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伴t（1；19）（q23；p13）和E2A-PBX1成人急性T淋巴细胞白血病一例报告附文献复习

中华血液学杂志 2009年第10期30卷 675-677页

作者：何广胜张旭辉姚莉张日陈子兴吴德沛孙爱宁金正明仇惠英胡晓慧苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

目的总结1例伴有t（1；19）和E2A-PBXl融合基因阳性的成人T细胞急性淋巴细胞白血病（ALL）患者的诊疗体会。方法对1例成人T细胞ALL患者进行染色体核型分析，流式细胞术检测免疫表型，同时进行融合基因多重RT-PCR扩增。结果患者染色体核... 详细信息

目的总结1例伴有t（1；19）和E2A-PBXl融合基因阳性的成人T细胞急性淋巴细胞白血病（ALL）患者的诊疗体会。方法对1例成人T细胞ALL患者进行染色体核型分析，流式细胞术检测免疫表型，同时进行融合基因多重RT-PCR扩增。结果患者染色体核型为47，XY，9p＋，15p＋，17q-，der（19），t（1；19）（q23；p13）[5j／46，XY[15]。E2A-PBX1融合基因阳性表达。给予hyperCVAD（环磷酰胺＋长春新碱＋阿霉素＋地塞米松）方案治疗后患者获血液学完全缓解，染色体核型复查为46，XY[10]，E2A—PBXI融合基因检测阴性。结论E2A—PBX1＋t（1；19）也可以发生于T细胞ALL，E2a-PBX1白血病细胞在不同的癌基因协同信号或微环境下转化方向可变。

关键词：白血病,T细胞,急性核型分析 t(1 19)(q23 p13) 融合基因,E2A-PBX1

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135例骨髓增殖性肿瘤患者JAK2基因突变的定量研究

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中华血液学杂志 2009年第5期30卷 321-325页

作者：晁红颖沈益民张日冯宇峰岑建农姚利沈宏杰朱子玲薛永权苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

目的研究JAK2基因突变在骨髓增殖性肿瘤（MPN）中的发生率和突变类型，并对突变转录本水平进行定量分析，初步探讨其临床意义。方法采用突变序列扩增系统PCR（ARMS—PCR）法检测JAK2突变的发生率及其突变类型；采用毛细管电泳法定量分析... 详细信息

目的研究JAK2基因突变在骨髓增殖性肿瘤（MPN）中的发生率和突变类型，并对突变转录本水平进行定量分析，初步探讨其临床意义。方法采用突变序列扩增系统PCR（ARMS—PCR）法检测JAK2突变的发生率及其突变类型；采用毛细管电泳法定量分析JAK2突变转录本水平。结果135例MPN患者共检出95例JAK2V617F阳性，总阳性率为70．4％；真性红细胞增多症（PV）患者JAK2V617F突变发生率为97．4％，原发性血小板增多症（ET）为59．6％，3例特发性骨髓纤维化（IMF）中2例阳性；95例突变患者中纯合突变36例，杂合突变59例，其中PV患者纯合突变发生率为47．3％，高于ET患者的18．1％（P〈0．05）。纯合突变者其JAK2V617F突变转录本水平高于杂合突变者（P〈0．05），杂合型PV患者的JAK2V617F突变转录本水平高于杂合型ET患者（P〈0．05）；JAK2V617F突变高表达组（转录本水平为70％～100％）的平均年龄高于低表达组（转录本水平为47．3％～70．0％），且两者年龄均较JAK2V617F阴性组为高（P〈0．05）；年龄〈60岁者其JAK2V617F转录本水平低于≥60岁者（P〈0．001）；PV患者中，JAK2V617F高表达组其白细胞计数高于低表达组（P〈0．001），ET患者中，JAK2V617F高表达组其白细胞计数高于低表达组（P〈0．05），且二者均较阴性组为高（P〈0．05），血红蛋白水平在高表达组与低表达组间差异无统计学意义（P〉0．05），但二者均较阴性组为高（P〈0．05）。101例患者进行了染色体检查，未发现核型异常与JAK2V617F突变之间存在相关性。结论ARMS—PCR可作为检测JAK2V617F突变较灵敏的方法，结合毛细管电泳可用于此突变的定量分析以及临床MPN的诊断和微量残留病的检测。

关键词：骨髓增殖性疾病 DNA突变分析突变序列扩增系统PCR 电泳毛细管

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急性早幼粒细胞白血病患者纤溶活性的临床研究

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中华血液学杂志 2009年第3期30卷 145-149页

作者：刘艳慧王兆钺张威戴兰沈文红阮长耿苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室 215006

目的研究急性早幼粒细胞白血病（APL）患者纤溶活性在诱导治疗缓解前后的改变及其机制，观察全反式维甲酸（ATRA）或ATRA＋三氧化二砷（ATO）诱导治疗对APL患者纤溶活性的影响。方法选择初治APL患者26例，在诱导治疗过程中分别用发色底... 详细信息

目的研究急性早幼粒细胞白血病（APL）患者纤溶活性在诱导治疗缓解前后的改变及其机制，观察全反式维甲酸（ATRA）或ATRA＋三氧化二砷（ATO）诱导治疗对APL患者纤溶活性的影响。方法选择初治APL患者26例，在诱导治疗过程中分别用发色底物法和ELISA法检测患者血浆纤溶酶原和纤维蛋白（原）降解产物（FDP），用全自动血凝仪检测纤维蛋白原和D-二聚体，在治疗前和完全缓解后用流式细胞术检测细胞表面膜联蛋白Ⅱ（AnnexinⅡ）和尿激酶型纤溶酶原激活剂受体（u-PAR）的表达，实时定量PCR检测AnnexinⅡ和u—PAR的mRNA表达水平。结果APL患者存在原发性纤溶亢进，APL细胞表面AnnexinⅡ和u-PAR蛋白的表达率和mRNA水平均高于正常对照，经以ATRA或ATRA＋ATO为基础的诱导缓解方案治疗达到完全缓解后血浆纤维蛋白原、纤溶酶原、FDP及D-二聚体恢复正常，AnnexinⅡ和u—PAR表达水平相应下降，但仍高于正常对照水平。结论APL细胞表面AnnexinII和u—PAR高表达可促使APL纤溶酶生成增多，导致APL患者纤溶亢进。ATRA或ATRA＋ATO可通过下调APL细胞Annexin1I和u—PAR表达纠正APL纤溶异常，这可能是减少APL出血的机制之一。

关键词：白血病早幼粒细胞急性纤维蛋白溶解膜联蛋白Ⅱ 受体尿激酶全反式维甲酸

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国际血栓与止血研究的新进展——第二十二届国际血栓与止血大会内容简介

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中华血液学杂志 2010年第3期31卷 212-213页

作者：王兆钺苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室

第二十二届国际血栓与止血大会于2009年7月11日至16日在美国波士顿举行，来自100个国家的6000多名代表参加了大会。在这次会议上除各种讲座与研讨会外，共发表学术论文约4000篇，反映了近两年来血栓与止血领域研究的成就和未来的发展趋势。

关键词：止血血栓内容简介国际十二 2009年学术论文波士顿

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KIR受配体模式在治疗急性淋巴细胞白血病中的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第2期29卷 160-164页

作者：何军鲍晓晶孙爱宁陈子兴吴德沛袁晓妮邱桥成岑建农阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

目的研究在无关供体造血干细胞移植中急性淋巴细胞白血病（ALL）的杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR）受配体模式对自然杀伤（NK）细胞的异源反应性活性预示造血干细胞移植的影响。方法采用基因测序和序列特异性引物聚合酶链反应（PCR-SS... 详细信息

目的研究在无关供体造血干细胞移植中急性淋巴细胞白血病（ALL）的杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR）受配体模式对自然杀伤（NK）细胞的异源反应性活性预示造血干细胞移植的影响。方法采用基因测序和序列特异性引物聚合酶链反应（PCR-SSP）的方法，对中国造血干细胞捐献者资料库中提供的23对HLA全相合供受者进行KIR及HLA高分辨基因分型；流式细胞术动态随访CD158分子表达水平；患者均为ALL。结果23对供受者中17例供者KIR2DL2／L3有相应的患者配体HLA-Cw1、3、7、8、12、14；6例供者KIR2DL1有相应的患者配体HLA—Cw6、15；16例供者KIR3DL1有相应的患者配体HLA—Bw4；12例供者3DL2有相应的患者配体HLA—A11。23对供受者中有19对接受了造血干细胞移植，供受者KIR基因完全相同或宿主抗移植物（HVG）方向移植相关死亡率高，分别为33．3％和40．0％；移植物抗宿主（GVH）方向移植相关死亡率低，为12．5％。供受者在GVH方向时，移植物抗宿主病（GVHD）发生率高（50．0％）且有多种激活性（aKIR）的组合；而HVG方向GVHD发生率低（20．0％）。19对供受者有5对均为KIR基因A单体型，其中2对供受者为KIR2DS4$00I／002亚型，移植后死亡；3对供受者KIR2DS4为KIR2DS4＊003-007亚型，1年后无病生存。移植后随访无GVHD发生时，CD158a的表达逐渐下降；有GVHD发生时，CD158a的表达逐渐增高；移植后早期受者NK细胞百分比为（23．4±3．8）％，高于正常人水平[（2．04±0．58）％，P〈0．05]，差异有统计学意义。结论供者的KIR2DL1、KIR3DL1是引起NK细胞异源反应活性的重要抑制性KIR。KIR受配体模式不仅能预示无关供体异基因造血干细胞移植的预后，更能帮助临床提高ALL异基因造血干细胞移植的总生存率及无病生存率，降低移植后相关死亡率和防止白血病复发。

关键词：杀伤细胞免疫球蛋白样受体受配体模式急性淋巴细胞白血病移植无关供体

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T淋巴细胞内mTOR／S6途径在难治／复发再生障碍性贫血发病机制中的作用

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中华血液学杂志 2009年第10期30卷 654-657页

作者：张翔何广胜吴德沛孙爱宁苗瞄王秀丽金正明仇惠英常伟荣苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

目的研究难治／复发再生障碍性贫血（AA）患者骨髓T淋巴细胞内雷帕霉素靶蛋白（mTOR）／核糖体蛋白S6途径活化情况，以及mTOR抑制剂雷帕霉素（RAPA）和CD28抗原阻断剂CTLA4免疫球蛋白（CTLA4Ig）对此途径的影响。方法采集13例难治／复... 详细信息

目的研究难治／复发再生障碍性贫血（AA）患者骨髓T淋巴细胞内雷帕霉素靶蛋白（mTOR）／核糖体蛋白S6途径活化情况，以及mTOR抑制剂雷帕霉素（RAPA）和CD28抗原阻断剂CTLA4免疫球蛋白（CTLA4Ig）对此途径的影响。方法采集13例难治／复发AA、8例初治重型AA（SAA）以及10例缺铁性贫血（IDA）患者（对照组）的骨髓标本，加入RAPA和CTLA4Ig进行孵育，用流式细胞术检测加药前后每组患者CD3＋T淋巴细胞胞质内磷酸化mTOR（p-roTOR）、磷酸化S6（P—S6）和干扰素γ（IFN-γ）的表达水平，并分析其与疾病的关系。结果①难治／复发AA组患者骨髓CD3＋T细胞胞内p-mTOR、p-S6及IFN-γ的表达水平较对照组显著升高（P值均〈0．01）。②初治SAA患者p-mTOR和p-S6的表达水平低于难治／复发AA组（P值均〈0．01），而与对照组比较差异无统计学意义（P值均〉0．05）；初治组IFN-γ的表达水平明显高于对照组（P值均〈0．01）。（3）RAPA和CTLA-4Ig作用后，难治／复发AA患者p-mTOR、p-S6及IFN-γ的表达水平较用药前明显下降（P值均〈0．01）。结论CD3＋T淋巴细胞内mTOR／S6途径在难治／复发AA患者中活化。RAPA和CTLA-4Ig均可抑制难治／复发AA患者体内roTOR／S6途径，并下调IFN-γ。CD28／mTOR／S6和IFN-γ途径参与难治／复发AA的免疫发病机制，并且对RAPA和CTLA4Ig敏感，以CD28、mTOR为治疗靶点，临床应用RAPA和CTLA-4Ig治疗此类AA患者值得探索。

关键词：贫血再生障碍性 T淋巴细胞抗原 CD28 雷帕霉素靶蛋白核糖体蛋白质 S6 干扰素γ CTLA-4免疫球蛋白

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尿BK病毒载量与干细胞移植后出血性膀胱炎的关系

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中华血液学杂志 2009年第8期30卷 524-527页

作者：谢颖韩悦吴德沛孙爱宁岑建农姚利阮长耿苏州大学附属第一医院血液科、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室

目的分析BK病毒尿与造血干细胞移植（HSCT）术后迟发性出血性膀胱炎（LOHC）的相关性，探讨BK病毒载量与LOHC发病的关系。方法收集2006年8月至2008年4月113例HSCT患者的晨尿标本，提取病毒DNA，用PCR方法扩增多瘤病毒DNA，以40名健康成... 详细信息

目的分析BK病毒尿与造血干细胞移植（HSCT）术后迟发性出血性膀胱炎（LOHC）的相关性，探讨BK病毒载量与LOHC发病的关系。方法收集2006年8月至2008年4月113例HSCT患者的晨尿标本，提取病毒DNA，用PCR方法扩增多瘤病毒DNA，以40名健康成人为对照。用实时定量PCR方法检测尿BK病毒阳性患者在LOHC不同时期的尿标本中BK病毒DNA拷贝数。结果113例HSCT患者中22例（19．5％）发生HC，中位发生时间为＋44（＋13～＋114）d，包括1级7例，2级11例，3级3例，4级1例。其中21例（95．5％）LOHC患者尿标本经PCR检出BK病毒，检出率明显高于非LOHC组（31．9％）（P=0．000）。健康对照组均未检出BK病毒。定量PCR检测结果显示，LOHC患者尿BK病毒DNA拷贝数在HC发病前1周的平均水平较初次阳性时有明显上升（10^3拷贝数／μl比10^4拷贝数／μl），在HC发病当周及缓解后1周无明显改变。不同级别LOHC患者在发病前和发病时尿BK病毒DNA拷贝数差异无统计学意义。非LOHC患者尿中BK病毒DNA拷贝数平均水平为10^3～10^4拷贝数／μl，低于LOHC患者。结论BK病毒尿是HSCT后LOHC的重要致病原因。如HSCT患者尿中BK病毒DNA拷贝数呈动态上升并超过10^5拷贝数／μl时可能预示LOHC的发生。

关键词： BK多瘤病毒膀胱炎出血性造血干细胞移植

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CAG方案治疗5例难治性急性双表型白血病疗效观察

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中华血液学杂志 2009年第1期30卷 42-43页

作者：张翔何广胜昊德沛孙爱宁金正明仇惠英苗瞄唐晓文傅垮垮韩悦马骁陈苏宁薛胜利赵晔王秀丽王荧吴小津苏州大学附属第一医院、江苏省血液病研究所卫生部血栓与止血重点实验室

急性双表型白血病（BAL）是急性白血病患者髓系和淋系细胞同时累及的一组疾病。目前对于BAL的治疗，尚没有统一有效的方案。我们发现，CAG方案不但能有效治疗髓系白血病和骨髓增生异常综合征，对部分急性淋巴细胞向血病患者也有效。因... 详细信息

急性双表型白血病（BAL）是急性白血病患者髓系和淋系细胞同时累及的一组疾病。目前对于BAL的治疗，尚没有统一有效的方案。我们发现，CAG方案不但能有效治疗髓系白血病和骨髓增生异常综合征，对部分急性淋巴细胞向血病患者也有效。因此，我们对MOAP／DOAP（M：米托蒽醌；O：长春地辛；A：阿糖胞忤；P：泼尼松；D：柔红霉素）方案诱导治疗未能取得完全缓解（CR）的5例难治性BAI．患者采用了CAG预激方案治疗，取得很好的疗效，现报道如下。

关键词：急性双表型白血病 CAG方案方案治疗疗效观察难治性急性白血病患者骨髓增生异常综合征急性淋巴细胞

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PAI-1在造血干细胞移植早期血栓病变中的临床意义

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中华血液学杂志 2009年第11期30卷 731-734页

作者：韩悦卢晓旭吴德沛孙爱宁张威胡晓慧高海丽王兆钺阮长耿苏州大学附属第一医院血液科、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

目的观察造血干细胞移植早期患者纤溶酶原激活剂抑制物-1（PAI-1）指标的动态改变，探讨其在移植相关性血栓病变中的临床意义。方法采用ELISA法监测95例接受造血干细胞移植的患者在预处理过程中以及干细胞移植后4周内血浆中PAI-1等凝血... 详细信息

目的观察造血干细胞移植早期患者纤溶酶原激活剂抑制物-1（PAI-1）指标的动态改变，探讨其在移植相关性血栓病变中的临床意义。方法采用ELISA法监测95例接受造血干细胞移植的患者在预处理过程中以及干细胞移植后4周内血浆中PAI-1等凝血指标的动态改变。根据移植后并发症的发生情况将患者分为平稳组、急性移植物抗宿主病（aGVHD）组、血栓组以及感染组进行统计学分析。结果造血干细胞移植过程中患者的各项凝血相关指标呈现动态改变。其中PAI-1水平在预处理后升高，移植当周下降，随后又逐步上升。根据移植后首先出现的并发症情况将患者分为四组：平稳组41例、aGVHD组29例、血栓组6例[肝静脉闭塞病（VOD）5例，血栓性微血管病（TMA）1例]和感染组19例。自体移植中发生血栓1例（3．3％），异基因移植组发生血栓5例（7．7％）。移植后发生血栓患者PAI-1水平较发生血栓者无增高，后者又高于自体移植无血栓患者。有并发症的移植患者PAI-1水平明显高于无并发症患者。出现血栓病变的6例患者PAI-1极度升高，为（62．8±7．5）μg/L，明显高于GVHD组[（45．1±9．1）μg/L]和感染组[（50．0±11．2）μg/L]患者的移植后平均水平。结论血浆PAI-1水平的增高可能是移植相关性血栓病变的特异性指标，提示VOD、TMA等血栓并发症的发生。PAI-1水平的明显升高有益于移植相关性血栓并发症的早期诊断。

关键词：移植相关性血栓病变纤溶酶原激活剂抑制物-1 造血干细胞移植肝静脉闭塞病

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412例骨髓增殖性肿瘤的JAK2V617F突变检测及其临床意义

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中华肿瘤杂志 2009年第7期31卷 510-514页

作者：晁红颖范峥张日沈益民陈婉费海荣朱子玲冯宇峰陈子兴薛永权苏州大学附属第一人民医院江苏省血液病研究所卫生部血栓与止血重点实验室 215006

目的研究JAK2V617F突变在慢性骨髓增殖性肿瘤（MPN）中的发生率及其与临床表现和并发症间的相关性。方法采用等位基因特异性PCR方法，检测MPN中JAK2V617F的发生情况。结果412例MPN患者中，JAK2V617F突变277例。JAK2V617F在原发性血小板... 详细信息

目的研究JAK2V617F突变在慢性骨髓增殖性肿瘤（MPN）中的发生率及其与临床表现和并发症间的相关性。方法采用等位基因特异性PCR方法，检测MPN中JAK2V617F的发生情况。结果412例MPN患者中，JAK2V617F突变277例。JAK2V617F在原发性血小板增多症（ET）、特发性骨髓纤维化（IMF）和不能分类的骨髓增殖性疾病（MPD—U）中发生率分别为55．9％、66．7％和52．4％（P〉0．05），均低于真性红细胞增多症（PV，95．6％），差异有统计学意义（P〈0．05）。JAK2突变型患者的平均年龄高于野生型患者（P〈0．01）；JAK2突变型患者的白细胞计数和血红蛋白水平均高于野生型患者（P〈0．05）；JAK2突变型患者中血管事件的发生率高于野生型患者（P〈0．05）；JAK2突变型的MPD—U患者较野生型患者更易进展为典型MPN（P〈0．05）；在301例行染色体检查的患者中，未发现核型异常与JAK2V617F表达之间存在相关性。结论检测MPD—U患者中JAK2V617F的突变情况对疾病发展有提示作用；JAK2V617F突变与MPN患者年龄、外周血细胞计数及血管事件并发症相关。

关键词：骨髓增殖性肿瘤 JAK2V617F 等位基因特异性PCR

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