检索结果-内蒙古大学图书馆

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2012年第3期30卷 214-217页

作者：蔡燕丽郑学礼南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学教研室广州510515

目的克隆白纹伊蚊(Aedes albopictus)RNA干扰通路相关AGO2和Dcr-2基因片段,并分析该蚊种不同发育阶段这2个基因片段的转录水平。方法根据埃及伊蚊(***)AGO2和Dcr-2蛋白的氨基酸序列保守区设计简并引物,经RT-PCR从白纹伊蚊雌蚊总RNA中分... 详细信息

目的克隆白纹伊蚊(Aedes albopictus)RNA干扰通路相关AGO2和Dcr-2基因片段,并分析该蚊种不同发育阶段这2个基因片段的转录水平。方法根据埃及伊蚊(***)AGO2和Dcr-2蛋白的氨基酸序列保守区设计简并引物,经RT-PCR从白纹伊蚊雌蚊总RNA中分别扩增AGO2和Dcr-2 cDNA,并与载体pMD18-T连接,转染大肠埃希菌(***)后,筛选阳性克隆,测序并做Blastx分析。根据获得的白纹伊蚊AGO2和Dcr-2基因片段设计特异性引物,采用半定量RT-PCR分析白纹伊蚊卵、Ⅰ/Ⅱ龄幼虫、Ⅲ/Ⅳ龄幼虫、蛹、雄蚊和雌蚊中这2个基因的mRNA水平。结果获得的AGO2和Dcr-2 cDNA片段大小分别为326 bp和491 bp,登录号分别为JQ764670和JQ764671。Blastx分析结果显示,该2个序列编码的氨基酸序列与埃及伊蚊的AGO2和白纹伊蚊的Dcr-2氨基酸序列的同源性分别为91%和98%。AGO2和Dcr-2基因在白纹伊蚊不同发育阶段中均有转录,于雌蚊中的mRNA水平最高,分别为雄蚊中mRNA的3.1倍和15.5倍,显著高于其他各阶段的mRNA水平(P<0.05)。结论获得了白纹伊蚊AGO2和Dcr-2基因部分cDNA片段,并发现这2个基因在雌蚊中转录水平最高。

关键词：白纹伊蚊 RNA干扰 AGO2 Dcr-2

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广州管圆线虫半乳凝素基因的克隆表达、蛋白纯化及免疫反应性研究

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南方医科大学学报 2007年第5期27卷 584-587页

作者：郝丽吴焜陈晓光王琼南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学教研室广东广州510515

目的构建在***中高效表达广州管圆线虫半乳凝素蛋白的重组表达质粒,并对重组蛋白纯化条件进行优化及免疫反应性鉴定。方法根据本室构建的广州管圆线虫幼虫cDNA文库EST测序结果,筛选出有诊断潜能的半乳凝素基因,经过PCR扩增其cDNA全长序... 详细信息

目的构建在***中高效表达广州管圆线虫半乳凝素蛋白的重组表达质粒,并对重组蛋白纯化条件进行优化及免疫反应性鉴定。方法根据本室构建的广州管圆线虫幼虫cDNA文库EST测序结果,筛选出有诊断潜能的半乳凝素基因,经过PCR扩增其cDNA全长序列后克隆入pET32a(+)载体进行诱导表达,包涵体经洗涤、变性、逐步透析复性,浓缩后进行聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫印迹。结果本研究首次克隆出广州管圆线虫半乳凝素蛋白基因全长cDNA序列(GenBank收录编号为DQ384534)。成功构建重组质粒pET32a(+)-AcGAL,通过IPTG诱导得到以包涵体形式表达的重组融合蛋白,Western-blot结果显示纯化的重组蛋白具有良好的免疫反应性。结论克隆表达了广州管圆线虫半乳凝素基因,为广州管圆线虫病诊断研究奠定了基础。

关键词：广州管圆线虫克隆表达纯化免疫反应性

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广州管圆线虫幼虫排泄分泌抗原及其诊断价值分析

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南方医科大学学报 2012年第4期32卷 477-481页

作者：张鑫刘敏吴雅欣莫泽珣沈浩贤陈代雄李华南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系广东广州510515 广州医学院病原生物学教研室广东广州510182

目的对比分析广州管圆线虫幼虫排泄分泌抗原(LESA)与成虫抗原(AWA),探讨其诊断价值。方法广州管圆线虫三期幼虫感染小鼠,21 d后取小鼠脑内幼虫进行体外培养,收集幼虫排泄分泌蛋白,并与广州管圆线虫成虫匀浆蛋白进行SDS-PAGE和Western b... 详细信息

目的对比分析广州管圆线虫幼虫排泄分泌抗原(LESA)与成虫抗原(AWA),探讨其诊断价值。方法广州管圆线虫三期幼虫感染小鼠,21 d后取小鼠脑内幼虫进行体外培养,收集幼虫排泄分泌蛋白,并与广州管圆线虫成虫匀浆蛋白进行SDS-PAGE和Western blot分析,分别用两种抗原建立LESA-ELISA和AWA-ELISA以检测小鼠血清和不同人群血清。结果SDS-PAGE和Western blot显示幼虫排泄分泌蛋白条带和抗原反应带较成虫少;LESA与小鼠感染血清和广州管圆线虫病患者血清在Mr40 000和Mr26 000处均出现强反应带;感染小鼠血清中抗LESA和AWA的IgG和IgM抗体自感染后开始上升,5 d后达到高峰,第10天后开始下降;LESA-ELISA用于检测广州管圆线虫病疑似病人血清阳性率低于AWA-ELISA;检测血吸虫和华支睾吸虫感染病人血清的交叉阳性率明显低于AWA-ELISA;检测献血员血清及其他非广州管圆线虫感染血清时,假阳性数较AWA-ELISA少。结论 LESA的抗原反应带较AWA少,尽管对广州管圆线虫病疑似病例血清抗体阳性率略低于AWA,但其特异性高;具有潜在的广州管圆线虫病早期诊断和现症感染诊断价值。

关键词：广州管圆线虫排泄分泌抗原成虫抗原免疫诊断

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K_(ATP)通道对缺氧海马CA1区神经元损伤保护作用的机制

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中国应用生理学杂志 2007年第3期23卷 257-261页

作者：黄潋滟李文军李勃兴邹飞南方医科大学公共卫生与热带医学学院南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广东广州510515

目的:探讨KATP通道在缺氧中对海马CA1区神经元的保护作用机制。方法:比较对照组、单纯缺氧组、KATP通道激动剂+缺氧组、KATP通道阻断剂+缺氧组中神经元p53 mRNA的表达、DNA断裂、以及神经元存活情况。结果:将神经元暴露在氧浓度为0%的... 详细信息

目的:探讨KATP通道在缺氧中对海马CA1区神经元的保护作用机制。方法:比较对照组、单纯缺氧组、KATP通道激动剂+缺氧组、KATP通道阻断剂+缺氧组中神经元p53 mRNA的表达、DNA断裂、以及神经元存活情况。结果:将神经元暴露在氧浓度为0%的缺氧环境中12h,KATP通道的激动剂二氮嗪(diazoxide,100μmol/L)显著降低p53 mRNA的表达量及细胞的凋亡数量。KATP通道的阻断剂甲糖宁(tolbutamide,100μmol/L)使p53mR-NA表达量显著增加,细胞的凋亡数量也随之显著增加。p53的特异性阻断剂曲古抑菌素(trichostatin,TSA)可以逆转甲糖宁(tolbutamide,100μmol/L)的作用。结论:KATP通道可以通过下调p53 mRNA的表达水平,对缺氧中的海马CA1区神经元起到保护作用。

关键词： ATP敏感钾通道重度缺氧神经元 p53

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广州管圆线虫感染小鼠脾脏T淋巴细胞亚群和细胞因子的变化

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中国人兽共患病学报 2012年第6期28卷 574-578,591页

作者：罗晓东沈二霞陈代雄丁雪李华广州医学院病原生物学与免疫学教研室广州510182 南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系广州510515

目的观察小鼠感染广州管圆线虫后脾脏T淋巴细胞亚群及其细胞因子分泌水平的变化。方法用从感染褐云玛瑙螺分离的广州管圆线虫第3期幼虫感染BALB/c小鼠,感染后第19d及第25d分批处死小鼠,分离脾细胞,使用细胞内细胞因子荧光染色方法,用流... 详细信息

目的观察小鼠感染广州管圆线虫后脾脏T淋巴细胞亚群及其细胞因子分泌水平的变化。方法用从感染褐云玛瑙螺分离的广州管圆线虫第3期幼虫感染BALB/c小鼠,感染后第19d及第25d分批处死小鼠,分离脾细胞,使用细胞内细胞因子荧光染色方法,用流式细胞仪检测脾脏淋巴细胞中的T细胞亚群的含量,用双抗夹心ELISA法检测脾细胞培养上清细胞因子的浓度。结果与对照组比较,感染小鼠脾脏CD4+、CD4+IL-4+T淋巴细胞比例显著上升,而CD4+IL-17+、CD4+IFN-γ+T淋巴细胞比例显著下降;脾细胞培养上清细胞因子IL-4水平明显升高,而IL-17水平明显下降。同时,感染程度和感染时间等因素也可造成脾脏T淋巴细胞亚群及其细胞因子分泌水平的变化。结论小鼠感染广州管圆线虫后,表现以脾脏CD4+T淋巴细胞大量增殖和Th2型淋巴细胞极化为特点。

关键词：广州管圆线虫 T淋巴细胞亚群细胞因子

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SARS冠状病毒的起源研究进展

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微生物学通报 2006年第3期33卷 138-141页

作者：赵卫龙北国张文炳南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学教研室广州510515

SARS冠状病毒(SARS—CoV)是一种新现病毒,可感染多种动物,果子狸是人类SARS—CoV重要的动物宿主之一,是已知较理想的实验动物模型。遗传因素在SARS-CoV的出现过程中起重要作用,它很可能是哺乳动物和鸟类冠状病毒之间重组产生的新物种,... 详细信息

SARS冠状病毒(SARS—CoV)是一种新现病毒,可感染多种动物,果子狸是人类SARS—CoV重要的动物宿主之一,是已知较理想的实验动物模型。遗传因素在SARS-CoV的出现过程中起重要作用,它很可能是哺乳动物和鸟类冠状病毒之间重组产生的新物种,但发生基因重组不是SARS在人群中暴发的原因。

关键词： SARS冠状病毒宿主起源

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登革病毒与登革热的起源研究

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中国人兽共患病学报 2006年第2期22卷 170-171页

作者：赵卫曹虹张文炳南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学教研室广州510515

登革病毒为黄病毒科黄病毒属的成员,有4种抗原性相差较大的血清型(1-4型),在血清型内存在较大的基因变异,按系统发生称之为“基因型”。基因组为单股正链RNA,长约11kb。[第一段]

关键词：登革病毒登革热单股正链RNA 黄病毒属黄病毒科基因变异系统发生血清型抗原性基因型

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登革病毒E蛋白结构与功能的研究进展

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中国人兽共患病学报 2007年第11期23卷 1147-1149页

作者：仲华曹虹赵卫南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学教研室广州510515

登革病毒(Dengue Virus,DEN)为单股正链RNA病毒,是急性蚊媒传染病-登革热的病原体,属黄病毒科(Fla-viviridae)黄病毒属(Flavivirus)。按生物学和免疫学特性分为DEN-1、DEN-2、DEN-3和DEN-4四种血清型。各血清型均可引起登革热(Dengue fe... 详细信息

登革病毒(Dengue Virus,DEN)为单股正链RNA病毒,是急性蚊媒传染病-登革热的病原体,属黄病毒科(Fla-viviridae)黄病毒属(Flavivirus)。按生物学和免疫学特性分为DEN-1、DEN-2、DEN-3和DEN-4四种血清型。各血清型均可引起登革热(Dengue fever,DF)和致死率很高的登革出血热(dengue haemorrhagic fever,DHF)以及登革休克综合征(dengue shock syndrome,DSS)。目前登革的预防主要依赖于切断蚊媒传播,尚无有效的疫苗用于其预防。[第一段]

关键词：登革病毒蛋白结构单股正链RNA病毒登革休克综合征蚊媒传染病免疫学特性登革出血热

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脑膜炎大肠杆菌IbeA蛋白结合肽序列的亲和筛选

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微生物学通报 2006年第5期33卷 101-106页

作者：曹虹林琳刘北一陈丽丹杨军贡树基李明南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学教研室广州510515 南方医科大学基础医学院免疫学教研室广州510515 南方医科大学生物技术学院广州510515

应用噬菌体展示肽库技术,以重组的脑膜炎大肠杆菌致病蛋白IbeA作为靶分子,经过吸附-洗脱-扩增-再吸附的亲和筛选,随机挑选亲和力强的噬菌体克隆,进行ELISA、竞争抑制实验和序列测定。结果显示,经3轮淘选后,间接ELISA鉴定得到高亲和性结... 详细信息

应用噬菌体展示肽库技术,以重组的脑膜炎大肠杆菌致病蛋白IbeA作为靶分子,经过吸附-洗脱-扩增-再吸附的亲和筛选,随机挑选亲和力强的噬菌体克隆,进行ELISA、竞争抑制实验和序列测定。结果显示,经3轮淘选后,间接ELISA鉴定得到高亲和性结合IbeA蛋白的15个阳性克隆。竞争抑制实验结果表明,游离IbeA蛋白能竞争抑制噬菌体结合肽克隆与固相包被的IbeA蛋白的结合,其抑制作用随游离IbeA蛋白浓度的降低而减弱。测序结果得到5种阳性噬菌体克隆展示肽序列。上述结果提示以脑膜炎大肠杆菌IbeA蛋白为靶筛选所获得的噬菌体12肽克隆,具有特异性,其结合肽序列呈现相对保守性。建立的从噬菌体随机肽库筛选IbeA蛋白结合肽的方法具有方便、灵活和高效可行的特点。

关键词：噬菌体展示肽库脑膜炎大肠杆菌IbeA蛋白结合肽亲和筛选

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脂质体疫苗在抗感染免疫中的应用

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国际免疫学杂志 2011年第1期34卷 21-23,35页

作者：李珊凤南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学教研室广州510515

脂质体是脂质双分子层组成的囊泡结构，包裹的可溶性药物在体内可释放，具有无毒性和生物可降解性等优点。脂质体可将亚单位疫苗或核酸疫苗转运入细胞，同时具有佐剂功能，提高机体体液免疫应答和细胞免疫应答。因而在抗感染免疫研究中... 详细信息

脂质体是脂质双分子层组成的囊泡结构，包裹的可溶性药物在体内可释放，具有无毒性和生物可降解性等优点。脂质体可将亚单位疫苗或核酸疫苗转运入细胞，同时具有佐剂功能，提高机体体液免疫应答和细胞免疫应答。因而在抗感染免疫研究中，脂质体作为表位疫苗、亚单位疫苗和核酸疫苗的载体和佐剂的应用越趋成熟。

关键词：脂质体疫苗抗感染免疫

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