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中华神经医学杂志 2009年第5期8卷 468-471,475页

作者：闫中杰徐如祥张洪钿姜晓丹林建浩马旭李西锋赵信德南方医科大学珠江医院神经外科广东神经外科研究所广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282

目的研究骨髓基质细胞（BMSCs）在体外条件下向周围神经雪旺细胞（SOs）分化的可靠性。方法分离提取SD大鼠股骨和胫骨部位BMSCs，利用其贴壁生长的特性，培养纯化，传代扩增。用复合诱导因子（β-巯基乙醇＋全反式维甲酸＋血小板凝集抑... 详细信息

目的研究骨髓基质细胞（BMSCs）在体外条件下向周围神经雪旺细胞（SOs）分化的可靠性。方法分离提取SD大鼠股骨和胫骨部位BMSCs，利用其贴壁生长的特性，培养纯化，传代扩增。用复合诱导因子（β-巯基乙醇＋全反式维甲酸＋血小板凝集抑制剂＋血小板源性生长因子＋碱性成纤维细胞生长因子1在体外诱导BMSCs分化。免疫细胞化学方法检测P75、S-100及胶质原纤维酸性蛋白fGFAP）的表达，荧光实时定量PCR检测P75、S100及CD104的表达。结果诱导后的BMSCs形态类似SCs，免疫荧光染色鉴定其具有SCs性质，表达SCs的表面标志物（GFAP、S100和P75）。荧光实时定量PCR结果显示诱导后BMSCsS-100、CD104的表达量达到了SCs的表达量水平．但P75的表达量与SCs的表达量水平还有较大差距。结论体外诱导BMSCs可部分获得SCs的特征，传代后恢复至未诱导状态，这种预诱导加复合因子诱导的方法尚待完善。

关键词：雪旺细胞细胞分化骨髓基质细胞

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新型带纤毛弹簧圈栓塞治疗颅内动脉瘤的临床研究

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中华神经医学杂志 2009年第6期8卷 581-584页

作者：李西锋段传志冯金福汪求精何旭英郭燕舞柳晓秋闫中杰赵信德林建浩南方医科大学附属珠江医院神经外科广东神经外科研究所广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282

目的探讨新型带纤毛弹簧圈栓塞治疗颅内动脉瘤的临床疗效。方法南方医科大学珠江医院神经外科自2008年3月至9月共收治41例颅内动脉瘤患者（43个动脉瘤），均用新型带纤毛弹簧圈栓塞治疗。回顾性分析患者随访情况，随访时间6～12个月，... 详细信息

目的探讨新型带纤毛弹簧圈栓塞治疗颅内动脉瘤的临床疗效。方法南方医科大学珠江医院神经外科自2008年3月至9月共收治41例颅内动脉瘤患者（43个动脉瘤），均用新型带纤毛弹簧圈栓塞治疗。回顾性分析患者随访情况，随访时间6～12个月，行脑血管造影或CT脑血管成像或磁共振脑血管成像，了解颅内动脉瘤复发及并发症情况。结果41例患者中死亡1例，术后并发脑梗死2例，动眼神经麻痹1例，复发1例，脑积水2例；改良Rankin评分量表评级为0级9例，1级19例，2级7例，3级3例，4级1例，5级和6级各1例。结论新型带纤毛弹簧圈栓塞治疗颅内动脉瘤安全有效，对小动脉瘤（〈5mm）有相对优势，对载瘤动脉闭塞有一定优势；但对大脑前动脉、大脑中动脉等较细载瘤动脉，因纤毛的致栓作用可能会造成脑梗死．因此封闭瘤颈时应用此圈要谨慎。

关键词：颅内动脉瘤栓塞性治疗新型带纤毛弹簧圈

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不同来源成体神经干细胞促进大鼠脊髓损伤功能修复的比较研究

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中华神经医学杂志 2009年第3期8卷 246-249页

作者：蔡颖谦张洪钿姜晓丹徐如祥郭琳琅南方医科大学珠江医院神经外科广东神经外科研究所广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282 南方医科大学珠江医院病理科广州510282

目的评价大脑、骨髓和脂肪组织3种不同来源的神经干细胞对大鼠脊髓挫伤的治疗效果。方法选取来源于同一大鼠成体中大脑、骨髓和脂肪的3个部位的组织，分离、诱导分化为不同来源的神经干细胞；应用自由落体损伤模型装置造成大鼠脊髓挫伤... 详细信息

目的评价大脑、骨髓和脂肪组织3种不同来源的神经干细胞对大鼠脊髓挫伤的治疗效果。方法选取来源于同一大鼠成体中大脑、骨髓和脂肪的3个部位的组织，分离、诱导分化为不同来源的神经干细胞；应用自由落体损伤模型装置造成大鼠脊髓挫伤。将不同来源的神经干细胞分别移植入大鼠脊髓损伤部位，通过BBB评分比较修复脊髓损伤功能的效果，应用免疫荧光染色检测不同移植细胞在损伤脊髓中的存活、分布、迁移的情况。另设假手术对照组和生理盐水对照组。结果与假手术对照组和生理盐水对照组比较，3个细胞处理组BBB评分在2～8周开始增加，9周以后更加明显，差异开始有统计学意义（P〈0．05）。在移植后1周和4周，细胞移植组中脑源性神经干细胞（SVZ-NSs）组Brdu／nestin^＋神经元存活的数目明显高于其他2组，但差异没有统计学意义（P〉0．05）；到了第8周，3组均仅有少量Brdu／nestin^＋细胞存活，相互之间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论植入来源于大脑、骨髓和脂肪组织的神经干细胞都可以在一定程度上提高脊髓损伤后运动功能恢复，但SVZ-NSs组的脊髓损伤大鼠运动功能恢复要比脂肪来源的神经干细胞（AD-NSs）组及骨髓来源的神经干细胞（BM-NSs）组更好。AD-NSs由于来源广泛和强有力的增殖能力，相比其他来源的神经干细胞，能是更好的选择。

关键词：脊髓损伤神经干细胞细胞移植

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LINGO-1多克隆抗体对大鼠脊髓损伤模型干预的可行性分析

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中华神经医学杂志 2009年第5期8卷 476-478,483页

作者：吕俊徐如祥法志强姜晓丹鲁辛柯以铨蔡颖谦杜谋选邹雨汐秦玲莎南方医科大学珠江医院神经外科广东神经外科研究所广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282 南方医科大学珠江医院内分泌科广州510282

目的探讨脊髓损伤（SCI）处局部给予LINGO-1多克隆抗体治疗的可行性。方法24只成年雌性SD大鼠采用随机数字表法分为假手术组、半横断对照IgG组及半横断LINGO-1多克隆抗体组，每组8只。假手术组仅行椎板切除术，另外两组均行T9脊髓半横... 详细信息

目的探讨脊髓损伤（SCI）处局部给予LINGO-1多克隆抗体治疗的可行性。方法24只成年雌性SD大鼠采用随机数字表法分为假手术组、半横断对照IgG组及半横断LINGO-1多克隆抗体组，每组8只。假手术组仅行椎板切除术，另外两组均行T9脊髓半横断术，半横断LINGO-1多克隆抗体组大鼠半横断损伤后立刻通过微量渗透泵局部给予损伤处LINGO-1多克隆抗体，而半横断对照IgG组仅给予兔源性对照IgG。术后3d和28d取各组T8-10节段脊髓制作冰冻切片，应用免疫荧光染色方法观察分析LINGO-1多克隆抗体是否进入脊髓组织并与LINGO-1分子特异性结合。结果半横断LINGO-1多克隆抗体组大鼠SCI术后3d和28d均可检测出兔源性抗体；术后3d，半横断对照IgG组切片LINGO-1染色强度（1．704±0．174）明显强于半横断LINGO-1多克隆抗体组（0．568±0．052），LINGO-1多克隆抗体预处理后的半横断对照IgG组切片LINGO-1染色强度（0．329±0．055）明显弱于半横断对照IgG组（1．704±0．174）切片，比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论局部给予的LINGO-1多克隆抗体在较宽的时间窗里均可进入SCI区并特异性识别LINGO-1分子．证明被动免疫治疗SCI是可行的。

关键词：中枢神经系统脊髓损伤 LINGO-1多克隆抗体

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重型颅脑损伤患者的预后因素分析

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中华神经医学杂志 2009年第11期8卷 1127-1130页

作者：徐如祥张鹏姜晓丹罗成义柯以铨张世忠段传志王向宇王清华薛杉南方医科大学珠江医院神经外科广东神经外科研究所广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282 北京军区总医院神经外科北京100700

目的探讨交通伤所致重型颅脑损伤患者预后的临床影响因素。方法回顾性分析南方医科大学珠江医院神经外科自1998年2月至2008年2月收治的652例交通伤所致重型颅脑损伤患者的临床资料。伤后3个月根据患者格拉斯哥预后评分（GOS）分为预后... 详细信息

目的探讨交通伤所致重型颅脑损伤患者预后的临床影响因素。方法回顾性分析南方医科大学珠江医院神经外科自1998年2月至2008年2月收治的652例交通伤所致重型颅脑损伤患者的临床资料。伤后3个月根据患者格拉斯哥预后评分（GOS）分为预后良好组和预后不良组，比较患者性别、年龄、入院时间、瞳孔、阻氧饱和度、收缩压、血糖、损伤严重度评分（ISS）、格拉斯哥昏迷评分（GCS）及脑损伤类型等10项指标在2组间的差异。结果与预后良好组相比．预后不良组患者入院时间长、血糖和ISS评分较高，丽瞳孔评分、血氧饱和度、收缩压、GCS分值较低．差异有统计学意义（P〈0.05）；脑挫裂伤、颅内多发血肿和颅内血肿患者预后较差；血糖、血氧、GCS评分和ISS评分为影响患者预后的独立因素。结论血糖、血氧、GCS评分和ISS评分可有效判断交通伤所致重型颅脑损伤患者的预后。

关键词：颅脑交通伤预后影响因素分析

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低浓度胰酶多次差速酶消纯化乳鼠雪旺细胞的实验研究

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中华神经医学杂志 2009年第4期8卷 351-354页

作者：林建浩徐如祥马旭张洪钿闫中杰罗杰李西锋卢凤飞广东神经外科研究所南方医科大学珠江医院神经外科广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282 北京军区总医院神经外科北京100700

目的介绍一种新的简便有效的体外培养和纯化雪旺细胞（SCs）方法，以获取足够数量、高纯度的SCs。方法取新生3～5d的SD乳鼠坐骨神经和臂丛神经，用胶原酶消化后收集细胞进行原代培养，细胞接种浓度为3×10^5个／mL，在接种72h内用... 详细信息

目的介绍一种新的简便有效的体外培养和纯化雪旺细胞（SCs）方法，以获取足够数量、高纯度的SCs。方法取新生3～5d的SD乳鼠坐骨神经和臂丛神经，用胶原酶消化后收集细胞进行原代培养，细胞接种浓度为3×10^5个／mL，在接种72h内用胰酶分步多次消化进行提纯。结果该方法与1．25g／L胰酶差速酶消提纯SCs相比．能更有效地将SCs和成纤维细胞分离，经免疫荧光染色显示，SCs的纯度能达到95％以上。结论本方法简便易掌握，可重复性高，能获得足够数量、高纯度的SCs供细胞移植研究。

关键词：雪旺细胞纯化差速酶消法

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大鼠脂肪基质细胞的分离培养及二步法诱导分化神经细胞

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中华神经医学杂志 2009年第4期8卷 340-343,350页

作者：唐艳平张洪钿邹雨汐姜晓丹肖中举广东神经外科研究所南方医科大学珠江医院神经外科广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282 南方医科大学基础部生理学教研室广州510515

目的研究脂肪基质细胞体外培养扩增及向神经细胞诱导分化的新方法。方法取SD大鼠的腹膜后脂肪组织，以Ⅰ型胶原酶消化离心，含10％胎牛血清的DMEM／F12培养基重悬细胞，增殖传代，取第5代细胞进行二步法诱导分化。首先以无血清Neurobasa... 详细信息

目的研究脂肪基质细胞体外培养扩增及向神经细胞诱导分化的新方法。方法取SD大鼠的腹膜后脂肪组织，以Ⅰ型胶原酶消化离心，含10％胎牛血清的DMEM／F12培养基重悬细胞，增殖传代，取第5代细胞进行二步法诱导分化。首先以无血清Neurobasal培养基联合应用碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）20ng／mL、表皮生长因子（EGF）20ng／mL和N2（1：100）添加剂将细胞先诱导成神经球；再取第二代神经球加入1％胎牛血清、5％马血清、0．5μmol／L的维甲酸（RA）和50ng／mL脑源性神经营养因子（BDNF），促进其向神经元和胶质细胞方向分化；免疫荧光染色鉴定细胞分化结果。结果初接种的细胞大多呈圆球状，悬浮在培养基中，24h后贴壁。随着细胞密度加大，形态变成单层成纤维样细胞，呈漩涡状排列。无血清Neurobasal培养基诱导5～7d可见悬浮的神经球出现；神经球迅速增殖，14d时直径可达100μm。分化后的大部分细胞呈现典型的神经元样改变，细胞体为圆形，内可见明显的细胞核，细胞伸出细长突起或网状突起，可见较多的细胞形成网络连接。免疫荧光染色鉴定结果证实，除了神经球可以高表达巢蛋白（nestin）（阳性率75．62％±1．34％）之外，分化细胞还可有效表达β-tubulinⅢ（未成熟神经元标记物，阳性率达57．62％±4．92％）或微管相关蛋白2（MAP2ab）（成熟神经元标记物，阳性率11．25％±3．87％）；有少量细胞表达胶质纤维酸性蛋白（GFAP）（阳性率18．34％±3．87％）和GalC（阳性率14.35％±3．98％）。结论从成年大鼠脂肪中分离得到的脂肪基质细胞可在体外培养得到大量分化潜能稳定的子代细胞。应用本实验二步诱导法，可得到较高比例的nestin及β-tubulinⅢ阳性细胞，并有一定比例MAP2ab阳性细胞出现。

关键词：脂肪基质细胞诱导细胞分化神经元样细胞

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脑水肿与颅内压的监测和临床观察

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中华神经医学杂志 2009年第9期8卷 969-972页

作者：周青徐如祥张世忠周敬安解放军总医院第二附属医院神经外科北京100091 南方医科大学珠江医院神经外科广东神经外科研究所广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282

脑水肿、颅内压（intracranialpressure，ICP）增高的诊断主要依靠临床观察、影像学检查和ICP监测三者结合。传统的CT和核磁共振虽然可以作为颅内血肿、脑水肿和ICP增高的检测方法．但它们不能对颅内血肿和脑水肿进行实时动态的监测．... 详细信息

脑水肿、颅内压（intracranialpressure，ICP）增高的诊断主要依靠临床观察、影像学检查和ICP监测三者结合。传统的CT和核磁共振虽然可以作为颅内血肿、脑水肿和ICP增高的检测方法．但它们不能对颅内血肿和脑水肿进行实时动态的监测．也不能反映脑水肿、颅内血肿的演变过程，给临床及时治疗带来难度。有创ICP监测又因为需要开颅手术或者钻孔放置监测电极，操作复杂以及增加颅内感染机会而受到限制。由于颅内血肿和脑水肿将引起大脑左右半球的电阻抗的变化．因此通过应用电阻抗测量的方式来检测颅内血肿和脑水肿是一种新型无创的方法。该方法主要是在大脑的左右半球分别注入低频安全电流来检测大脑左右两侧的电阻抗，通过测量大脑左右半球的电阻抗之差值来反映颅内血肿和脑水肿的阻抗变化的演变过程．从而达到动态监测颅内血肿和脑水肿的目的。

关键词：脑血肿脑水肿颅内压监测

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PLGA／PEG缓释微球的制备与载药性能的研究

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中华神经医学杂志 2009年第7期8卷 674-677页

作者：汪求精孙新林祝爱萍曾晨光全大萍南方医科大学珠江医院神经外科广东神经外科研究所广东省脑功能修复与再生重点实验室广州501282 中山大学高分子研究所广州510275

目的以不同组成丙交酯／乙交酯共聚物（PLGA）为载体，制备载牛血清白蛋白（BSA）聚合物微球，考察共聚物组成、浓度及混合聚乙二醇（PEG）对聚合物微球粒径、BSA包封率和体外释放规律的影响。方法采用水／油／水（W／O／W）双乳化溶剂... 详细信息

目的以不同组成丙交酯／乙交酯共聚物（PLGA）为载体，制备载牛血清白蛋白（BSA）聚合物微球，考察共聚物组成、浓度及混合聚乙二醇（PEG）对聚合物微球粒径、BSA包封率和体外释放规律的影响。方法采用水／油／水（W／O／W）双乳化溶剂挥发技术制备载BSA的PLGA／PEG聚合物微球。利用扫描电子显微镜观察聚合物微球表面形貌，激光动态粒度分析仪测定聚合物微球粒径，紫外分光光度法测定聚合物微球药物包封率和体外释放速率。结果PLGA共聚物中GA含量越高，聚合物微球粒径越大，释放速率越快。同时，PEG的加入导致聚合物微球对BSA的包封率增加，最高达88．22％，且释放速率也加快。采用双乳化溶剂挥发法制备的BSA-PLGA／PEG聚合物微球包封率较高、突释量较小、缓慢释放时间达3周以上并能维持较高药物浓度。结论通过调整各组份的比例及添加PEG．可以得到较高包封率和适当载药量的BSA-PLGA／PEG缓释微球。

关键词： PLGA/PEG缓释微球牛血清白蛋白双乳化溶剂挥发法控制释放

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成人骨髓源性神经干细胞高迁移能力的基因分析

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中华神经医学杂志 2009年第7期8卷 649-652页

作者：朱汝森徐如祥姜晓丹蔡颖谦邹雨汐杜谋选广东医学院附属医院神经外科湛江524001 南方医科大学珠江医院神经外科广东神经外科研究所广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282 北京军区总医院神经外科北京100010

目的检测成人骨髓源性神经干细胞（Md—NSCs）中与细胞侵袭转移相关基因的表达情况．研究Md-NSCs在中枢神经系统中具有高迁移能力的基因基础。方法自正常成人志愿者获取成人骨髓基质细胞（BMSCs），于体外诱导培养获得Md-NSCs，应用寡... 详细信息

目的检测成人骨髓源性神经干细胞（Md—NSCs）中与细胞侵袭转移相关基因的表达情况．研究Md-NSCs在中枢神经系统中具有高迁移能力的基因基础。方法自正常成人志愿者获取成人骨髓基质细胞（BMSCs），于体外诱导培养获得Md-NSCs，应用寡核苷酸基因芯片检测Md—NSCs中与细胞侵袭转移相关基因的表达情况；应用实时定量PCR（RT—PCR）检测验证基因芯片的结果。结果基因芯片检测结果显示，与新鲜正常成人骨髓细胞去红细胞相比较，Md—NSCs中与细胞侵袭转移相关基因（MMP1、MMP2、MMP17、ITGA3、RhoB、RhoC及RhoD）均呈高度表达；RT-PCR检测结果显示．MMP2、ITGA3、RhoC在Md-NSCs中高度表达，分别为新鲜正常成人骨髓细胞去红细胞含量的2．84×10^0倍、2．22×10^2倍及4．92×10^0倍。结论Md—NSCs在中枢神经系统中具有高迁移能力可能与该细胞中促进细胞侵袭转移相关基因的高度表达相关。另外，这些高度表达的基因属于重要的癌基因，因此对Md—NSCs致瘤性问题的深入研究值得重视。

关键词：神经干细胞侵袭转移基因芯片基因表达

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