检索结果-内蒙古大学图书馆

生物技术通讯 2015年第3期26卷 430-432页

作者：李福记陈凤平吕宇吴华裕广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室广西南宁530021

衰老的分子机制复杂,目前的研究尚未能对衰老的关键轴心获得一致而明晰的理论认识,各种衰老假说相继被提出,其中具有代表性的为端粒学说。端粒-p53-线粒体衰老轴线自从被提出,已经获得越来越多的实验论证,较多的研究也表明线粒体DNA突... 详细信息

衰老的分子机制复杂,目前的研究尚未能对衰老的关键轴心获得一致而明晰的理论认识,各种衰老假说相继被提出,其中具有代表性的为端粒学说。端粒-p53-线粒体衰老轴线自从被提出,已经获得越来越多的实验论证,较多的研究也表明线粒体DNA突变与衰老有着密切的相关性,但突变与衰老之间的因果关系存在较大争议。我们简要综述了近年来线粒体DNA突变与衰老关系的相关研究进展。

关键词：端粒线粒体DNA 突变衰老

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ATF4重组慢病毒对C2C12细胞增殖和凋亡的影响

ATF4重组慢病毒对C2C12细胞增殖和凋亡的影响

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中国细胞生物学学会2015年全国学术大会

作者：夏飞伍志盟李美玲邓莉郭风劲重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016

目的：构建人活性转录因子4(activating transcriptional facror4,ATF4)慢病毒载体并包装慢病毒颗粒(lentivirus),探讨成肌细胞C2C12中ATF4基因慢病毒修饰对BMP2诱导其成骨分化的作用.方法设计并合成人ATF4基因的上、下游引物,采用PCR... 详细信息

目的：构建人活性转录因子4(activating transcriptional facror4,ATF4)慢病毒载体并包装慢病毒颗粒(lentivirus),探讨成肌细胞C2C12中ATF4基因慢病毒修饰对BMP2诱导其成骨分化的作用.方法设计并合成人ATF4基因的上、下游引物,采用PCR方法从真核质粒pcDNA3.1(-)-ATF4中扩增目的基因.鉴定后与慢病毒载体pWPT-GFPV5进行重组,再将重组慢病毒载体pWPT-GFPATF4与慢病毒包装质粒pMD2G、pSPAX2共转入293T细胞中,进一步包装成ATF4慢病毒(Lv-ATF4);用病毒上清感染成肌细胞C2C12,观察绿色荧光蛋白(GFP)感染效率,并应用流式细胞仪(FCM)监测BMP2诱导成肌细胞C2C12细胞分化时对其增殖凋亡的影响,蛋白质印迹法监测凋亡相关基因Cleaved Caspase-3、Chop与p-JNK蛋白的表达,电镜观察细胞形态差异.

关键词： ATF4 慢病毒 C2C12 分化细胞增殖凋亡

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广西汉族早老症家系三例病例研究——影像学特征分析

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中国全科医学 2015年第29期18卷 3619-3623页

作者：吴华裕覃霞舒艳张伟峰李福记舒伟马军胡启平袁志刚林有坤方玲广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室广西南宁市530021 广西医科大学第一附属医院皮肤性病科浙江省湖州市妇幼保健院

目的分析广西汉族1个罕见早老症家系3例患者的影像学资料,探讨该家系早老症患者的影像学特征。方法收集广西汉族1个早老症家系3例患者的临床资料及CT、X线、MRI影像学检查资料,对其影像学特点进行总结。结果先证者为7岁女孩,另2例患者... 详细信息

目的分析广西汉族1个罕见早老症家系3例患者的影像学资料,探讨该家系早老症患者的影像学特征。方法收集广西汉族1个早老症家系3例患者的临床资料及CT、X线、MRI影像学检查资料,对其影像学特点进行总结。结果先证者为7岁女孩,另2例患者分别为先证者的妹妹(3岁)和弟弟(1岁)。先证者颈部正侧位片示颅盖骨与下颌骨比例不协调,下颌骨发育不全,锁骨消失,梨形胸。3例患者双手正侧位片检查均显示双手指指关节屈曲畸形,骨质疏松;年长的2例患者双手正侧位片提示骨龄发育迟缓,指骨远端骨质溶解明显。3例患者肺部CT平扫结果均未提示肺部纤维化表现,但先证者胸廓及肺脏均小于正常儿童,且胸壁脂肪厚度较正常儿童薄,颅脑MRI显示脑颅骨比例增大,垂体大小正常。结论早老症患者具有特征性的影像学改变,包括骨质疏松症、小下颌、锁骨及指骨末端缺失变短、手指指关节畸形、梨形胸等,对该病的诊断和鉴别诊断具有重要意义。

关键词：衰老,过早早老症体层摄影术,X线体层摄影术,螺旋计算机磁共振成像

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过表达核糖核酸酶抑制因子对膀胱癌移植瘤侵袭转移及上皮细胞间质转化的影响

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重庆医学 2015年第36期44卷 5057-5060页

作者：舒静姜源姚雪陈俊霞泸州医学院附属医院检验科四川泸州646000 重庆市卫生信息中心<重庆医学>编辑部 401120 重庆医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室分子医学与肿瘤研究中心 400016

目的研究过表达核糖核酸抑制因子(RI)对膀胱癌移植瘤侵袭转移及上皮细胞间质转化(EMT)的影响。方法将RI过表达质粒(pIRES2-EGFP-RI)和阴性对照质粒(pIRES2-EGFP)稳定转染膀胱癌T24细胞,稳定表达细胞株分别命名为:T24-RI组、T24vector组... 详细信息

目的研究过表达核糖核酸抑制因子(RI)对膀胱癌移植瘤侵袭转移及上皮细胞间质转化(EMT)的影响。方法将RI过表达质粒(pIRES2-EGFP-RI)和阴性对照质粒(pIRES2-EGFP)稳定转染膀胱癌T24细胞,稳定表达细胞株分别命名为:T24-RI组、T24vector组、T24组。将各组T24细胞分别接种至BALB/C裸鼠左腋皮下,观察移植瘤的生长、微血管密度及肺组织转移灶的变化;进一步分析RI、MMP-2、MMP-9、EMT相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Snail、Slug、Twist蛋白)在肿瘤组织中的表达水平。结果 T24-RI组较T24组与T24vector组,瘤体质量显著降低(P<0.01),抑瘤率分别为26.67%和38.85%;与对照组比较,T24-RI组瘤组织微血管密度明显减少,肺组织未见明显转移灶,同时CD31在瘤组织中表达减少;免疫组织化学染色显示:T24-RI组瘤组织中RI、E-cadherin蛋白的表达明显升高,而MMP-2、MMP-9、N-cadherin、Vimentin、Snail、Slug、Twist蛋白表达明显降低。结论过表达RI可能通过调节侵袭转移EMT关键蛋白的表达,显著抑制了膀胱癌移植瘤生长、侵袭和转移的潜能。

关键词：过表达核糖核酸抑制因子 T24细胞移植瘤肿瘤侵袭转移上皮细胞介质转化

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hβ-arrestin2基因重组质粒构建及蛋白表达和定位

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现代肿瘤医学 2015年第9期23卷 1198-1200页

作者：刘彩红毛琪郭文东朱亚勤中国医科大学基础医学院细胞病理生物学研究室细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001 哈尔滨医科大学大庆校区医学检验与技术学院免疫教研室黑龙江大庆163319

目的:构建p EGFP-C1-β-arrestin2融合蛋白表达载体,并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法:以p GEX-5X-1-β-arrestin2为模板,PCR法扩增hβ-arrestin2编码序列,亚克隆至p EGFP-C1中,p EGFP-C1-β-arrestin2经双酶切初步鉴定再送测... 详细信息

目的:构建p EGFP-C1-β-arrestin2融合蛋白表达载体,并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法:以p GEX-5X-1-β-arrestin2为模板,PCR法扩增hβ-arrestin2编码序列,亚克隆至p EGFP-C1中,p EGFP-C1-β-arrestin2经双酶切初步鉴定再送测序公司检测正确后瞬时转染人胚肾细胞HEK293,Western blot检测融合蛋白表达。激光扫描共聚焦显微镜观察融合蛋白在HEK293细胞中的分布。结果:hβ-arrestin2编码序列被成功克隆至p EGFP-C1中,Western blot检测到融合蛋白表达,分子量约为77k Da,p EGFP-C1-β-arrestin2定位于HEK293细胞的细胞质中。结论:成功构建hβ-arrestin2基因真核表达载体,证实了融合蛋白定位在HEK293的细胞质中。

关键词： hβ-arrestin2基因蛋白质印记绿色荧光蛋白

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长寿家系的白细胞端粒长度

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中国老年学杂志 2015年第9期35卷 2325-2327页

作者：吴华裕罗晓秋韩焕钦吕泽平胡才友刘承武彭均华孙鹏葛琳潘尚领广西医科大学细胞生物学与遗传学教研室广西南宁530021 新乡医学院生理学教研室广东医学院第一附属医院传染科国家康复辅具研究中心附属康复医院神经内科广西壮族自治区江滨医院神经内科广西医科大学病理生理学教研室

目的探讨长寿家系血液白细胞的端粒长度与人类衰老/长寿的关系。方法采用real-time PCR方法对广西巴马地区长寿家系(BLF,n=1 301)群体外周血白细胞进行相对端粒长度(LTL)的测定,并与同地区非长寿家系(BNLF,n=283)及外地区(广西平果地区... 详细信息

目的探讨长寿家系血液白细胞的端粒长度与人类衰老/长寿的关系。方法采用real-time PCR方法对广西巴马地区长寿家系(BLF,n=1 301)群体外周血白细胞进行相对端粒长度(LTL)的测定,并与同地区非长寿家系(BNLF,n=283)及外地区(广西平果地区)长寿家系(PLF,n=308)、非长寿家系(PNLF,n=482)进行比较。结果 (1)在整体人群及各家系人群中,LTL均与年龄呈负相关;(2)在BLF中,LTL在各年龄段均无性别差异(P>0.05),其他对照家系除个别年龄段外,也呈现类似的趋势;(3)BLF 90~年龄段的LTL长于PLF(P=0.000);(4)BLF 65~年龄段(近似于长寿老人的第一胎子女)的LTL长于BNLF(P=0.000)、PLF(P=0.011)及PNLF(P=0.021)三个对照家系,BLF 90~高龄段的LTL与三个对照家系65~年龄段的水平相当。结论长寿家系LTL明显长于普通家系,存在一定的遗传倾向。

关键词：端粒长度长寿衰老

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乳扇制品中乳酸杆菌的分离鉴定及16S rRNA序列同源性分析

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中国微生态学杂志 2015年第4期27卷 394-399页

作者：崔照琼郤翠仙周玉照柴俊刘旭川张以芳昆明医科大学海源学院细胞生物学暨医学遗传学教研室云南昆明650106 云南农业大学动物科技学院云南昆明650201

目的乳扇是云南大理白族的一种传统乳制品,明确大理乳扇制品中乳杆菌的多样性及优势种群分布,为科学利用奠定基础。方法采用表型鉴定及16S r RNA鉴定方法,对10个家庭作坊的大理乳扇制品中的乳杆菌进行了分离鉴定。结果共分离到50株乳杆... 详细信息

目的乳扇是云南大理白族的一种传统乳制品,明确大理乳扇制品中乳杆菌的多样性及优势种群分布,为科学利用奠定基础。方法采用表型鉴定及16S r RNA鉴定方法,对10个家庭作坊的大理乳扇制品中的乳杆菌进行了分离鉴定。结果共分离到50株乳杆菌,通过表型鉴定为8个种,包括植物乳杆菌10株、德氏乳杆菌7株、发酵乳杆菌6株、干酪乳杆菌6株、棒状乳杆菌4株、鼠乳杆菌2株、弯曲乳杆菌3株和食果糖乳杆菌2株;06422和06430两株表型鉴定未能定种,进一步通过16S r RNA鉴定为植物乳杆菌和马酒乳杆菌,06422株与植物乳杆菌***、***和*** P158的同源性分别是100%、100%和99.9%,与乳杆菌属其它种的同源性为83.4%(***)至93.5%(***),06430株与***的16S r RNA同源性是99.9%,与乳杆菌属其它种的同源性为83.7%(*** P158)至96.3%(***)。结论大理乳扇制品中有9种乳杆菌,其优势种群为植物乳杆菌、德氏乳杆菌、发酵乳杆菌和干酪乳杆菌等四种。

关键词：乳酸杆菌分离鉴定 16S rRNA

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中性蛋白酶Ⅱ消化法在神经元诱导培养中的应用

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武警后勤学院学报（医学版） 2015年第3期24卷 182-184,F0002页

作者：王永光陈旭义刘英富陈小义钟士江河北医科大学河北石家庄050017 武警后勤学院附属医院天津300162 武警后勤学院细胞生物学与遗传学教研室天津300309

【目的】建立中性蛋白酶Ⅱ(DispaseⅡ)对神经球的分散、消化及消化后神经元的诱导培养方法。【方法】取15 d胎鼠的脑组织,经剪碎、研磨、血清培养基培养得到的神经球,培养2 d后观察细胞贴壁情况,并换成诱导剂培养液培养3 d,用DispaseⅡ... 详细信息

【目的】建立中性蛋白酶Ⅱ(DispaseⅡ)对神经球的分散、消化及消化后神经元的诱导培养方法。【方法】取15 d胎鼠的脑组织,经剪碎、研磨、血清培养基培养得到的神经球,培养2 d后观察细胞贴壁情况,并换成诱导剂培养液培养3 d,用DispaseⅡ消化已培养的神经球,后期将经DispaseⅡ消化后的细胞继续进行培养、诱导、鉴定。【结果】用DispaseⅡ消化神经细胞后体外培养并诱导,神经球能够诱导分化成神经元,并能形成典型的神经元细胞网状,经NSE鉴定阳性。【结论】利用DispaseⅡ消化的方法能够将神经球消化成单个细胞,消化后的细胞能够继续培养并向神经元分化。

关键词：中性蛋白酶Ⅱ 神经元神经球诱导培养

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广西汉族早老症家系三例病例研究--线粒体DNAD-环区突变分析

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中国全科医学 2015年第29期18卷 3624-3627页

作者：李福记吴华裕韩焕钦陈凤平覃霞吕宇林有坤舒艳张伟峰方玲胡启平袁志刚舒伟广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室广西南宁市530021 广东医学院附属医院感染内科广西医科大学第一附属医院皮肤科浙江省湖州市妇幼保健院

目的探讨广西汉族1个早老症家系中3例儿童早老症(HGPS)患者线粒体DNA D-环区(D-loop区)突变是否呈现年龄相关的突变累积。方法采用聚合酶链反应(PCR)对3例HGPS患者及其父母、8例正常老人(正常老人组)的线粒体DNA D-loop区进行扩增、测... 详细信息

目的探讨广西汉族1个早老症家系中3例儿童早老症(HGPS)患者线粒体DNA D-环区(D-loop区)突变是否呈现年龄相关的突变累积。方法采用聚合酶链反应(PCR)对3例HGPS患者及其父母、8例正常老人(正常老人组)的线粒体DNA D-loop区进行扩增、测序。结果正常老年人线粒体DNA D-loop区较Cambridge序列存在较多的突变位点,HGPS患者与正常老人组线粒体DNA D-loop区突变率差异具有统计学意义(P<0.05);3例HGPS患者线粒体DNA D-loop区单体型与其母亲一致;未检测到3例HGPS患者线粒体DNA D-loop区发生新突变,也未检测到3例HGPS患者线粒体DNA D-loop区存在差异。结论该家系3例HGPS患者在7岁前未发生线粒体DNA D-loop突变累积,且不同年龄患者均未见年龄相关的突变累积,推论线粒体DNA突变不是该家系HGPS患者加速衰老的重要原因。

关键词：衰老,过早早老症 DNA,线粒体 D-loop区突变

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乙型肝炎病毒核苷类似物交叉耐药株RT区变异分析

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国际检验医学杂志 2015年第9期36卷 1179-1181页

作者：滕旭林乐勋陈丽玲梁爽徐晖谷鸿喜哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学大庆校区检验系黑龙江大庆163000 哈尔滨市疾病预防控制中心黑龙江哈尔滨150056 哈尔滨医科大学医学遗传学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的研究多种核苷类似物(NAs)序贯治疗产生交叉耐药的患者体内乙型肝炎病毒(HBV)RT区变异位点和变异类型。方法筛选6例临床上对两种或两种以上NAs产生交叉耐药的患者,并从患者血清中获取HBV交叉耐药株DNA,进行全基因克隆和测序,从而分... 详细信息

目的研究多种核苷类似物(NAs)序贯治疗产生交叉耐药的患者体内乙型肝炎病毒(HBV)RT区变异位点和变异类型。方法筛选6例临床上对两种或两种以上NAs产生交叉耐药的患者,并从患者血清中获取HBV交叉耐药株DNA,进行全基因克隆和测序,从而分析其变异特点和规律。结果经测序鉴定,6位患者体内HBV基因型均为C型,产生交叉耐药的相关性变异以rtM204V/I(YMDD)变异为主(50%),部分YMDD变异株伴有rtL180M变异(16.7%)、其他伴随变异包括rtV173L(16.7%),rtL80I(16.7%)。此外,还发现RT区次要变异伴随位点rtL269I(40%)、rtQ333K(56.7%)、rtH337N(56.7%)。结论RT区次要变异伴随位点rtL269I、rtQ333K、rtH337N的出现可能增强了HBV YMDD变异株在体内的复制能力,并对交叉耐药准种所占比例起到了放大的效果,从而导致本研究中6例患者出现对拉米夫定、恩替卡韦、阿德福韦和替比夫定产生多重耐药。

关键词：乙型肝炎病毒交叉耐药病毒变异

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