检索结果-内蒙古大学图书馆

肿瘤防治研究 2012年第1期39卷 32-35页

作者：刘磊玉赵彬佳惠秦玮陈媛媛林锋邹海峰于晓光哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨150081

目的探讨过表达细胞程序性死亡基因5(PDCD5)对顺铂诱导人前列腺癌DU145细胞凋亡以及细胞凋亡相关蛋白表达的影响。方法 CCK-8法检测顺铂处理DU145细胞后对细胞生长增殖的影响;构建稳定过表达PDCD5的DU145细胞系;Annexin V-FITC﹠PI双染... 详细信息

目的探讨过表达细胞程序性死亡基因5(PDCD5)对顺铂诱导人前列腺癌DU145细胞凋亡以及细胞凋亡相关蛋白表达的影响。方法 CCK-8法检测顺铂处理DU145细胞后对细胞生长增殖的影响;构建稳定过表达PDCD5的DU145细胞系;Annexin V-FITC﹠PI双染法检测细胞的凋亡率、电子显微镜观察细胞凋亡的形态学变化;Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白的表达。结果顺铂对DU145细胞的生长有抑制作用,且呈时间-剂量依赖性;成功构建稳定过表达PDCD5的DU145细胞;流式细胞术和电子显微镜都显示PDCD5联合顺铂(25μmol/L)促进细胞的凋亡作用比联合顺铂(10μmol/L)和单独使用顺铂明显,Western blot结果显示,顺铂联合PDCD5能明显降低Bcl-2的表达,而Bax的表达变化不明显。结论单独PDCD5过表达不引起DU145细胞的凋亡,但PDCD5能显著增强顺铂诱导DU145细胞凋亡的作用,其机制之一是通过降低Bcl-2/Bax的表达比率实现的。

关键词：顺铂细胞程序性死亡基因5 前列腺癌细胞凋亡

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大肠杆菌L型对小鼠致病性的研究

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白求恩医科大学学报 1991年第6期17卷 564-565页

作者：侯芳玉洪宗霞何述祥李才赵志涛白求恩医科大学基础医学院微生物教研室白求恩医科大学应用基础医学研究所病理研究室

本文应用人工诱导的大肠杆菌L型经血行和膀胱感染小鼠,通过细菌学和病理学检查发现,大肠杆菌L型直接感染可引起小鼠多个脏器的间质性炎症,并观察到注射免疫抑制剂的小鼠较正常小鼠发病率高、病变重;血行感染较膀胱感染发病率高。

关键词：大肠杆菌L型致病性小鼠

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人乳头瘤病毒16型E2蛋白表达、纯化及抗血清制备

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细胞与分子免疫学杂志 2013年第9期29卷 940-944页

作者：孙宇辉张沿君刘明明唐丽萍张光虹魏兰兰谷鸿喜商庆龙哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第一医学院妇科黑龙江哈尔滨150040 哈尔滨医科大学附属肿瘤医院妇科黑龙江哈尔滨150086

目的表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)E2蛋白,并制备小鼠抗HPV16 E2血清。方法采用PCR技术扩增HPV16E2基因,构建入pET21b载体,重组表达载体pET21b-HPV16E2经鉴定后转化大肠埃希菌BL21(DE3),诱导表达并鉴定表达产物。经纯化、变性和复性方法... 详细信息

目的表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)E2蛋白,并制备小鼠抗HPV16 E2血清。方法采用PCR技术扩增HPV16E2基因,构建入pET21b载体,重组表达载体pET21b-HPV16E2经鉴定后转化大肠埃希菌BL21(DE3),诱导表达并鉴定表达产物。经纯化、变性和复性方法,制备可溶性HPV16 E2蛋白。免疫BALB/c小鼠制备抗血清,检测小鼠IFN-γ、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、CD4/CD8比值和抗血清滴度变化。结果酶切和测序结果表明pET21b-HPV16 E2构建成功。表达蛋白相对分子质量(M_r)为42 000,Western blot法证明具有较高特异性。小鼠抗血清效价升高,CD4^+T细胞数量和CD4/CD8比值升高,小鼠IFN-γ无升高。结论成功制备可溶性HPV16 E2蛋白和小鼠抗HPV16 E2高效价的抗血清。

关键词：人乳头瘤病毒16型 E2蛋白表达抗血清

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柱层析法纯化人用地鼠肾细胞狂犬病毒灭活疫苗的研究

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中国人兽共患病杂志 2000年第5期16卷 55-58页

作者：郑庆纹李书津徐永革吴强卓金荣赵宇毕伟民姚刚姚彩霞毛秀珍贾文祥成都卫生部成都生物制品研究所 610063 华西医科大学基础医学院微生物教研室

目的改进和提高现行人用地鼠肾细胞狂犬病灭活疫苗的纯度和保护效价。方法　将原代地鼠肾细胞 (PHKC)培养并收获的aG株狂犬病毒原液超滤浓缩 40～ 5 0倍 ,再经Sepharose 6FastFlow分子筛柱层析 ,收集完整的病毒颗粒 ,除菌、灭活、添加Al... 详细信息

目的改进和提高现行人用地鼠肾细胞狂犬病灭活疫苗的纯度和保护效价。方法　将原代地鼠肾细胞 (PHKC)培养并收获的aG株狂犬病毒原液超滤浓缩 40～ 5 0倍 ,再经Sepharose 6FastFlow分子筛柱层析 ,收集完整的病毒颗粒 ,除菌、灭活、添加Al (OH) 3 佐剂制成纯化地鼠肾细胞狂犬病毒疫苗。结果　浓缩狂犬病毒经过柱层析纯化 ,抗原比活性较纯化前平均提高 2 9 5 4倍 ,纯化效果平均达到 96 1% ,疫苗效力平均达到 2 98IU/ml,其余检测结果均符合现行有关规程。结论　凝胶分子筛柱层析技术。

关键词：狂犬病毒柱层析纯化疫苗

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脂筏介导的病毒内吞

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生命的化学 2007年第2期27卷 161-163页

作者：隋文黄敏孙长凯大连医科大学基础医学院微生物教研室/大连医科大学脑疾病研究所大连116027

近几年的研究表明,病毒内吞进入细胞的途径是多样化的。除了经典的网格蛋白介导的病毒内吞,还有小窝(caveolae)或脂筏(lipid raft)介导的病毒内吞。在研究过程中还发现了新的细胞器小窝体(caveosome)。小窝体甚至还与网格蛋白介导的内... 详细信息

近几年的研究表明,病毒内吞进入细胞的途径是多样化的。除了经典的网格蛋白介导的病毒内吞,还有小窝(caveolae)或脂筏(lipid raft)介导的病毒内吞。在研究过程中还发现了新的细胞器小窝体(caveosome)。小窝体甚至还与网格蛋白介导的内吞相关的细胞器(如内体)存在着联系。这些研究加深了我们对病毒的认识,为我们发现新的抗病毒药物打下基础。同时病毒可以作为一个有用的工具来研究细胞内吞的路径和与之相关的细胞器,使人类更加了解细胞本身的奥秘。

关键词：脂筏小窝体病毒

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真核细胞翻译延长因子在病毒性疾病中的作用

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国际病毒学杂志 2020年第5期27卷 433-436页

作者：刘欣宇钟照华哈尔滨医科大学基础医学院微生物教研室 150081

真核细胞翻译延长因子(eukaryotic elongation factor 1A,eEF1A)是真核生物体内参与蛋白质合成的重要分子,它通过与转运RNA(transfer ribonucleic acid,tRNA)结合发挥主要生物学功能。但越来越多的研究发现,eEF1A在多种病毒的转录与翻... 详细信息

真核细胞翻译延长因子(eukaryotic elongation factor 1A,eEF1A)是真核生物体内参与蛋白质合成的重要分子,它通过与转运RNA(transfer ribonucleic acid,tRNA)结合发挥主要生物学功能。但越来越多的研究发现,eEF1A在多种病毒的转录与翻译过程中也能发挥重要作用,说明eEF1A与病毒感染有着密切的联系。eEF1A一方面参与了病毒的复制过程,另一方面以分子伴侣的形式调控病毒性疾病的病理进程。本文对eEF1A在病毒性疾病发生发展过程中发挥的作用与机制进行综述。

关键词： eEF1A RNA病毒病毒复制病毒性疾病肿瘤

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呼吸道合胞病毒感染时间对花粉诱导的过敏性反应的影响

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中国医科大学学报 2008年第3期37卷 314-316页

作者：刘北星吕昌龙阎建忠那立新木村吉延中国医科大学基础医学院免疫学教研室沈阳110001 福井大学医学部微生物学教研室日本

目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染时间对花粉诱导的呼吸道过敏性反应是否有影响作用。方法用花粉抽提物JCP致敏BALB/c鼠,致敏前或后经鼻感染RSV,提取肺组织细胞,体外培养,ELISA试剂盒检测培养上清中细胞因子水平;姬姆萨染色法分类并计... 详细信息

目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染时间对花粉诱导的呼吸道过敏性反应是否有影响作用。方法用花粉抽提物JCP致敏BALB/c鼠,致敏前或后经鼻感染RSV,提取肺组织细胞,体外培养,ELISA试剂盒检测培养上清中细胞因子水平;姬姆萨染色法分类并计数肺组织内浸润细胞数量;ELISA方法检测血清特异性抗体IgE水平。结果JCP致敏鼠肺组织细胞培养上清中Th2型细胞因子IL-4明显升高,血清JCP特异性IgE抗体水平亦显著上升,提示JCP是Th2型免疫应答的诱导剂。致敏前RSV感染诱导BALB/c鼠肺组织细胞合成分泌Th1型细胞因子,下调JCP诱导的Th2型免疫应答,降低致敏鼠肺组织炎性细胞的浸润,减少前炎性因子TNF-α及趋化因子IL-8的分泌,降低血清JCP特异性IgE抗体水平。结论在某种条件下,RSV感染对花粉过敏原诱导的过敏性反应有一定的保护作用。

关键词：呼吸道合胞病毒花粉抽提物 Th1/Th2型细胞因子

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三类整合酶基因(intⅠ)的简并引物PCR方法建立及应用

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中华微生物学和免疫学杂志 2005年第2期25卷 156-160页

作者：李心晖石磊杨维青曹以诚张宏梅尹晓琳郑美萍华南理工大学食品与生物工程学院广州510640 河北医科大学基础医学院微生物和免疫教研室

目的　建立一种筛选第一、二和三类整合酶基因 (intⅠ )的简并引物PCR方法 ,并对临床菌株进行整合子筛选和分类。方法　用梯度PCR方法确定PCR反应的最适退火温度 ,并对 1 6株临床标本进行PCR扩增 ,通过对阳性PCR扩增产物的限制性内切酶... 详细信息

目的　建立一种筛选第一、二和三类整合酶基因 (intⅠ )的简并引物PCR方法 ,并对临床菌株进行整合子筛选和分类。方法　用梯度PCR方法确定PCR反应的最适退火温度 ,并对 1 6株临床标本进行PCR扩增 ,通过对阳性PCR扩增产物的限制性内切酶分析进行整合子分类。结果　根据梯度PCR结果确定最适退火温度为 4 6℃。应用简并引物PCR法检测 1 6株临床分离株 ,其中 8株阳性 ,经酶切分类后确定其中 4株只含有第一类整合酶基因 ,有 3株含有第二类整合酶基因 ,1株同时含有第一类和第二类整合酶基因。结论　建立了一种同时筛选第一、二和三类整合子的方法 ,实际检测显示其可行性 ,为全面细致研究整合子介导的细菌耐药提供了一种快速、简便的方法。

关键词：简并引物PCR 酶基因方法建立限制性内切酶分析 PCR扩增产物 PCR方法 PCR法检测退火温度 PCR反应梯度PCR 临床分离株整合子临床菌株临床标本细菌耐药筛选阳性

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不同种属钩端螺旋体疏水外膜蛋白的特征研究

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中华微生物学和免疫学杂志 1998年第3期18卷 189-193页

作者：张燕华许玉堂曹勇戴保民华西医科大学基础医学院钩端螺旋体病研究室成都中医药大学微生物与免疫学教研室

目的研究钩端螺旋体外膜蛋白（Ｏｕｔｅｒｍｅｍｂｒａｎｅｐｒｏｔｅｉｎ，ＯＭＰ）的结构和抗原特征，对不同种属钩端螺旋体疏水外膜蛋白进行了比较研究。方法用ＴｒｉｔｏｎＸ－１１４（ＴＸ－１１４）抽提１０株不同种属钩体疏水外... 详细信息

目的研究钩端螺旋体外膜蛋白（Ｏｕｔｅｒｍｅｍｂｒａｎｅｐｒｏｔｅｉｎ，ＯＭＰ）的结构和抗原特征，对不同种属钩端螺旋体疏水外膜蛋白进行了比较研究。方法用ＴｒｉｔｏｎＸ－１１４（ＴＸ－１１４）抽提１０株不同种属钩体疏水外膜蛋白，用不连续缓冲系统制备５％浓缩胶和１２％的分离胶，行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳，在恒压下１８０Ｖ电泳５小时，考马斯亮兰Ｇ－２５０染色。用抗０１７外膜血清、０１７ＭｃＡｂ行免疫印迹分析，对其疏水外膜蛋白的免疫特征进行比较和分析。结果不同种属钩体疏水ＯＭＰ，均出现４－７条主要蛋白区带，并存在较大差别。致病性问号状钩体与非致病的双曲钩体及细丝体几乎无相同的蛋白主带，而分子量为３９０００的蛋白主带为问号状钩体各株共有，且各株此区带与问号状钩体０１７株特异性抗体出现强弱不等的免疫反应；不同群型０１７株和ＨｏｎｄＵｔｒｅｃｈｔⅣ株带型相似程度较大，而同型不同株０１７株（高毒）和６０１株（低毒）两株有相似主带，也有各自不同的主带。结论不同种属钩体疏水ＯＭＰ结构有较大差异，同种、同群、同型间相似性较大，但也有明显变异。分子量为３９０００疏水ＯＭＰ（ＯｍｐＬ３９）是问号状钩体共有的蛋白抗原，在筛选钩体毒力基因、保?

关键词：钩端螺旋体膜蛋白抗原性

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白纹伊蚊rAlb-34k2蛋白诱导小鼠皮肤补体固有成分及CRIg的变化

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中国病原生物学杂志 2020年第5期15卷 551-555,579页

作者：金芮田炎珅朱亚妮代薇露卢涛徐昊朱俐兰朱家洪吴家红商正玲贵州医科大学基础医学院免疫学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室贵州医科大学现代病原生物学特色重点实验室贵州医科大学微生物与生化药学工程中心

目的探讨白纹伊蚊唾液特异性34k2重组蛋白(rAlb-34k2)刺激(小鼠腹腔巨噬细胞)RAW264.7及C57BL/6小鼠后补体相关成分mRNA的变化。方法分别用不同浓度rAlb-34k2蛋白刺激RAW264.7细胞和C57BL/6小鼠足垫,采集样本,Trizol提取RNA,逆转录为cDN... 详细信息

目的探讨白纹伊蚊唾液特异性34k2重组蛋白(rAlb-34k2)刺激(小鼠腹腔巨噬细胞)RAW264.7及C57BL/6小鼠后补体相关成分mRNA的变化。方法分别用不同浓度rAlb-34k2蛋白刺激RAW264.7细胞和C57BL/6小鼠足垫,采集样本,Trizol提取RNA,逆转录为cDNA后经实时荧光定量PCR方法检测刺激后不同时间各组标本中补体C3、C1q、CfB、CRIg的mRNA变化。结果rAlb-34k2诱导CfB、C3、C1q的mRNA表达上调,且皮肤组织上调幅度高于RAW264.7细胞,其中以CfB mRNA的上调幅度及持续更为显著,在诱导24h时各组(5μg、20μg)2-△△CT值分别是23.90±8.38、8.50±1.64(P<0.05);但刺激12-24h时高剂量组与低剂量组比较上调幅度差异无统计学意义(P>0.05)。在RAW264.7细胞,以刺激6h各种补体固有分成CfB、C3、C1q表达上调,但随时间延长均恢复至正常水平,各剂量组间差异不明显。在局部皮肤组织,rAlb-34k2刺激24h后CRIg表达上调,且呈浓度和时间依赖趋势;48h时,各组rAlb-34k2(5μg、20μg)2-△△CT值达到高峰,分别为8.67±2.44和32.98±9.74,有统计学差异(P<0.05)。在Raw264.7细胞,刺激6h时CRIg有上调表达趋势,但随时间延长而下调,各剂量组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论白纹伊蚊唾液rAlb-34k2蛋白参与调控巨噬细胞及皮肤补体重要成分的表达变化,在组织中尤为显著,且显著上调定居组织的巨噬细胞特异性膜受体CRIg。

关键词：白纹伊蚊 rAlb-34k2 皮肤局部补体 CRIg 巨噬细胞

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