检索结果-内蒙古大学图书馆

食用菌学报 2019年第4期26卷 9-15页

作者：冯志勇陈辉汪虹黄建春郝海波王倩宋晓霞隽加香张津京南京农业大学生命科学学院江苏南京210095 上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

为建立鉴定双孢蘑菇(Agaricus bisporus)核型的方法,根据GeneBank公布的其基因组信息,针对交配型基因序列设计特异性引物,以W192两个不同核型的同核体菌株A1和A2的菌丝体基因组DNA为模板进行PCR扩增,获得交配型基因序列,筛选存在差异的... 详细信息

为建立鉴定双孢蘑菇(Agaricus bisporus)核型的方法,根据GeneBank公布的其基因组信息,针对交配型基因序列设计特异性引物,以W192两个不同核型的同核体菌株A1和A2的菌丝体基因组DNA为模板进行PCR扩增,获得交配型基因序列,筛选存在差异的序列,预测基因片段的限制性内切酶位点,筛选最佳酶切位点,根据酶切片段的差异鉴定菌株的交配型。结果表明:筛选得到长度为736 bp的基因序列,将其命名为aba1;核型为A1的同核体菌株,采用内切酶EcoRⅤ可以将aba1酶切成大小为257 bp和479 bp的两个片段;核型为A2的同核体菌株,采用内切酶XhoⅠ可以将aba1酶切成大小为327 bp和409 bp的两个片段;如果同时可以被两种限制性内切酶酶切,说明该菌株为异核体。采用基因测序鉴定了5株标记为孢子同核体的菌株和8株标记为原生质体同核体的菌株,测序结果表明:5株标记为孢子同核体的菌株中176P11、176P14和176P17的核型属于A1型,176P12和176P19属于A2型;8株标记为原生质体同核体的菌株中101-1P75和03P75的核型为A1型;152P11、46P23、46P27和152P2为A2型;03P46和176P21属于异核体;同时又采用笔者建立的内切酶方法鉴定了这些菌株,核型与基因测序鉴定结果相同。

关键词：双孢蘑菇交配型基因核型限制性内切酶

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根癌农杆菌介导的食用菌转化研究

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食用菌学报 2014年第1期21卷 69-75页

作者：孙运奇张津京冯志勇陈明杰汪虹陈辉上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 南京农业大学生命科学学院江苏南京210095

近年来,根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的食用菌遗传转化研究取得了一定的进展。为此,笔者对农杆菌介导转化的原理、转化的食用菌种类以及影响转化效率的相关因素进行了系统阐述。并分析了农杆菌介导食用菌转化中存在的问题... 详细信息

近年来,根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的食用菌遗传转化研究取得了一定的进展。为此,笔者对农杆菌介导转化的原理、转化的食用菌种类以及影响转化效率的相关因素进行了系统阐述。并分析了农杆菌介导食用菌转化中存在的问题,以及对该技术在食用菌中的应用前景进行了展望。

关键词：食用菌根癌农杆菌遗传转化

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微生物多样性分析技术应用于食用菌发酵培养料分析的进展

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食用菌学报 2019年第3期26卷 148-156页

作者：赵妍刘顺杰张亚茹孙育红黄建春余昌霞陈明杰上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306 上海市浦东新区农业技术推广中心上海200120

食用菌培养料的腐熟是由多种微生物共同作用而实现的,在这个过程中营养成分降解程度的差异,在一定程度上会影响后期的生产过程及产量。物种多样性差异反映了生态群落的功能和动态变化,因此分析发酵培养料制备过程中微生物多样性的变化... 详细信息

食用菌培养料的腐熟是由多种微生物共同作用而实现的,在这个过程中营养成分降解程度的差异,在一定程度上会影响后期的生产过程及产量。物种多样性差异反映了生态群落的功能和动态变化,因此分析发酵培养料制备过程中微生物多样性的变化对生产优质的培养料,使食用菌获得高产量尤为重要。本文梳理了食用菌发酵培养料微生物多样性分析的研究方法,简述了各种方法的原理并综述了其在相关研究中的应用,最后总结了不同方法的优缺点,以期为未来选用适宜的方法进行研究及开发复合菌制剂提供参考。

关键词：食用菌发酵培养料微生物多样性

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双孢蘑菇发酵培养料细菌菌群结构及其功能预测

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食用菌学报 2019年第4期26卷 50-56页

作者：隽加香肖婷婷王倩宋晓霞沈新芬高飞陈明杰黄建春上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海市金山区农业技术推广中心上海201599 江苏裕灌现代农业科技有限公司江苏灌南222500

为了解双孢蘑菇(Agaricus bisporus)培养料不同发酵阶段的细菌菌群组成,并对细菌菌群功能进行预测,采用近红外分析仪分别测定3个发酵阶段双孢蘑菇培养料中纤维素、半纤维素和木质素的含量,同时选用细菌16S rRNA基因V3-V4特异性引物分别... 详细信息

为了解双孢蘑菇(Agaricus bisporus)培养料不同发酵阶段的细菌菌群组成,并对细菌菌群功能进行预测,采用近红外分析仪分别测定3个发酵阶段双孢蘑菇培养料中纤维素、半纤维素和木质素的含量,同时选用细菌16S rRNA基因V3-V4特异性引物分别对3个发酵阶段的培养料进行PCR扩增、建库和测序。采用QIIME软件对获得的序列进行归并和可操作分类单元(operational taxonomic unit,OTU)划分,分别对每个样本计算Chao1、ACE、Shannon和Simpson指数,并获取各样本在门、属分类水平上的组成和丰度分布表,使用R软件计算各样本共有OTU的数量,绘制样本在门、属分类水平的组成柱状图,通过Galaxy在线平台,提交属水平的相对丰度矩阵进行LEfSe分析,对未加权的UniFrac距离矩阵进行非度量多维尺度(nonmetric multidimensional scaling,NMDS)分析,通过PICRUSt软件将基因测序数据与代谢功能已知的微生物参考基因组数据库相比,预测细菌菌群代谢功能。结果表明:随着发酵次数的增加纤维素和半纤维素含量均呈下降趋势,而木质素含量二次发酵料高于一次料和三次料;3个阶段发酵培养料共有OTU数量为419个,其中一、二、三次发酵阶段独有的OTU数量分别为420、761和750个;二次料和三次料的细菌群落的丰富度和多样性均高于一次料;3个阶段中丰度高的门为异常球菌-栖热菌门(Deinococcus-Thermus)、绿弯菌门(Chloroflexi)、变形杆菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)和放线菌门(Actinobacteria);在一次料中栖热菌属(Thermus)丰度较高,在二次料中假黄单胞菌属(Pseudoxanthomonas)和高温多孢菌属(Thermopolyspora)丰度较高,在三次料中假黄单胞菌属和螯台球菌属(Chelatococcus)丰度较高;一次料与二、三次料样本之间的细菌群落结构差异较大;二次料与三次料样本之间的细菌群落结构相似度高;3个阶段代谢通路排在前两位的均为氨基酸代谢和碳水化合物代谢。

关键词：双孢蘑菇培养料发酵阶段高通量测序功能预测

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基于全基因组序列的香菇商业菌种SSR遗传多样性分析及多位点指纹图谱构建的研究

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食用菌学报 2014年第2期21卷 1-13页

作者：张丹宋春艳章炉军巫萍鲍大鹏尚晓冬谭琦上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 南京农业大学生命科学学院江苏南京210095

香菇(Lentinula edodes)是世界主要栽培食用菌之一,香菇菌种的准确鉴定是香菇大规模生产和菌种知识产权保护的重要前提。本研究基于香菇全基因组序列开发200对SSR标记用于25份常用香菇栽培菌种的遗传多样性分析和菌种鉴定。结果表明:供... 详细信息

香菇(Lentinula edodes)是世界主要栽培食用菌之一,香菇菌种的准确鉴定是香菇大规模生产和菌种知识产权保护的重要前提。本研究基于香菇全基因组序列开发200对SSR标记用于25份常用香菇栽培菌种的遗传多样性分析和菌种鉴定。结果表明:供试材料的遗传相似性较高,遗传相似系数平均值为0.776,最小值为0.567,最大值为1。基于遗传多样性分析结果,筛选出7对带型清晰且重复性好的SSR标记,并成功构建了11份香菇商业菌种的多位点SSR指纹图谱。这11份菌种分别为:Cr-02、闵丰1号、香菇241-4、森源1号、森源8404、香九、广香51号、华香5号、L952、L9319、L808。

关键词：香菇简单重复序列商业菌种遗传多样性指纹图谱

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猴头菌活性多糖高产菌株的筛选

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食用菌学报 2012年第2期19卷 66-68页

作者：李巧珍唐传红杨焱刘朝贵于海龙吴迪汪雯瀚张劲松上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 西南大学园艺园林学院重庆市蔬菜学重点实验室重庆400715

对10株猴头菌(Hericium erinaceus)菌株的菌丝多糖产量和体外免疫活性进行比较。结果表明:不同的猴头菌菌株发酵所产生的菌丝多糖量及其多糖对刺激巨噬细胞产生NO的产量不同;其中华中猴头(H10)不仅菌丝多糖量高且对巨噬细胞的刺激作用... 详细信息

对10株猴头菌(Hericium erinaceus)菌株的菌丝多糖产量和体外免疫活性进行比较。结果表明:不同的猴头菌菌株发酵所产生的菌丝多糖量及其多糖对刺激巨噬细胞产生NO的产量不同;其中华中猴头(H10)不仅菌丝多糖量高且对巨噬细胞的刺激作用也较强,可作为深层发酵生产猴头菌菌丝多糖的优良菌株。

关键词：猴头菌菌株 ITS序列菌丝多糖巨噬细胞 NO

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大孔吸附树脂联用KB-2微球柱层析法分离纯化虫草素的工艺优化

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食用菌学报 2019年第2期26卷 65-71页

作者：周靖吐尔尼散·吐地张忠张冕刘艳芳周帅王晨光唐庆九上海百信生物科技有限公司国家食用菌工程技术研究中心中试基地上海201403 上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 中国药科大学江苏南京211198

通过比较19种大孔吸附树脂对虫草素的解吸附率并联用KB-2微球柱层析法优选出一种简单快捷分离纯化蛹虫草(Cordyceps militaris)培养基中虫草素的制备工艺。结果表明,经大孔吸附树脂XDA-8D吸附后,再用体积分数30%的乙醇解吸附,虫草素纯... 详细信息

通过比较19种大孔吸附树脂对虫草素的解吸附率并联用KB-2微球柱层析法优选出一种简单快捷分离纯化蛹虫草(Cordyceps militaris)培养基中虫草素的制备工艺。结果表明,经大孔吸附树脂XDA-8D吸附后,再用体积分数30%的乙醇解吸附,虫草素纯度从原料中的0.4%达到了10.53%;联用KB-2微球柱层析法分离虫草素,可将纯度提升至66.94%,其优化后的参数为:上样流速1.0 mL/min,上样浓度0.5 mg/mL,用300 mL(2VB)水和体积分数10%的乙醇450 mL(3VB)除杂,30%乙醇1500 mL(10VB)洗脱得到虫草素。

关键词：蛹虫草大孔树脂微球虫草素

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北冬虫夏草深层发酵高产虫草素工艺的优化

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上海农业学报 2010年第3期26卷 26-30页

作者：刘艳芳唐庆九顾俊杰张劲松杨焱冯娜周帅魏东芝国家食用菌工程技术研究中心农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室 3. 上海市农业遗传育种重点开放实验室 4. 上海市农业科学院食用菌研究所华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室鲁华生物技术研究所

对23个北冬虫夏草菌株发酵液中虫草素的含量进行了测定,发现发酵液中虫草素含量最高的菌株为21号;对该菌株的发酵条件进行优化,获得最适培养基配方为:蔗糖40g/L,蛋白胨15 g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L,KH2PO40.5g/L,K2HPO4·3H2O 0.5g... 详细信息

对23个北冬虫夏草菌株发酵液中虫草素的含量进行了测定,发现发酵液中虫草素含量最高的菌株为21号;对该菌株的发酵条件进行优化,获得最适培养基配方为:蔗糖40g/L,蛋白胨15 g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L,KH2PO40.5g/L,K2HPO4·3H2O 0.5g/L,pH自然;在此培养基中添加0.5 g/L腺嘌呤进行培养,可使发酵液中虫草素含量提高约30%,同时腺嘌呤的添加可以加快虫草素的合成。培养方式的考察结果表明:纯静置培养有利于虫草素的产生和积累,静置培养28 d,所得发酵液中虫草素含量达2.05g/L,比优化前提高了2倍。

关键词：北冬虫夏草虫草素深层发酵培养方式

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斑玉蕈甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因克隆与序列分析

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食用菌学报 2011年第2期18卷 5-9页

作者：张津京陈辉冯志勇陈明杰汪虹农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201405 南京农业大学生命科学学院

甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)是糖酵解和卡尔文循环中的关键酶,本实验室之前的研究发现斑玉蕈菌丝的GAPDH表达随培养基中葡萄糖添加浓度的变化而变化,在此基础上我们首次克隆了斑玉蕈GAPDH的DN... 详细信息

甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)是糖酵解和卡尔文循环中的关键酶,本实验室之前的研究发现斑玉蕈菌丝的GAPDH表达随培养基中葡萄糖添加浓度的变化而变化,在此基础上我们首次克隆了斑玉蕈GAPDH的DNA和cDNA序列,结果斑玉蕈gpd基因长2 724 bp,对比基因组DNA和cDNA序列知其中有7个内含子、8个外显子;其理论分子量为36.15 kD、编码蛋白质含338个氨基酸、等电点(PI)为8.24。

关键词：斑玉蕈甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因克隆序列分析

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蛹虫草抗肿瘤和免疫活性部位的体外筛选

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食用菌学报 2011年第1期18卷 41-45页

作者：杜秀菊张劲松贾薇唐庆九刘艳芳杜秀云聊城大学生命科学学院山东聊城252059 国家食用菌工程技术研究中心农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 东昌府区凤凰办事处山东聊城252000

为筛选蛹虫草(Cordyceps militaris)子实体的抗肿瘤和免疫活性部位,采用系统溶剂法,分别用氯仿、乙酸乙酯、95%的无水乙醇、沸水(100℃)、3%草酸铵和5%NaOH依次提取并计算提取物得率,且测定了沸水提取物、草酸铵提取物、NaOH提取物1和2... 详细信息

为筛选蛹虫草(Cordyceps militaris)子实体的抗肿瘤和免疫活性部位,采用系统溶剂法,分别用氯仿、乙酸乙酯、95%的无水乙醇、沸水(100℃)、3%草酸铵和5%NaOH依次提取并计算提取物得率,且测定了沸水提取物、草酸铵提取物、NaOH提取物1和2的多糖含量。采用体外抗肿瘤模型测定了氯仿提取物、乙酸乙酯提取物和乙醇提取物对肿瘤细胞L1210和SW620的抑制活性;采用体外免疫增殖试验模型测定了沸水提取物、草酸铵提取物和NaOH提取物1和2的免疫活性。结果表明,乙酸乙酯提取物对肿瘤细胞L1210和SW620的抑制效果最好,当乙酸乙酯提取物浓度为200μg/mL时,抑制率分别为(85.2±2.5)%和(67.7±6.3)%;体外免疫活性测定结果表明,草酸铵提取物刺激小鼠脾淋巴细胞后的增殖活性最高,当浓度为500μg/mL时细胞增殖率为(312.0±7.2)%,与阳性对照PHA的细胞增殖率(329.3±3.0)%相当。

关键词：蛹虫草抗肿瘤免疫活性

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