检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医科大学学报 2009年第1期38卷 1-4页

作者：何群张艳宋春阳潘忠诚王天骄张玉魁赵雨杰中国医科大学基础医学院生物芯片中心卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001 沈阳医学院细胞生物学教研室沈阳110034

目的应用凝集素芯片检测兔不同组织细胞膜表面糖链类型。方法分别用不同胶原酶消化兔的脾、肾和肝组织,对消化后得到的细胞进行荧光标记,利用凝集素对糖链的特异亲和性捕获细胞,激光扫描仪检测细胞膜表面糖谱。结果兔不同组织细胞表面... 详细信息

目的应用凝集素芯片检测兔不同组织细胞膜表面糖链类型。方法分别用不同胶原酶消化兔的脾、肾和肝组织,对消化后得到的细胞进行荧光标记,利用凝集素对糖链的特异亲和性捕获细胞,激光扫描仪检测细胞膜表面糖谱。结果兔不同组织细胞表面糖链类型不同:肝细胞特异亲和的凝集素为LTL,脾细胞为SNA和WGA,3种组织细胞共有DSL、MAL、AAL、STL。结论肝细胞膜表面特有糖链为L-岩藻糖,脾细胞特有糖链为唾液酸,使用凝集素芯片检测细胞膜表面的糖链特异性为建立各种细胞膜表面糖谱提供依据。

关键词：凝集素糖组学细胞膜

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胃癌细胞中p21活化激酶4的表达和定位

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中国医科大学学报 2009年第8期38卷 565-568页

作者：邵阳光李妍王春玉佟宇鑫李丰中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001 中国医科大学生物科学与生物技术系沈阳110001

目的构建真核表达载体pEGFP-PAK4,利用它鉴定p21活化激酶4(PAK4)在胃癌细胞中的定位,并检测外源性和内源性PAK4在胃癌细胞中的表达。方法以pCAN2-MYC-PAK4为模板,采用PCR法进行人PAK4编码序列的扩增,并将其克隆至真核表达载体pEGFP-C1... 详细信息

目的构建真核表达载体pEGFP-PAK4,利用它鉴定p21活化激酶4(PAK4)在胃癌细胞中的定位,并检测外源性和内源性PAK4在胃癌细胞中的表达。方法以pCAN2-MYC-PAK4为模板,采用PCR法进行人PAK4编码序列的扩增,并将其克隆至真核表达载体pEGFP-C1中。将pCAN2-MYC-PAK4质粒瞬时转染到胃癌BGC-823细胞中,用Western blot方法检测MYC-PAK4融合蛋白的表达;并用Western blot方法检测不同胃癌细胞系中内源性PAK4的表达;瞬时转染pEGFP-PAK4到胃癌BGC-823细胞中,用激光扫描共聚焦显微镜观察PAK4的定位。结果(1)hPAK4编码序列被成功克隆至真核表达载体pEGFP-C1中;(2)证实了MYC-PAK4融合蛋白及内源性PAK4在胃癌细胞中的表达;(3)转染pEGFP-PAK4后,在胃癌BGC-823细胞胞质内可见明亮的绿色荧光。结论成功地构建了pEGFP-PAK4载体,证实了外源性和内源性PAK4的表达,证明在胃癌BGC-823细胞中PAK4主要定位于细胞质,为进一步研究PAK4的生物学特性及其信号转导通路奠定了基础。

关键词： p21活化激酶4 绿色荧光蛋白融合蛋白转染胃癌

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芹菜素对MDA-MB-231细胞增殖及侵袭转移的影响

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生物技术 2009年第3期19卷 33-37页

作者：赖洁娟蒲淑萍汤为学重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的:研究芹菜素对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及侵袭转移能力的影响,探讨其作用机制。方法:芹菜素处理MDA-MB-231细胞,MTT法及流式法检测细胞增殖、粘附和周期变化;Millicell小室检测新生血管形成、侵袭转移能力的改变;免疫细胞化学检测B... 详细信息

目的:研究芹菜素对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及侵袭转移能力的影响,探讨其作用机制。方法:芹菜素处理MDA-MB-231细胞,MTT法及流式法检测细胞增殖、粘附和周期变化;Millicell小室检测新生血管形成、侵袭转移能力的改变;免疫细胞化学检测Bcl-2、Bax、cyclinB1、VEGF、MMP-9、E-cd蛋白的表达差异。结果:芹菜素明显抑制MDA-MB-231细胞增殖,诱导细胞凋,G2/M期细胞比例由4.79%增至36.12%(P<0.05);细胞的黏附、新生血管形成能力均显著降低;侵袭转移穿膜细胞数明显低于对照组,分别由88.67、106.33降至45.67、68(P<0.05);Bcl-2、cyclinB1、VEGF、MMP-9蛋白表达明显降低;Bax,E-cd的表达则增加。结论:芹菜素有效抑制MDA-MB-231细胞增殖,阻滞细胞于G2/M期,诱导细胞凋亡;抑制细胞粘附、新生血管形成、侵袭与转移的能力,其机制与抑制Bcl-2、cyclinB1、VEGF、MMP9表达,促进Bax、E-cd表达有关。

关键词：芹菜素细胞增殖侵袭转移乳腺癌

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hLMO1编码基因重组质粒的构建及蛋白的表达和定位

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中国医科大学学报 2009年第11期38卷 816-819页

作者：蔡鑫泽顾卉刘彤李丰中国医科大学附属第一医院中心实验室中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001

目的构建hLMO1真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法以人胎脑文库cDNA为模板,PCR扩增hLMO1基因cDNA全长,亚克隆至pEGFP表达载体中。将构建的重组质粒进行酶切测序鉴定,并转染到人上皮细胞——HEK293细胞中,提取细胞蛋... 详细信息

目的构建hLMO1真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法以人胎脑文库cDNA为模板,PCR扩增hLMO1基因cDNA全长,亚克隆至pEGFP表达载体中。将构建的重组质粒进行酶切测序鉴定,并转染到人上皮细胞——HEK293细胞中,提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用激光扫描共聚焦显微镜观察pEGFP-hLMO1在HEK293细胞内的定位。结果hLMO1基因cDNA全长克隆到了真核表达载体pEGFP中,酶切鉴定片段为471bp。Western blot检测到了融合蛋白表达,分子量约为45kDa。pEGFR-LMO1在人HEK293细胞核与细胞质均有表达。结论成功构建了hLMO1基因cDNA全长的真核表达载体,pEGFP-LMO1蛋白定位于HEK293细胞的细胞质和细胞核内。

关键词： hLMO1基因质粒构建基因表达与定位

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抗小鼠TLR2胞外段单表位抗体TSP-2对酵母多糖诱发小鼠腹膜炎的影响

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南方医科大学学报 2009年第8期29卷 1521-1524页

作者：杨翠兰赵文忠黄恩平罗深秋南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515 广东省计划生育科学技术研究所广东广州510600

目的观察抗小鼠TLR2胞外段(mTLR2ECD)单表位抗体TSP-2对酵母多糖诱发的小鼠腹膜炎的主要作用。方法用腹腔灌洗、细胞计数及特异染色、免疫组化、ELISA等各种方法检测了抗体TSP-2对模型动物的扭身次数、腹腔灌洗液的伊文思兰渗出、腹腔... 详细信息

目的观察抗小鼠TLR2胞外段(mTLR2ECD)单表位抗体TSP-2对酵母多糖诱发的小鼠腹膜炎的主要作用。方法用腹腔灌洗、细胞计数及特异染色、免疫组化、ELISA等各种方法检测了抗体TSP-2对模型动物的扭身次数、腹腔灌洗液的伊文思兰渗出、腹腔白细胞浸润的数量变化、腹腔肥大细胞脱颗粒情况以及腹腔灌洗液离心上清中PAF和TNFα水平的影响。结果与PBS处理组和正常兔IgG组相比,抗体TSP-2能促使小鼠因腹腔炎症引起的扭身次数减少,腹腔灌洗液中伊文思蓝OD值降低,腹腔灌洗液中白细胞渗透减少以及C48/80诱导的腹腔肥大细胞脱颗粒降低。结论抗体TSP-2可能通过对肥大细胞脱颗粒的抑制作用减轻酵母多糖诱导的小鼠腹膜炎炎症症状。

关键词： mTLR2 TSP-2 酵母多糖腹膜炎

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喉鳞癌中ΔNp63和ΔNp73的表达及临床意义

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哈尔滨医科大学学报 2009年第3期43卷 222-225,228页

作者：徐晋李燕华梁爽杨昌霖张杰武哈尔滨医科大学细胞生物学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学儿少卫生与妇幼保健学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学第三临床医学院头颈外科黑龙江哈尔滨150081

目的通过研究喉鳞癌中ΔNp63和ΔNp73的表达及与患者各临床病理参数的关系,探讨其在喉鳞癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化二步法,检测40例喉鳞癌及相应癌旁组织中ΔNp63和ΔNp73的表达情况。结果ΔNp63和ΔNp73在喉鳞癌组织中的... 详细信息

目的通过研究喉鳞癌中ΔNp63和ΔNp73的表达及与患者各临床病理参数的关系,探讨其在喉鳞癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化二步法,检测40例喉鳞癌及相应癌旁组织中ΔNp63和ΔNp73的表达情况。结果ΔNp63和ΔNp73在喉鳞癌组织中的阳性表达率分别为85%(34/40)和82.5%(33/40)。喉癌组织中ΔNp63和ΔNp73的表达显著高于相应癌旁组织(P<0.001)。ΔNp63在喉癌组织中的表达与肿瘤分化程度有关(P<0.05);而与患者性别、临床分期、有无淋巴结转移等无关。ΔNp73在喉癌组织中的表达与患者性别、肿瘤分化程度、临床分期、有无淋巴结转移等无关(P>0.05)。喉癌组织中ΔNp63和ΔNp73的表达无显著相关性(r=0.16,P>0.05)。结论ΔNp63和ΔNp73可能作为癌基因维持肿瘤细胞干细胞样的增殖特性,在喉鳞癌的发生、发展中发挥重要作用,并可能成为喉癌成瘤机制研究中的重要靶点。

关键词： △Np63 △Np73 喉鳞癌免疫组化

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混合法用于基因芯片数据的分类分析

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中国医科大学学报 2009年第7期38卷 501-503页

作者：单连峰张惠丹周宝森中国医科大学基础医学院数学教研室沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室沈阳110001 中国医科大学公共卫生学院流行病学教研室辽宁省高校肿瘤病因与预防重点实验室沈阳110001

目的研究广义似然比检验(GLRT)与支持向量机(SVM)相结合的混合法在基因芯片表达数据分类研究中的应用效果。方法结合Golub研究的白血病基因表达数据,利用GLRT寻找白血病表达水平存在显著性差异的基因,再使用SVM对白血病进行分类。结果基... 详细信息

目的研究广义似然比检验(GLRT)与支持向量机(SVM)相结合的混合法在基因芯片表达数据分类研究中的应用效果。方法结合Golub研究的白血病基因表达数据,利用GLRT寻找白血病表达水平存在显著性差异的基因,再使用SVM对白血病进行分类。结果基于GLRT鉴别得到的特征基因有很强的代表性,SVM分类的效果明显优于其他方法。结论混合法在解决数据量大、维数高、样本量小、非线性问题中具有很强的优势,可以有效的用于基因芯片表达数据的分类研究。

关键词：白血病基因芯片广义似然比检验支持向量机

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广义似然比检验应用于基因芯片表达数据的分析

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中国卫生统计 2009年第3期26卷 328-330页

作者：单连峰张惠丹周宝森中国医科大学基础医学院数学教研室 110001 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室 110001 中国医科大学流行病学教研室 110001 辽宁省高校肿瘤病因与预防重点实验室

基因芯片技术的出现使同时监测成千上万个基因的表达成为可能,人们可以全面的在基因组水平上揭示不同基因之间的相互关系,使研究效率明显提高,为基因诊断和基因治疗提供了可能性。但基因芯片技术的成本昂贵、复杂、检测灵敏度较低、重... 详细信息

基因芯片技术的出现使同时监测成千上万个基因的表达成为可能,人们可以全面的在基因组水平上揭示不同基因之间的相互关系,使研究效率明显提高,为基因诊断和基因治疗提供了可能性。但基因芯片技术的成本昂贵、复杂、检测灵敏度较低、重复性差等特点制约了其发展,特别是其得到的海量数据的分析成为基因芯片研究的瓶颈。利用基因芯片获得的基因表达数据具有数据量大、维数高、样本量小、非线性的四大特点。[第一段]

关键词：基因芯片技术似然比检验广义基因表达数据基因组水平检测灵敏度同时监测相互关系

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GST/HIF-1α融合蛋白表达载体的构建及其在大肠埃希菌中的表达

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中国医科大学学报 2009年第10期38卷 721-723,729页

作者：佟宇鑫李丹妮邵阳光李妍李丰中国医科大学第90期生物科学与生物技术系沈阳110001 中国医科大学第94期临床医学系沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001

目的构建GST/HIF-1α融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(***)中诱导表达。方法以质粒pcDNA3.1-HIF-1α为模板,用PCR法扩增HIF-1α全长及各个截短片段,通过BamHI和NotI酶切位点将HIF-1α全长及各个截短突变体定向插入pGEX-4T-2中,构建原... 详细信息

目的构建GST/HIF-1α融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(***)中诱导表达。方法以质粒pcDNA3.1-HIF-1α为模板,用PCR法扩增HIF-1α全长及各个截短片段,通过BamHI和NotI酶切位点将HIF-1α全长及各个截短突变体定向插入pGEX-4T-2中,构建原核表达质粒pGEX-4T-2-HIF-1α及其截短突变体,并转化*** DH5α,筛选阳性重组子,限制性内切酶酶切鉴定和DNA序列测定正确后,转入*** BL21中,异丙基硫代β-D半乳糖苷诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果酶切及测序结果证明,成功构建了原核表达质粒pGEX-4T-2-HIF-1α及其截短突变体,并用Western blot方法证实了GST/HIF-1α全长及各个截短突变体融合蛋白的表达。结论成功构建了HIF-1α原核表达载体及其截短突变体,并证实了融合蛋白的表达,为进一步纯化HIF-1α蛋白和研究HIF-1α的生物学功能奠定了基础。

关键词：缺氧诱导因子1α 截短突变体质粒原核表达

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FZS中药合剂对细胞凋亡的保护作用研究

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哈尔滨医科大学学报 2009年第4期43卷 320-324页

作者：王建秀王德生段淑荣赵敬堃郭彩玲张凤民哈尔滨医科大学第一临床医学院神经内科黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨医科大学基础医学院微生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的探讨FZS中药合剂对Aβ25-35、Aβ42、Aβ42寡聚体诱导的PC12细胞凋亡的保护作用。方法应用正常细胞进行对照研究,通过测定MTT、LDH和原位末端标记(TUNEL)方法检测细胞凋亡。原子力显微镜观察PC12细胞表面突起的变化。结果MTT在FZS... 详细信息

目的探讨FZS中药合剂对Aβ25-35、Aβ42、Aβ42寡聚体诱导的PC12细胞凋亡的保护作用。方法应用正常细胞进行对照研究,通过测定MTT、LDH和原位末端标记(TUNEL)方法检测细胞凋亡。原子力显微镜观察PC12细胞表面突起的变化。结果MTT在FZS组明显增高(P<0.05);LDH、TUNEL凋亡率在FZS组表达明显降低(P<0.05);原子力显微镜观察Aβ致细胞表面突起缩短的现象在FZS组明显改善,差异有显著意义(P<0.05)。结论FZS可以通过降低Aβ的细胞凋亡作用而减少其细胞毒性,FZS中药合剂可能成为Alzheimer病的治疗手段之一。

关键词： β-淀粉样蛋白寡聚体凋亡中药合剂原子力显微镜

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