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冠状动脉内干细胞灌注对载脂蛋白E基因缺陷小鼠离体心脏血液动力学影响的实验研究

中外医疗 2015年第17期34卷 6-8页

作者：郑秀峰赵石磊杨力明黑龙江省医院心内科黑龙江哈尔滨150036 哈尔滨医科大学第一附属医院肾病内科黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨医科大学病理生理教研室黑龙江哈尔滨150001

目的探讨冠状动脉内干细胞灌注对载脂蛋白E基因缺陷小鼠离体心脏血液动力学的影响。方法设计Langendorff离体心脏灌注模型,比较接受低剂量（1.0×10~6）、高剂量（2.5×10~6）干细胞灌注时及灌注后5 min、15 min、30 min两组载... 详细信息

目的探讨冠状动脉内干细胞灌注对载脂蛋白E基因缺陷小鼠离体心脏血液动力学的影响。方法设计Langendorff离体心脏灌注模型,比较接受低剂量（1.0×10~6）、高剂量（2.5×10~6）干细胞灌注时及灌注后5 min、15 min、30 min两组载脂蛋白E基因缺陷小鼠（低剂量组、高剂量组）和两组WT小鼠心脏（低剂量对照组、高剂量对照组）的血流动力学指标。同时比较注射后5 min、15 min、30 min时,两组心脏细胞的血流动力学指标。结果四组T1~T4时刻的心率均显著低于T0时刻差异有统计学意义（P〈0.05）;且高剂量组的心率变化最明显。四组在进行细胞灌注后,LVEDP水平均显著升高,＋dp/dt和-dp/dt水平均显著降低,且均以高剂量组的上升或下降幅度最为显著。细胞灌注后,四组的冠脉流量均较灌注前显著降低差异有统计学意义（P〈0.05）;且以高剂量组的降低幅度最明显,与其他三组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。灌注后30 min,四组的漏出液细胞含量均达到了60%以上。结论冠脉内干细胞灌注会对载脂蛋白E基因缺陷小鼠离体心脏的血流动力学产生不良影响,并且灌注剂量越大,不良影响越显著。

关键词：血流动力学载脂蛋白E基因缺陷干细胞灌注冠状动脉

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藤黄酸和芬维A胺协同抗肝癌的体外实验研究

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东方食疗与保健 2015年第2期 1-3页

作者：董晓先刘宁宁华先良廖宇宁广州医科大学病理生理学教研室 510182 广州医科大学附属第二医院心血管疾病研究所 510260 黄石市中心医院·湖北理工学院附属医院肿瘤内科 435000

目的：研究藤黄酸和芬维A胺联合用药对人肝癌HepG2细胞是否具有协同作用。方法人肝癌HepG2细胞经藤黄酸和（或）芬维A胺处理后，MTS法检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡，Western blot方法检测BIP、CHOP、Caspase-3、8、9和PARP凋... 详细信息

目的：研究藤黄酸和芬维A胺联合用药对人肝癌HepG2细胞是否具有协同作用。方法人肝癌HepG2细胞经藤黄酸和（或）芬维A胺处理后，MTS法检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡，Western blot方法检测BIP、CHOP、Caspase-3、8、9和PARP凋亡相关蛋白的变化。结果藤黄酸和芬维A胺联合用药明显增强抑制HepG2细胞的活力，与单独用药组相比具有协同作用。藤黄酸联合芬维A胺可以明显诱导HepG2细胞凋亡。两药联合作用可以诱导BIP、CHOP表达增加，引起Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活化，PARP的切割。结论藤黄酸和芬维A胺联合用药具有协同作用，明显增强抑制HepG2细胞的活力和诱导细胞凋亡，其作用机制可能与内质网应激诱导Caspase系统活化相关。

关键词：藤黄酸芬维A胺肝癌细胞

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***926人脐静脉内皮细胞株与原代细胞生物特性的比较研究

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新疆医科大学学报 2014年第1期37卷 36-39页

作者：李慧李秀娟古力热巴.夏依买旦阿曼古丽.如则吴江聂永梅新疆医科大学基础医学院生理学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院病理生理学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学第二附属医院心电图室乌鲁木齐830063

目的比较培养***926人脐静脉内皮细胞株与原代脐静脉内皮细胞(HUVECs)的优缺点及生物学特性。方法通过倒置显微镜、透射电镜形态学鉴定、Ⅷ因子相关抗原免疫组织化学检查及生长曲线测定,比较2种脐静脉内皮细胞的形态、生长曲线等差异。... 详细信息

目的比较培养***926人脐静脉内皮细胞株与原代脐静脉内皮细胞(HUVECs)的优缺点及生物学特性。方法通过倒置显微镜、透射电镜形态学鉴定、Ⅷ因子相关抗原免疫组织化学检查及生长曲线测定,比较2种脐静脉内皮细胞的形态、生长曲线等差异。结果透射电镜观察到原代HUVECs中发现较多WebelPalade小体,而***926细胞株较少见。免疫组织化学染色Image-Pro Plus 6.0软件进行分析***926人脐静脉内皮细胞株与原代HUVECs平均光密度值分别为(2 234.02±78.78)、(4 138.80±594.01)。原代HUVECs的染色程度明显较***926细胞株高,差异有统计学意义(P<0.01)。***926人脐静脉内皮细胞株生长曲线较原代HUVECs稳定。结论培养原代HUVECs耗时长,生长期较短,易出现杂细胞的污染,细胞的增殖能力有限,花费昂贵。***926细胞株虽生物特性较差,但其操作简便,具有一定程度的原代HUVECs所具有的生物特性,细胞均一以及增长旺盛,可用于较复杂、细胞创伤较大的体外内皮细胞的研究。

关键词： EA HY926细胞株原代人脐静脉内皮细胞细胞培养比较

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耐药结核分枝杆菌PhoPR双组分系统基因表达的研究

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中国病原生物学杂志 2014年第4期9卷 303-308页

作者：李文娟宝音王霞张峰章乐吴芳吴江东庄睿邬博梁晨樊超张春军张辉张万江石河子大学医学院病理生理学教研室、“新疆地方与民族高发病”教育部重点实验室新疆石河子832002 新疆乌鲁木齐市第一人民医院新疆阿克苏地区第二人民医院新疆医科大学第五附属医院

目的比较结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)原始耐药菌株与经过含不同浓度培养基培养后的菌株中PhoPR双组分系统基因表达水平的差异,研究MTB PhoPR双组分系统与MTB耐药的相关性。方法分别在原始状态下和用低浓度含药培养基... 详细信息

目的比较结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)原始耐药菌株与经过含不同浓度培养基培养后的菌株中PhoPR双组分系统基因表达水平的差异,研究MTB PhoPR双组分系统与MTB耐药的相关性。方法分别在原始状态下和用低浓度含药培养基及高浓度含药培养基培养单纯耐异烟肼MTB临床分离株(INH-MTB)、单纯耐利福平的MTB临床分离株(RFP-MTB)、单纯耐链霉素MTB临床分离株(SM-MTB)、单纯耐乙胺丁醇的MTB临床分离株(EB-MTB)、耐多药MTB临床分离株(MDR)养至对数期,提取各组MTB总RNA,并进行纯度鉴定;运用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR,检测各组MTB的PhoP基因和PhoR基因的表达,比较不同耐药的MTB临床分离株PhoP基因和PhoR基因表达水平的差异。结果在低浓度抗结核药物条件下培养的INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB和MDR组MTB与原始状态下MTB相比,PhoP基因表达分别上调2.19、2.04、1.72、2.73倍,PhoR基因分别上调1.57、2.57、1.56和2.83倍,差异有统计学意义(P<0.05);在高浓度抗结核药物条件下培养,INH-MTB、RFP-MTB、SMMTB、EB-MTB和MDR组MTB中的PhoP基因表达分别上调1.79、1.44、2.10、1.27和1.97倍,PhoR基因在INHMTB、RFP-MTB、SM-MTB和MDR组MTB分别上调1.05、1.91、1.76和2.13倍,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PhoP和PhoR基因的差异表达与MTB的耐药性相关,提示PhoPR双组分系统与MTB耐药具有相关性。

关键词：结核分枝杆菌耐药性 PhoPR双组分系统

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硝酰基通过巯基靶点增加心肌对钙离子敏感性

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中国药学杂志 2013年第10期48卷 792-796页

作者：王育文杨东晓王喜尧钟鑫哈尔滨医科大学附属第二医院检验科哈尔滨150081 哈尔滨医科大学病理生理学教研室黑龙江生物医药工程重点实验室哈尔滨150081

目的研究NCA[硝酰基(HNO,一氧化氮的单电子还原产物,对活体心脏发挥正性肌力作用)供体,1-nitrosocyclohexylacetate]的作用效果及其巯基靶点机制。方法大鼠右心室的完整梳状肌被连接在张力换能器与刺激电极之间,肌小节长度设定在2.2～2.... 详细信息

目的研究NCA[硝酰基(HNO,一氧化氮的单电子还原产物,对活体心脏发挥正性肌力作用)供体,1-nitrosocyclohexylacetate]的作用效果及其巯基靶点机制。方法大鼠右心室的完整梳状肌被连接在张力换能器与刺激电极之间,肌小节长度设定在2.2～2.3μm之间,K-H液表面灌流后(pH 7.4,室温),Fura-2经玻璃微电极负载进行离子透入法检测[Ca2+]i同时测定心肌收缩张力的变化。Western blotting方法检测NCA对Tm(肌原纤维蛋白)、MLC(肌凝蛋白轻链)和TnI(肌钙蛋白I)的影响。结果收缩力在NCA作用下呈剂量依赖性增加(20～100μmol.L-1)。不同频率作用下(0.5～3.0 Hz,NCA 20μmol.L-1,Ca2+0.5μmol.L-1)收缩力的增加(P<0.01)和[Ca2+]i瞬变(P>0.05)没有受到明显的影响。同对照组相比,NCA处理组去肌膜心肌收缩力明显增加(P<0.05),且作用效果具有结构唯一性特点。非还原条件下Western blotting可见Tm出现交联。巯基还原剂二硫苏糖醇(DTT,5.0μmol.L-1)能够阻止并逆转NCA的活动。结论 NCA提供的硝酰基是心脏钙离子增敏剂,心肌调节蛋白质巯基翻译后修饰可能是其靶点作用所在。

关键词：硝酰基 NCA 肌原纤维巯基

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丹酚酸B对异丙肾上腺素所致乳鼠心肌细胞肥大的保护作用

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中草药 2013年第17期44卷 2422-2426页

作者：吴继超王彬田振张伟华哈尔滨医科大学病理生理教研室黑龙江哈尔滨150081 牡丹江医学院第二附属医院医保科黑龙江牡丹江157015

目的探讨丹酚酸B对异丙肾上腺素诱发的原代乳鼠心肌细胞肥大的保护作用及其机制。方法用异丙肾上腺素诱导制备原代乳鼠心肌细胞肥大模型。MTT法检测丹酚酸B对乳鼠心肌细胞活力的影响;RT-PCR技术检测心肌肥厚指标心钠肽(ANP)、脑钠肽(BNP... 详细信息

目的探讨丹酚酸B对异丙肾上腺素诱发的原代乳鼠心肌细胞肥大的保护作用及其机制。方法用异丙肾上腺素诱导制备原代乳鼠心肌细胞肥大模型。MTT法检测丹酚酸B对乳鼠心肌细胞活力的影响;RT-PCR技术检测心肌肥厚指标心钠肽(ANP)、脑钠肽(BNP)基因表达;分光光度法检测心肌细胞中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的量;Western blotting法测定心肌肥厚信号转导通路JAK、STAT蛋白的表达。结果不同浓度的丹酚酸B对乳鼠心肌细胞的活力无明显影响。与模型组比较,丹酚酸B浓度为10、20μmol/L时明显下调ANP、BNP基因表达(P<0.05、0.01);显著增强SOD活性和降低MDA的量(P<0.05、0.01);显著下调JAK1与STAT3蛋白的表达(P<0.05、0.01)。结论丹酚酸B能有效抑制异丙肾上腺素诱发的原代乳鼠心肌细胞肥大,其机制可能与抗氧化应激以及抑制JAK1/STAT3信号通路有关。

关键词：丹酚酸B 异丙肾上腺素心肌细胞肥大氧化应激 JAK1 STAT3信号通路

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三七对糖尿病肾病大鼠保护作用的观察

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中国糖尿病杂志 2013年第10期21卷 931-934页

作者：赵玲柯亭羽彭嘉睿于南南李树清昆明医科大学第二附属医院干疗内分泌科云南650101 昆明医科大学病理生理教研室

目的观察三七对糖尿病肾病(DN)大鼠的治疗效果,探讨其作用机制,为糖尿病及DN的预防及治疗提供参考。方法予不同剂量三七治疗8周,观察其对STZ诱导的DN大鼠肾脏功能及结构的影响,观察各组血脂、血糖、体重、24h尿蛋白定量、肾脏VEGF表达... 详细信息

目的观察三七对糖尿病肾病(DN)大鼠的治疗效果,探讨其作用机制,为糖尿病及DN的预防及治疗提供参考。方法予不同剂量三七治疗8周,观察其对STZ诱导的DN大鼠肾脏功能及结构的影响,观察各组血脂、血糖、体重、24h尿蛋白定量、肾脏VEGF表达水平。结果不同三七剂量组血糖、TG、尿量、24h尿蛋白定量及VEGF表达均有不同程度降低(P<0.05或P<0.01),而体重、HDL-C均有不同程度增加(P<0.05或P<0.01)。结论三七治疗DN大鼠有一定疗效,其机制可能与改善相关代谢异常及改善组织缺血有关。

关键词：糖尿病微血管病变糖尿病肾病三七血管内皮生长因子大鼠

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结核杆菌PhoPR双组分系统与广泛流行的耐药结核杆菌耐药性的相关性研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2013年第10期33卷 773-779页

作者：李文娟宝音王霞张峰梁晨庄睿樊超庹清章张春军张辉吴芳吴江东章乐张万江新疆石河子大学医学院病理生理学教研室/《新疆地方与民族高发病》教育部重点实验室 832002 新疆乌鲁木齐市第一人民医院内一科新疆阿克苏地区第二人民医院检验科新疆医科大学第五附属医院心胸外科

目的：通过比较分析不同耐药的结核杆菌临床分离株PhoP基因和PhoR基因的表达水平差异，探讨研究结核杆菌PhoPR双组分系统与新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌耐药性是否具有相关性。方法以新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌临床分离株为研... 详细信息

目的：通过比较分析不同耐药的结核杆菌临床分离株PhoP基因和PhoR基因的表达水平差异，探讨研究结核杆菌PhoPR双组分系统与新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌耐药性是否具有相关性。方法以新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌临床分离株为研究对象，分别提取结核分枝杆菌临床分离药物敏感菌株、单纯耐异烟肼的结核杆菌临床分离株（ INH-MTB）、单纯耐利福平的结核杆菌临床分离株（ RFP-MTB）、单纯耐链霉素的结核杆菌临床分离株（ SM-MTB）、单纯耐乙胺丁醇的结核杆菌临床分离株（ EB-MTB）、耐多药结核杆菌临床分离株（ MDR）总RNA，并进行纯度鉴定，运用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR的方法，分别检测各组结核杆菌菌株的PhoP基因和PhoR基因的表达，比较分析不同耐药的结核杆菌临床分离株PhoP基因和PhoR基因的表达水平的差异。结果与结核分枝杆菌临床分离药物敏感菌株相比，PhoP基因在RFP-MTB中的表达上调1．48倍，在MDR中的表达上调2．74倍，差异有统计学意义（P＜0．05）；与MDR相比，PhoP基因在INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB和EB-MTB中的表达下调0．70、0．50、0．25和0．21倍，差异有统计学意义（P＜0．05）。与结核分枝杆菌临床分离药物敏感菌株相比，PhoR基因在INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB和EB-MTB中的表达分别上调6．33、4．56、2．34和1．85倍，在MDR中的表达上调9．06倍，差异有统计学意义（ P＜0．05）；与 MDR相比，PhoR基因在INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB 和EB-MTB 中的表达下调0．36、0．54、0．35和0．19倍，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论在结核分枝杆菌临床分离药物敏感菌株、INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB、EB-MTB和MDR中，结核杆菌PhoP和PhoR基因的表达有差异，结核杆菌PhoPR双组分系统与新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌的耐药性具有相关性。

关键词：结核分枝杆菌耐药性 PhoPR双组分系统

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磷酸化ERK1/2在6-OHDA致PC12细胞损伤中的作用

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中国老年学杂志 2012年第15期32卷 3244-3246页

作者：李静张一娜范鹰马兰姜礼红崔璨吴博哈尔滨医科大学附属第二医院老年病科黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学病理生理教研室

目的观察细胞外信号调节激酶(ERK1/2)在6-OHDA致PC12细胞损伤的帕金森(PD)细胞模型中所起的作用。方法 6-OHDA处理体外培养的PC12细胞株,建立PD细胞模型。MTT法检测6-OHDA对PC12细胞活力的影响,免疫印迹法研究p-ERK1/2蛋白表达随时间变... 详细信息

目的观察细胞外信号调节激酶(ERK1/2)在6-OHDA致PC12细胞损伤的帕金森(PD)细胞模型中所起的作用。方法 6-OHDA处理体外培养的PC12细胞株,建立PD细胞模型。MTT法检测6-OHDA对PC12细胞活力的影响,免疫印迹法研究p-ERK1/2蛋白表达随时间变化的趋势,并检测ERK1/2上游激酶抑制剂PD98059和U0126对6-OHDA诱导ERK1/2磷酸化及凋亡的影响。结果 PC12细胞随6-OHDA作用时间的增加,p-ERK1/2出现表达升高;PD98059和U0126明显抑制6-OHDA所致的ERK1/2磷酸化,明显减低了细胞损伤的程度。结论在6-OHDA介导的多巴胺神经元损伤中呈现ERK1/2磷酸化,抑制ERK1/2可以6-OHDA引起的PC12细胞损伤,该过程可能在调控PD多巴胺能细胞损伤中起重要作用。

关键词： PC12细胞 PD98059 U0126 帕金森病 ERK1/2

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结核分枝杆菌PhoP/PhoR基因重组穿梭表达质粒的构建及鉴定

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石河子大学学报（自然科学版） 2013年第6期31卷 697-701页

作者：梁晨姜晓霞张锋王霞吴芳章乐吴江东张春军张辉樊超庄睿李文娟张万江石河子大学医学院病理生理学教研室/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室石河子832002 石河子大学医学院第一附属医院功能科石河子832008 新疆医科大学第五附属医院烧伤整形科乌鲁木齐830011 新疆阿克苏地区第二人民医院检验科阿克苏843000

为构建结核杆菌PhoPR双组分系统PhoP、PhoR基因的重组穿梭质粒pMV361-PhoP、pMV361-PhoR并对其进行鉴定。采用结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株基因组DNA为模版,利用PCR技术分别扩增PhoP、PhoR基因编码序列,先克隆于T-Vector pMD19(... 详细信息

为构建结核杆菌PhoPR双组分系统PhoP、PhoR基因的重组穿梭质粒pMV361-PhoP、pMV361-PhoR并对其进行鉴定。采用结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株基因组DNA为模版,利用PCR技术分别扩增PhoP、PhoR基因编码序列,先克隆于T-Vector pMD19(Simple),再亚克隆至大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体pMV361,并转化*** DH5α感受态细胞,提取所得的阳性克隆子获得重组表达质粒pMV361-PhoP、pMV361-PhoR,通过PCR及双酶切鉴定。结果显示,结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株基因组DNA中扩增出的PhoP、PhoR基因与GenBank公布的序列一致,经过PCR及双酶切鉴定,表明PhoP、PhoR基因均成功插入了pMV361穿梭载体。由此可知,成功构建了重组穿梭质粒pMV361-PhoP、pMV361-PhoR,为进一步研究PhoPR双组分系统奠定了基础。

关键词：结核杆菌 PhoP PhoR pMV361

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