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2011国际灵芝研究学术会议

作者：张劲松贾薇唐传红刘艳芳杨焱唐庆九周帅冯娜汪文瀚吴迪 Werner Reutter 国家食用菌工程技术研究中心南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业科学院食用菌研究所柏林自由大学分子生物学与生物化学研究所

灵芝作为我国长期使用的重要的真菌类中药,在我国已经有大量的研究,已发现其含有不同的活性成分,如三萜和多糖类,具有多种生理活性,如抗肿瘤、降血糖、调节免疫等。然而在我国栽培灵芝的研究方面,还存在生产品种名称混乱、子实体品质控... 详细信息

灵芝作为我国长期使用的重要的真菌类中药,在我国已经有大量的研究,已发现其含有不同的活性成分,如三萜和多糖类,具有多种生理活性,如抗肿瘤、降血糖、调节免疫等。然而在我国栽培灵芝的研究方面,还存在生产品种名称混乱、子实体品质控制难、不同菌株的生物活性成份结构不明确等问题,这些问题的存在已经严重地阻碍了我国灵芝产业的健康发展。

关键词：栽培灵芝生物活性灵芝菌株子实体

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草菇全基因组框架图的构建和序列分析

草菇全基因组框架图的构建和序列分析

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中国菌物学会第五届会员代表大会暨2011年学术年会

作者：鲍大鹏赵国屏谭琦王升跃陈明杰郑华军张劲松朱永强汪虹康慧陈祥林楠冯爱萍国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用专业重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所国家人类基因组南方研究中心

草菇是一种重要的常规栽培种类,其栽培起源于我国,具有悠久的栽培历史,在国际上有"中国菇"之称。草菇味道鲜美,营养丰富,并具有一定的保健作用,在中国的华南地区及东南亚等地区一直很受欢迎。草菇是食用菌中主要的草腐菌,以... 详细信息

草菇是一种重要的常规栽培种类,其栽培起源于我国,具有悠久的栽培历史,在国际上有"中国菇"之称。草菇味道鲜美,营养丰富,并具有一定的保健作用,在中国的华南地区及东南亚等地区一直很受欢迎。草菇是食用菌中主要的草腐菌,以稻草、麦秆、废棉为生长基质。但是草菇的生物学转化率比较低,一般只有20%,远远低于其它食用菌100-150%的生物学转化率。草菇一个特有的生物学性状是在摄氏4度低温下发生自溶,这使得草菇成为唯一不能低温储运的食用菌。这也导致草菇的货架期很短,从而极大地限制了草菇栽培的普及。如何解决这些问题,多年来一直是食用菌遗传育种科研工作者努力研究的目标。由于对草菇的遗传学背景的了解比较薄弱,因而在分子水平上对草菇的分解木质纤维素和低温自溶的机理的研究一直没有重要的突破。近年来,新一代高通量测序技术的出现,显著地提高了基因组测序的速度,并大幅度地降低了测序成本,这为完成真菌类物种的全基因组序列提供了很好的机遇。通过完成草菇的全基因组测序计划,可以在全基因组水平上了解草菇降解木质纤维素的机制。并结合诱导变异型菌株基因组测序,开展其与野生型菌株的比较基因组学分析,有望了解草菇低温自溶分子机理,这些研究成果将为进一步运用基因修饰手段提高草菇分解基质的能力和耐低温的能力奠定坚实的基础。本研究采用Roche公司的454 GS FLX测序技术和Illumina公司的Solexa测序技术分别对草菇的单孢分离菌株进行了从头(de novo)全基因组序列测定,充分利用两种不同特点测序技术获得的结果,完成了草菇野生型全基因组框架图的构建,进行了初步的基因组结构和基因功能的生物信息学分析。用Roche 454 GS FLX测序技术,得到序列总长714,488,913 bp,测序覆盖率为20倍。通过Newbler软件拼装,得到LargeContigs(>2 kb)1,289个,Contig总长度为35.60Mb。采用Illumina solexa测序技术进行了DNA片段配对末端(paired-end)测序,测序长度为2*100bp,得到30,884,166对序列,基因组覆盖率为170倍。应用Velvet软件进行拼装,得到Large Contigs(>2 kb)4,022个,总计大小32.37Mb。运用独立开发的软件,将上述两组数据整合后得到Large Contigs(>2 kb)997个,Contig总长度为36.45Mb。平均Contig长度为40,218 bp,最长的Contig长度为1.04Mb,N50Contig长度为86,492 bp。再通过pair-end和Solexa 3K Matepair测序,插入片段平均大小为2-3k,对上述得到的Contig进行组装得到62个Scaffold。利用四款基因预测软件对62个Scaffold序列进行基因预测,并且以草菇EST序列的分布情况进行过滤,共得到了个基因。,共获得11,084个蛋白编码基因。平均编码序列(CDS)长度为1,532 bp,每个基因平均长度为1,948 bp,每个基因平均含有有6个外显子。通过与swiss-prot,KEGG的真核基因和蛋白数据库等进行比对,对预测基因进行了功能注释,其中有5,516个基因有明确的功能注释信息。通过KOG和GO分类,可以把4,821个基因分到25个功能类别中(KOG),1,462个基因可以进行GO分类。随后,通过KEGG代谢数据库,构建了草菇的代谢通路,发现了糖酵解、三羧酸循环等完整代谢通路。本研究在国际上首次完成了草菇的全基因组框架图,确定出草菇的基因组为36.45Mb,这远远大于通过脉冲电泳技术估算出的25Mb的基因组长度。本研究采用454 GS FLX和Solex GA两种新一代高通量测序技术相结合的方式,充分利用两种技术的不同优势,以较低的成本,高质量地完成草菇全基因组测序和框架图的构建。本研究所尝试的整合测序技术将会促进食用菌全基因组学和比较基因组学研究的广泛开展,从而能够提供全面和深入的食用菌遗传学知识,快速推动食用菌分子遗传学和分子育种学的进步。

关键词：草菇全基因组框架图

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超临界CO2萃取法与醇提法萃取灵芝三萜的比较

超临界CO2萃取法与醇提法萃取灵芝三萜的比较

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2011国际灵芝研究学术会议

作者：章慧张劲松贾薇冯娜唐传红杨焱唐庆九刘艳芳潘迎捷国家食用菌工程技术研究中心农业部食用菌资源利用重点开放实验室上海市农业遗传育种重点实验室上海市农业科学院食用菌所上海市农业科学院天然药用资源研究开发中心上海海洋大学

目的:灵芝三萜类化合物是灵芝中公认的抗肿瘤有效成分,但由于其含量低且不易分离纯化,给三萜的深入研究和临床应用带来很大的限制。本文运用超临界CO2萃取法(SFE-CO2)和醇提法萃取灵芝子实体中的三萜,比较了两种萃取方法的差异,为合理... 详细信息

目的:灵芝三萜类化合物是灵芝中公认的抗肿瘤有效成分,但由于其含量低且不易分离纯化,给三萜的深入研究和临床应用带来很大的限制。本文运用超临界CO2萃取法(SFE-CO2)和醇提法萃取灵芝子实体中的三萜,比较了两种萃取方法的差异,为合理高效的应用灵芝三萜提供依据。

关键词：超临界CO2萃取醇提灵芝三萜 HPLC 抗肿瘤

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人工控制条件下的灰树花菌株筛选

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食用菌学报 2010年第3期17卷 25-28页

作者：张美彦尚晓冬郭倩王瑞娟李玉谭琦国家食用菌工程技术研究中心农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室上海市农业遗传育种重点实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201106

对收集到的36个灰树花(Grifola frondosa)菌株在人工控制的环境条件下进行品比试验,为工厂化生产选择表现优良的菌株。共进行4轮筛选,从出菇正常的15个菌株中选择4个表现良好的菌株进行扩大栽培,对其稳定性进行研究。筛选出原基形成率... 详细信息

对收集到的36个灰树花(Grifola frondosa)菌株在人工控制的环境条件下进行品比试验,为工厂化生产选择表现优良的菌株。共进行4轮筛选,从出菇正常的15个菌株中选择4个表现良好的菌株进行扩大栽培,对其稳定性进行研究。筛选出原基形成率高、抗逆性好的2个来自庆元的菌株(灰M良和灰M云)用于人工控制条件下生产。

关键词：灰树花菌株筛选人工栽培

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灰树花多糖GFP75-2-2B的分离及其对刺激巨噬细胞释放NO的影响

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食用菌学报 2010年第4期17卷 48-51页

作者：乔彦茹罗永煌周帅杨焱贾薇唐庆九刘艳芳张劲松周昌艳西南大学药学院重庆400716 国家食用菌工程技术研究中心农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室上海市农业遗传育种重点实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201106

利用DEAE-Sepharose Fast Flow离子柱层析和Sephacryl凝胶柱层析对灰树花(Grifola frondosa)子实体水提醇沉粗多糖进行分离纯化,对分离纯化到的一种多糖GFP75-2-2B进行了分析。紫外光谱鉴定结果表明,GFP75-2-2B不含蛋白质、核酸和酚类成... 详细信息

利用DEAE-Sepharose Fast Flow离子柱层析和Sephacryl凝胶柱层析对灰树花(Grifola frondosa)子实体水提醇沉粗多糖进行分离纯化,对分离纯化到的一种多糖GFP75-2-2B进行了分析。紫外光谱鉴定结果表明,GFP75-2-2B不含蛋白质、核酸和酚类成分;离子色谱分析表明其单糖组成为岩藻糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖,摩尔比为1.0∶1.3∶3.6∶4.0∶4.5。GFP75-2-2B对巨噬细胞株RAW264.7进行体外免疫活性的研究结果表明,GFP75-2-2B有明显刺激巨噬细胞分泌NO的活性。

关键词：灰树花多糖分离纯化巨噬细胞 NO

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草菇全基因组框架图

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食用菌学报 2010年第1期17卷 1-5页

作者：鲍大鹏赵国屏谭琦王升跃陈明杰郑华军张劲松朱永强汪虹康慧陈祥林楠冯爱萍国家食用菌工程技术研究中心农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201106 国家人类基因组南方研究中心上海201203

采用Roche 454 GS FLX测序技术和Solexa测序技术相结合,进行了草菇(Volvariella volvacea)全基因组的测序,最终获得了长度为35.67Mb的草菇全基因组序列。通过生物信息学预测,获得了11097个蛋白编码基因,其中5516个基因有明确的功能注释... 详细信息

采用Roche 454 GS FLX测序技术和Solexa测序技术相结合,进行了草菇(Volvariella volvacea)全基因组的测序,最终获得了长度为35.67Mb的草菇全基因组序列。通过生物信息学预测,获得了11097个蛋白编码基因,其中5516个基因有明确的功能注释信息。这是在国际上首次报道的草菇基因组框架图。

关键词：草菇全基因组框架图

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蛹虫草及其培养基中主要核苷类成分的分析比较

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食品科学 2010年第4期31卷 139-142页

作者：刘艳芳唐庆九杨焱张劲松郝瑞霞唐传红魏东芝史国平华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室鲁华生物技术研究所上海200237 农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室上海市食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201106

采用高效液相色谱法测定虫草中的核苷类成分,优化后的色谱条件为YMC-Polyamine柱(250mm×4.6mm,5μm);采用梯度洗脱,流动相:乙腈-水(V/V):0～15min为90:10,15～20min为86.5:13.5,20～30min为75:25,30～35min为70:30;流速:1mL/min;柱温:30℃;检测波长:259nm;进样量:10μL。结果表明:胸腺嘧啶、虫草素、尿嘧啶、腺苷、腺嘌呤、尿苷、鸟嘌呤、次黄嘌呤均能得到较好分离,该方法稳定性好、精密度高、重现性好,适用于虫草中的核苷类成分的分析。经分析发现,蛹虫草子实体核苷类物质组成大致相似,但含量差异非常显著,同时发现蛹虫草培养基残基及固体发酵产物中虫草素含量较高,其他核苷类成分很少,因此认定蛹虫草培养基残基及固体发酵产物是非常优良的分离纯化虫草素的原料。

关键词：蛹虫草高效液相色谱核苷虫草素固体发酵

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北冬虫夏草深层发酵高产虫草素工艺的优化

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上海农业学报 2010年第3期26卷 26-30页

作者：刘艳芳唐庆九顾俊杰张劲松杨焱冯娜周帅魏东芝国家食用菌工程技术研究中心农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室 3. 上海市农业遗传育种重点开放实验室 4. 上海市农业科学院食用菌研究所华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室鲁华生物技术研究所

对23个北冬虫夏草菌株发酵液中虫草素的含量进行了测定,发现发酵液中虫草素含量最高的菌株为21号;对该菌株的发酵条件进行优化,获得最适培养基配方为:蔗糖40g/L,蛋白胨15 g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L,KH2PO40.5g/L,K2HPO4·3H2O 0.5g... 详细信息

对23个北冬虫夏草菌株发酵液中虫草素的含量进行了测定,发现发酵液中虫草素含量最高的菌株为21号;对该菌株的发酵条件进行优化,获得最适培养基配方为:蔗糖40g/L,蛋白胨15 g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L,KH2PO40.5g/L,K2HPO4·3H2O 0.5g/L,pH自然;在此培养基中添加0.5 g/L腺嘌呤进行培养,可使发酵液中虫草素含量提高约30%,同时腺嘌呤的添加可以加快虫草素的合成。培养方式的考察结果表明:纯静置培养有利于虫草素的产生和积累,静置培养28 d,所得发酵液中虫草素含量达2.05g/L,比优化前提高了2倍。

关键词：北冬虫夏草虫草素深层发酵培养方式

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毛头鬼伞子实体含氮化合物的分离纯化及结构鉴定

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食用菌学报 2010年第2期17卷 85-88页

作者：冯娜张劲松唐庆九杨焱贾薇钟建江国家食用菌工程技术研究中心农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院天然药用资源研究与开发中心上海市农业科学院食用菌研究所上海201106 上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢教育部重点实验室上海200240

采用色谱柱层析法,首次从毛头鬼伞(Coprinus comatus)子实体的醇提物中分离得到8个含氮化合物,通过波谱分析,分别鉴定为尿嘧啶(uracil)、黄嘌呤(xanthine)、光色素(lumichrome)、烟酰胺(nicotinamide)、甲酰肼(formylhydrazine)、烟酸(n... 详细信息

关键词：毛头鬼伞子实体含氮化合物

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食用菌科技论文写作中常见的问题和对策

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上海农业科技 2010年第2期 9-10页

作者：王瑞霞于荣利朱丽娜国家食用菌工程技术研究中心农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室上海市农业遗传育种重点实验室上海市农业科学院食用菌研究所<食用菌学报>编辑部上海201106

总结了食用菌科技论文写作中常见的问题,并提出相关对策,以期为食用菌科技工作者的论文写作提供帮助。

关键词：食用菌科技论文问题对策

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