检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2013年第9期33卷 1112-1117页

作者：秦洁李屹刘永琦王倩舍雅莉骆亚莉甘肃中医学院系统生物学与中医药转化研究所兰州大学校医院兰州大学基础医学院遗传学研究所甘肃中医学院省中药药理与毒理学重点实验室中西医结合基础室甘肃中医学院敦煌医学与转化省部共建教育部重点实验室甘肃兰州730020

目的探讨人骨髓间充质干细胞(HMSC-bm)在肺腺癌微环境中遗传稳定性的变化。方法通过6孔板结合Transwell小室建立HMSC-bm和肺腺癌A549细胞的共培养体系,倒置相差显微镜下观察细胞的形态;MTT法检测细胞的增殖能力;常规染色体及G显带核型... 详细信息

目的探讨人骨髓间充质干细胞(HMSC-bm)在肺腺癌微环境中遗传稳定性的变化。方法通过6孔板结合Transwell小室建立HMSC-bm和肺腺癌A549细胞的共培养体系,倒置相差显微镜下观察细胞的形态;MTT法检测细胞的增殖能力;常规染色体及G显带核型分析细胞的染色体;Western blot检测组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)的表达。以单独培养的HMSC-bm,A549作为对照组。结果共培养组细胞胞核大而深染,可见病理性核分裂象,HMSC-bm组无明显变化;细胞增殖曲线呈S型,共培养组细胞于第4天开始增殖速率快于HMSC-bm组;共培养组染色体数目为亚三倍体、三倍体,有明显的染色体异常;共培养组细胞HDAC4表达明显高于HMSC-bm组(P<0.01)。结论肺腺癌微环境可改变HMSC-bm的增殖速率和其遗传稳定性。

关键词： HMSC bm 肺腺癌微环境遗传稳定性染色体

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结核分枝杆菌生物膜形成相关基因的筛选与鉴定

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中国生物工程杂志 2013年第4期33卷 15-21页

作者：刘霞郭庆龙王若珺王洪海裴秀英张雪莲复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海200433 宁夏医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室医学科学技术研究中心银川750004

目的:通过菌落表型变化并结合生物膜生长缺陷筛选并鉴定可能与生物膜形成相关基因。方法:利用带有Himar1转座子的MycoMarT7转座子系统建立结核分枝杆菌H37Ra随机插入突变库;筛选细菌表面结构发生变化和生物膜形成有变化的突变菌株;运用... 详细信息

目的:通过菌落表型变化并结合生物膜生长缺陷筛选并鉴定可能与生物膜形成相关基因。方法:利用带有Himar1转座子的MycoMarT7转座子系统建立结核分枝杆菌H37Ra随机插入突变库;筛选细菌表面结构发生变化和生物膜形成有变化的突变菌株;运用T-A克隆法并结合抗性标记挽救法获得突变菌株的随机插入基因侧翼序列从而鉴定突变基因,并运用生物信息学方法分析预测突变基因的功能。结果:通过菌落形态变化及生物膜缺陷表型筛选出39株突变株,成功鉴定其中16株突变株,涉及16个基因发生突变,其中5个与脂质代谢相关,4个与细胞壁合成相关、2个与中间代谢和呼吸作用相关、1个调节蛋白相关基因,1个毒力相关基因,1个PE/PPE家族基因,还有2个功能未知基因。结合生物膜形成缺陷分析,其中8个基因可能与H37Ra体外生物膜的形成相关。结论:成功构建库容量约为1×104结核分枝杆菌转座子随机插入突变文库,筛选获得生物膜生长受损突变株及可能与结核分枝杆菌生物膜形成相关的基因信息,为后续深入开展生物膜形成机制研究奠定基础。

关键词：结核分枝杆菌 MycoMarT7噬菌体转座子菌落形态生物膜

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兰州回族人群STR基因座多态性及遗传关系

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解剖学杂志 2013年第6期36卷 1098-1101,1125页

作者：孙红兵杨鑫哈飞张子龙谢小冬甘肃省证据科学技术研究与应用重点实验室兰州730070 兰州市公安局刑事科学技术研究所兰州730030 兰州大学基础医学院遗传学研究所兰州730000

目的：通过研究兰州地区500名回族无关个体D8S1179等15个基因座的遗传频率，同时应用其他9组中国人群的STR基因座数据进行分析，了解各人群的群体遗传结构及遗传关系。方法：对500名兰州回族个体血样DNA进行15个SIR基因座的复合扩增并... 详细信息

目的：通过研究兰州地区500名回族无关个体D8S1179等15个基因座的遗传频率，同时应用其他9组中国人群的STR基因座数据进行分析，了解各人群的群体遗传结构及遗传关系。方法：对500名兰州回族个体血样DNA进行15个SIR基因座的复合扩增并检测；分析兰州回族等10组人群的遗传亲源系数并构建群体系统发生树。结果：兰州回族15个STR基因座均符合Hardy-Weinberg平衡定律，联合应用此15个S1R基因座的累计个体识别能力（TDP）达0．999999999999999986，累计非父排除率（TPE）达0．999995813，符合个人识别及亲权鉴定的统计学要求；遗传关系分析显示兰州回族与广西回族的遗传关系最接近，并与青海回族、新疆维吾尔族、甘肃裕固族、青海撒拉族列为1个聚类群，兰州回族与兰州汉族较其他8个民族遗传关系最远。结论：兰州回族STR基因座遗传多态性数据为涉及回族人群的司法鉴定工作提供了基础数据，同时这些数据的获得将有助于进行民族、起源、迁徙、基因交流等群体遗传关系的研究。

关键词：兰州回族 STR基因座多态性遗传关系

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东北地区一遗传性白内障家系的临床遗传学及基因定位研究

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国际眼科杂志 2013年第6期13卷 1212-1214页

作者：张天晓马立威赵江月张学张劲松中国医科大学附属第四医院眼科中国医科大学眼科医院辽宁省晶状体学重点实验室中国辽宁省沈阳市110001 中国医学科学院基础医学研究所医学遗传学系中国北京市100005

目的:分析一先天性核型白内障家系的遗传方式及致病基因所在位置。方法:收集一个3代遗传性白内障家系成员的临床资料;提取家系成员外周血DNA,选取62个态性微卫星标记进行连锁分析。应用LINKAGE软件(version 5.2)中的MLINK程序计算两点连... 详细信息

目的:分析一先天性核型白内障家系的遗传方式及致病基因所在位置。方法:收集一个3代遗传性白内障家系成员的临床资料;提取家系成员外周血DNA,选取62个态性微卫星标记进行连锁分析。应用LINKAGE软件(version 5.2)中的MLINK程序计算两点连锁LOD值,并人工构建家系成员的单体型。结果:确定该家系为一常染色体显性遗传性白内障大家系,在微卫星标记D22S689可获得最大LOD值2.71(θ=0时),单体型提示该家系表型可能与染色体22q11.2-12.1区域连锁。该区域含有CRYBB1,CRYBB2,CRYBB3,CRYBA44个候选基因。结论:本研究先天性核型白内障家系符合常染色体显性遗传规律,其致病基因定位于22q11.2-12.1区域。

关键词：常染色体显性遗传性白内障连锁分析基因

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日本血吸虫核糖核酸酶T2的表达及其功能分析

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中国病原生物学杂志 2013年第12期8卷 1082-1088,1092页

作者：柯雪丹余传信宋丽君菊池三惠子平山谦二王玠殷旭仁金一沈双姚媛高玒高琪苏州大学基础医学系寄生虫学教研室江苏苏州215021 江苏省血吸虫病防治研究所卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室日本长崎大学热带医学研究所分子免疫遗传室

目的制备重组日本血吸虫核糖核酸酶T2蛋白(rSj RNase T2),并分析其生物学功能。方法根据编码RNase T2开放阅读的基因序列设计、合成一对5′端带有酶切位点的引物。采用PCR方法从质粒CP1412/PEU-GST中扩增编码RNase T2蛋白成熟肽的基因片... 详细信息

目的制备重组日本血吸虫核糖核酸酶T2蛋白(rSj RNase T2),并分析其生物学功能。方法根据编码RNase T2开放阅读的基因序列设计、合成一对5′端带有酶切位点的引物。采用PCR方法从质粒CP1412/PEU-GST中扩增编码RNase T2蛋白成熟肽的基因片段,亚克隆到表达载体pET28a(+)中,构建重组表达质粒Sj RNase T2-pET28a。将重组表达质粒转化到*** BL21中,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,用镍螯合亲和层析胶在变性条件下纯化rSj RNase T2蛋白。纯化蛋白通过尿素浓度梯度透析的方法进行复性,制备可溶性rSj RNase T2。以酵母RNA为底物进行消化,采用琼脂糖凝胶电泳的方法检测rSj RNase T2酶活性。用纯化的rSj RNase T2免疫小鼠,采用酶联免疫法(ELISA)检测小鼠血清特异抗体水平,观察其抗原性;采用检测Western blot抗rSj RNase T2抗体IgG与成虫可溶性虫抗原、成虫外分泌抗原、虫卵可溶性抗原和虫卵外分泌抗原的反应性,并观察Sj RNase T2在虫体中的分布。以rSj RNase T2刺激巨噬细胞RAW264.7,通过流式分析观察RAW264.7细胞表面标志物CD16/32、CD206表达水平的变化,采用RT-PCR检测RAW264.7细胞内诱导型一氧化氮合酶与精氨酸酶基因mRNA的表达水平,采用ELISA检测RAW264.7细胞培养上清液中IL-12及IL-10水平的变化,以观察Sj RNase T2的免疫调节功能。结果重组表达质粒Sj RNase T2-pET28a构建成功,经IPTG诱导,能表达重组Sj RNase T2蛋白。该蛋白以包涵体形式存在,经过复性能获得部分可溶性蛋白。rSj RNase T2具有酶活性,能够水解酵母RNA。ELISA检测rSj RNase T2免疫小鼠血清特异性抗体滴度为1︰200 000,该抗血清能识别来源于血吸虫虫卵及虫卵外分泌抗原中的天然RNase T2。rSj RNase T2可诱导巨噬细胞向M2型方向转化,表达高水平的IL-10、精氨酸酶及CD206表面分子。结论 rSj RNase T2表达成功。该蛋白具有天然的酶学特性和抗原性,能调节巨噬细胞向M2型方向分化。

关键词：血吸虫,日本核糖核酸酶T2 表达功能分析免疫调节

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冠状动脉粥样硬化性心脏病8号染色体基因扫描

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遗传 2012年第8期34卷 1043-1049页

作者：蒋婷婷陈星李婷婷张凤国谢毅张建宁彭洁刘天骄陈刚郭媛山东大学齐鲁医院心内科教育部和卫生部心血管重构与功能研究重点实验室济南250012 山东省医学科学院基础医学研究所医学遗传学与基因工程重点实验室济南250062 山东省胸科医院呼吸内科济南250013 山东大学齐鲁医院ICU 济南250012

冠状动脉粥样硬化性心脏病(Coronary heart disease,CHD)的全基因组扫描研究在世界各大研究中心展开,关于CHD易感基因位点的报道多集中于1号、3号、9号、11号、16号染色体,对8号染色体的研究报道甚少。在汉族人群中未见关于CHD的8号染... 详细信息

冠状动脉粥样硬化性心脏病(Coronary heart disease,CHD)的全基因组扫描研究在世界各大研究中心展开,关于CHD易感基因位点的报道多集中于1号、3号、9号、11号、16号染色体,对8号染色体的研究报道甚少。在汉族人群中未见关于CHD的8号染色体的基因扫描研究。文章旨在查找汉族人群中CHD易感基因位点,选取8号染色体上间隔10 cM遗传距离的13个微卫星遗传位点,采用DNA混合池的方法对CHD患者组156例和正常对照组1 000例DNA样本进行基因扫描,经卡方检验分析患者组和对照组每个位点的等位基因频率差异。发现在患者组与对照组中D8S264位点(8p23.3-p23.2)及D8S285位点(8q12.1)的等位基因频率差异有统计学意义(P<0.05)。汉族人群中CHD患者8号染色体上8p23.3-p23.2、8q12.1区域可能存在CHD易感基因,需要进行候选基因突变筛查。

关键词：冠心病 8号染色体 DNA混合池

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结核分枝杆菌最低抑菌浓度测定方法及临界值设置研究进展

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上海交通大学学报（医学版） 2012年第5期32卷 661-666页

作者：张朝宝王洪海张舒林上海交通大学基础医学院病原生物学教研室上海200025 武汉工业学院生物与制药工程学院武汉430023 复旦大学遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海200433

结核病迄今仍是全球单一病原体引起死亡人数最多的传染性疾病。耐药及耐多药的产生是结核病流行和广泛传播的重要原因之一。建立规范、有效的结核分枝杆菌药敏最低抑菌浓度(MIC)的检测方法及设置有效的临界值对于结核病个体化治疗、快... 详细信息

结核病迄今仍是全球单一病原体引起死亡人数最多的传染性疾病。耐药及耐多药的产生是结核病流行和广泛传播的重要原因之一。建立规范、有效的结核分枝杆菌药敏最低抑菌浓度(MIC)的检测方法及设置有效的临界值对于结核病个体化治疗、快速耐药检测方法的研究以及新型抗结核药物筛选等领域具有重要意义,也是控制耐药结核病产生和传播的关键。该文就结核分枝杆菌MIC测定方法及临界值设置等方面的研究进展进行综述。

关键词：结核分枝杆菌最低抑菌浓度临界值

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我国诺里病家系NDP基因的突变分析

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中华眼科杂志 2012年第9期48卷 815-818页

作者：张天晓赵秀丽华芮张劲松张学中国医科大学附属第四医院眼科中心中国医科大学眼科医院辽宁省晶状体学重点实验室沈阳110005 中国医学科学院基础医学研究所医学遗传学系中国医科大学医学基因组学教研室

目的对我国诺里病一家系进行致病基因突变的鉴定，确定其家系中是否存在ⅣDP基因突变。方法基因家系研究。发现一个3代均患有诺里病的家系，共13人，患者3人，现存患者仅先证者1人，为20月龄男孩。根据诺里病家族史、临床体征及眼科B超... 详细信息

目的对我国诺里病一家系进行致病基因突变的鉴定，确定其家系中是否存在ⅣDP基因突变。方法基因家系研究。发现一个3代均患有诺里病的家系，共13人，患者3人，现存患者仅先证者1人，为20月龄男孩。根据诺里病家族史、临床体征及眼科B超检查对患者进行临床诊断；采集该家系成员外周血标本，常规提取基因组DNA；设计并合成3对特异性引物，通过PCR扩增NDP基因的外显子及外显子与内含子交界区，PCR产物直接测序；通过PCR产物限制性内切酶分析和基因型分析对家系所有13名成员进行突变鉴定。结果基因测序结果显示先证者及其母亲均具有NDP基因突变C．220C〉T（***74Cys），且先证者为该突变的半合子，其母为该突变的携带者；NDP基因突变鉴定表明家系中另外4个表型正常的个体（Ⅲ3、Ⅳ4、Ⅲ5和Ⅱ2）均为该突变的携带者。结论我国诺里病一家系中发现存在NDP错义突变C．220C〉T。

关键词：盲神经系统疾病痉挛婴儿眼蛋白质类神经组织蛋白质类突变

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ATP依赖的人Lon蛋白酶的表达、纯化及其活性鉴定

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中国细胞生物学学报 2012年第9期34卷 899-905页

作者：姚蔚夏雷刘永章黎真王璐吕斌温州医学院生物物理研究所温州325035 温州医学院检验医学与生命科学学院生物系温州325035 温州医学院Attardi线粒体生物医学研究院温州325035 浙江省医学遗传学重点实验室温州325035

ATP依赖的人Lon蛋白酶是一种同质寡聚、环状的蛋白酶,主要位于细胞线粒体基质中。许多研究表明,Lon蛋白酶对于维护细胞的内环境稳定起着重要作用,并参与线粒体蛋白质量控制和代谢调控。将pPROEX1 His6-Lon重组质粒在Escherichia coli Ro... 详细信息

ATP依赖的人Lon蛋白酶是一种同质寡聚、环状的蛋白酶,主要位于细胞线粒体基质中。许多研究表明,Lon蛋白酶对于维护细胞的内环境稳定起着重要作用,并参与线粒体蛋白质量控制和代谢调控。将pPROEX1 His6-Lon重组质粒在Escherichia coli Rosetta 2菌株中诱导表达用Ni2+柱亲和层析法纯化,获得纯度较高的目的蛋白。经纯化后,Lon蛋白酶的比酶活达到0.17 U/mg。通过多肽底物Rhodamine 110、bis-(CBZ-L-alanyl-L-alanine amide)[(Z-AA)2 Rh110]的降解检测显示,Lon蛋白酶具有肽酶活性,并被ATP所刺激。Casein和线粒体转录因子A降解实验表明,纯化的Lon蛋白酶具有蛋白水解活性,而且蛋白水解活性依赖于ATP。

关键词：线粒体 Lon蛋白酶蛋白纯化蛋白酶活性

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与耳聋相关的线粒体12S rRNA突变

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中国生物化学与分子生物学报 2012年第4期28卷 316-325页

作者：张婷曾爱平郑静管敏鑫温州医学院Attardi线粒体生物医学研究院和浙江省医学遗传学重点实验室浙江温州325035 温岭市第一人民医院检验科暨温州医学院附属温岭医院检验科浙江温岭317500 浙江大学生命科学学院遗传学研究所浙江杭州310058

线粒体DNA突变是引起听力损伤的重要原因之一.其中,线粒体12S rRNA基因突变与综合征型耳聋和非综合征型耳聋相关.导致综合征型耳聋的线粒体DNA突变多为异质性,然而对于非综合征型耳聋突变则多以同质性或高度异质性存在,说明这种分子致... 详细信息

线粒体DNA突变是引起听力损伤的重要原因之一.其中,线粒体12S rRNA基因突变与综合征型耳聋和非综合征型耳聋相关.导致综合征型耳聋的线粒体DNA突变多为异质性,然而对于非综合征型耳聋突变则多以同质性或高度异质性存在,说明这种分子致病性需要较高的阈值.位于12S rRNA解码区的A1555G和C1494T突变是造成氨基糖甙类抗生素耳毒性和非综合征型耳聋常见的分子机制.这些突变可能造成12S rRNA二级结构的改变,影响线粒体蛋白质的合成,降低细胞内ATP的产生,由此引起的线粒体功能障碍导致耳聋.但是多数基因突变的致病机制还仅处于推测阶段.其它修饰因子如氨基糖甙类抗生素、线粒体单体型、核修饰基因参与了线粒体12SrRNA基因A1555G和C1494T突变相关的耳聋表型表达.

关键词：线粒体12S rRNA 突变耳聋修饰因子

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