检索结果-内蒙古大学图书馆

广西医科大学学报 2007年第5期24卷 695-697页

作者：林文珍张荣泰广西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室南宁530021 香港中文大学生物化学系

目的:比较蛋白质组研究的双向电泳中第一向(等电聚焦电泳)的杯上样法和溶涨上样法对2D图谱的影响。方法:以固相pH梯度等电聚焦为第一向和垂直SDS-PAGE为第二向,对上样方法及等电聚焦电泳程序及参数进行比较研究和条件优化。结果:在总电... 详细信息

目的:比较蛋白质组研究的双向电泳中第一向(等电聚焦电泳)的杯上样法和溶涨上样法对2D图谱的影响。方法:以固相pH梯度等电聚焦为第一向和垂直SDS-PAGE为第二向,对上样方法及等电聚焦电泳程序及参数进行比较研究和条件优化。结果:在总电压时间积较短的情况下,运用杯上样法可以得到满意的图谱,而运用溶涨上样法却要在总电压时间积较长的情况下才能得到较好的图谱。结论:杯上样法和溶涨上样法均可得到满意的图谱,但杯上样法所需的总电压时间积比溶涨上样法要短。

关键词：蛋白质双向电泳杯上样法溶涨上样法

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人MCHR2真核表达载体的构建及稳定转染CHO细胞系的建立

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第三军医大学学报 2007年第1期29卷 32-35页

作者：袁成福杨俊霞魏丽丽石华陈济宋方洲重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室教育部临床检验诊断学重点实验室重庆400016

目的构建人MCHR2真核表达载体,转染CHO细胞,建立稳定转染的CHO细胞系。方法采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR2基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切和测序鉴定后,用脂... 详细信息

目的构建人MCHR2真核表达载体,转染CHO细胞,建立稳定转染的CHO细胞系。方法采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR2基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染CHO细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的CHO细胞系,用RT-PCR、W estern b lot及免疫荧光法检测MCHR2的表达。结果成功构建了pcDNA3.1(+)/MCHR2真核表达载体,并建立了稳定转染的CHO细胞系,成功地表达目的基因。结论真核表达载体成功构建和稳定转染CHO细胞系的建立为进一步研究MCHR2的功能奠定良好的实验基础。

关键词： MCHR2 真核表达载体稳定转染的CHO细胞系基因表达

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细胞外信号调节激酶及蛋白激酶C_γ亚型在慢性染铅小鼠脑海马中的异常表达

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中国医科大学学报 2007年第6期36卷 634-635页

作者：高双孙黎光宫慧之姜泓中国医科大学公共卫生学院卫生检验学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

目的:观察和探讨铅对小鼠脑海马蛋白激酶Cγ(PKC-γ)及细胞外信号调节激酶(ERK)蛋白表达的影响。方法:小鼠出生1d,染铅组母鼠开始通过饮水饲以不同浓度醋酸铅2.4,4.8,9.6mmol/L。幼鼠出生后,先通过哺乳接触铅,断乳后则自行饮用与母鼠饮... 详细信息

目的:观察和探讨铅对小鼠脑海马蛋白激酶Cγ(PKC-γ)及细胞外信号调节激酶(ERK)蛋白表达的影响。方法:小鼠出生1d,染铅组母鼠开始通过饮水饲以不同浓度醋酸铅2.4,4.8,9.6mmol/L。幼鼠出生后,先通过哺乳接触铅,断乳后则自行饮用与母鼠饮用浓度相同的含铅水。分别在14,21,28,35d处死小鼠,用蛋白免疫印迹法观察各组小鼠海马区PKC-γ蛋白表达状况;分别在7,14,21,28d处死小鼠,用蛋白免疫印迹法观察各组小鼠海马区ERK蛋白表达状况。结果:慢性铅暴露对小鼠脑海马PKC-γ蛋白表达总体上呈现下降趋势,各染铅组中,PKC-γ蛋白表达与相应期对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。低浓度铅2.4mmol/L使ERK表达升高,但此后随铅浓度升高ERK表达量逐渐降低,铅浓度升高至9.6mmol/L时随着铅浓度升高ERK表达量不再降低相反有所回升。结论:铅扰乱小鼠脑海马中PKC-γ及ERK蛋白正常表达。

关键词：铅蛋白激酶Cγ亚型细胞外信号调节激酶海马

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蛋白激酶B对小鼠1-细胞期受精卵卵裂的影响

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生殖与避孕 2007年第10期27卷 633-638页

作者：冯晨王雁宿文辉张哲徐小燕宗志红于秉治中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室沈阳110001 中国医科大学实验技术中心三部沈阳110001

目的:研究蛋白激酶B(PKB)的活性变化对小鼠受精卵早期发育的影响。方法:将野生型、持续激活型和激酶失活型PKB克隆至pBluescriptII/SK表达载体中,体外转录成mRNA,显微注射到1-细胞期受精卵中,观察受精卵分裂情况。结果:1-细胞期受精卵... 详细信息

目的:研究蛋白激酶B(PKB)的活性变化对小鼠受精卵早期发育的影响。方法:将野生型、持续激活型和激酶失活型PKB克隆至pBluescriptII/SK表达载体中,体外转录成mRNA,显微注射到1-细胞期受精卵中,观察受精卵分裂情况。结果:1-细胞期受精卵注射野生型或持续激活型PKB的mRNA后,卵裂率均增加,而持续激活型PKB的促进作用更为显著;相反注射激酶失活型PKB的mRNA后,卵裂率明显降低。结论:PKB能促进小鼠1-细胞期受精卵的发育,其活化对于小鼠受精卵的发育是必需的。

关键词：小鼠受精卵蛋白激酶B(PKB) 定点突变

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重组人睾丸精子结合蛋白对人精子获能及膜功能的影响

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生殖与避孕 2007年第5期27卷 334-337,350页

作者：宿文辉崔城张哲李宏图王彦于秉治中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室中国医科大学基础医学院生理学教研室沈阳110001 中国医科大学基础医学院辽宁省计划生育科研院沈阳110031

目的:探讨重组人睾丸精子结合蛋白(testis sperm binding protein,TSBP)对人精子获能及膜功能的影响。方法:采集22例健康生育男性新鲜精液样本,精子经Percoll密度梯度离心法优化处理后与不同浓度的重组人睾丸精子结合蛋白分别孵育培养1h... 详细信息

目的:探讨重组人睾丸精子结合蛋白(testis sperm binding protein,TSBP)对人精子获能及膜功能的影响。方法:采集22例健康生育男性新鲜精液样本,精子经Percoll密度梯度离心法优化处理后与不同浓度的重组人睾丸精子结合蛋白分别孵育培养1h或3h,取培养后精子进行孕酮诱导顶体反应与精子膜低渗肿胀功能检测。结果:0.1mg/mlTSBP处理组孕酮诱导精子顶体反应率及精子膜尾部低渗肿胀率均明显高于对照组(P<0.05);0.01mg/mlTSBP处理组各指标与对照组无显著差异。结论:重组人睾丸精子结合蛋白在体外可以促进人精子获能,对精子的膜功能具有保护作用。

关键词：人睾丸精子结合蛋白人精子获能膜功能

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p21蛋白在小鼠受精卵不同期的表达及定位

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中国医科大学学报 2007年第1期36卷 7-8页

作者：武迪迪张盼盼李雪松张杰宗志宏于秉治中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁沈阳110001 沈阳市第五医院外科

目的:研究小鼠受精卵不同时期中p21蛋白的细胞表达及定位。方法:根据时间点收集不同时期小鼠卵细胞,应用免疫荧光法检测其p21蛋白的细胞定位。同时用Westernblot法检测p21蛋白的表达。结果:在小鼠受精卵G1期p21蛋白分布在胞浆中,S期向... 详细信息

目的:研究小鼠受精卵不同时期中p21蛋白的细胞表达及定位。方法:根据时间点收集不同时期小鼠卵细胞,应用免疫荧光法检测其p21蛋白的细胞定位。同时用Westernblot法检测p21蛋白的表达。结果:在小鼠受精卵G1期p21蛋白分布在胞浆中,S期向胞核聚集,而G2期则集中分布于细胞核中;不同时期小鼠受精卵中p21蛋白的表达无明显差异。结论:p21蛋白在小鼠受精卵发育中的作用与其细胞定位密切相关。

关键词：小鼠受精卵 p21蛋白细胞周期定位

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苛求芽孢杆菌胞外尿酸酶的表征及其在血清尿酸测定中的应用

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华中科技大学学报（医学版） 2007年第2期36卷 239-242页

作者：赵运胜赵利娜杨根庆陶佳卜友泉廖飞重庆医科大学重庆市生物化学与分子药理学重点实验室生物信息学与分子工程研究室重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016

目的考察苛求芽孢杆菌（ATCC 26904）分泌型尿酸酶的特性和将其应用于直接动力学尿酸酶法测定血清尿酸的有效性。方法苛求芽孢杆菌分泌的尿酸酶经DEAE-cellulose层析纯化后，用于以积分法分析尿酸酶反应曲线预测反应体系本底的直接动力... 详细信息

目的考察苛求芽孢杆菌（ATCC 26904）分泌型尿酸酶的特性和将其应用于直接动力学尿酸酶法测定血清尿酸的有效性。方法苛求芽孢杆菌分泌的尿酸酶经DEAE-cellulose层析纯化后，用于以积分法分析尿酸酶反应曲线预测反应体系本底的直接动力学尿酸酶法测定血清尿酸。结果苛求芽孢杆菌分泌的尿酸酶只含1种肽链，分子量为34．7kD（1kD=0．9921ku），其米氏常数为（0．22±0．01）mmol／L（n=11），黄嘌呤抑制常数为（36±3）μmol／L（n=4）。用此尿酸酶，只要被分析反应曲线终点的底物浓度低于起点的30％，应用积分法就能可靠预测本底；直接测定反应前吸收，可使直接动力学尿酸酶法不受常见血清成分、酶活性变化和15μmol／L黄嘌呤等干扰。监测0．025U／ml尿酸酶反应5min的数据，其线性响应范围为1～50μmol／L；所得临床标本血清尿酸含量（Ct）与过氧化物酶偶联间接终点平衡法（Ce）正相关（Ck=-0．008＋1．046Ce，r=0．996，n=206），但Bland—Altman法分析表明两种方法不一致。结论苛求芽孢杆菌分泌的尿酸酶可用于直接动力学尿酸酶法测定尿酸，并可保障其优势。

关键词：直接动力学尿酸酶法血清尿酸测定苛求芽孢杆菌分泌型尿酸酶

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慢性染铝大鼠海马PKC、MAPK活力与LTP的相关性

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毒理学杂志 2007年第2期21卷 102-104页

作者：邢伟王彪许金华李晓枫聂海祺张玉霞时利德中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁沈阳110001 辽宁省血液中心

目的研究慢性铝暴露引起大鼠海马蛋白激酶C(PKC)、有丝分裂激活蛋白激酶(MAPK)活力的变化,对海马齿状回(CAI区)产生长时程增强(LTP)幅值改变的调节作用,探讨铝暴露对学习记忆功能的影响。方法选择断乳后Wistar大鼠,随机分4组(1个对照组,... 详细信息

目的研究慢性铝暴露引起大鼠海马蛋白激酶C(PKC)、有丝分裂激活蛋白激酶(MAPK)活力的变化,对海马齿状回(CAI区)产生长时程增强(LTP)幅值改变的调节作用,探讨铝暴露对学习记忆功能的影响。方法选择断乳后Wistar大鼠,随机分4组(1个对照组,3个染毒组),每组20只,染毒组大鼠分别喂食质量浓度为0.2%、0.4%和0.6%氯化铝的水,饲养3个月后,测量大鼠海马LTP,用改良的Takai法测定PKC、MAPK活力的变化。结果3个浓度的染铝,PKC的活力均依浓度依赖方式被抑制,细胞浆比活力的倍数分别为:4.95±0.76、5.31±0.90、5.50±1.46(P<0.01);细胞膜为9.84±3.84、8.35±2.327、.56±2.06(P<0.01)。MAPK活力依浓度依赖方式被抑制,比活力的倍数分别为:3.43±0.91、2.53±1.21和2.64±0.55(P<0.05)。结论慢性铝暴露引起PKC及ERK活力降低,导致大鼠海马LTP幅值下降。

关键词：铝 LTP PKC MAPK 学习和记忆

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加强实验室管理,提高实验课教学质量

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2007年第2期9卷 182-183页

作者：王淑娟于晓光哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

生物化学与分子生物学实验教学是培养学生实际操作能力和分析问题、解决问题能力的重要手段，是一门实践性很强的学科。为了提高学生实际操作能力，只有加大实验教学设备的投入，才能培养出一流的人才；同时必须加强实验室管理，才能提... 详细信息

生物化学与分子生物学实验教学是培养学生实际操作能力和分析问题、解决问题能力的重要手段，是一门实践性很强的学科。为了提高学生实际操作能力，只有加大实验教学设备的投入，才能培养出一流的人才；同时必须加强实验室管理，才能提高实验课教学质量。

关键词：实验室管理实验教学生物化学分子生物学

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克山病患者SCN5A基因突变的研究

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齐齐哈尔医学院学报 2007年第10期28卷 1155-1157页

作者：韩霜舒畅李晖哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

目的通过观察正常人和克山病患者心脏Na+通道基因SCN5A第28外显子的结构,探讨SCN5A基因突变与克山病发病的分子生物学机制。方法提取正常人和克山病患者的DNA,通过聚合酶链反应(PCR)对正常人和克山病患者的DNA进行扩增,并采用PCR-SSCP... 详细信息

目的通过观察正常人和克山病患者心脏Na+通道基因SCN5A第28外显子的结构,探讨SCN5A基因突变与克山病发病的分子生物学机制。方法提取正常人和克山病患者的DNA,通过聚合酶链反应(PCR)对正常人和克山病患者的DNA进行扩增,并采用PCR-SSCP法检测克山病患者SCN5A基因28外显子的碱基序列。结果通过PCR-SSCP方法在克山病患者的SCN5A基因28号外显子处发现与正常人不同的单链条带,即克山病患者的28号外显子存在突变。结论克山病患者心肌Na+通道基因SCN5A的结构与正常人存在差异,SCN5A基因突变可能是导致克山病患者对环境因素易感性增加的因素之一。

关键词：克山病电压门控Na^+通道 SCN5A 基因突变

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