检索结果-内蒙古大学图书馆

生物工程学报 2005年第2期21卷 192-197页

作者：陈伟于梅李山虎王鸣刚周建光军事医学科学院生物工程研究所北京100850 厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

pBR32 2 - Red是一种新型重组工程系统 ,它携带了λ 噬菌体Red重组酶基因和一系列调控元件。对pBR32 2 Red最优重组条件进行探索后应用该质粒提供的体内同源重组功能 ,在菌株W3110体内 ,对染色体上的lac操纵子进行了基因修饰 ,包括 :... 详细信息

pBR32 2 - Red是一种新型重组工程系统 ,它携带了λ 噬菌体Red重组酶基因和一系列调控元件。对pBR32 2 Red最优重组条件进行探索后应用该质粒提供的体内同源重组功能 ,在菌株W3110体内 ,对染色体上的lac操纵子进行了基因修饰 ,包括 :①运用kan- sacB选择反选择方法和重叠引物方法敲除了阻遏基因lacI,②运用kan -sacB选择反选择方法和线性双链DNA介导的DNA重组方法将报告基因lacZ敲入lacA和lacY的位置 ,并且首次测定了报告基因lacZ在这三个结构基因位置的组成性表达情况。结果表明运用不同的重组策略 ,pBR32 2- Red系统都能方便有效地对大肠杆菌W3110染色体进行基因敲除和敲入修饰。

关键词：体内操纵子基因敲除 BR 首次携带染色体重组工程报告基因重组酶

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戊型肝炎病毒ORF2片段在毕赤酵母中的分泌表达及活性鉴定

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湖南师范大学自然科学学报 2005年第2期28卷 57-61页

作者：刘如石邱义兰杨坤宇梁良张军夏宁邵湖南师范大学生命科学学院生物化学与分子生物学系中国长沙410081 厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室中国厦门361005

　为了寻求新型表达系统来研制戊型肝炎病毒基因工程疫苗,利用Pichiapastoris表达系统表达戊型肝炎病毒(HEV)结构区ORF2基因.利用PCR扩增HEVORF2基因,然后将ORF2基因按正确的阅读框融合到Pichiapastoris分泌型表达载体pPIC9K的а因子信... 详细信息

　为了寻求新型表达系统来研制戊型肝炎病毒基因工程疫苗,利用Pichiapastoris表达系统表达戊型肝炎病毒(HEV)结构区ORF2基因.利用PCR扩增HEVORF2基因,然后将ORF2基因按正确的阅读框融合到Pichiapastoris分泌型表达载体pPIC9K的а因子信号肽编码序列3′端,重组表达载体在电击转化毕赤酵母,经过含G418的营养缺陷型培养基(RDB)筛选、重组酵母基因组总DNA进行PCR鉴定后,证实HEVORF2基因已经整合到酵母基因组中并得到重组转化子.表型鉴定后对G418具有不抗性的重组菌株诱导表达,用双抗体夹心法ELISA筛选了表达外源蛋白的重组菌株,再经SDS PAGE与Westernblot证实ORF2基因在Pichiapastoris中实现了分泌表达,而且重组蛋白具有较强的特异性与生物学活性;同时用双抗体夹心法证实在Pichiapastoris表达的上清中存在衣壳蛋白聚体.

关键词：戊型肝炎病毒衣壳蛋白重组毕赤酵母

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草鱼碱性磷酸酶的分离纯化与部分性质研究

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厦门大学学报（自然科学版） 2005年第5期44卷 684-687页

作者：张继平林建成谢进金陈清西厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

用Tris-HCl缓冲液抽提,硫酸铵分级沉淀,DEAE-纤维素和葡聚糖凝胶层析,从草鱼肠中提取出碱性磷酸酶(ALP).提取倍数为6.74,比活为684 U/mg蛋白.酶液经PAGE呈现单一带,该酶催化对硝基苯磷酸二钠(pNPP)水解反应的最适pH值为10.41,最适温度... 详细信息

用Tris-HCl缓冲液抽提,硫酸铵分级沉淀,DEAE-纤维素和葡聚糖凝胶层析,从草鱼肠中提取出碱性磷酸酶(ALP).提取倍数为6.74,比活为684 U/mg蛋白.酶液经PAGE呈现单一带,该酶催化对硝基苯磷酸二钠(pNPP)水解反应的最适pH值为10.41,最适温度为27℃,Km值为1.01 mmol/L,酶的热稳定性与pH稳定性研究表明:该酶在pH 6.6～11.5区间和在温度低于45℃下稳定.研究金属离子对酶活力影响的结果表明:一价金属离子Li+、Na+和K+对酶活力没有影响;二价金属离子Mg2+、Mn2+和Co2+对酶有不同程度的激活作用;Zn2+对酶有抑制作用.

关键词：草鱼碱性磷酸酶分离纯化温度 pH 金属离子

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银杏叶和银杏外种皮乙醇提取物对酪氨酸酶的抑制作用比较

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厦门大学学报（自然科学版） 2005年第B06期44卷 116-119页

作者：韩鹏邱凌黄浩陈祥仁陈清西厦门大学生命科学学院细胞生物学和肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

报道银杏叶和银杏外种皮乙醇提取物对酪氨酸酶活力的影响.结果表明:银杏叶和银杏外种皮乙醇提取物对酪氨酸酶活力均有显著的抑制作用.测定导致酶活力下降50%的银杏叶和银杏外种皮提取物含量(IC50)分别为:6.59mg/mL和2.73mg/mL.对酪氨酸... 详细信息

报道银杏叶和银杏外种皮乙醇提取物对酪氨酸酶活力的影响.结果表明:银杏叶和银杏外种皮乙醇提取物对酪氨酸酶活力均有显著的抑制作用.测定导致酶活力下降50%的银杏叶和银杏外种皮提取物含量(IC50)分别为:6.59mg/mL和2.73mg/mL.对酪氨酸酶的抑制作用均表现为可逆抑制,抑制类型均为混合型.分别测定银杏叶和外种皮提取物对游离酶抑制常数(KI)和酶底物络合物抑制常数(KIS),并加以比较.

关键词：银杏外种皮乙醇提取物抑制作用酪氨酸酶银杏叶抑制常数酶活力络合物游离酶混合型测定

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脊椎动物线粒体DNA的基因重排

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Acta Genetica Sinica 2005年第3期32卷 322-330页

作者：钟婧李光刘忠权李庆伟王义权厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005 南京师范大学生命科学学院南京210097 辽宁师范大学生命科学学院大连116029

将GenBank上已公布的321种脊椎动物mtDNA全序列,按纲整理归类,绘制基因排布图并进行比对。比对结果表明:81个物种的mtDNA中观察到基因重排现象,涉及脊椎动物各纲,其中9个物种同时存在基因顺序变化和基因倒置现象,所有的基因重排... 详细信息

将GenBank上已公布的321种脊椎动物mtDNA全序列,按纲整理归类,绘制基因排布图并进行比对。比对结果表明:81个物种的mtDNA中观察到基因重排现象,涉及脊椎动物各纲,其中9个物种同时存在基因顺序变化和基因倒置现象,所有的基因重排都涉及tRNA的变化。脊椎动物mtDNA基因顺序变化可分为3类:1)邻接的基因或片段的位置交换;2)接近于控制序列或轻链起始位点的基因或片段的位置变化,有时还伴随着控制序列的倍增;3)I Q M区域的变化。所有鸟类、蛇类、鳄类和有袋类的mtDNA具有各自独特的基因排列顺序。基因倒置现象常见于鱼类和哺乳类,且多表现为tRNA从轻链往重链上迁移。本文就这些基因重排现象、发生重排的机制和mtDNA基因重排在系统发生研究中的应用做一简要概述。

关键词：线粒体DNA 基因重排基因倒置系统发生

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几种核受体核浆穿梭与调控机制

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细胞生物学杂志 2005年第4期27卷 363-368页

作者：林晓峰吴乔厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

许多核受体属于核转录因子,它们在胞浆合成后快速地转运入核,同时还能够在核浆之间穿梭以行使其特定的生物学功能。核受体的核浆转运主要通过核膜上的核孔复合体,依靠运输载体Importins和Exportins介导以及Ran-GDP提供能量。现对糖皮质... 详细信息

许多核受体属于核转录因子,它们在胞浆合成后快速地转运入核,同时还能够在核浆之间穿梭以行使其特定的生物学功能。核受体的核浆转运主要通过核膜上的核孔复合体,依靠运输载体Importins和Exportins介导以及Ran-GDP提供能量。现对糖皮质激素受体(GR)、雄激素受体(AR)和雌激素受体(ER)等核受体在核浆穿梭转运和调控机制等方面的研究进展进行综述,同时也介绍我们实验室最近发现的视黄素X受体(RXR)核浆穿梭转运的新功能。

关键词：核受体配体核浆穿梭核定位信号核输出信号调控机制穿梭糖皮质激素受体核浆转运核转录因子

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莴苣花药发育过程中钙的分布特征

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实验生物学报 2005年第5期38卷 377-386页

作者：邱义兰刘如石谢潮添杨延红徐青田惠桥湖南师范大学生命科学学院长沙410018 细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门大学生命科学学院厦门361005

减数分裂前,莴苣花药中的钙颗粒很少。减数分裂后,花药绒毡层细胞中的钙颗粒明显增加, 同时在花药药室基质中也出现许多细小的钙颗粒。刚从四分体中释放出的小孢子内钙颗粒很少,伴随着花粉外壁物质在小孢子表面的沉积,钙颗粒开始积累在... 详细信息

减数分裂前,莴苣花药中的钙颗粒很少。减数分裂后,花药绒毡层细胞中的钙颗粒明显增加, 同时在花药药室基质中也出现许多细小的钙颗粒。刚从四分体中释放出的小孢子内钙颗粒很少,伴随着花粉外壁物质在小孢子表面的沉积,钙颗粒开始积累在花粉壁部位。随后,小孢子中开始出现钙颗粒。当小孢子开始形成液泡后,钙颗粒向其中聚集,伴随着小液泡融合成大液泡,体积较大的钙颗粒主要集中在液泡中,而细胞质基质中的钙颗粒很少。随着二胞花粉中的大液泡消失,花粉细胞质中的钙颗粒变得很少。在以后的发育中,只有花粉壁中积累较多的钙颗粒。在莴苣花药发育过程中,钙与绒毡层细胞的退化和小孢子液泡形成以及二胞花粉中大波泡的消失有关。而花粉外壁表面积累丰富的钙与以后花粉的萌发有关。

关键词：莴苣花药花粉钙发育过程细胞质基质花粉外壁绒毡层细胞特征减数分裂

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细胞周期检控点

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细胞生物学杂志 2005年第5期27卷 479-483页

作者：蔡秋凤江瑞胜欧阳高亮鲍仕登厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

细胞周期是高度有组织的时序调控过程,受到DNA损伤检控点、DNA复制检控点和纺锤体检控点等细胞周期检控点的精确调控。细胞周期检控点的作用主要是调节细胞周期的时序转换,以确保DNA复制、染色体分离等细胞重要生命活动的高度精确性,并... 详细信息

细胞周期是高度有组织的时序调控过程,受到DNA损伤检控点、DNA复制检控点和纺锤体检控点等细胞周期检控点的精确调控。细胞周期检控点的作用主要是调节细胞周期的时序转换,以确保DNA复制、染色体分离等细胞重要生命活动的高度精确性,并对DNA损伤、DNA复制受阻、纺锤体组装和染色体分离异常等细胞损伤及时做出反应,以防止突变和遗传不稳定的发生。细胞周期检控点的功能缺陷,将导致细胞基因组的不稳定,与细胞癌变密切相关。因此细胞周期检控点对于维持细胞遗传信息的稳定性和完整性以及防止细胞癌变和遗传疾病的发生起着至关重要的作用。

关键词：细胞周期检控点时序调控细胞癌变遗传疾病纺锤体

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检控蛋白Rad17在小鼠睾丸精子发生过程中的表达及其磷酸化变化

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细胞生物学杂志 2005年第4期27卷 441-444页

作者：欧阳高亮江瑞胜毛宇彬鲍仕登厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

Rad17是细胞周期检控点信号转导过程中的一个关键检控蛋白,在DNA损伤检控和DNA复制检控中具有重要功能。但Rad17在细胞减数分裂中的检控作用还不是很清楚。因细胞减数分裂在睾丸组织中非常活跃,应用Western印迹检测Rad17在不同发育时期... 详细信息

Rad17是细胞周期检控点信号转导过程中的一个关键检控蛋白,在DNA损伤检控和DNA复制检控中具有重要功能。但Rad17在细胞减数分裂中的检控作用还不是很清楚。因细胞减数分裂在睾丸组织中非常活跃,应用Western印迹检测Rad17在不同发育时期的小鼠睾丸组织中的表达及其磷酸化水平,并应用免疫组化的方法检测小鼠睾丸组织不同时期生殖细胞内Rad17的表达变化。结果显示Rad17在小鼠睾丸组织内高表达,而在肝、肾等组织中表达水平较低;Rad17在不同周龄的小鼠睾丸组织中均高水平表达,但在4周龄以后的小鼠睾丸组织中其磷酸化水平明显升高;免疫组化结果显示Rad17在精原细胞、精母细胞的细胞核中高表达,但在成熟精子细胞中消失。这些结果提示Rad17在小鼠睾丸生殖细胞减数分裂过程中也起重要检控作用。

关键词：细胞周期检控点 Rad17 减数分裂睾丸小鼠小鼠睾丸磷酸化精子发生过程检控蛋白

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14-3-3蛋白家族的调控机制和生物学功能

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细胞生物学杂志 2005年第2期27卷 101-104页

作者：伍家发吴乔厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

14-3-3蛋白家族在真核细胞中广泛表达并高度保守,它们主要以同源/异源二聚体形式存在,可以同时与两个靶蛋白或一个靶蛋白的两个结构域相互作用。14-3-3蛋白通过磷酸化丝氨酸/苏氨酸介导和靶蛋白结合,从而发挥其调控功能。现对14-3-3蛋... 详细信息

14-3-3蛋白家族在真核细胞中广泛表达并高度保守,它们主要以同源/异源二聚体形式存在,可以同时与两个靶蛋白或一个靶蛋白的两个结构域相互作用。14-3-3蛋白通过磷酸化丝氨酸/苏氨酸介导和靶蛋白结合,从而发挥其调控功能。现对14-3-3蛋白的识别序列、与配体相互作用的特点,及其在细胞周期、凋亡、信号转导、线粒体/叶绿体前体蛋白跨膜转运中的调控机制和发挥的生物学功能进行综述。

关键词： 14-3-3蛋白生物学功能调控机制家族相互作用靶蛋白真核细胞调控功能识别序列细胞周期信号转导跨膜转运前体蛋白结构域苏氨酸丝氨酸磷酸化叶绿体线粒体表达体形凋亡

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