检索结果-内蒙古大学图书馆

上海预防医学 2006年第9期18卷 432-434页

作者：周欣李燕婷沈荣明沈微娟瞿涤复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部重点实验室上海200032 上海市疾病预防控制中心上海200336

[目的]构建汉坦病毒S片段标准品,用于实时荧光定量PCR检测汉坦病毒。[方法]对S片段基因进行序列分析,利用引物设计软件设计出一对引物和一条荧光探针,提取病人总RNA,逆转录为cDNA,经PCR扩增,产物纯化后与PMD 18-T Vector连接,转化到大... 详细信息

[目的]构建汉坦病毒S片段标准品,用于实时荧光定量PCR检测汉坦病毒。[方法]对S片段基因进行序列分析,利用引物设计软件设计出一对引物和一条荧光探针,提取病人总RNA,逆转录为cDNA,经PCR扩增,产物纯化后与PMD 18-T Vector连接,转化到大肠杆菌DH5α,筛选得到标准品的质粒,提取质粒并进行定量。[结果]重组S片段基因质粒进行荧光定量PCR扩增出现强烈的荧光值增长,表明基因已成功克隆。以不同稀释水平的标准品进行扩增,统计学分析显示C t值与标准品浓度的对数存在良好线性关系,回归系数在0.99以上。成功制备并获得稳定的S片段重组质粒。[结论]该方法能大量制备质粒标准品,如何进行荧光RT-PCR条件的优化是关键所在。

关键词： S片段实时荧光定量PCR 标准品

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表皮葡萄球菌AtlE蛋白介导生物膜起始黏附的相关机制

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世界感染杂志 2006年第5期6卷 469-469页

作者：欧元祝朱于莉陈洁敏秦智强江娟杨晓梅瞿涤复旦大学上海医学院教育部卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的探讨表皮葡萄球菌atlE基因编码的AtlE蛋白介导生物膜起始黏附的相关机制。方法采用RT-PCR法检测表皮葡萄球菌atlE基因在不同时期的表达水平，用紫外分光光度计检测DNA的方法检测了相应时期的胞外DNA的释放量，并用DNA酶（DNase□）... 详细信息

目的探讨表皮葡萄球菌atlE基因编码的AtlE蛋白介导生物膜起始黏附的相关机制。方法采用RT-PCR法检测表皮葡萄球菌atlE基因在不同时期的表达水平，用紫外分光光度计检测DNA的方法检测了相应时期的胞外DNA的释放量，并用DNA酶（DNase□）研究表皮葡萄球菌胞外DNA在生物膜形成和起始黏附中的作用；采用pBT2质粒同源重组敲除的方法构建了表皮葡萄球菌1457的atlE基因突变株。研究atlE基因敲除突变对起始黏附能力、生物膜形成及胞外DNA释放能力的影响。结果表皮葡萄球菌atlE基因的表达与胞外DNA的释放量有相关性；DNA酶能影响未成熟生物膜且能降低起始黏附能力；□atlE菌株胞外DNA的释放减少，起始黏附能力明显降低，不形成生物膜。结论表皮葡萄球菌atlE基因编码的AtlE蛋白能通过释放胞外DNA在表皮葡萄球菌的生物膜起作用。

关键词：表皮葡萄球菌生物膜形成黏附能力 E蛋白 Atl 关机介导 PCR法检测

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美国微生物学会杂志摘要

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微生物与感染 2006年第4期1卷 250-250页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

*** Einstein医学院的Casadevail提出了对人类的微生物毒力组学的概念，他认为土壤中的微生物通过相互作用可获得在动物宿主中致病的特性。每一种在土壤中栖身的微生物都有一套综合性特性，例如获得铁或产生分解蛋白的酶。当各种土壤微... 详细信息

*** Einstein医学院的Casadevail提出了对人类的微生物毒力组学的概念，他认为土壤中的微生物通过相互作用可获得在动物宿主中致病的特性。每一种在土壤中栖身的微生物都有一套综合性特性，例如获得铁或产生分解蛋白的酶。当各种土壤微生物间互相传递基因后，这些微生物则可以获得在动物及人群中传播的特性，其中尤为重要的是能在37℃生长。作者认为微生物的毒力组学应包括所有能在宿主中致病的毒力基因，但每一种微生物具有独特的毒力基因（或基因簇），从而可具有独特的致病特性。

关键词：微生物学会土壤微生物致病特性摘要杂志美国毒力基因生物毒力

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美国微生物学会杂志摘要

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微生物与感染 2006年第1期1卷 57-57页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

1．目前，禽流感仍是全球微生物学界普遍关心的问题。Webster认为单纯扑杀感染的禽不是一项有效措施。泰国曾以扑杀感染禽的方法控制了疫情近1年，但HSN1病毒已重返。因HSNl病毒在亚洲野鸟中存在，故控制禽流感不能仅靠扑杀。由于在亚... 详细信息

1．目前，禽流感仍是全球微生物学界普遍关心的问题。Webster认为单纯扑杀感染的禽不是一项有效措施。泰国曾以扑杀感染禽的方法控制了疫情近1年，但HSN1病毒已重返。因HSNl病毒在亚洲野鸟中存在，故控制禽流感不能仅靠扑杀。由于在亚洲的小养殖场是散养，没有将家禽与野鸟隔离的网等设施，疫苗免疫成为很重要的措施。印度尼西亚科技部的Amin Soebandrio认为有些疫苗质量有问题，禽类免疫后禽类感染H5N1病毒后不死，反而继续排毒。据认为，好的疫苗注射1次即可产生有效保护，因此应不断研发质量高的用于禽类的疫苗。

关键词：微生物学会 News ASM H5N1病毒摘要杂志美国疫苗免疫疫苗质量印度尼西亚

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美国微生物学会杂志摘要

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微生物与感染 2006年第3期1卷 187-187页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

1．美国德州MD Anderson癌症研究中心开发了一种颗粒，是带有金（金属）的重组丝状M-13噬菌体的颗粒，据称可以用作影像诊断试剂，并还可能具有可将药物导入损伤组织的潜在作用。该组研究人员曾发现人血管系统具有特异的分子标记，并被... 详细信息

1．美国德州MD Anderson癌症研究中心开发了一种颗粒，是带有金（金属）的重组丝状M-13噬菌体的颗粒，据称可以用作影像诊断试剂，并还可能具有可将药物导入损伤组织的潜在作用。该组研究人员曾发现人血管系统具有特异的分子标记，并被称“邮编”（zip codes）。根据这一特性，他们利用重组噬菌体DNA可展示一些肽，从而可以识别这些“邮编”，而与之结合并到达特殊的组织内。

关键词：微生物学会美国噬菌体DNA 摘要杂志诊断试剂潜在作用分子标记

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适合我国结核分枝杆菌菌株基因型分型的方法

适合我国结核分枝杆菌菌株基因型分型的方法

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中华医学会结核病学分会2006年学术会议

作者：张璐陈婧高谦董海燕万康林沈鑫桂晓红梅建复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室中国疾病预防控制中心传染病预防控制所上海市疾病预防控制中心结核病防治科

以结核分枝杆菌基因分型技术为基础的分子流行病学可以帮助我们更好的掌握结核病的流行病学信息,现已被广泛应用。IS 6110 RFLP分型方法是研究结核病分子流行病学的金标准,但其技术上要求高,所需时间长。以PCR技术为基础的可变DNA 串联... 详细信息

以结核分枝杆菌基因分型技术为基础的分子流行病学可以帮助我们更好的掌握结核病的流行病学信息,现已被广泛应用。IS 6110 RFLP分型方法是研究结核病分子流行病学的金标准,但其技术上要求高,所需时间长。以PCR技术为基础的可变DNA 串联重复区(variable number of tandem repeat,VNTR)和结核分枝杆菌散在分布重复

关键词：结核分枝杆菌菌株基因型分型分子流行病学分布重复单位

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走近医学真菌

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微生物与感染 2006年第3期1卷 131-131页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室医学微生物研究所上海200032

真菌学科所研究的真菌至少包括50000种，其中多数在自然界有机物循环中起重要作用。在医学真菌中，真菌的次级代谢产物如抗生素以及免疫抑制药物如环孢素，均已被用于医疗。此外，酵母已作为一种模式生物进行基因组学、蛋白质组学、代... 详细信息

真菌学科所研究的真菌至少包括50000种，其中多数在自然界有机物循环中起重要作用。在医学真菌中，真菌的次级代谢产物如抗生素以及免疫抑制药物如环孢素，均已被用于医疗。此外，酵母已作为一种模式生物进行基因组学、蛋白质组学、代谢组学的研究对象，例如目前研究蛋白质一蛋白质相互作用中，酵母双杂交体系对推动生命科学卓有贡献。与人类疾病密切相关的真菌种类仅为几十种。

关键词：真菌学医学酵母双杂交体系蛋白质相互作用蛋白质组学次级代谢产物有机物循环免疫抑制

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trap基因表达在表皮葡萄球菌生物膜形成及附属基因调节（agr）系统活化中的作用

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世界感染杂志 2006年第5期6卷 482-482页

作者：朱于莉杨晓梅李娜江娟陈洁敏秦智强李敏吕元魏武瞿涤复旦大学上海医学院教育部卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 复旦大学蛋白质组学研究中心上海200032 复旦大学附属华山医院检验医学中心上海200040 上海生物信息技术研究中心上海200235

目的研究表皮葡萄球菌trap基因表达与生物膜形成的相关性及其对agr系统的活化作用。方法采用微量板半定量法检测表皮葡萄球菌生物膜表型，二维电泳和高灵敏度的基质辅助激光解吸附飞行时间质谱分析比较表皮葡萄球菌标准株蛋白质表达谱... 详细信息

目的研究表皮葡萄球菌trap基因表达与生物膜形成的相关性及其对agr系统的活化作用。方法采用微量板半定量法检测表皮葡萄球菌生物膜表型，二维电泳和高灵敏度的基质辅助激光解吸附飞行时间质谱分析比较表皮葡萄球菌标准株蛋白质表达谱，实时定量逆转录PCR检测trap基因和RNAⅢ的转录水平，CLUSTALX对表皮葡萄球菌trap基因与金黄色葡萄球菌序列进行分析．Mega软件构建进化树。结果比较分析形成生物膜的表皮葡萄球菌ATCC35984株与不形成生物膜的ATCC12228株生长中期的蛋白质组，发现ATCC35984株的TRAP蛋白量明显高于ATCC12228株。转录水平的检测显示ATCC12228株和生物膜阳性临床SE1457、SE671株的trap基因均低转录，但RNAⅢ的转录水平未降低。SE1457株agr系统突变后，RNAⅢ的转录明显降低，trap基因的转录无变化．RNAⅢ的转录随细菌生长变化而增加，trap基因转录保持不变．trap序列分析显示其在表皮葡萄球菌与金黄色葡萄球菌中较为保守，但存在明显的进化距离。结论在本论文所研究的表皮葡萄球菌菌株中，trap基因的转录和翻译与细菌生物膜的形成不存在直接的调控相关性；并提示TRAP蛋白不是表皮葡萄球菌agr系统活化所必需的细菌产物；表皮葡萄球菌trap基因序列与金黄色葡萄球菌之问存在差异，可能与其功能差异相关。

关键词：表皮葡萄球菌生物膜形成 trap 活化作用基因表达系统基因调节金黄色葡萄球菌

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葡萄糖类似物甲基葡萄糖对表皮葡萄球菌生物被膜形成的影响及调节机制的研究

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微生物学报 2005年第6期45卷 930-936页

作者：靳嘉巍查锡良李华林瞿涤复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系卫生部糖复合物重点实验室上海200032 复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室上海200032

生物被膜(Biofilm)是条件致病菌表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)的主要致病因素,生物被膜的形成依赖多糖PIA的合成,PIA合成与细菌糖代谢相关。通过研究葡萄糖类似物甲基葡萄糖(MethylDglucoside,MG)对生物被膜的形成及相关基... 详细信息

生物被膜(Biofilm)是条件致病菌表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)的主要致病因素,生物被膜的形成依赖多糖PIA的合成,PIA合成与细菌糖代谢相关。通过研究葡萄糖类似物甲基葡萄糖(MethylDglucoside,MG)对生物被膜的形成及相关基因表达的影响,考察生物被膜形成的调控机制并寻找抑制生物被膜形成的方法。甲基葡萄糖能抑制97337株生物被膜的形成,而且不同浓度的甲基葡萄糖对生物膜作用不同。甲基葡萄糖对97337株生物被膜形成的早期的粘附有较强的抑制作用;不同浓度的甲基葡萄糖处理后对ica和AtlE基因的mRNA表达水平影响不大,但能诱导agr基因的表达,这与甲基葡萄糖处理不同时间后的结果一致;而且甲基葡萄糖处理后97337的表面相关蛋白的组成明显改变。甲基葡萄糖对生物膜的抑制并不直接由于它对生长的抑制,它对细菌生长和生物被膜形成的抑制与其在细菌糖代谢中的竞争性相关;甲基葡萄糖能通过调控agr基因的表达改变细菌表面从而抑制97337的早期粘附和生物被膜的形成,但没有通过调控icaADBC、icaR的表达抑制生物膜的形成,可能与其对合成PIA相关糖基转移酶的竞争性抑制相关。

关键词：表皮葡萄球菌生物被膜多聚β-1 6-2脱氧-2-氨基-D-吡喃葡萄糖(PIA) 2-脱氧葡萄糖甲基葡萄糖 ica AtlE

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CpG ODN对活动性肺结核患者外周血Th1/Th2型免疫应答的调节作用

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复旦学报（医学版） 2005年第6期32卷 648-652页

作者：任涛金美玲蔡映云胡芸文袁正宏复旦大学附属中山医院呼吸病研究所复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部重点实验室上海200032

目的观察CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)对活动性肺结核患者外周血单个核细胞(PBMC)γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-12以及IL-10表达的影响。方法20例活动性肺结核患者和20名健康人PBMC根据刺激物不同分为空白对照组、结核菌素纯化蛋白衍... 详细信息

目的观察CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)对活动性肺结核患者外周血单个核细胞(PBMC)γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-12以及IL-10表达的影响。方法20例活动性肺结核患者和20名健康人PBMC根据刺激物不同分为空白对照组、结核菌素纯化蛋白衍化物(PPD)组(10ng/mL)、CpG ODN组(2nmoL/mL)和CpG ODN+PPD组。用real ti me-PCR法检测PBMCIFN-γmRNA、IL-12mRNA和IL-10mRNA的表达。结果①活动性肺结核患者PBMC空白对照组IFN-γmRNA和IL-12mRNA的表达低于健康人(P<0.01,P<0.05),IL-10mRNA的表达与健康人相似(P>0.05);②经PPD刺激,IFN-γmRNA、IL-12mRNA和IL-10mRNA的表达较空白对照组增高(P<0.01,P<0.01,P<0.01),但IFN-γmRNA的表达低于健康人(P<0.01),IL-12mRNA的表达与健康人相似(P>0.05),IL-10mRNA的表达高于健康人(P<0.01);③经CpGODN刺激,IFN-γmRNA和IL-12mRNA的表达高于空白对照组(P<0.01,P<0.01),但低于健康人(P<0.01,P<0.05),IL-10mRNA的表达与空白对照组相似(P>0.05),与健康人也无差别(P>0.05);④经CpGODN+PPD刺激,IFN-γmRNA和IL-12mRNA的表达较空白对照组增高(P<0.01,P<0.01),但IFN-γmR-NA的表达低于健康人(P<0.01),IL-12mRNA的表达与健康人相似(P>0.05),IL-10mRNA的表达与空白对照组相似(P>0.05),与健康人也无差别(P>0.05);⑤经CpG ODN+PPD刺激,肺结核患者IL-12mRNA的表达高于PPD组(P<0.05),IL-10mRNA的表达低于PPD组(P<0.01)。结论CpG ODN可促进活动性肺结核患者PBMC产生IFN-γ和IL-12,增强Th1型免疫反应。CpG ODN与PPD联合应用可进一步促进PPD对IL-12表达的诱导,并抑制PPD对IL-10表达的增强作用。

关键词：肺结核 CpG寡脱氧核苷酸 γ干扰素白细胞介素10 白细胞介素12

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