检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病毒学 2006年第3期21卷 207-212页

作者：王健伟王彦斌常昭瑞闫克夏谭文杰屈建国夏宁邵阮力洪涛中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100052 福建省医学分子病毒学研究中心厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

为了明确抗SARS-CoVN蛋白单克隆抗体的特异性,并鉴定其识别表位,首先在***中表达了人类冠状病毒229E(HCoV-229E)和OC43(HCoV-OC4)N蛋白,用Westernblotting和间接免疫荧光方法分别检测了4株抗SARS-CoVN蛋白单克隆抗体(1-1C2、1-1D6、2-8F11和2-2E5)与HCoV-OC43和HCoV-229E及其N蛋白的交叉反应情况,而后应用12种重组截短型SARS-CoVN蛋白对上述4种单克隆抗体的识别表位进行了初步定位。结果显示:(1)在4株抗N蛋白单克隆抗体中,1-1C2、1-1D6和2-2E5不与HCoV-OC43和HCoV-229E及其N蛋白发生交叉反应,为SARS-CoVN蛋白特异性抗体;(2)2-8F11、1-1D6和2-2E5针对的抗原表位位于SARS-CoVN蛋白的aa30-60,1-1C2针对的抗原表位则位于SARS-CoVN蛋白的aa170-184。这一研究为阐明SARS-CoVN蛋白的免疫学特征,建立特异性免疫诊断技术和研究其致病机制提供了必要的依据和材料。

关键词： SARS相关冠状病毒(SARS—CoV) 核衣壳蛋白单克隆抗体抗原表位

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利用ISSR技术对优质红锥种质资源遗传多样性的分析

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厦门大学学报（自然科学版） 2006年第B5期45卷 91-94页

作者：王蕾叶志云蒋燚王鸣刚陈亮厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005 广西林业科学研究院广西南宁530001

利用ISSR分子标记对10个优质红锥品种进行基因组多态性分析．从20条引物中筛选的11条具有扩增多态性的引物共扩增出435条带，其中多态性条带325条，占总扩增条带的74．7％，平均每个引物扩增3．95条．ISSR标记揭示的10个优质红锥品种的... 详细信息

利用ISSR分子标记对10个优质红锥品种进行基因组多态性分析．从20条引物中筛选的11条具有扩增多态性的引物共扩增出435条带，其中多态性条带325条，占总扩增条带的74．7％，平均每个引物扩增3．95条．ISSR标记揭示的10个优质红锥品种的遗传相似系数变化范围为0．4737～0．8081，平均值为0．7287．聚类分析可将10个优质红锥品种分为四类．

关键词：红锥 ISSR标记遗传多样性

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SARS-CoV N蛋白与人冠状病毒HCoV-OC43和HCoV-229E的交叉反应表位及特异表位的确定

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病毒学报 2006年第4期22卷 248-255页

作者：闫克夏谭文杰张相民王慧娟张陵林周为民夏宁邵阮力中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100052 福建省医学分子病毒学研究中心厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

为确定SARS-CoV N蛋白的特异抗原表位，对3种人冠状病毒SARS-CoV、HCoV-OC43和HCoV-229EN蛋白之间的交叉免疫反应进行了系统研究。构建了分别表达SARS-CoV、HCoV—OC43和HCoV-229EN蛋白的重组痘苗病毒，并制备了相应的小鼠免疫血清。用... 详细信息

为确定SARS-CoV N蛋白的特异抗原表位，对3种人冠状病毒SARS-CoV、HCoV-OC43和HCoV-229EN蛋白之间的交叉免疫反应进行了系统研究。构建了分别表达SARS-CoV、HCoV—OC43和HCoV-229EN蛋白的重组痘苗病毒，并制备了相应的小鼠免疫血清。用间接免疫荧光方法，检测了3种N蛋白的表达及其与3种冠状病毒免疫动物血清和SARS病人恢复期血清之间的反应。与此同时，用Western blot方法分析了原核表达的39个不同区段的SARS-CoVN蛋白与3种冠状病毒动物免疫血清和SARS病人恢复期血清之间的交叉反应性。免疫荧光检测结果表明，SARS-CoV、HCov-OC43和HCoV-229E3种病毒的N蛋白在重组痘苗病毒感染的HeLa细胞中均可以特异表达；3种N蛋白之间存在明显交叉免疫反应。Western blot结果显示，SARS-CoV N蛋白的表位主要位于30～60aa、170～184aa、301～320aa和360～422aa；与HCoV-OC43的交叉反应表位主要位于30～60aa、90～120aa、204～214aa和320～360aa；与HCoV-229E的交叉反应表位主要位于30～60aa、150～160aa和301～360aa。含SARS-CoVN蛋白特异表位的重组肽N155b（60～214aa）和N185（30～214aa）只与SARS病人恢复期血清和灭活SARS-CoV免疫小鼠的血清反应，而不与灭活HCoV-OC43和HCoV-229E免疫的山羊血清产生交叉反应。上述结果为使用SARS-CoVN蛋白抗原进行特异诊断试剂的研究，提供了重要的实验依据。

关键词： SARS-CoV HCoV-OCA3 HCoV-229E N蛋白抗原表位

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红树林耐盐相关基因转化水稻的研究

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西北植物学报 2006年第6期26卷 1105-1109页

作者：张文惠林涛张红心陈亮山仑西北农林科技大学生命科学学院陕西杨陵712100 厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

运用农杆菌介导法将红树林耐盐相关基因mangrin转入粳稻品种‘日本晴’中,通过GUS基因检测愈伤组织转化率,确定农杆菌菌液浓度OD600为0.5,浸染时间30 min,共培养时间3 d为最佳转化体系;经潮霉菌筛选,获得抗性再生植株.通过PCR扩增检测、... 详细信息

运用农杆菌介导法将红树林耐盐相关基因mangrin转入粳稻品种‘日本晴’中,通过GUS基因检测愈伤组织转化率,确定农杆菌菌液浓度OD600为0.5,浸染时间30 min,共培养时间3 d为最佳转化体系;经潮霉菌筛选,获得抗性再生植株.通过PCR扩增检测、Southern blot分析和GUS基因活性检测,结果表明,mangrin基因整合到再生水稻的染色体DNA上.耐盐性测定结果表明,转基因植株在200 mmol/L NaCl胁迫下,成活率保持在83.3%,株高增长20%～40%,mangrin基因能提高转基因水稻对盐胁迫的抗性.

关键词：红树林耐盐相关基因水稻转化

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一种新型H5N1禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂的建立

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病毒学报 2006年第6期22卷 445-449页

作者：葛胜祥徐飞海罗海峰陈毅歆郭永利陈自敏王嘉罗文新吴婷张军陈鸿霖管轶夏宁邵厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室汕头大学医学院汕港联合流感中心汕头515031

利用5株广谱特异性抗H5亚型血凝素单克隆抗体和酶联免疫渗滤技术成功地建立了一种适于现场检测H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白的抗原快速检测试剂H5-HA(Ag)Dot-ELISA。该试剂对41株代表当前亚洲地区流行的各种遗传变异亚系H5N1禽流感病毒... 详细信息

利用5株广谱特异性抗H5亚型血凝素单克隆抗体和酶联免疫渗滤技术成功地建立了一种适于现场检测H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白的抗原快速检测试剂H5-HA(Ag)Dot-ELISA。该试剂对41株代表当前亚洲地区流行的各种遗传变异亚系H5N1禽流感病毒检测均为阳性,对多数毒株的分析灵敏度优于0.1个血凝滴度(HA titer),其中部分优于0.01个血凝滴度;比较该试剂与早期开发的同类ELISA试剂,发现前者对后者未能检出的H5N1新变异株检测均为阳性;利用该试剂和商品化Directigen Flu A(BD)试剂检测两株H5N1病毒株,提示前者灵敏度高于后者;该试剂对一株H5N1病毒的检测灵敏度与标准RT-PCR相当;该试剂对24株非H5亚型病毒检测均为阴性,显示出良好特异性。以上结果提示,此研究建立的H5N1病毒抗原快速检测试剂在H5禽流感现场检测上具有较好的应用前景。

关键词：禽流感病毒 H5N1 抗原快速检测血凝素单克隆抗体

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不同养殖期的凡纳滨对虾外壳膜NAGase基本性质比较

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台湾海峡 2006年第3期25卷 348-352页

作者：朴顺金谢晓兰黄乾生谢进金陈清西厦门大学生命科学学院教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室福建厦门361005 福建泉州师范学院化学与生命科学学院福建泉州362000

以不同生长期的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannam ei)的外壳为材料,分离提取外壳膜N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.52,NAGase),测定分析不同生长期的外壳膜NAGase的酶比活力及其性质的变化.结果表明:不同生长期的酶活力、最适温度... 详细信息

以不同生长期的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannam ei)的外壳为材料,分离提取外壳膜N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.52,NAGase),测定分析不同生长期的外壳膜NAGase的酶比活力及其性质的变化.结果表明:不同生长期的酶活力、最适温度、催化反应的动力学参数(Km、vm)、活化能等均存在差异.不同生长期酶的最适pH均为5.5.不同生长期的对虾外壳膜NAGase对Cu2+、Zn2+和Hg2+的敏感性也不同.Cu2+对养殖8周对虾外壳膜NAGase的激活作用最为显著,可以使酶活力提高到400%.Zn2+对不同生长期的酶活力均有抑制作用,但对成体对虾酶抑制作用最为显著,可以使酶活力下降80%.Hg2+对各个生长期的酶活力影响效果也不一样,当浓度为0.1 mmol/dm3时,仅对养殖6、8、9周的对虾的酶有激活作用,当Hg2+浓度为1.0mmol/dm3时,五个生长期的虾皮NAGase活力均受到不同程度抑制.

关键词：海洋生物实验研究凡纳滨对虾 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶性质比较

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前列腺组织中AMACR表达的临床意义

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肿瘤 2006年第9期26卷 860-862页

作者：徐骏林建峰顾琪陈清西钱伟庆孙忠全宋建达华东医院泌尿科上海200040 厦门大学生命科学学院教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室厦门361005 华东医院上海老年医学研究所上海200040

目的:检测α-甲基酰基辅酶A消旋酶(-αmethylacyl-CoA racemase,AMACR)在前列腺组织中的表达,探索前列腺癌诊断的新方法。方法:前列腺针刺标本108例,用AMACR抗体作免疫组化染色。同时,随机抽取其中的24例病例,每个病例抽取1个针刺标本,... 详细信息

目的:检测α-甲基酰基辅酶A消旋酶(-αmethylacyl-CoA racemase,AMACR)在前列腺组织中的表达,探索前列腺癌诊断的新方法。方法:前列腺针刺标本108例,用AMACR抗体作免疫组化染色。同时,随机抽取其中的24例病例,每个病例抽取1个针刺标本,用Western blot方法检测AMACR在前列腺癌中的表达,与病理诊断相比较。结果:用免疫组化染色的方法检测AMACR在前列腺癌中的表达,与病理诊断结果相比较,在61例良性标本中,阴性59例,假阳性2例,符合率为96.7%。在44例腺癌中,阳性41例,漏诊3例,符合率为93.2%,总符合率为92.6%。前列腺小细胞癌1例,表达阳性,转移癌1例,表达阴性,高级别前列腺上皮内瘤(high grade prostatic intraepithelial neoplasia,HPIN)1例,表达为弱阳性。用West-ern blot方法检测,与病理诊断结果相比较,符合率为87.5%。在14例良性标本中,阴性14例,假阳性为0,符合率100%。10例癌症标本中,阳性7例,漏诊3例,符合率70%。用免疫组化法检测AMACR在前列腺癌中的表达,可以显示微小癌灶。结论:AMACR是前列腺癌诊断有用的新指标,具有广阔的应用前景。用AMACR结合Western blot,对于前列腺癌的诊断,有一定的临床意义,值得进一步研究。

关键词：前列腺肿瘤/诊断活组织检查,针吸免疫组织化学印迹法,蛋白质 α-甲基酰基辅酶A消旋酶

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产物及其类似物对锯缘青蟹NAGase酶活力的影响

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台湾海峡 2006年第2期25卷 229-233页

作者：杨学敏张继平谢进金颜雅雯陈清西厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门大学生命科学学院广东佛山科学技术学院生命科学学院广东佛山528231 泉州师范学院生物系福建泉州362000

以产物N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖(NAG)及其类似物-葡萄糖(glu)、半乳糖(gal)、果糖(fru)和蔗糖(suc)为效应物,研究它们对锯缘青蟹N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响及抑制作用机理.结果表明,上述效应物对酶均表现为可逆的抑... 详细信息

以产物N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖(NAG)及其类似物-葡萄糖(glu)、半乳糖(gal)、果糖(fru)和蔗糖(suc)为效应物,研究它们对锯缘青蟹N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响及抑制作用机理.结果表明,上述效应物对酶均表现为可逆的抑制作用.NAG有较强的抑制作用,其IC50为0.011 mol/dm3.但产物类似物对该酶的抑制作用均弱于***对该酶的抑制作用机理表现为反竞争性抑制,抑制常数KIS为4.37×10-3mol/dm3;glu、gal、suc则表现为非竞争性抑制,抑制常数KI分别为0.125、0.394、0.474 mol/dm3;而fru则表现为竞争性抑制,抑制常数KI为0.455mol/dm3.

关键词：海洋生物 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶实验研究锯缘青蟹产物及其类似物抑制机理

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外源植物激素对坛紫菜生长发育的影响及蛋白组学分析

外源植物激素对坛紫菜生长发育的影响及蛋白组学分析

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第十次中国生物物理学术大会

作者：左正宏江雨陈瑜芳王重刚陈奕欣厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室

＜正＞紫菜（Porphyra）不仅具有很高的营养价值,而且是良好的保健品以及重要的工业原料。坛紫菜（Porphyra haitanensis）是中国南方最主要的栽培品种,但目前普遍存在种质退化问题,对病害和不良环境的抵抗力下降。外源植物激素对高等...

＜正＞紫菜（Porphyra）不仅具有很高的营养价值,而且是良好的保健品以及重要的工业原料。坛紫菜（Porphyra haitanensis）是中国南方最主要的栽培品种,但目前普遍存在种质退化问题,对病害和不良环境的抵抗力下降。外源植物激素对高等植物生长发育的作用已有广泛而深入的研究,但在紫菜组织培养中的作用却少有报道。本文就外源植物激素对坛紫菜叶状体细胞生长发育过程中的作用进行了研究,并用蛋白质组学方法

关键词：

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利用高保真酶扩增特性调整基因读码框的方法

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生物技术通报 2006年第3期22卷 54-57页

作者：张国广陈亮吴亦亮曾雅明厦门大学生命科学学院细胞生物学和肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门361005

在基因工程研究中,经常要涉及到对目的基因读码框进行调整的研究。本文报道了利用高保真DNA聚合酶扩增DNA后产生平末端的特性,及限制性内切酶对一重组的原核表达载体pET28a-HA进行读码框调整的研究,测序结果显示读码框按照预期设计正确... 详细信息

在基因工程研究中,经常要涉及到对目的基因读码框进行调整的研究。本文报道了利用高保真DNA聚合酶扩增DNA后产生平末端的特性,及限制性内切酶对一重组的原核表达载体pET28a-HA进行读码框调整的研究,测序结果显示读码框按照预期设计正确调整,表明高保真DNA聚合酶可以用于DNA 3'凹陷端的补平,在DNA 3'凹陷端平滑化时多了一个有效的选择。

关键词：高保真DNA聚合酶 DNA粘端补平基因读码框调整

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