检索结果-内蒙古大学图书馆

中国人兽共患病学报 2007年第4期23卷 319-322页

作者：杨琴顾江毛旭虎邹全明宋方洲丁红雷王庆旭重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫教研室

目的克隆表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7 Tir细胞骨架偶联蛋白(TccP)基因,并研究其抗原性。方法采用PCR法自EHEC O157∶H7 Sakai菌株基因组扩增TccP基因,构建TccP原核表达载体并在大肠杆菌中诱导表达。表达产物经初步纯化后,免疫... 详细信息

目的克隆表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7 Tir细胞骨架偶联蛋白(TccP)基因,并研究其抗原性。方法采用PCR法自EHEC O157∶H7 Sakai菌株基因组扩增TccP基因,构建TccP原核表达载体并在大肠杆菌中诱导表达。表达产物经初步纯化后,免疫新西兰白兔,制备兔抗TccP多克隆抗体。抗体效价及特异性用ELISA法和Western blotting法进行测定和分析。结果从EHEC O157∶H7 Sakai菌株中克隆出了1014bp的TccP基因。构建的重组质粒pET28a-TccP在大肠杆菌中获得了高效表达;以TccP免疫家兔获得了高效价多克隆抗体,Western blotting分析此抗体能与TccP发生特异性抗原抗体反应。结论在大肠杆菌中成功克隆表达了TccP基因,所获TccP具有良好的抗原性,为进一步研究TccP在EHEC O157∶H7致病机制中的作用奠定基础。

关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7 Tir-细胞骨架偶联蛋白基因表达多克隆抗体

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在Fas诱导Bel-7402细胞凋亡中p38MAPK调节Bcl-2的表达

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世界华人消化杂志 2007年第30期15卷 3184-3189页

作者：王玉孙黎光夏春辉叶丽平张莹中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁省沈阳市110001 齐齐哈尔医学院黑龙江省齐齐哈尔市161042

目的:探讨p38MPAK是否参与Fas和AD诱导Bel-7402细胞的凋亡过程,以及p38MPAK和bcl-2的关系,进一步揭示p38MAPK的凋亡途径.方法:在Fas和AD作用24h后,用MTT法检测Bel-7402细胞的活力,用Western-blot和RT- PCR法检测p38MAPK,p-p38MAPK和Bcl-2 expression,用免疫荧光法对p-p38MAPK进行细胞定位.结果:随着Fas浓度的增加,Bel-7402细胞的活力明显抑制,p38MAPK和p-p38MAPK表达明显增高(P<0.01),且p-p38MAPK由胞质易位到胞核.Bcl-2的表达明显降低(P<0.01),并且这种降低趋势被p38MAPK抑制剂SB203580所阻止.结论:p38MAPK参与Fas诱导的凋亡途径,以磷酸化形式激活后抑制Bcl一2的表达,进而促进细胞凋亡.

关键词： p38MAPK p-p38MAPK Bcl-2 细胞凋亡免疫印迹逆转录聚合酶链式反应 Fas

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慢性铝暴露对大鼠认知功能及海马MAPK活性的影响

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中国医科大学学报 2007年第3期36卷 252-253页

作者：邢伟黄莹王彪许金华赵岩岳志军中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁沈阳110001 沈阳市第四人民医院神经内科

目的:探讨慢性铝暴露损害大鼠学习记忆的作用机制。方法:选择断乳后Wistar大鼠,以含不同浓度氯化铝的水进行饲养。3个月后,进行跳台行为学及有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)活性的测定。结果:染铝各组大鼠的血铝、脑铝浓度与对照组相比均... 详细信息

目的:探讨慢性铝暴露损害大鼠学习记忆的作用机制。方法:选择断乳后Wistar大鼠,以含不同浓度氯化铝的水进行饲养。3个月后,进行跳台行为学及有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)活性的测定。结果:染铝各组大鼠的血铝、脑铝浓度与对照组相比均升高,且有显著性差异(P<0.01);染铝各组潜伏期与对照组比较均缩短(P<0.01);染铝组的海马MAPK活性与对照组比较显著降低(P<0.05)。结论:不同浓度慢性铝暴露可引起大鼠脑铝和血铝的含量增高,使海马MAPK活性下降,导致大鼠认知功能降低。

关键词：铝跳台有丝分裂原活化蛋白激酶认知能力

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用线性动力学方法表征L-苯丙氨酸对兔小肠黏膜碱性磷酸酶的抑制作用

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第四军医大学学报 2007年第13期28卷 1161-1163页

作者：陈虹程真莉左渝平廖飞重庆医科大学药学院重庆市生物化学与分子药理学重点实验室生物信息学与制药生物技术组重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016

目的:考察用线性动力学方法表征L-苯丙氨酸对兔小肠黏膜碱性磷酸酶抑制作用的可靠性.方法:测定碱性磷酸酶水解对硝基苯酚磷酸酯(PNPP)的产物生成初速度.用两个底物浓度下标定比活性计算米氏常数(Km)和最大反应速度(Vm),再据二者对抑制... 详细信息

目的:考察用线性动力学方法表征L-苯丙氨酸对兔小肠黏膜碱性磷酸酶抑制作用的可靠性.方法:测定碱性磷酸酶水解对硝基苯酚磷酸酯(PNPP)的产物生成初速度.用两个底物浓度下标定比活性计算米氏常数(Km)和最大反应速度(Vm),再据二者对抑制剂浓度的响应确定抑制剂类型和抑制常数.结果:双倒数分析法重复测定发现70%的Km和Vm随抑制剂浓度升高而同步下降,两动力学参数变化对应抑制常数的比值为(2.4±0.6,n=9).线性动力学方法所得参数精度稍高,Km和Vm随抑制剂浓度升高同时下降的出现率约80%,两抑制常数之比为(2.0±0.8,n=10),两参数变化对应的抑制常数及两抑制常数之比都与双倒数分析法一致.如允许两抑制常数之比在2.5倍内波动,则两种方法都表明L-苯丙氨酸为此碱性磷酸酶的反竞争性抑制剂.结论:此线性动力学方法可用于表征反竞争性抑制剂.

关键词： L-苯丙氨酸反竞争性抑制碱性磷酸酶线性动力学方法抑制常数

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大鼠SCN5A基因内含子1 +204 bp^+757 bp转录调控功能分析

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医学分子生物学杂志 2007年第2期4卷 108-111页

作者：刘宇李晖董钦张振明李凤兰李金波马宁哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨市150081

目的克隆大鼠心肌SCN5A基因5′端调控区,检测目的片段在HEK293细胞中的转录活性。方法扩增大鼠心肌SCN5A基因+204 bp^+757 bp、+204 bp^+385 bp和+204 bp^+329 bp片段,构建含目的片段的荧光素酶报告基因——pGL3-P0、pGL3-P1和pGL3-P2,... 详细信息

目的克隆大鼠心肌SCN5A基因5′端调控区,检测目的片段在HEK293细胞中的转录活性。方法扩增大鼠心肌SCN5A基因+204 bp^+757 bp、+204 bp^+385 bp和+204 bp^+329 bp片段,构建含目的片段的荧光素酶报告基因——pGL3-P0、pGL3-P1和pGL3-P2,比较HEK293细胞中荧光素酶活性,评价不同长度DNA片段的转录调控活性。结果成功构建大鼠心肌SCN5A基因5′端3个片断的荧光素酶报告基因,HEK293细胞中pGL3-P1相对荧光素酶活性分别为pGL3-P0、pGL3-P2的4.3倍和2.8倍。结论SCN5A基因内含子1目的片段在HEK293细胞中具有较强的转录调控活性;SCN5A基因+329 bp^+385 bp为正调控区,软件分析MZF1、USF、C-ETs-1等因子能与这些正调控区域结合并可能参与SCN5A基因的表达调控。

关键词： SCN5A基因转录调控报告基因分析顺式作用元件

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铝暴露对大鼠认知能力及海马Ng蛋白表达影响

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中国公共卫生 2007年第7期23卷 807-808页

作者：宗志红文涛王彪孟晓娜邢伟中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室沈阳110001 辽宁省疾病预防控制中心

目的研究慢性铝暴露对大鼠海马神经颗粒素(Neurogranin,Ng)蛋白表达的影响,探讨慢性铝暴露损害大鼠认知能力的机制。方法选择断乳后Wistar大鼠,以含有不同浓度AlCl3水溶液进行饲养。3个月后,进行跳台行为测定,蛋白免疫印迹法检测Ng蛋白... 详细信息

目的研究慢性铝暴露对大鼠海马神经颗粒素(Neurogranin,Ng)蛋白表达的影响,探讨慢性铝暴露损害大鼠认知能力的机制。方法选择断乳后Wistar大鼠,以含有不同浓度AlCl3水溶液进行饲养。3个月后,进行跳台行为测定,蛋白免疫印迹法检测Ng蛋白表达。结果染铝组大鼠的血铝分别为(6.0±0.9),(6.1±1.2),(17.7±1.4)μg/L,与对照组(4.1±1.3)μg/L比较均升高,差异有统计学意义(P<0.01);染铝组潜伏期分别为(166.00±21.33),(120.23±15.44),(79.86±10.35)S,与对照组(300S)比较均缩短(P<0.01);染铝组与对照组Ng的蛋白表达降低(P<0.05)。结论不同浓度慢性铝暴露可以引起大鼠脑铝和血铝的含量增高,使海马Ng的蛋白表达下降,导致大鼠认知能力降低。

关键词：铝跳台神经颗粒素(Ng) 认知能力

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汉坦病毒细胞膜受体的研究进展

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国际流行病学传染病学杂志 2007年第5期34卷 331-333页

作者：李青岭冯涛重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

病毒通过细胞膜上受体入侵细胞是病毒感染细胞的起始环节。近年来,汉坦病毒细胞膜受体的研究主要集中在β3整合素上,但并没有证据表明病毒与β3整合素之间有直接的相互作用关系,同时对其他可能的协同受体或辅助受体也少有相关报道。此... 详细信息

病毒通过细胞膜上受体入侵细胞是病毒感染细胞的起始环节。近年来,汉坦病毒细胞膜受体的研究主要集中在β3整合素上,但并没有证据表明病毒与β3整合素之间有直接的相互作用关系,同时对其他可能的协同受体或辅助受体也少有相关报道。此文对汉坦病毒细胞膜受体的相关研究作了综述。

关键词：汉坦病毒受体 β3整合素

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沉默HPV16 E6基因对人宫颈癌裸鼠移植瘤的抑制作用

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第三军医大学学报 2007年第6期29卷 486-489页

作者：成海恩张溢张翠莉潘巍巍石华易发平郭风劲宋方洲重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆医科大学公共卫生学院生殖医学系遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室

目的采用RNA干扰抑制人宫颈癌CaSki细胞裸鼠移植瘤中人乳头瘤病毒(human papillomavirus-16,HPV16)E6基因的表达,观察对裸鼠移植瘤的抑制作用。方法将HPV16 E6特异性的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)真核表达载体转染到人宫... 详细信息

目的采用RNA干扰抑制人宫颈癌CaSki细胞裸鼠移植瘤中人乳头瘤病毒(human papillomavirus-16,HPV16)E6基因的表达,观察对裸鼠移植瘤的抑制作用。方法将HPV16 E6特异性的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)真核表达载体转染到人宫颈癌细胞株CaSki细胞中,经G418筛选,RT-PCR检测E6基因的表达;将细胞接种到BALB/c裸鼠背部皮下,同时将该质粒注射到人宫颈癌CaSki细胞移植瘤的裸鼠中,观察肿瘤出现时间及体积变化;观察肿瘤组织的病理改变。结果成功筛选到持续表达E6 siRNA的CaSki细胞,经RT-PCR检测该细胞中HPV16 E6基因表达降低;裸鼠成瘤实验结果显示,处理后的CaSki细胞成瘤能力明显降低,抑瘤率为71.4%;注射质粒进行基因治疗后,裸鼠肿瘤生长受到抑制,肿瘤的体积与质量明显低于CaSki细胞组,差异具有显著性(P<0.05)。病理检查结果显示,经pGensil-CH2处理的肿瘤生长不佳,细胞分裂像少见,组织内有较多坏死区域。结论沉默CaSki细胞中HPV16 E6基因的表达能明显降低宫癌细胞的成瘤作用。

关键词：宫颈肿瘤 RNA干扰 HPV16 E6基因

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分子生物学PBL教学法实施及体会

分子生物学PBL教学法实施及体会

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首届全国生物化学与分子生物学教学研讨会

作者：王磊李晖哈尔滨医科大学基础医学学院生物化学与分子生物学教研室

为探索传统教学与PBL教学相结合的教学模式在生物化学与分子生物学教学中的可行性，本文介绍了本学期分子生物学课程进行了PBL教学尝试，收到了较好的效果的经验体会。

关键词：分子生物学问题教学法教学改革终身教育

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重组蛋白F3T7的亚克隆、表达、纯化及生物学活性的初步鉴定

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重庆医科大学学报 2007年第3期32卷 239-242,327页

作者：刘洋何爱彬李甲初蒋雪曾昭淳重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016

目的:克隆编码F3T7的DNA序列,获得融合蛋白F3T7,研究其F3T7的功能。方法:采用亚克隆技术获得原核表达载体PET32a(+)-F3TwM法测定F3T7的抗血管活性。结果:F3T7具有特异结合血管内皮细胞能力,并抑制其增殖和新血管生成。结论:初步表明F3T... 详细信息

目的:克隆编码F3T7的DNA序列,获得融合蛋白F3T7,研究其F3T7的功能。方法:采用亚克隆技术获得原核表达载体PET32a(+)-F3TwM法测定F3T7的抗血管活性。结果:F3T7具有特异结合血管内皮细胞能力,并抑制其增殖和新血管生成。结论:初步表明F3T7仍具特异结合血管内皮细胞,抑制新血管生长的能力。

关键词：亚克隆融合表达抗血管生成

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