检索结果-内蒙古大学图书馆

HSV-1 VP22及microdystrophin基因融合表达重组质粒的构建及其生物学特性的初步研究

中华神经医学杂志 2009年第4期8卷 325-330页

作者：熊符张成陈松林郑卉肖少波潘永飞于美娟冯善伟卢锡林南方医科大学医学遗传学教研室广州510515 中山大学附属第一医院神经内科广州510080 广州医学院第二附属医院神经科学研究所广州510260 华中农业大学农业微生物国家重点实验室武汉430070

目的构建人单纯疱疹病毒1型（HSV-1）病毒蛋白22（VP22）及microdystrophin基因融合表达重组质粒，体外研究其表达及HSV-1 VP22介导的蛋白转导特性，为进一步利用此重组质粒治疗Duchenne型肌营养不良症（DMD）奠定基础。方法从质粒pSINr... 详细信息

目的构建人单纯疱疹病毒1型（HSV-1）病毒蛋白22（VP22）及microdystrophin基因融合表达重组质粒，体外研究其表达及HSV-1 VP22介导的蛋白转导特性，为进一步利用此重组质粒治疗Duchenne型肌营养不良症（DMD）奠定基础。方法从质粒pSINrep5-VP22中PCR扩增HSV-1 VP22全长基因，然后克隆至真核表达载体pAVX1中，构建重组质粒pAVP22；再用NotⅠ酶切含microdystrophin基因的pBSK-MICRO质粒，获得microdystrophin基因，片段回收后定向插入质粒pAVP22中，获得重组质粒pAVP22-MICDYS；然后将重组质粒pAVP2-MICDYS转染至小鼠成纤维细胞3T3细胞，通过RT-PCR、Western blot及间接免疫荧光检测microdystrophin基因的转录及蛋白表达；最后收集转染后3T3细胞上清。感染人间充质干细胞（MSCs），检测重组蛋白在人MSCs中的表达情况来分析HSV-1 VP22是否可以介导VP22-microdystrophin融合蛋白的转导。结果成功构建了含有HSV-1 VP22和microdystrophin基因的重组质粒，并在体外得到了很好表达；同时也证实HSV-1 VP22提高了microdystrophin基因在3T3细胞中的表达效率。并可介导VP22-microdystrophin蛋白从3T3细胞到人MSCs间的转导。结论该重组质粒的构建及体外成功表达和蛋白转导特性的确定为下一步用该重组质粒进行DMD疾病治疗研究奠定了基础。

关键词： Microdystrophin基因单纯疱疹病毒1型病毒蛋白22 Ducherme型肌营养不良症蛋白转导

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苯接触者精子质量及遗传突变检测的初步结果

苯接触者精子质量及遗传突变检测的初步结果

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东北三省及内蒙古地区遗传学研究进展学术研讨会

作者：由田闫晓杰李岭中国医科大学医学基础医学院医学遗传学教研室中国医科大学附属盛京医院妇产科/辽宁省出生缺陷产前诊断中心

随着分子生物学的快速发展,对于精子质量的观察正在从细胞形态学(如精液密度、活率、形态等)向分子机制转变。包括染色体畸变在内的生殖细胞遗传突变是造成精子质量下降的重要原因。近年来,流行病调查发现,包括鞋厂工人在内的苯类化学... 详细信息

随着分子生物学的快速发展,对于精子质量的观察正在从细胞形态学(如精液密度、活率、形态等)向分子机制转变。包括染色体畸变在内的生殖细胞遗传突变是造成精子质量下降的重要原因。近年来,流行病调查发现,包括鞋厂工人在内的苯类化学物品接触者,无论男女均具有较高的早期流产及畸胎发生率。

关键词：苯精子遗传突变回文序列染色体易位

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分子检测Klippel-Trenaunay综合征一例

分子检测Klippel-Trenaunay综合征一例

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东北三省及内蒙古地区遗传学研究进展学术研讨会

作者：吕远李萍萍李岭中国医科大学医学基础医学院医学遗传学教研室中国医科大学附属盛京医院妇产科/辽宁省出生缺陷产前诊断中心

Klippel-Trenaunay综合征(KTS)是一种先天性血管疾病,病因尚未明确。1900年,由法国医生Klippel和Trenaunay首先报道。该病好发于儿童和青少年,且症状逐渐加重而影响患者生活质量,死亡率约为1%。临床上,该病主要表现为葡萄酒色痣、静脉... 详细信息

Klippel-Trenaunay综合征(KTS)是一种先天性血管疾病,病因尚未明确。1900年,由法国医生Klippel和Trenaunay首先报道。该病好发于儿童和青少年,且症状逐渐加重而影响患者生活质量,死亡率约为1%。临床上,该病主要表现为葡萄酒色痣、静脉曲张、患肢骨与软组织肥大三联征。Sturge-Weber综合征(SWS)和Parkes-Weber综合征(PWS)具有与之相似的表现,但SWS患者常见头部血管畸形且累及神经,不会出现显著的肢体肥大;PWS患者则具有动静脉瘘,很少累及淋巴系统,皮肤红斑颜色比KTS深。根据文献报道,上述综合征中的任意两种均可能同时出现于同一患者中。近年来,研究者已在KTS患者中发现了多种染色体及基因改变,具体包括t(5;11)(q13.3;p15.1)、t(8;14)(q22.3;q13)、嵌合型r(18)以及存在争议的AGGF1基因E133K多态等。

关键词： Klippel-Trenaunay综合征 AGGF1 Sturge-Weber综合征 Parkes-Weber综合征

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葫芦素B在体内外对乳腺癌细胞的生长抑制作用

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现代肿瘤医学 2009年第1期17卷 16-19页

作者：张美侠张洪亮孙春艳刘亭彦杨晓临李岭邓意辉中国医科大学药学院临床药理学教研室辽宁沈阳110001 杭州师范大学临床医学院耳鼻喉科浙江杭州310015 中国医科大学医学遗传学教研室辽宁沈阳110001 沈阳药科大学药剂学教研室辽宁沈阳110015

目的:体内外观察葫芦素B(cucurbitacin B)对人乳腺癌细胞系MCF-7的增殖抑制和诱导凋亡作用,为临床应用提供依据。方法:用浓度分别为0.001、0.01、0.1、1、10以及100μmol/L的葫芦素B处理MCF-7细胞,24、48和72 h后用MTT法检测细胞增殖。... 详细信息

目的:体内外观察葫芦素B(cucurbitacin B)对人乳腺癌细胞系MCF-7的增殖抑制和诱导凋亡作用,为临床应用提供依据。方法:用浓度分别为0.001、0.01、0.1、1、10以及100μmol/L的葫芦素B处理MCF-7细胞,24、48和72 h后用MTT法检测细胞增殖。用0.1和10μmol/L的葫芦素B处理MCF-7细胞24 h,之后用流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡率,并用倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞凋亡。建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型,观察葫芦素B的体内抑瘤作用。结果:MTT结果显示葫芦素B对MCF-7细胞的增殖抑制作用具有明显的剂量和时间依赖性。流式细胞仪检测提示,随着葫芦素B浓度增高,处于S期和G2/M期细胞的比例逐渐升高,同时伴随G0/G1期细胞的减少以及细胞凋亡率的逐渐升高。统计学分析提示,各实验组之间以及实验组与对照组之间均有显著差异(P<0.05)。荧光显微镜显示典型的细胞凋亡。此外,体内实验亦提示,葫芦素B可剂量依赖性地抑制乳腺癌裸鼠移植瘤的生长。结论:葫芦素B可抑制乳腺癌细胞的增殖,引起S期和G2/M期阻滞,诱导乳腺癌细胞凋亡,从而发挥抗肿瘤效应。

关键词：葫芦素B 乳腺癌 MCF-7 凋亡

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低氧模拟剂氯化钴对胃癌细胞BGC823中S100A4基因表达的影响

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遗传 2008年第12期30卷 1563-1566页

作者：滑君付浩张瑞秀陈丹琦闫扬陈芳杰孙开来孙秀菊中国医科大学医学遗传学教研室沈阳110001 沈阳医学院生物化学教研室沈阳110046

S100A4基因是肿瘤侵袭转移相关的重要基因,该基因高表达与胃癌浸润、淋巴结转移及胃癌细胞体外侵袭力密切相关。为探讨S100A4基因高表达的机制,文章应用低氧模拟剂氯化钴处理胃癌细胞BGC823,RT-PCR、免疫组化、免疫荧光及Westernblottin... 详细信息

S100A4基因是肿瘤侵袭转移相关的重要基因,该基因高表达与胃癌浸润、淋巴结转移及胃癌细胞体外侵袭力密切相关。为探讨S100A4基因高表达的机制,文章应用低氧模拟剂氯化钴处理胃癌细胞BGC823,RT-PCR、免疫组化、免疫荧光及Westernblotting方法分别检测BGC823细胞中S100A4mRNA及蛋白表达情况。结果显示,氯化钴处理胃癌BGC823细胞后,S100A4mRNA及蛋白表达明显增加。提示低氧模拟剂氯化钴可促进胃癌细胞BGC823中S100A4基因表达。

关键词：胃癌低氧氯化钴 S100A4基因

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创伤弧菌溶细胞素融合蛋白细胞毒活性相关分子机制研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2008年第5期28卷 390-394页

作者：桂静胡蝶郑丽楼永良肖美英严杰朱晔晶肖翔温州医学院微生态学研究所浙江省医学遗传学重点实验室325035 浙江大学医学院病原生物学教研室

目的研究创伤弧菌溶细胞素融合蛋白（rVVC）诱导人ECV304细胞（人脐静脉内皮细胞）凋亡过程中caspase．3，-8，-9活性变化。方法应用MTT法、Hoehest33342／PI荧光双染、流式细胞术及DNA琼脂糖凝胶电泳分析rVVC对人ECV304细胞诱导凋亡的... 详细信息

目的研究创伤弧菌溶细胞素融合蛋白（rVVC）诱导人ECV304细胞（人脐静脉内皮细胞）凋亡过程中caspase．3，-8，-9活性变化。方法应用MTT法、Hoehest33342／PI荧光双染、流式细胞术及DNA琼脂糖凝胶电泳分析rVVC对人ECV304细胞诱导凋亡的影响；比色法测定rVVC诱导人ECV304凋亡过程中caspase-3，-8，-9活性变化。结果MTT结果显示rVVC具有降低人ECV304细胞的存活率活性；浓度为2．0溶血单位（HU）／ml的rVVC作用人ECV30412h后，其诱导凋亡的活性高于对照组和浓度为0．5HU／ml的rVVC处理组，具有剂量依赖性；浓度为2．0HU／ml rVVC处理组加40μmol／L Caspase全酶抑制剂（Z—VAD—FMK）后凋亡率较2．0HU／ml rVVC处理组有一定程度降低。浓度为2．0HU／ml rVVC处理人ECV304细胞0．5h后caspase-3活性开始增高，于3h达高峰，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01），caspase-8，-9活性无明显变化。结论rVVC对人ECV304具有凋亡诱导的生物学活性，caspase-3可能与活性rVVC诱导的人ECV304凋亡有关。

关键词：创伤弧菌溶细胞素 rVVC 人ECV304 细胞凋亡

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RIG-I基因剔除小鼠表型的初步分析

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上海交通大学学报（医学版） 2008年第7期28卷 836-840页

作者：孙岳平张丽君张梅金月娥柳子星张洪信陆顺元孔辉王铸钢上海交通大学医学院细胞生物学教研室上海200025 上海交通大学医学院医学遗传学教研室上海200025 上海交通大学医学院病理学教研室上海200025

目的通过对视黄酸诱导基因Ⅰ(RIG-I基因)剔除小鼠表型的分析,在整体动物水平揭示RIG-Ⅰ的生物学功能。方法Northern blotting和半定量RT-PCR检测小鼠组织中RIG-I基因的表达;对小鼠的表型分析包括体质量的测量、外周血细胞分类计数、代... 详细信息

目的通过对视黄酸诱导基因Ⅰ(RIG-I基因)剔除小鼠表型的分析,在整体动物水平揭示RIG-Ⅰ的生物学功能。方法Northern blotting和半定量RT-PCR检测小鼠组织中RIG-I基因的表达;对小鼠的表型分析包括体质量的测量、外周血细胞分类计数、代谢指标测定及病理组织学检查。结果RIG-Ⅰ在小鼠多种组织中广泛表达,但表达水平存在一定差异。RIG-Ⅰ基因剔除后,小鼠未见明显发育异常;无明显预期的粒系分化受阻表现;但RIG-Ⅰ基因剔除小鼠外周血相中的粒/淋比明显倒置,且对条件性致病菌易感。结论RIG-Ⅰ在小鼠抗细菌免疫过程中具有重要作用。

关键词：视黄酸诱导基因Ⅰ 细菌感染基因剔除小鼠

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台湾阿美原住民肤纹学研究

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中国科学（C辑） 2008年第3期38卷 277-284页

作者：张海国陈尧峰沈建甫赖俊宏上海交通大学医学院医学遗传学教研室上海200025 台湾慈济大学人类发展研究所中国台湾花莲97074

本文报道台湾原住民(高山族)阿美人男性和女性的肤纹参数,研究项目包含指纹总嵴线数(TFRC)、手掌的指三角a和b间嵴线数(a-bRC)、手掌的轴三角到指三角a和d角度(atd)、手掌的轴三角百分距离(tPD)、指纹、指间纹、手大鱼际纹、指三角以及... 详细信息

本文报道台湾原住民(高山族)阿美人男性和女性的肤纹参数,研究项目包含指纹总嵴线数(TFRC)、手掌的指三角a和b间嵴线数(a-bRC)、手掌的轴三角到指三角a和d角度(atd)、手掌的轴三角百分距离(tPD)、指纹、指间纹、手大鱼际纹、指三角以及猿线等参数.阿美人是台湾原住民最大的族群,因此他们的肤纹数据特别具有代表性,然而早期的研究却仅有少数肤纹参数的描述.本研究是阿美人自1960年以来首次详尽的阿美人肤纹调查,以期为人类学、遗传学和医学研究提供较完整的肤纹参数数据.

关键词：高山族阿美人台湾原住民肤纹人类学

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X连锁隐性遗传鱼鳞病基因突变研究进展

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国际遗传学杂志 2008年第6期31卷 463-466页

作者：席红利蒋玮莹中山大学医学院医学遗传学教研室

X连锁隐性遗传鱼鳞病(XLRI)是一种常见的遗传角化障碍性皮肤病,以皮肤干燥、大块状、深褐色鳞屑脱落为主要表现。皮肤以外的特征包括:角膜混浊和隐睾症等。1978年已经有研究阐述了类固醇硫酸酯酶(steroid sulfatase,STS)的缺陷与XLRI发... 详细信息

X连锁隐性遗传鱼鳞病(XLRI)是一种常见的遗传角化障碍性皮肤病,以皮肤干燥、大块状、深褐色鳞屑脱落为主要表现。皮肤以外的特征包括:角膜混浊和隐睾症等。1978年已经有研究阐述了类固醇硫酸酯酶(steroid sulfatase,STS)的缺陷与XLRI发生的内在关系。STS基因定位于Xp22.3。该区域逃避了X染色体失活,具有很高的缺失频率,约90%的患者存在STS基因的完全缺失。男性患者的诊断和携带者的筛查主要依赖于生化检测和遗传学分析。目前已经有很多关于XLRI病分子遗传学的研究。本文主要就X连锁隐性遗传性鱼鳞病基因突变特点和基因诊断作一综述。

关键词： X 连锁隐性遗传鱼鳞病类固醇硫酸酯酶基因缺失

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骨保护素基因敲除对小鼠左心室收缩功能的影响

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上海交通大学学报（医学版） 2008年第3期28卷 285-288页

作者：李西华颜美珠许勇庞晓芬王铸钢上海交通大学基础医学院医学遗传学教研室上海交通大学医学院瑞金医院老年科上海200025 上海交通大学医学院瑞金医院伤骨科研究所上海200025

目的探讨左心室收缩功能与骨保护素配体(RANKL)和雌激素在骨保护素(OPG)基因敲除小鼠引起骨质疏松之间的关系。方法建立OPG基因敲除小鼠模型,并设对照组;ELISA法检测小鼠血清OPG和RANKL水平,放射免疫法检测血清雌激素水平;利用心脏超声... 详细信息

目的探讨左心室收缩功能与骨保护素配体(RANKL)和雌激素在骨保护素(OPG)基因敲除小鼠引起骨质疏松之间的关系。方法建立OPG基因敲除小鼠模型,并设对照组;ELISA法检测小鼠血清OPG和RANKL水平,放射免疫法检测血清雌激素水平;利用心脏超声对心功能进行评价。结果与对照组比较,OPG基因敲除组小鼠的心脏质量、心脏质量与体质量的比值、左室心肌细胞的横切面积均明显增大(P<0.01),左心室收缩末期内径和左心室收缩末期容积也明显增大(P<0.05)。OPG基因敲除组小鼠血清RANKL浓度明显高于对照组(P<0.001),两组血清雌激素水平则无显著差异(P>0.05)。结论OPG缺乏导致血清RANKL水平升高,左心室心肌细胞肥大,但不影响血清雌激素水平。

关键词：骨保护素骨保护素配体左心室小鼠

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