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大豆科学 2016年第6期35卷 1002-1007页

作者：董立明李葱葱邢珍娟邵改革夏蔚闫伟李飞武吉林省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所吉林长春130033

转基因大豆305423、MON89788、CV127、GTS40-3-2、356043作为商品化应用最为广泛的大豆品系,种植面积占世界转基因大豆总种植面积的80%以上。根据大豆内标准基因Lectin和5种转基因大豆品系的边界序列设计特异性引物。通过验证引物的适... 详细信息

转基因大豆305423、MON89788、CV127、GTS40-3-2、356043作为商品化应用最为广泛的大豆品系,种植面积占世界转基因大豆总种植面积的80%以上。根据大豆内标准基因Lectin和5种转基因大豆品系的边界序列设计特异性引物。通过验证引物的适用性、特异性和灵敏度,优化多重PCR检测体系中不同引物的用量及反应退火温度,建立了能同时扩增大豆内源基因Lectin和5个转基因大豆品系的六重PCR检测体系。结果表明:确定的大豆内源基因和5个转基因大豆品系的引物具有很好的特异性,引物之间无交叉扩增和非特异性扩增,多重PCR方法的检测灵敏度达到0.1%。该方法可作为转基因大豆及其产品成分检测的辅助手段,快速检测转基因大豆及其产品中的相应品系。

关键词：转基因大豆多重PCR 品系特异性检测

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应用单管巢式和半巢式PCR检测转基因玉米MON89034

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玉米科学 2016年第4期24卷 56-60页

作者：闫伟李葱葱夏蔚邵改革李飞武吉林省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所长春130033

根据MON89034玉米的5’端和3’端边界序列分别设计1组转化体特异性的巢式PCR引物,采用中途进退式PCR策略建立MON89034玉米的转化体特异性检测方法,扩增产物分别为491 bp和188 bp。以转基因玉米MON89034及8种其他转基因作物为材料,证明... 详细信息

根据MON89034玉米的5’端和3’端边界序列分别设计1组转化体特异性的巢式PCR引物,采用中途进退式PCR策略建立MON89034玉米的转化体特异性检测方法,扩增产物分别为491 bp和188 bp。以转基因玉米MON89034及8种其他转基因作物为材料,证明此方法对MON89034玉米具有高度特异性。灵敏度测试结果表明,此方法的相对检出限达到0.01%,绝对检出限为4个单倍体基因组拷贝数,比普通PCR提高了5倍。建立的单管巢式和半巢式PCR方法可准确、高效地检测转基因玉米MON89034及其产品。

关键词：转基因玉米巢式PCR 中途进退式PCR 转化体特异性检测

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大豆转化体E8A7027外源T-DNA分析及特异性检测体系建立

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大豆科学 2023年第5期42卷 579-585页

作者：闫伟马月谢彦博董立明龙丽坤李葱葱张玲李飞武吉林省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所吉林长春130033

为进一步分析转AgGlpF基因耐盐转基因大豆E8A7027转化体的分子特征信息并对其进行特异性检测,本研究分离该转化体的旁侧序列并建立其特异性PCR检测体系。基于基因组重测序技术并结合Sanger测序技术,将基因组重测序分析获得的序列信息与... 详细信息

为进一步分析转AgGlpF基因耐盐转基因大豆E8A7027转化体的分子特征信息并对其进行特异性检测,本研究分离该转化体的旁侧序列并建立其特异性PCR检测体系。基于基因组重测序技术并结合Sanger测序技术,将基因组重测序分析获得的序列信息与参考大豆基因组进行对比,确定E8A7027转化体的T-DNA区在大豆基因组上的插入位点及其5′端和3′端的旁侧序列。根据旁侧序列设计PCR检测引物,并对检测体系的特异性、灵敏度进行实验室内验证。结果显示:转基因大豆E8A7027的整合位点为Chr09染色体的33886331位点,整合方式为单拷贝插入,受体基因组DNA在插入位点缺失了1段58 bp序列,分别获得E8A7027大豆的5′端旁侧序列910 bp和3′端旁侧序列802 bp。根据这两个旁侧序列设计引物建立的PCR检测方法,能够特异性地将E8A7027大豆转化体与其他转基因作物和非转基因大豆区分开,方法的检测灵敏度为0.05%。研究结果可为E8A7027转化体的安全评价和监管检测提供技术支撑。

关键词：转基因大豆高通量测序旁侧序列微滴式数字PCR 转化体特异性检测

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UPLC-MS-MS法测定花生中黄曲霉毒素的不确定度评定

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食品研究与开发 2018年第7期39卷 154-159页

作者：孟繁磊李刚蔡玉红张振都何智勇蔡红梅宋志峰吉林省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所吉林长春130033

对应用超高液相色谱串联质谱法测定花生中4种黄曲霉毒素含量的测量不确定度进行评定。根据JJF 1135-2005《化学分析测量不确定度评定》和JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》中的有关规定和基本程序,建立测定花生中4种黄曲霉毒... 详细信息

对应用超高液相色谱串联质谱法测定花生中4种黄曲霉毒素含量的测量不确定度进行评定。根据JJF 1135-2005《化学分析测量不确定度评定》和JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》中的有关规定和基本程序,建立测定花生中4种黄曲霉毒素含量的数学模型,依据影响测量不确定度的来源,对各个不确定度分量进行评定和分析,给出了1μg/kg的检测水平下,超高液相色谱串联质谱法测定花生中4种黄曲霉毒素测定结果的扩展不确定度。通过比较各个分量不确定度,发现实验过程中最小二乘法拟合带来的不确定度影响最大。

关键词：超高液相色谱串联质谱花生黄曲霉毒素不确定度评定

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香芹酮对马铃薯种薯发芽的调控机制

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中国农业科学 2020年第23期53卷 4929-4939页

作者：葛霞徐瑞李梅田甲春李守强程建新田世龙甘肃省农业科学院农产品贮藏加工研究所甘肃省农业科学院畜草与绿色农业研究所甘肃省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所

【目的】香芹酮是植物精油中常见的单萜类物质。从激素调控和膜脂过氧化方面探讨香芹酮对马铃薯种薯发芽调控的作用机制,为其在种薯上的实际应用提供理论依据。【方法】以‘青薯9号’微型薯为试验材料,采用香芹酮0.3 mL·kg-1(药剂... 详细信息

【目的】香芹酮是植物精油中常见的单萜类物质。从激素调控和膜脂过氧化方面探讨香芹酮对马铃薯种薯发芽调控的作用机制,为其在种薯上的实际应用提供理论依据。【方法】以‘青薯9号’微型薯为试验材料,采用香芹酮0.3 mL·kg-1(药剂体积/块茎重量)的处理剂量,贮藏18周后进行停药6周的处理方式,同时以不做任何处理为对照,分别在贮藏0、6、18、20和24周,测定种薯芽长、失重率、脱落酸(ABA)、吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA3)、丙二醛(MDA)和脯氨酸(PRO)的含量,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)的活性,并定期对种薯芽分生组织进行切片和显微成像分析。【结果】香芹酮可调控种薯的发芽和芽长,降低种薯的失重率,贮藏24周时,处理种薯芽长为4.77 mm,显著低于对照芽长51.02 mm,且失重率比对照降低49.76%。香芹酮通过损伤种薯顶芽分生组织和维管束组织抑制顶芽的生长,但不影响腋芽的萌出。贮藏期间,香芹酮显著提高了种薯中ABA的含量,但抑制了IAA的含量,推迟了GA3含量的峰值和(GA3+IAA)/ABA>1拐点的出现;香芹酮处理的种薯MDA含量比对照降低了15.04%—25.90%,PRO含量比对照高24.59%—54.45%,SOD、CAT和PPO活性分别比对照高18.86%—35.56%、14.34%—31.97%和26.00%—36.41%,POD的活性是对照的1.87—3.07倍。【结论】香芹酮通过促进/抑制甲羟戊酸途径中3-羟基-3-甲基戊二酰基辅酶A还原酶(HMG-CoA还原酶)来调节种薯中内源激素ABA、IAA和GA3的含量水平,抑制种薯顶芽生长。此外,香芹酮提高了种薯中的抗氧化酶活性,降低了膜脂过氧化程度,进而延缓种薯衰老。

关键词：香芹酮种薯发芽调控机制内源激素抗氧化酶组织切片

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ICP-AES检测云南稻核心种质矿质元素含量的地带性特征

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光谱学与光谱分析 2009年第6期29卷 1691-1695页

作者：曾亚文汪禄祥普晓英杜娟杨树明刘家富邰丽梅云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所云南昆明650205 云南农业大学云南昆明650201 云南省农业科学院质量标准与检测技术研究所云南昆明650223

采用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)测定了云南省5个稻作区16个州市的789份地方水稻糙米中的八种矿质元素,该方法简单快速、灵敏度高、准确性好和多元素同时测定,加标回收率为97.1%～110.2%,RSD为0.7%～4.4%。结果表明:糙米... 详细信息

采用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)测定了云南省5个稻作区16个州市的789份地方水稻糙米中的八种矿质元素,该方法简单快速、灵敏度高、准确性好和多元素同时测定,加标回收率为97.1%～110.2%,RSD为0.7%～4.4%。结果表明:糙米元素含量(***-1)依次为P(3834.83±486.49)>K(2567.72±336.74)>Mg(2567.72±336.74)>Ca(153.67±55.90)>Zn(33.35±13.65)>Fe(32.08±25.51)>Cu(14.22±11.85)>Mn(13.58±3.22);世界生物多样性最丰富及有色金属富集的滇西北糙米P含量高,早寒武纪动物群及磷矿富集的滇中糙米Ca,Mg,Fe和Zn含量高,作物多样性突出的滇西南糙米Cu和Mn含量高;糙米高磷钾、中钙镁锰和低铁锌分布区是世界生物多样性最丰富及矿产资源富集区。首次提出云南糙米矿质元素含量的地带性特征与生物多样性中心、矿产资源富集区、生命起源及其山脉、河流有关;进一步推断地球矿质元素分布不均匀性及其山脉、河流的相互作用是生命起源的关键。文章研究为解决人类Fe,Zn和Ca等矿质营养不良和生命起源问题以及功能稻米育种生产提供参考。

关键词：电感耦合等离子体原子发射光谱法糙米矿质元素地带性特征核心种质云南地方水稻

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火龙果中螺螨酯残留检测及膳食摄入风险评估

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果树学报 2021年第1期38卷 90-98页

作者：吴绪金马婧玮汪红安莉乔成奎马莹谢汉忠河南省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所郑州450002 中国农业科学院郑州果树研究所郑州450009

【目的】建立螺螨酯在火龙果全果和果肉中的残留检测方法,并对火龙果果肉中的残留量进行膳食摄入评估。【方法】样品中螺螨酯加乙腈提取,N-丙基乙二胺和石墨化碳黑净化,离心,上清液过滤膜后超高效液相色谱三重四极杆串联质谱检测,外标... 详细信息

【目的】建立螺螨酯在火龙果全果和果肉中的残留检测方法,并对火龙果果肉中的残留量进行膳食摄入评估。【方法】样品中螺螨酯加乙腈提取,N-丙基乙二胺和石墨化碳黑净化,离心,上清液过滤膜后超高效液相色谱三重四极杆串联质谱检测,外标法定量。【结果】火龙果全果和果肉中螺螨酯平均回收率分别为87%~105%和81%~90%,相对标准偏差分别为4.6%~13%和6.6%~8.1%。火龙果全果和果肉中螺螨酯的最低检测浓度(w,后同)均为0.01 mg·kg^-1。【结论】按本试验设计进行施药,不同采收间隔期火龙果全果和果肉中螺螨酯的残留量分别为<0.71 mg·kg^-1和<0.14 mg·kg^-1。螺螨酯的普通人群国家估计每日摄入量是0.003 1 mg,占日允许摄入量的0.5%左右,认为对一般人群健康不会产生不可接受的风险。

关键词：火龙果螺螨酯残留检测膳食摄入评估

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减氮增密提高寒地水稻产量与氮素吸收利用

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农业资源与环境学报 2022年第6期39卷 1124-1132页

作者：尹彩侠刘志全孔丽丽李前张磊侯云鹏郝彩环吉林省农业科学院农业资源与环境研究所/农业农村部东北植物营养与农业环境重点实验室长春130033 吉林省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所长春130033

针对水稻氮肥过量施用和移栽密度过低的问题,研究减氮增密对水稻产量与氮素利用效率的影响,以期为东北寒区水稻生产提供科学依据。于2019—2020年在吉林省前郭县红光农场进行田间试验,共设4个处理,分别为不施氮肥+移栽密度1.80×10^... 详细信息

针对水稻氮肥过量施用和移栽密度过低的问题,研究减氮增密对水稻产量与氮素利用效率的影响,以期为东北寒区水稻生产提供科学依据。于2019—2020年在吉林省前郭县红光农场进行田间试验,共设4个处理,分别为不施氮肥+移栽密度1.80×10^(5)穴·hm^(-2)(N0)、传统施氮(氮肥用量235 kg·hm^(-2))+移栽密度1.80×10^(5)穴·hm^(-2)(FP)、较传统施氮减量20%(氮肥用量188 kg·hm^(-2))+移栽密度2.40×10^(5)穴·hm-(2)(SNHD1)、较传统施氮减量20%(氮肥用量188 kg·hm^(-2))+移栽密度3.00×10^(5)穴·hm^(-2)(SNHD2)。对水稻产量、地上部干物质积累与分配、氮素积累与分配以及氮素利用效率进行测定分析。结果表明:SNHD1和SNHD2处理相较于FP处理显著增加了水稻有效穗数,提高了水稻产量,其中SNHD1处理水稻产量增幅达显著水平,两年平均增幅为7.8%。减氮增密提高了水稻各生育时期干物质积累量和氮素积累量,以及水稻齐穗后干物质积累量与氮素积累量占总生育期积累量的比例,且均为SNHD1处理最高。SNHD1和SNHD2处理较FP处理显著提高了氮素吸收率、氮肥农学利用率、氮肥偏生产力和氮肥吸收利用率,且均为SNHD1处理最高,较FP处理两年平均分别提高0.3、6.2、14.4 kg·kg^(-1)和16.4个百分点。氮素表观平衡结果显示,FP、SNHD1和SNHD2处理两年平均表现为盈余,其中SNHD1处理氮盈余量最低。水稻齐穗前、后的干物质积累量和氮素积累量与水稻产量均呈显著正相关,其中水稻齐穗后干物质积累量和氮积累量的相关性高于齐穗前。综上所述,合理的氮肥用量与移栽密度提高了水稻整个生育期干物质积累量和氮素积累量,并提高齐穗后积累比例,进而提高水稻产量和氮素利用效率,综合水稻产量、氮素吸收利用等因素,东北寒地稻区适宜的水稻栽培模式为氮肥用量188 kg·hm^(-2)、移栽密度2.40×10^(5)穴·hm^(-2)。

关键词：水稻移栽密度产量氮素吸收氮素利用

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高效液相色谱分离牛奶中己烯雌酚、己烷雌酚和双烯雌酚

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分析化学 2008年第2期36卷 245-248页

作者：刘宏程邹艳红黎其万佴注农业部农产品质量监督检验测试中心云南省农业科学院质量标准与检测技术研究所农业部农产品质量监督检验测试中心云南省农业科学院质量标准与检测技术研究所昆明650223

采用基质固相分散技术,对牛奶中己烯雌酚(DES)、己烷雌酚(HEX)和双烯雌酚(DS)残留进行提取和净化处理,并通过高效液相色谱进行分离。研究雌激素在C18,Florisil和N-丙基乙二胺(PSA)填料的保留行为,并研究不同流动相和色谱柱对3种雌激素... 详细信息

采用基质固相分散技术,对牛奶中己烯雌酚(DES)、己烷雌酚(HEX)和双烯雌酚(DS)残留进行提取和净化处理,并通过高效液相色谱进行分离。研究雌激素在C18,Florisil和N-丙基乙二胺(PSA)填料的保留行为,并研究不同流动相和色谱柱对3种雌激素的分离。实验结果表明,流动相为20 mmol/L磷酸/乙腈(42/58,V/V),流速1.0 mL/min,紫外波长230 nm。Xterra C18柱对3种雌激素分离最好。3种雌激素的平均回收率为84.1%~93.5%,相对标准偏差为3.5%~7.8%。DES、HEX和DS的检出限(LOD)分别为0.004,0.004和0.006 mg/kg,定量限(LOQ)分别为0.01、0.01和0.02 mg/kg;本方法可对样品进行灵敏、准确的定性定量分析。

关键词：牛奶雌激素己烯雌酚己烷雌酚双烯雌酚高效液相色谱

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高效液相色谱法测定黑枸杞中花青素的不确定度评定

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河南农业科学 2019年第6期48卷 152-160页

作者：曹秀余明霞冯慧慧杨亚琴刘秀娟韦丹青钟红舰河南省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所

对高效液相色谱法测定黑枸杞中花青素进行不确定度影响因素的分析,为提高花青素检测的准确性提供依据。构建黑枸杞中花青素的不确定度评定数学模型,逐层对不确定度来源进行分析和评定,并对各不确定度分量加以量化和合成。结果表明,测量... 详细信息

对高效液相色谱法测定黑枸杞中花青素进行不确定度影响因素的分析,为提高花青素检测的准确性提供依据。构建黑枸杞中花青素的不确定度评定数学模型,逐层对不确定度来源进行分析和评定,并对各不确定度分量加以量化和合成。结果表明,测量过程随机效应、标准物质纯度、标准曲线拟合和标准系列工作液的配制所引入的不确定度比较大。分别用标准不确定度和扩展不确定度表示黑枸杞中花青素含量,当黑枸杞中花青素含量介于21.40~2745.00mg/kg时,其标准不确定度介于0.87~163.76mg/kg,扩展不确定度介于1.75~327.52mg/kg(k=2)。

关键词：高效液相色谱法花青素黑枸杞数学模型不确定度

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