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中国病理生理学会受体和信号转导专业委员会暨消化专业委员会联合学术会议

作者：徐长庆张伟华哈尔滨医科大学病理生理教研室黑龙江生物医药工程重点实验室

本文首先梗概介绍了钙敏感受体(CaSR)的概念、发现、结构特点、分布、功能、判断方法、调节剂、基因位点以及与疾病的关系。接下来,重点阐述了心血管系统CaSR的研究进展,主要包括:CaSR在正常大鼠、缺血/再灌注和心肌肥大大鼠心肌的表达... 详细信息

本文首先梗概介绍了钙敏感受体(CaSR)的概念、发现、结构特点、分布、功能、判断方法、调节剂、基因位点以及与疾病的关系。接下来,重点阐述了心血管系统CaSR的研究进展,主要包括:CaSR在正常大鼠、缺血/再灌注和心肌肥大大鼠心肌的表达规律、作用和信号传导途径;CaSR在大鼠心肌钙稳态调节、内质网应激和心肌缺血预(后)适应中作用和机制;心肌细胞的多胺代谢规律、生理和病理作用;动脉粥样硬化大鼠心肌钙敏感受体的表达及其对急性心肌梗死的影响等。最后,展望了心血管系统CaSR的研究前景。

关键词：钙敏感受体心血管系统缺血/再灌注内质网应激心肌肥大大鼠

动脉粥样硬化大鼠心肌梗死模型中钙敏感受体的表达和细胞凋亡通路变化

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动脉粥样硬化大鼠心肌梗死模型中钙敏感受体的表达和细胞凋亡通路...

国际心脏研究会（ISHR）中国分会第十届暨中国病理生理学会心血管专业委员会第十三届学术会议

作者：郭津徐长庆李鸿珠王丽娜张伟华李光伟赵雅君张力田野哈尔滨医科大学病理生理教研室黑龙江生物医药工程重点实验室

本文旨在观察钙敏感受体在动脉粥样硬化大鼠心肌梗死模型中的表达和细胞凋亡通路的变化。采用高脂饮食和注射VD3的方法,复制大鼠高脂血症和动脉粥样硬化模型,异丙肾上腺素(200 mg/kg体重)皮下注射制备大鼠心肌梗死模型。Wistar大鼠随机... 详细信息

本文旨在观察钙敏感受体在动脉粥样硬化大鼠心肌梗死模型中的表达和细胞凋亡通路的变化。采用高脂饮食和注射VD3的方法,复制大鼠高脂血症和动脉粥样硬化模型,异丙肾上腺素(200 mg/kg体重)皮下注射制备大鼠心肌梗死模型。Wistar大鼠随机分为6组:正常对照组(Control);动脉硬化组(AS);异丙肾上腺素1d和2d组(ISO/1d,ISO/2d);动脉硬化+异丙肾上腺素1d和2d组(AS/1d,AS/2d)(n=12)。采用RT-PCR和Western blot分别检测CaSR、Bax、Bcl-2、caspase-3、Fas的mRNA和蛋白表达;TUNEL染色观察心肌细胞凋亡情况;光镜观察腹主动脉形态学变化;光镜和电镜观察心肌形态学和超微结构变化;紫外分光法检测乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物岐化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的含量,电化学免疫发光法检测肌钙蛋白(cTnT)水平。与Control组比较,ISO/1d组:LDH和CK活性、MDA含量和cTnT水平、细胞凋亡指数以及CaSR、Bax、caspase-3和Fas的表达均升高,同时SOD活性降低,Bcl-2表达减少,心肌细胞超微结构损伤严重;与ISO/1d组比较,ISO/2d组,上述变化有所减轻,AS/1d组则进一步加重。动脉粥样硬化大鼠心肌钙敏感受体的表达增加导致对心肌梗死的敏感性增加,其机制与氧化应激损伤和细胞凋亡进一步加重有关。

关键词：钙敏感受体大鼠动脉粥样硬化心肌梗死细胞凋亡

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2009年全国微循环与血液流变学基础研究及临床应用学术研讨会

作者：徐长庆张伟华哈尔滨医科大学病理生理教研室黑龙江生物医药工程重点实验室

1概述钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)是G蛋白偶联受体C家族成员,该家族成员还包括mGluR、GABAB受体和信息素受体。CaSR在哺乳动物、鸟、两栖动物、爬虫动物和鱼类均有分布。1993年,Brown EM等人从牛甲状旁腺首次克隆出CaSR... 详细信息

1概述钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)是G蛋白偶联受体C家族成员,该家族成员还包括mGluR、GABAB受体和信息素受体。CaSR在哺乳动物、鸟、两栖动物、爬虫动物和鱼类均有分布。1993年,Brown EM等人从牛甲状旁腺首次克隆出CaSR。1.1 CaSR的结构特点(1)约600个氨基酸组成的氨基端细胞外区(ECD):含多个糖基化位点,细

关键词：钙敏感受体心血管系统缺血/再灌注内质网应激心肌肥大

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国际心脏研究会（ISHR）中国分会第十届暨中国病理生理学会心血管专业委员会第十三届学术会议

作者：徐长庆张伟华王丽娜郭津李光伟哈尔滨医科大学病理生理教研室黑龙江生物医药工程重点实验室

钙敏感受体（calcium-sensing receptor,CaSR）是G蛋白耦联受体C家族成员（该家族成员还包括mGluR、GABAB受体和信息素受体）在哺乳动物、鸟、两栖动物、爬虫动物和鱼类均有分布。1993年,Brown EM等人首次从牛甲状旁腺克隆出CaSR。CaSR... 详细信息

钙敏感受体（calcium-sensing receptor,CaSR）是G蛋白耦联受体C家族成员（该家族成员还包括mGluR、GABAB受体和信息素受体）在哺乳动物、鸟、两栖动物、爬虫动物和鱼类均有分布。1993年,Brown EM等人首次从牛甲状旁腺克隆出CaSR。CaSR由氨基端的细胞外区（ECD）、7个跨膜螺旋的跨膜区（TMD）和胞内羧基端尾部（COOH）组成。ECD含多个糖基化位点,TMD的细胞内环和COOH尾部有PKC和PKA磷酸化位点。细胞外钙是CaSR的天然配体,CaSR对其他激动剂的敏感性为:La>Gd>Be>Ca=Ba>Sr>Mg。CasR主要分布在甲状旁腺、肾脏、肠道和骨细胞,也广泛表达在中枢系统、胃、食道、肝、胰腺等组织。CaSR的主要功能是维持机体Ca和其它金属离子的稳态,同时参与调控细胞的分泌、增殖、分化、趋化、凋亡、基因表达、离子通道开关等。CaSR的研究已成为国际热点,国内则刚起步,涉及心血管领域CaSR的研究开展较晚。2003年,我们首次证明成年大鼠心肌组织存在CaSR的功能表达。2006年,Tfelt-Hansen等人证实,在新生大鼠心室肌细胞也有功能性表达。其他实验小组近年来也提供了一些证据,表明在人主动脉平滑肌细胞、人主动脉内皮细胞、大鼠肠系膜动脉、猪冠状动脉内皮细胞等,也有CaSR的功能性表达。本课题组以大鼠冠脉结扎在体模型、离体心脏灌流模型、分离的单个心肌细胞和原代培养乳鼠心肌细胞为观察对象,采用高效液相色谱、流式细胞仪、膜片钳、激光共聚焦,Western blot、RT-PCR、原位杂交、免疫荧光、TUNEL染色、MTT等手段,对心血管系统CaSR开展了多层次、多角度的系列研究,首次发现、揭示或证实了:（1）成年、新生和不同鼠龄大鼠心肌CaSR的表达特点和规律;（2）CaSR激活通过G蛋白-PLC-IP3通路引起细胞内钙增加,参与心肌钙稳态和兴奋-收缩耦联的调控,并是细胞钙超载的发生机制之一;（3）CaSR在心肌缺血-再灌注损伤的表达规律（缺血期表达增加,再灌注早期进一步增加,晚期则减少）和发挥的关键作用,通过激活MAPKs-Cyt c-Caspase-3通路及Fas受体死亡通路,诱导心肌细胞凋亡。（4）PKCε介导的CaSR活性改变,参与了缺血后适应的心肌保护作用。（5）心肌低氧-复氧过程中CaSR表达增多,通过钙稳态失衡,诱发内质网应激增强,导致心肌细胞凋亡。（6）在异丙肾性大鼠心肌肥大模型和AngⅡ诱导的心肌细胞肥大模型,CaSR的表达均增加,并通过神经钙调磷酸酶（CaN）通路和PKC通路参与AngⅡ诱导的大鼠心肌肥大。（7）动脉粥样硬化大鼠心肌钙敏感受体的表达增加,进而导致对心肌梗死的敏感性增加,其机制与氧化应激损伤和细胞凋亡进一步加重有关。

关键词：心血管系统缺血-再灌注钙敏感受体

钙敏感受体在大鼠肺动脉平滑肌细胞的功能性表达及其在缺氧性肺动脉收缩中作用

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钙敏感受体在大鼠肺动脉平滑肌细胞的功能性表达及其在缺氧性肺动...

中国病理生理学会受体、肿瘤和免疫专业委员会联合学术会议

作者：李光伟郭津邢文婧李鸿珠郝静辉白淑芝李宏霞席玉慧张伟华徐长庆哈尔滨医科大学病理生理教研室黑龙江生物医药工程重点实验室

目的:观察钙敏感受体（CaSR）在大鼠肺动脉平滑肌细胞的功能表达及其在缺氧性肺动脉收缩中的作用。方法:采用RT-PCR、western blot及免疫荧光技术测定大鼠肺动脉平滑肌CaSR mRNA和蛋白的表达及其细胞定位;采用组织浴槽血管环技术检测血... 详细信息

目的:观察钙敏感受体（CaSR）在大鼠肺动脉平滑肌细胞的功能表达及其在缺氧性肺动脉收缩中的作用。方法:采用RT-PCR、western blot及免疫荧光技术测定大鼠肺动脉平滑肌CaSR mRNA和蛋白的表达及其细胞定位;采用组织浴槽血管环技术检测血管张力;激光共聚焦显微镜监视细胞内钙变化;流式细胞仪检测处于不同细胞周期的细胞比例;同时观察不同浓度Ca和Gd（CaSR激动剂）、10mM NiCl(Na-Ca交换阻断剂)、0.2mM CdCl(L型Ca通道阻断剂)、50μMU73122（PLC的特异性阻断剂）、50μMU73343（U73122的类似物）、10mM咖啡因（耗竭肌浆网内钙）、50μM thapsigargin（肌浆网钙泵抑制剂）以及急慢性缺氧对上述观察指标的影响。结果:正常大鼠肺动脉平滑肌细胞有CaSR mRNA及蛋白的表达,CaSR定位在平滑肌细胞的胞浆及胞膜;Ca和Gd呈剂量依赖性引起肺动脉平滑肌细胞内钙及肌张力增加;CaSR激动剂引起的离体肺动脉环收缩及细胞内钙增加,不能被Na-Ca交换阻断剂及L型Ca通道阻断剂所取消;U73122、咖啡因及thapsigargin能抑制CaSR激动剂引起的肺动脉环的收缩,而U73343则无此作用;缺氧可使肺动脉平滑肌CaSR的表达增加、肺血管收缩增强和细胞增殖指数升高。结论:大鼠肺动脉平滑肌细胞有CaSR的功能表达,它可通过PLC-IP3信号通路引起细胞内钙增加和肺动脉收缩。CaSR表达增加在缺氧性肺动脉收缩中发挥重要作用,其机制与肺动脉平滑肌内钙增加和细胞增殖有关。

关键词：钙敏感受体平滑肌细胞

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第七届海峡两岸心血管科学研讨会

作者：徐长庆张伟华王丽娜郭津席玉慧李光伟孙轶华姜春明赵雅君哈尔滨医科大学病理生理教研室黑龙江生物医药工程重点实验室

钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)是G蛋白偶联受体C家族成员,体内分布广泛,参与金属离子稳态的维持,在细胞分泌、增殖、分化、趋化、凋亡、基因表达和衰老等过程中亦发挥重要作用。近年来,在心血管系统CaSR的研究取得了些进展... 详细信息

钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)是G蛋白偶联受体C家族成员,体内分布广泛,参与金属离子稳态的维持,在细胞分泌、增殖、分化、趋化、凋亡、基因表达和衰老等过程中亦发挥重要作用。近年来,在心血管系统CaSR的研究取得了些进展。(1)CaSR钙敏感受体在不同鼠龄大鼠心肌的表达:2003年Wang和XU等首次证明,成年大鼠心肌存在CaSR的表达。2006年,Tfelt-Hansen等发现,在培养的新生大鼠心室肌细胞也有CaSR功能性表达。同年,我室孙轶华等揭示了大鼠不同鼠龄CaSR mRNA的表达规律。(2)CaSR在大鼠缺血-再灌注心肌的表达规律、作用和信号传导途径:我室张伟华等发现,心肌CaSR的表达

关键词：心血管系统功能性表达大鼠心肌钙敏感受体张伟华

钙敏感受体在动脉粥样硬化大鼠心肌的表达变化及其对心肌梗死敏感性的影响

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钙敏感受体在动脉粥样硬化大鼠心肌的表达变化及其对心肌梗死敏感...

中国病理生理学会受体和信号转导专业委员会暨消化专业委员会联合学术会议

作者：郭津徐长庆李鸿珠王丽娜张伟华李光伟赵雅君张力田野哈尔滨医科大学病理生理教研室黑龙江生物医药工程重点实验室

目的:观察钙敏感受体在动脉粥样硬化大鼠心肌的表达变化及其对心肌梗死敏感性的影响。方法:采用高脂饮食和注射VD3的方法,复制大鼠高脂血症和动脉粥样硬化模型,异丙肾上腺素(200mg/kg)皮下注射制备大鼠心肌梗死模型。Wistar大鼠随机分为... 详细信息

目的:观察钙敏感受体在动脉粥样硬化大鼠心肌的表达变化及其对心肌梗死敏感性的影响。方法:采用高脂饮食和注射VD3的方法,复制大鼠高脂血症和动脉粥样硬化模型,异丙肾上腺素(200mg/kg)皮下注射制备大鼠心肌梗死模型。Wistar大鼠随机分为6组:正常对照组(Control):动脉硬化组(AS):异丙肾上腺素1d和2d组(ISO/Id,ISO/2d);动脉硬化+异丙肾上腺素1d和2d组(AS+ISO/Id,AS+ISO/2d)(n=12)。采用RT-PCR和Western blot分别检测CaSK、Bax、Bcl-2、caspase-3、Fas的mRNA和蛋白表达;TUNEL染色观察心肌细胞凋亡情况;光镜观察腹主动脉形态学变化;光镜和电镜观察心肌形态学和超微结构变化:紫外分光法检测乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物岐化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的含量,电化学免疫发光法检测肌钙蛋白(cTnT)水平。结果:与Control组比较,ISO/1d组:LDH和CK活性、MDA含量和cTnT水平、细胞凋亡指数以及CaSR、Bax、caspase-3和Fas的表达均升高,同时SOD活性降低,Bcl-2表达减少,心肌细胞超微结构损伤严重;与ISO/1d组比较,lSO/2d组,上述变化有所减轻,AS+ISO/1d组则进一步加重。结论:动脉粥样硬化大鼠心肌钙敏感受体的表达增加可增加对心肌梗死的敏感性,其机制与氧化应激损伤和细胞凋亡加重有关。

关键词：钙敏感受体大鼠动脉粥样硬化心肌梗死细胞凋亡

多巴胺受体对缺氧-复氧诱导的原代培养乳鼠心肌细胞凋亡的影响

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多巴胺受体对缺氧-复氧诱导的原代培养乳鼠心肌细胞凋亡的影响

国际心脏研究会（ISHR）中国分会第十届暨中国病理生理学会心血管专业委员会第十三届学术会议

作者：李鸿珠徐长庆李弘王丽娜席玉慧郭津李光伟田野哈尔滨医科大学病理生理教研室黑龙江生物医药工程重点实验室

观察多巴胺受体（DR）对缺氧-复氧诱导的心肌细胞凋亡的影响并探讨其机制。采用95%N+5%CO和无血清条件下培养2 h后,更换为正常DMEM培养液常规培养24 h的方法,建立新生乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤模型。随机分为6组:正常对照组（Control... 详细信息

观察多巴胺受体（DR）对缺氧-复氧诱导的心肌细胞凋亡的影响并探讨其机制。采用95%N+5%CO和无血清条件下培养2 h后,更换为正常DMEM培养液常规培养24 h的方法,建立新生乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤模型。随机分为6组:正常对照组（Control）、缺氧.复氧组（H/R）、SKF-38393（DR1激动剂）组、Bromocriptine（DR2激动剂）组、SCH-23390（DR1抑制剂）组、Haloperidol（DR2抑制剂）组。用Western blot检测DR1、DR2、Bcl-2、caspase-3,-8,-9、cytochrome c（Cyt c）、Fas/Fas-L的蛋白表达;激光共聚焦显微镜检测细胞内钙浓度;紫外分光光度计测定培养液中LDH、SOD、MDA水平;流式细胞仪、TUNEL染色、MTT检测心肌细胞凋亡率和存活率;透射电镜观察心肌细胞超微结构变化。结果:（1）与Control组比较,H/R组DR1、DR2、Bcl-2、caspase-3,-8,-9、Cyt c、Fas/Fas-L的蛋白表达增加;细胞内钙浓度升高;细胞存活率降低,凋亡率增加;LDH和MDA升高,SOD降低;心肌细胞损伤严重。（2）与H/R组比较,SKF-38393使上述指标的变化更明显;Bromocriptine的作用与SKF-38393相反;SCH- 23390、Haloperidol对上述指标的影响不明显。缺氧-复氧可导致新生乳鼠心肌细胞损伤,同时DR表达增加。DR1激活可促进心肌细胞凋亡,DR2则抑制心肌细胞凋亡,其信号转导通路均与Cyt c-caspase-3和Fas/Fas-L途径有关。

关键词：多巴胺受体缺血/再灌注损伤细胞凋亡心肌细胞

脂微球前列腺素E1对大鼠离体心肌缺血/再灌注损伤的保护作用和机制

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中华临床医师杂志（电子版） 2009年第10期3卷 49-52页

作者：孙敏李鸿珠王丽岩杨狄郭津田野徐长庆黑龙江省医院肾内科哈尔滨150010 哈尔滨医科大学病理生理教研室黑龙江生物医药工程重点实验室

目的观察脂微球前列腺素E1(凯时)对大鼠离体心肌缺血/再灌注损伤的保护作用并探讨其可能机制。方法Wistar大鼠24只,随机分成正常对照组、缺血/再灌注损伤组和凯时保护组。利用Langendorff灌流装置复制大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型。观... 详细信息

目的观察脂微球前列腺素E1(凯时)对大鼠离体心肌缺血/再灌注损伤的保护作用并探讨其可能机制。方法Wistar大鼠24只,随机分成正常对照组、缺血/再灌注损伤组和凯时保护组。利用Langendorff灌流装置复制大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型。观察指标:冠状动脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,心肌匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,心肌超微结构,HE染色,TUNEL染色及免疫组化等。结果凯时(10μg/L)可使心肌缺血/再灌注损伤所致的LDH释放显著降低,心肌超微结构损伤减轻,SOD活性升高,MDA含量降低;同时使细胞凋亡减少,Bcl-2表达增加,Bax和Caspase-3表达减少。结论凯时能显著减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤,其机制可能与凯时具有抗氧化、清除自由基和抗细胞凋亡的作用有关。

关键词：前列地尔心肌再灌注损伤活性氧细胞凋亡疾病模型动物