检索结果-内蒙古大学图书馆

超高效液相色谱-串联质谱法测定尿液中血栓素A_(2)的3种代谢物和8-异前列腺素F_(2α)

色谱 2025年第2期43卷 148-154页

作者：刘思佳赵福荣张亚莲孙晓宇张萌萌侯琨曹云峰锦州医科大学药学院辽宁锦州121001 上海市生物医药技术研究院上海市疾病与健康基因组学重点实验室国家卫生健康委员会计划生育药具重点实验室上海200237 锦州医科大学辽宁省肿瘤临床代谢组学重点实验室辽宁锦州121001 大连博源医学科技有限公司辽宁大连116011

建立了同时测定人体尿液中血栓素A_(2)的3种代谢物(2,3-地诺血栓素B_(2)、11-脱氢-2,3-地诺血栓素B_(2)和11-脱氢血栓素B_(2))和8-异前列腺素F_(2α)的超高效液相色谱-串联质谱检测方法。尿液经盐酸酸化至pH 2.0~4.0,经C18固相萃取柱净... 详细信息

建立了同时测定人体尿液中血栓素A_(2)的3种代谢物(2,3-地诺血栓素B_(2)、11-脱氢-2,3-地诺血栓素B_(2)和11-脱氢血栓素B_(2))和8-异前列腺素F_(2α)的超高效液相色谱-串联质谱检测方法。尿液经盐酸酸化至pH 2.0~4.0,经C18固相萃取柱净化后测定。使用ACQUITY UPLC^(■) BEH Phenyl色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm),以含0.002%氨水的2 mmol/L乙酸铵水溶液和乙腈作为流动相进行梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,柱温为40℃,采用电喷雾离子源,在负离子和多反应监测模式下分析4 min,内标法定量。4种目标化合物在各自范围内线性关系良好,相关系数(R^(2))大于0.99;方法检出限为2,3-地诺血栓素B_(2)0.02 ng/mL,其余目标化合物0.01 ng/mL;定量限为2,3-地诺血栓素B_(2)0.1 ng/mL,其余目标化合物0.05 ng/mL;实际尿液中,4种目标物在定量限水平下的加标回收率为91.48%~104.87%,低、中、高水平下的加标回收率为92.95%~104.90%,日内精密度为2.79%~13.01%,日间精密度为4.45%~13.67%。应用该方法测定健康人群和缺血性脑卒中患者血栓素A_(2)的3种代谢物和8-异前列腺素F_(2α)的含量,并用肌酐进行校正。对目标化合物进行二元Logistic回归分析并绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)用于诊断,血栓素A_(2)(血栓素A_(2)的3种代谢物加和)的曲线下面积(AUC)为0.849,8-异前列腺素F_(2α)的AUC为0.775,具有较好的临床价值,有望辅助缺血性脑卒中的早期筛查诊断。

关键词：超高效液相色谱-串联质谱 2,3-地诺血栓素B_(2) 11-脱氢-2,3-地诺血栓素B_(2) 11-脱氢血栓素B_(2) 8-异前列腺素F_(2α) 尿液缺血性脑卒中

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不同类型社区居家养老服务需要与利用分析

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南京医科大学学报(社会科学版) 2025年第2期25卷 139-144页

作者：杨定王丽娟南京市中医院夫子庙院区综合办江苏南京210006 国家卫生健康委计划生育药具不良反应监测中心江苏省生育力保护与卫生技术评估重点实验室江苏省卫生健康发展研究中心江苏南京210036

为了解社区居家养老服务发展现况,抽样调查南京市鼓楼区不同类型社区617名老年人,分析社区居家养老服务的需要、利用情况及影响因素。研究发现,调查对象对社区居家养老服务的知晓率为70.02%、意愿率为60.78%、利用率为43.92%、满意率为8... 详细信息

为了解社区居家养老服务发展现况,抽样调查南京市鼓楼区不同类型社区617名老年人,分析社区居家养老服务的需要、利用情况及影响因素。研究发现,调查对象对社区居家养老服务的知晓率为70.02%、意愿率为60.78%、利用率为43.92%、满意率为85.24%,利用率总体不高;不同社区老年人的知晓率、意愿率、利用率差异显著(P均<0.001);不同年龄、身体状况老年人的意愿率、利用率差异显著(P均<0.001)。结果说明,社区居家养老服务供需错位、失衡问题突出;精神慰藉、医疗相关服务利用低;居家养老服务意愿、利用率和知晓率受社区资源和服务影响。

关键词：居家养老社区需求利用人口老龄化

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人受精蛋白β整联蛋白配体区cDNA的克隆、表达及抗体制备

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2001年第3期33卷 303-308页

作者：丁蓓蓓沈卫英蒋俶王健高尔生申庆祥上海市计划生育科学研究所国家计划生育药具重点实验室!上海200032

从人睾丸中抽提mRNA ,合成双链cDNA ,利用合成的PCR引物扩增受精蛋白 β(fertilinβ)的整联蛋白配体区cDNA(hf2 79)。序列分析表明 ,该区编码 93个氨基酸 ,与文献报道完全相同。将hf2 79插入质粒 pGEX 4T 2 ,构建 pGEX hf2 79表达质粒 ... 详细信息

从人睾丸中抽提mRNA ,合成双链cDNA ,利用合成的PCR引物扩增受精蛋白 β(fertilinβ)的整联蛋白配体区cDNA(hf2 79)。序列分析表明 ,该区编码 93个氨基酸 ,与文献报道完全相同。将hf2 79插入质粒 pGEX 4T 2 ,构建 pGEX hf2 79表达质粒 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,表达菌株经IPTG诱导 ,可产生大量可溶性的表达蛋白GST HF93。SDS PAGE分析表明融合蛋白表观分子量为 38kD ,其含量占菌体可溶性蛋白的 5 0 %以上。表达产物经谷胱甘肽转硫酶 (GST)亲和层析柱纯化 ,得到 90 %以上纯度的融合蛋白。融合蛋白经凝血酶酶切 2h可得HF93肽。再经GST亲和层析柱去除GST ,得到纯度大于 80 %的HF93肽。将其和SDS PAGE凝胶上切下的HF93多肽条带一起用于免疫BALB/c小鼠 ,经ELISA检测 ,证明获得了较高滴度的抗体

关键词：人受精蛋白β整联蛋白配体区基因克隆基因表达大肠杆菌抗体

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重组人绒毛膜促性腺激素嵌合肽12的聚丙烯酰胺凝胶电泳制备

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生物化学与生物物理学报 2002年第5期34卷 671-674页

作者：邹永水徐万祥何远孙志达薛小琳上海市计划生育科学研究所计划生育药具国家重点实验室

利用板状聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)方法 ,建立了一步分离纯化基因工程表达蛋白质的新技术。在构建的人绒毛膜促性腺激素嵌合肽 (CP1 2 )表达率约为 1 %的情况下 ,借助分析制备两用型板状PAGE装置 ,通过下行和上行两次电泳以及用透析膜... 详细信息

利用板状聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)方法 ,建立了一步分离纯化基因工程表达蛋白质的新技术。在构建的人绒毛膜促性腺激素嵌合肽 (CP1 2 )表达率约为 1 %的情况下 ,借助分析制备两用型板状PAGE装置 ,通过下行和上行两次电泳以及用透析膜隔离形成收集槽这两步改进 ,从包涵体抽提液中一步纯化了目的表达产物。结果表明 ,一次上样总蛋白质量为 3～ 4mg的PAGE ,可获得 5 0～ 1 0 0 μgCP1 2蛋白 ,其相对均一性达到 95 %。研究提示此改良的制备性PAGE新技术 ,是一种分离纯化低分子量目的蛋白质的好方法

关键词：人绒毛膜促性腺激素基因工程嵌合肽聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化

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禁欲时间对男性精液质量的影响

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复旦学报（医学版） 2003年第4期30卷 391-393页

作者：李文英武俊青高尔生杨秋英陶建国陈锡宽上海市计划生育科学研究所-计划生育药具国家重点实验室上海200032

目的了解不同禁欲时间的男性精液质量状况,为临床治疗不育提供参考。方法对来自全国7个省市562名健康男性的精液质量进行分析。结果随着禁欲时间的延长,精液量、精子密度、精子总数都有所增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论精... 详细信息

目的了解不同禁欲时间的男性精液质量状况,为临床治疗不育提供参考。方法对来自全国7个省市562名健康男性的精液质量进行分析。结果随着禁欲时间的延长,精液量、精子密度、精子总数都有所增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论精子数目过少的男性,禁欲时间可以稍长,但不宜超过7 d。精子活力差而精子数量足够的男性,则禁欲时间可以稍短,3 d左右即可。

关键词：禁欲时间男性不育症精液质量流行病学质量控制

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医院高质量发展导向下的科技评价体系改革策略研究

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公关世界 2025年第4期 17-19页

作者：陈文莉姚捷叶芊张云东南大学附属中大医院康复医学科国家卫生健康委计划生育药具不良反应监测中心江苏省生育力保护与卫生技术评估重点实验室江苏省卫生健康发展研究中心南京特殊教育师范学院康复科学学院

在当前“面向人民生命健康”的新使命下，亟需健全以创新、实效、贡献为导向的科技评价体系，这对提升我省医务人员从事科研的积极性、促进我省医院沿着新方向良性发展具有重要意义。现有科技评价体系存在的问题主要体现在重数量、轻质... 详细信息

在当前“面向人民生命健康”的新使命下，亟需健全以创新、实效、贡献为导向的科技评价体系，这对提升我省医务人员从事科研的积极性、促进我省医院沿着新方向良性发展具有重要意义。现有科技评价体系存在的问题主要体现在重数量、轻质量；重科研、轻临床；重短期、轻长远；重个人、轻团队。因此，本研究提出了一些高质量发展导向下的科技评价体系改革策略，包括施行岗位分类管理，采取不同的评价方式和占比，对不同岗位类型实行差别化管理；建立健全科技论文分类评价体系，采用分类评价、同行评价、代表作制度相结合的评价原则，区分论文在不同学科领域的评价标准；同时，拓宽评价体系中的认证项目，将高质量科技转化成果、参与高质量科研平台与团队等纳入评价体系，以制度创新激发医学科技创新的活力，调动医院、医务人员参加临床研究、成果转化的积极性，引领重大产品创新，服务于全省高质量发展。

关键词：科技评价高质量发展改革

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一种早胚发育促进因子“DPF-1”cDNA的表达、纯化及其抗体的制备

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生殖与避孕 2001年第3期21卷 143-148,I001,I003页

作者：潘勇顾正王俊茹左嘉客计划生育药具国家重点实验室

目的 :表达纯化 GST-DPF-1融合蛋白 ,制备抗 DPF-1抗体 ,用抗 DPF-1抗体进行功能封闭实验。方法 :用 Eco RI和 Not I双酶切 p Bluescript IIKS/ 1 .9kb DPF-1 c DNA,得到1 .9kb DPF-1 c DNA;Hinc II酶切该片段 ,得到 1 .8kb DPF-1 c DNA... 详细信息

目的 :表达纯化 GST-DPF-1融合蛋白 ,制备抗 DPF-1抗体 ,用抗 DPF-1抗体进行功能封闭实验。方法 :用 Eco RI和 Not I双酶切 p Bluescript IIKS/ 1 .9kb DPF-1 c DNA,得到1 .9kb DPF-1 c DNA;Hinc II酶切该片段 ,得到 1 .8kb DPF-1 c DNA;Sma I与 Not I双酶切 GST融合基因表达载体 p GEX-4T-3 ,得到线性 p GEX-4T-3载体 ;1 .8kb DPF-1 c DNA与线性 p GEX-4T-3载体连接 ,构建了重组 p GEX-4T-3 / DPF-1 c DNA。带有重组质粒的DE3菌 3 7℃培养 ,IPTG诱导 ,菌体裂解及蛋白纯化。融合蛋白免疫 BAL B/ c小鼠 ,制备抗血清 ,抗血清经 GST吸附。结果 :获得的 GST-DPF-1融合蛋白和针对 DPF-1的抗体具有较好的专一性。经 GST吸附后的抗 DPF-1抗血清可使条件培液中的昆明小鼠受精卵全部被阻断于 2 -细胞期。结论 :该抗体可用于天然 DPF-1的纯化、DPF-1功能及作用机制的研究。

关键词： DPF-1 pGEX-4T-3 亲和层析抗体早胚发育胚胎 cDNA

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HeLa细胞表达分泌重组eGFP-DPF-1在卵母细胞上的定位

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实验生物学报 2003年第4期36卷 307-313页

作者：罗金平颜桂军顾正左嘉客计划生育药具国家重点实验室

将兔输卵管蛋白(DPF-1)基因连结于增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因5′端,构建了真核表达重组质粒(pEGFP-N1/DPF-1),转染HeLa细胞,获得稳定表达分泌融合蛋白eGFP-DPF-1的HeLa细胞株。该融合蛋白呈现的分子量达120 KD,提示经翻译后修饰。取... 详细信息

将兔输卵管蛋白(DPF-1)基因连结于增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因5′端,构建了真核表达重组质粒(pEGFP-N1/DPF-1),转染HeLa细胞,获得稳定表达分泌融合蛋白eGFP-DPF-1的HeLa细胞株。该融合蛋白呈现的分子量达120 KD,提示经翻译后修饰。取兔卵母细胞-卵丘细胞复合物(COC)、去除卵丘细胞后的卵母细胞或输卵管内的卵母细胞,与该株细胞共培养或培养于该株细胞条件培液中,观察兔输卵管蛋白在兔卵母细胞上的分布。结果显示DPF-1大量结合于卵母细胞透明带,先结合于透明带内层,然后维持在内层多外层少的分布状态上;在卵母细胞质膜表面则呈点状均匀分布。DPF-1在卵母细胞上的分布不受其周围颗粒细胞的阻碍,且颗粒细胞上未见有DPF-1结合的痕迹。本实验首次证实体外真核细胞表达分泌的输卵管蛋白能与卵母细胞结合,并借助绿色荧光蛋白作为示踪信号体外直接观察到该表达产物在卵母细胞上的动态分布,为进一步深入分析输卵管蛋白的功能提供了线索,也为研究输卵管内其他蛋白在配子/早胚上定位提供了可行的办法。

关键词：卵母细胞绿色荧光蛋白兔输卵管蛋白定位 HeLa细胞表达分泌重组

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小鼠着床丝氨酸蛋白酶2cDNA的克隆、表达及抗体制备

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生物化学与生物物理学报 2003年第7期35卷 649-654页

作者：黄哲平王健余浩黄萍沈维雄左嘉客杨增明申庆祥上海市计划生育科学研究所国家计划生育药具重点实验室东北农业大学生命科学学院上海市计划生育科学研究所国家计划生育药具重点实验室上海200032 哈尔滨150030

以孕 4 .5天小鼠子宫着床位点总cDNA为模板 ,用PCR方法扩增获得着床丝氨酸蛋白酶 2 (ISP2 )的cDNA。序列分析表明 ,该cDNA序列中的开放阅读框编码 2 79个氨基酸 ,并与文献报道完全相同 ,但在 3′非翻译区多 2 0 4bp ,已登录于GenBank(... 详细信息

以孕 4 .5天小鼠子宫着床位点总cDNA为模板 ,用PCR方法扩增获得着床丝氨酸蛋白酶 2 (ISP2 )的cDNA。序列分析表明 ,该cDNA序列中的开放阅读框编码 2 79个氨基酸 ,并与文献报道完全相同 ,但在 3′非翻译区多 2 0 4bp ,已登录于GenBank(登录号 :AF4 4 2 819)。为了获得重组ISP2 (rISP2 ) ,构建了pGEX 4T 2 ISP2表达质粒 ,进而在大肠杆菌BL2 1(DE3)中表达融合蛋白质GST ISP2 ,经SDS PAGE回收的融合蛋白质用牛凝血酶酶切 ,再经SDS PAGE回收获得rISP2。用rISP2作为免疫原免疫家兔获得ISP2多克隆抗血清。用该抗血清进行免疫组化研究表明 ,ISP2在妊娠早期的小鼠子宫内膜腺上皮有特异性的高表达。

关键词： ISP2 PCR 基因表达抗体制备

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比格犬前列腺增生模型中输精管病理变化

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中国药理学与毒理学杂志 2003年第3期17卷 221-226页

作者：吴建辉孙祖越钟恩宏朱焰刘桂明何桂林曹霖上海市计划生育科学研究所计划生育药具国家重点实验室

目的　探讨前列腺增生症中输精管的增生机制。方法　丙酸睾酮 (TP)诱导比格犬前列腺增生模型建立后 ,获取输精管组织 ,利用放射免疫分析法检测输精管组织中的双氢睾酮 (DHT)含量 ,组织经石蜡固定包埋切片 ,显微图像分析技术分析输精管... 详细信息

目的　探讨前列腺增生症中输精管的增生机制。方法　丙酸睾酮 (TP)诱导比格犬前列腺增生模型建立后 ,获取输精管组织 ,利用放射免疫分析法检测输精管组织中的双氢睾酮 (DHT)含量 ,组织经石蜡固定包埋切片 ,显微图像分析技术分析输精管管腔大小及上皮细胞高度 ,流式细胞术检测输精管组织凋亡率 ,免疫组织化学技术检测输精管组织中前列腺特异抗原 (PSA)、前列腺酸性磷酸酶 (PAP)、Bcl 2及P5 3蛋白表达 ,2 %的琼脂糖凝胶电泳观察输精管组织的凋亡情况。结果　输精管组织中DHT含量随TP剂量增大而增加 ,但无统计显著性差异。输精管管腔面积随TP增加增大 (P <0 .0 1 ) ,输精管上皮细胞高度也随TP增高 (P <0 .0 1 )。流式细胞术结果中 ,对照组细胞凋亡率高于 0 .8及 7.5mg·kg-1TP组(P <0 .0 1 )。免疫组化结果中 ,PSA ,PAP和Bcl 2表达没有明显差异 ,但各组P5 3表达均低于对照组 (P <0 .0 5 )。琼脂糖凝胶电泳结果中 ,对照组中可以看到 2 0 0bp整数倍的DNA片段 ,其他组则没有观察到类似现象。结论　DHT促进输精管增生。

关键词：输精管睾酮凋亡前列腺增生

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