多数菌体具有"一尖一圆"结构,纤毛状结构长度差异显著。本研究首次描述了不同生长期蜜蜂螺原体的形态变化,发现螺原体纤毛状结构最长可达1 860.5 nm,并首次在人工培养基中发现螺原体具有类似纤毛接合现象。

关键词：螺原体生长曲线形态多样性尖端结构纤毛状结构

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一株毒死蜱降解菌株Sphingomonas sp. Dsp-2的分离鉴定及降解特性

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土壤学报 2007年第4期44卷 734-739页

作者：李晓慧贾开志何健李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

从长期受毒死蜱污染的污水处理池中分离到一株毒死蜱高效降解菌株,命名为Dsp-2.经生理生化和16S rDNA 序列同源性分析,鉴定其为鞘胺醇单胞菌属（Sphingomonas sp.）细菌.该菌株能在24 h内完全降解100 mg L^-1的毒死蜱,降解特性的研究表... 详细信息

从长期受毒死蜱污染的污水处理池中分离到一株毒死蜱高效降解菌株,命名为Dsp-2.经生理生化和16S rDNA 序列同源性分析,鉴定其为鞘胺醇单胞菌属（Sphingomonas sp.）细菌.该菌株能在24 h内完全降解100 mg L^-1的毒死蜱,降解特性的研究表明：随着农药浓度的加大,绝对降解量也增大,但高浓度的毒死蜱会导致不能完全降解;起始接种量和降解毒死蜱的速率呈正相关;外加氮源营养能够明显促进降解;1 mmol L-1的Fe^3＋和Ni^2＋等对其降解性能有抑制作用.研究了Dsp-2在土壤中降解毒死蜱的效果.结果表明,Dsp-2在三种供试土壤中都能有效的降解毒死蜱,其中在潮土中降解的速率最快,且当毒死蜱的浓度范围在1～100 mg kg^-1内Dsp-2都能有效的降解毒死蜱,7 d降解率达到85%～98%.

关键词：毒死蜱鞘氨醇单胞菌降解特性土壤

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蜜蜂螺原体的分离鉴定及致病性研究

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微生物学通报 2007年第4期34卷 695-699页

作者：阮康勤周秀文张晶于汉寿纪燕玲王志伟陈永萱南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京农业大学生物学实验中心南京农业大学生物学实验中心南京210095

从患"爬蜂病"的蜜蜂体内分离到一株螺原体M10,具有典型的螺原体形态和运动性,能透过0.22μm孔径的滤膜,在含青霉素浓度为2000U/mL的R-2培养基中生长良好。该菌株生长需要血清,能利用葡萄糖、精氨酸、不能利用尿素,其16S rDNA... 详细信息

从患"爬蜂病"的蜜蜂体内分离到一株螺原体M10,具有典型的螺原体形态和运动性,能透过0.22μm孔径的滤膜,在含青霉素浓度为2000U/mL的R-2培养基中生长良好。该菌株生长需要血清,能利用葡萄糖、精氨酸、不能利用尿素,其16S rDNA序列与Spiroplasma melliferum BC-3(=ATCC33219)同源性为99.86%。通过饲喂菌液的方式,发现供试蜜蜂4d开始出现"爬蜂病"病症,15d内71%的蜜蜂死亡,说明M10对蜜蜂具有较强的致病性,且感染致死的蜜蜂体内螺原体的分离率为100%,利用螺原体特异性16S rDNA引物在感染致死的蜜蜂的不同部位(头、胸、腹、足)均能扩增出螺原体16S rDNA,反映了螺原体对蜜蜂的系统性侵染。

关键词：螺原体生物学特性 16S rDNA 致病性

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Pseudomonas putida GM6多聚磷酸盐激酶(ppk)基因的克隆及表达

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土壤学报 2007年第4期44卷 727-733页

作者：管莉菠蔡天明李波何健李顺鹏崔中利南京农业大学生命科学学院微生物学系南京农业大学农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

以一株高效聚磷菌Pseudomonas putidaGM6为研究材料。为获得其多聚磷酸盐激酶(polyphos-phate kinase,ppk)基因,并验证该基因在磷酸盐转运系统中的作用,根据已报道的ppk基因保守区域设计引物,从其总DNA中成功扩增到ppk基因的部分片段(约... 详细信息

以一株高效聚磷菌Pseudomonas putidaGM6为研究材料。为获得其多聚磷酸盐激酶(polyphos-phate kinase,ppk)基因,并验证该基因在磷酸盐转运系统中的作用,根据已报道的ppk基因保守区域设计引物,从其总DNA中成功扩增到ppk基因的部分片段(约528 bp)。随后采用快速染色体步移方法(Self-formed adap-tor PCR,SEFA-PCR)技术扩增片段的上下游基因序列,将三个序列拼接,用OMIGA软件分析其ORFs,推测ppk基因全长为2 220 bp(GenBank accession number DQ133537)。构建的多聚磷酸盐激酶表达菌株***21(DE3)/pET29a-ppk经IPTG诱导后3 h时,明显出现分子量约为81 kDa的表达产物。且表达菌株在12 h时的磷去除率高达80%(对照菌株的磷去除率仅为18%),远高于已报道的40%的去除率。这表明ppk基因在***中的过量表达,导致了***菌体中poly-P的大量聚集,从而大大去除了培养基中的磷酸盐。

关键词：多聚磷酸盐激酶 ppk全基因及上下游序列快速染色体步移方法(SEFA—PCR)

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辛硫磷降解菌XSP-1的分离、鉴定及其降解特性研究

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环境科学 2007年第12期28卷 2833-2837页

作者：沈雨佳洪源范洪青蒋新李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 中国科学院南京土壤研究所土壤与农业可持续发展国家重点实验室南京210008

从农药厂污泥中分离到1株能以辛硫磷为唯一碳源生长的细菌,命名为XSP-1.根据其生理生化特征和16S rRNA基因序列相似性分析,将该菌株初步鉴定为戴尔福特菌属(Delftiasp.).该菌株能在7 h内完全降解100 mg/L的辛硫磷.XSP-1降解辛硫磷的最... 详细信息

从农药厂污泥中分离到1株能以辛硫磷为唯一碳源生长的细菌,命名为XSP-1.根据其生理生化特征和16S rRNA基因序列相似性分析,将该菌株初步鉴定为戴尔福特菌属(Delftiasp.).该菌株能在7 h内完全降解100 mg/L的辛硫磷.XSP-1降解辛硫磷的最适pH为7.0,最适温度为35℃,降解速率与初始接种量呈正相关,该菌株对甲基对硫磷、毒死蜱、杀螟硫磷也有较好的降解能力.根据已报道有机磷农药降解基因mpd的保守序列设计引物,未从该菌株中扩增到目标条带,但是该菌株是否带有新的有机磷农药降解基因仍需要进一步研究.

关键词：辛硫磷生物降解戴尔福特菌属 XSP-1

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自然土壤中苯酚降解菌的分离和系统发育分析

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环境科学 2007年第3期28卷 623-626页

作者：王云端董小军王茜洪青蒋新李顺鹏中国科学院南京土壤研究所土壤与农业可持续发展国家重点实验室南京210008 南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

采用富集培养的方法,从未受苯酚污染的自然土壤中分离得到5株能以苯酚为唯一碳源生长的细菌.根据生理生化特性和系统发育分析对它们进行了初步鉴定,菌株PHD-2为Ralstonia sp.,菌株PHD-4为Acinetobacter sp.,菌株PHD-5为Microbacterium s... 详细信息

采用富集培养的方法,从未受苯酚污染的自然土壤中分离得到5株能以苯酚为唯一碳源生长的细菌.根据生理生化特性和系统发育分析对它们进行了初步鉴定,菌株PHD-2为Ralstonia sp.,菌株PHD-4为Acinetobacter sp.,菌株PHD-5为Microbacterium sp.,菌株PHD-1和PHD-3均为Pseudomonas sp.,16S rRNA基因序列的同源性比较和系统发育分析表明自然土壤中的苯酚降解菌具有丰富的多样性.

关键词：自然土壤苯酚降解菌系统发育分析

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阿特拉津降解菌Arthrobacter sp. AG1降解基因研究

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生物工程学报 2007年第5期23卷 789-793页

作者：代先祝蒋建东顾立峰潘荣清李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部环境微生物工程重点开放实验室西南大学资源环境学院微生物学实验中心重庆400715

菌株Arthrobacter sp. AG1能以4000mg/L的阿特拉津(AT)为唯一碳源、氮源和能源生长。通过设计特异引物从AG1中扩增出阿特拉津氯水解酶基因trzN的全序列,该基因与已报道的trzN基因序列相似性为99%。AG1菌株中含有两个大于100kb的质粒,Sou... 详细信息

菌株Arthrobacter sp. AG1能以4000mg/L的阿特拉津(AT)为唯一碳源、氮源和能源生长。通过设计特异引物从AG1中扩增出阿特拉津氯水解酶基因trzN的全序列,该基因与已报道的trzN基因序列相似性为99%。AG1菌株中含有两个大于100kb的质粒,Southern杂交结果显示trzN和atzB基因均位于其中较大的一个质粒pAG1上。将AG1菌株在LB液体培养基中转接三代后,发现34%的细菌细胞丢失了降解活性,但却未发现丢失质粒,PCR扩增结果表明突变子丢失了trzN基因,但atzB和atzC基因未丢失,说明降解活性的缺失是trzN基因片段从质粒上丢失的结果,表明trzN基因在环境中存在水平转移现象,暗示菌株AG1中的阿特拉津降解基因是基因的水平转移重组的结果。

关键词： Arthrobacter sp. AG1 trzN 基因水平转移阿特拉津降解

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一株嗜热厌氧菌的分离及其耐高温淀粉酶基因的克隆和表达

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南京农业大学学报 2007年第1期30卷 55-60页

作者：赵子如梅琴高雅英虞方伯沈标南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

从云南腾冲眼镜泉中分离到1株嗜热厌氧的杆状细菌185y2。根据其生理生化特征和16S rDNA序列同源性分析,将该菌株鉴定为嗜热厌氧杆菌属Therm oanaerobactersp.。该菌的最适生长pH值和温度分别为7.0和70℃,具有水解淀粉的能力。从185y2的... 详细信息

从云南腾冲眼镜泉中分离到1株嗜热厌氧的杆状细菌185y2。根据其生理生化特征和16S rDNA序列同源性分析,将该菌株鉴定为嗜热厌氧杆菌属Therm oanaerobactersp.。该菌的最适生长pH值和温度分别为7.0和70℃,具有水解淀粉的能力。从185y2的基因组DNA中扩增出高温淀粉酶结构基因,序列分析表明,它与中温菌的淀粉酶基因亲缘关系较远。克隆其耐高温淀粉酶基因,并构建重组表达载体,最终在***21中得到了高效表达。

关键词：嗜热厌氧菌分离鉴定高温淀粉酶

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PNP降解相关基因温敏突变株的分离及其特性研究

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微生物学通报 2007年第1期34卷 32-35页

作者：邓海华李晓丹曹慧王世明黄婷婷崔中利南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

通过接合转移将质粒pSC123上的转座子Tn5随机插入到DLL-E4基因组DNA中,从大约8,000个突变株中得到1株温度敏感型突变株MT54。根据转座子上的已知序列设计引物以MT54基因组DNA为模板进行PCR扩增,证实MT54的染色体中有转座子插入。MT54在3... 详细信息

通过接合转移将质粒pSC123上的转座子Tn5随机插入到DLL-E4基因组DNA中,从大约8,000个突变株中得到1株温度敏感型突变株MT54。根据转座子上的已知序列设计引物以MT54基因组DNA为模板进行PCR扩增,证实MT54的染色体中有转座子插入。MT54在30℃条件下能够以对硝基苯酚(p-nitrophenol,PNP)为唯一碳源生长,但在37℃不能生长。格里斯试色剂法检测NO_2^-的生成情况进一步证明了MT54的这种特性。通过30℃和37℃两种温度条件下MT54和原始出发菌株DLL-E4对PNP和对苯二酚降解情况的比较,推测温敏突变位点可能发生在与PNP降解相关的基因中。

关键词：对硝基苯酚对苯二酚转座子突变温敏突变株

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一株氯氰菊酯降解菌的分离和鉴定

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南京农业大学学报 2007年第3期30卷 68-72页

作者：刘君寒王兆守何健王保战李顺鹏南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

从氯氰菊酯污染土壤中,分离到一株氯氰菊酯的降解菌,命名为HF12-8。根据形态、生理生化和16S rDNA聚类分析、Biolog GN测试等,将该菌株初步鉴定为铜绿假单胞菌。HF12-8能够以氯氰菊酯或联苯菊酯为唯一碳源生长,5 d内对20 mg.L-1的氯氰... 详细信息

从氯氰菊酯污染土壤中,分离到一株氯氰菊酯的降解菌,命名为HF12-8。根据形态、生理生化和16S rDNA聚类分析、Biolog GN测试等,将该菌株初步鉴定为铜绿假单胞菌。HF12-8能够以氯氰菊酯或联苯菊酯为唯一碳源生长,5 d内对20 mg.L-1的氯氰菊酯和联苯菊酯降解率分别为93.03%和58%。

关键词：氯氰菊酯生物降解分离鉴定

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