检索结果-内蒙古大学图书馆

交通医学 2003年第1期17卷 1-4页

作者：沈爱国丁斐顾晓松顾建新南通医学院江苏省神经再生重点实验室 226001 复旦大学上海医学院基因研究中心

β -1,4-半乳糖基转移酶在高尔基体上通过合成 β -1,4糖苷键进行重要的蛋白质糖链修饰作用。同时 β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅰ在细胞膜上 ,参与多种细胞的增殖、迁移、粘附等信号识别。随着许多编码蛋白具有 β -1,4-GalT活性的新基因被... 详细信息

β -1,4-半乳糖基转移酶在高尔基体上通过合成 β -1,4糖苷键进行重要的蛋白质糖链修饰作用。同时 β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅰ在细胞膜上 ,参与多种细胞的增殖、迁移、粘附等信号识别。随着许多编码蛋白具有 β -1,4-GalT活性的新基因被克隆出来 ,有关它们的结构、底物。

关键词： β-1,4-半乳糖基转移酶进展高尔基体蛋白质糖链修饰结构生物活性生物学功能

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DNA疫苗的研究进展

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中国处方药 2003年第2期2卷 22-26页

作者：熊思东徐薇复旦大学上海医学院免疫学系教育部分子医学重点实验室上海基因免疫与疫苗研究中心

DNA疫苗又称基因疫苗或核酸疫苗,其建立和发展极大程度上基于上世纪九十年代初新兴的一门新的免疫学理论和技术DNA免疫(DNA immunization)。由于DNA免疫免去了繁琐的蛋白纯化步骤和免疫性剂的辅助,更重要的是,基因在体内的表达及诱生免... 详细信息

DNA疫苗又称基因疫苗或核酸疫苗,其建立和发展极大程度上基于上世纪九十年代初新兴的一门新的免疫学理论和技术DNA免疫(DNA immunization)。由于DNA免疫免去了繁琐的蛋白纯化步骤和免疫性剂的辅助,更重要的是,基因在体内的表达及诱生免疫反应的过程,模拟了自然状态下机体感染外源病原生物表达抗原及诱导免疫的过程。因此,DNA免疫系统一经建立,便很快成为抗感染、抗肿瘤免疫等领域的研究热点。自1994年以来,美国FDA已陆续批准了HIV、流感病毒、乙型肝炎病毒、单纯疱疹病毒、疟疾和肿瘤相关抗原等DNA疫苗进入临床试验。迄今,以DNA免疫技术为关键技术,已研制出不同预防性和治疗性DNA疫苗(DNA vaccines),发展为以DNA免疫为特征的第三代疫苗。

关键词： DNA疫苗研究进展作用机制核酸疫苗

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正、反义β-1,4半乳糖基转移酶Ⅱ和Ⅴ地高辛标记RNA探针的制备和应用

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解剖学研究 2003年第4期25卷 273-276,F003页

作者：龚蕾蕾沈爱国严美娟何江虹顾建新南通医学院江苏省神经再生重点实验室南通226001 复旦大学上海医学院基因研究中心上海20032

目的　为了探讨 β1 ,4半乳糖基转移酶 Ⅱ和Ⅴ (β1 ,4 galactosyltransferaseI,β 1 ,4 GalT ⅡandⅤ )表达定位 ,本实验通过分子生物学手段 ,制备正、反义 β 1 ,4 GalT Ⅱ和Ⅴ地高辛标记的RNA原位杂交探针。方法　设计引物 ,提... 详细信息

目的　为了探讨 β1 ,4半乳糖基转移酶 Ⅱ和Ⅴ (β1 ,4 galactosyltransferaseI,β 1 ,4 GalT ⅡandⅤ )表达定位 ,本实验通过分子生物学手段 ,制备正、反义 β 1 ,4 GalT Ⅱ和Ⅴ地高辛标记的RNA原位杂交探针。方法　设计引物 ,提取小鼠脑总RNA ,通过RT PCR方法 ,得到 β 1 ,4 GalT Ⅱ和Ⅴ基因序列 ,将其克隆到pGEM T载体。根据其多克隆酶切位点和Sp6及T7位置 ,分别酶切后作为转录模板 ,通过Sp6及T7RNA聚合酶 ,得到正、反义 β 1 ,4 GalT Ⅱ和Ⅴ地高辛标记的RNA原位杂交探针。检测标记探针的效价后 ,最后通过原位杂交分析标记探针的特异性和杂交效果。结果　本实验得到了高效价的正、反义 β 1 ,4 GalT Ⅱ和Ⅴ地高辛标记的RNA原位杂交探针 ,并表现出很好的杂交效果。结论　正、反义β 1 ,4 GalT Ⅱ和ⅤRNA原位杂交探针的制备 ,为进一步研究 β 1 ,4 GalT Ⅱ和Ⅴ在组织中的表达。

关键词： β1,4半乳糖基转移酶分子生物学地高辛 RNA原位杂交探针小鼠神经元再生

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糖类模式识别分子纤维胶凝蛋白与补体凝集素活化途径

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生命的化学 2003年第5期23卷 358-361页

作者：乔滨熊思东复旦大学上海医学院免疫学系教育部分子医学重点实验室上海基因免疫与疫苗研究中心上海200032

纤维胶凝蛋白(ficolin)是一组存在于人、猪、小鼠和海鞘等动物体内,含有胶原样结构域和纤维蛋白原样结构域的糖蛋白。它们的分子结构相似,多形成寡聚体,其基因结构和氨基酸序列有一定的同源性。Ficolin与MBL的功能相似,识别并特异结合... 详细信息

纤维胶凝蛋白(ficolin)是一组存在于人、猪、小鼠和海鞘等动物体内,含有胶原样结构域和纤维蛋白原样结构域的糖蛋白。它们的分子结构相似,多形成寡聚体,其基因结构和氨基酸序列有一定的同源性。Ficolin与MBL的功能相似,识别并特异结合某些糖类,所以它们可能是一种重要的糖类模式识别分子。血清中的ficolin结合病原体表面的糖类配体后,通过调理吞噬作用及凝集素途径激活补体,是天然免疫中的效应分子。本文主要介绍了纤维胶凝蛋白(ficolin)的分子结构、生物学特性及其补体活化的凝集素途径。

关键词： Ficolin 补体凝集素途径

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抗原识别中的危险模式

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生命的化学 2003年第1期23卷 3-5页

作者：张进平熊思东复旦大学上海医学院免疫学系、教育部分子医学重点实验室、上海基因免疫与疫苗研究中心上海200032

Matzinger提出的危险模式摆脱了自我与非我模式(SNS)和感染的非我模式(INS)的束缚,认为免疫应答的启动是由损伤的细胞发出的危险信号所决定的,且组织细胞决定了免疫应答效应的类型.并运用危险信号模式对肿瘤、移植、母胎耐受、自身免疫... 详细信息

Matzinger提出的危险模式摆脱了自我与非我模式(SNS)和感染的非我模式(INS)的束缚,认为免疫应答的启动是由损伤的细胞发出的危险信号所决定的,且组织细胞决定了免疫应答效应的类型.并运用危险信号模式对肿瘤、移植、母胎耐受、自身免疫性疾病、先天性淋巴细胞(NK 1T细胞、γδT细胞)的作用等作了新的解释.

关键词：危险模式抗原识别免疫耐受免疫调节

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系统性红斑狼疮患者血清淀粉样P成分的测定及其意义

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中华风湿病学杂志 2003年第5期7卷 257-259页

作者：吴瑾熊思东复旦大学上海医学院免疫学系教育部分子医学重点实验室上海基因免疫与疫苗研究中心 200032

目的　检测系统性红斑狼疮 (SLE)患者血清淀粉样P成分 (SAP)含量并研究其与DNA及抗DNA抗体间的关系 ,探讨它在SLE发生发展中的作用及意义。方法　用酶联免疫吸附测定 (ELISA)方法检测SAP含量及抗dsDNA抗体 ,荧光分光光度法测定DNA水平... 详细信息

目的　检测系统性红斑狼疮 (SLE)患者血清淀粉样P成分 (SAP)含量并研究其与DNA及抗DNA抗体间的关系 ,探讨它在SLE发生发展中的作用及意义。方法　用酶联免疫吸附测定 (ELISA)方法检测SAP含量及抗dsDNA抗体 ,荧光分光光度法测定DNA水平。结果　SLE患者血清SAP、DNA水平显著高于正常人 ,活动期患者明显高于缓解期 ;血清SAP含量与DNA浓度呈显著性正相关 ,但SLE患者血清SAP相对DNA水平下降 ;SAP/DNA比值与抗DNA抗体水平呈负相关。结论　SLE患者血清中SAP含量相对DNA不足 ,可能影响此类自身抗原物质的及时清除。

关键词：系统性红斑狼疮血清淀粉样P成分测定

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异位hCGβ-CTP37基因疫苗的抗肿瘤作用

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中国癌症杂志 2003年第3期13卷 193-196页

作者：王立新关庆东吴瑾储以微熊思东复旦大学上海医学院免疫学系教育部分子医学重点实验室上海基因免疫与疫苗研究中心上海200032

目的:研究异位hCGβ-CTP37基因免疫诱导的肿瘤特异性免疫应答及其抗肿瘤作用,为肿瘤的免疫生物治疗寻求新途径.方法:分离获取异位hCGβ-CTP37的编码基因,并将4拷贝基因以头尾串联形式克隆于真核表达载体TR421构建重组质粒TR421-CTP37.4,... 详细信息

目的:研究异位hCGβ-CTP37基因免疫诱导的肿瘤特异性免疫应答及其抗肿瘤作用,为肿瘤的免疫生物治疗寻求新途径.方法:分离获取异位hCGβ-CTP37的编码基因,并将4拷贝基因以头尾串联形式克隆于真核表达载体TR421构建重组质粒TR421-CTP37.4,以PCR、酶切和DNA序列测定进行鉴定;肌内注射法对BALB/c小鼠实施3次基因免疫(100μg/100μl)(每只小鼠),间隔3周,并以空载质粒为对照.ELISA法检测免疫小鼠血清中特异性抗hCGβ-IgG抗体;免疫小鼠脾细胞经特异性抗原hCGβ刺激后,用3H-TdR掺入法和同位素释放法分别检测其特异性淋巴细胞增殖活性和CTL细胞毒活性;皮下接种SP2/0-hCGβ细胞攻击免疫小鼠,以成瘤率及实体瘤重量评估体内抗瘤效果.结果:TR421-CTP37.4质粒免疫小鼠产生了较高水平的抗hCGβ-IgG抗体,与空载质粒组有显著差异;hCGβ蛋白刺激TR421-CTP37.4质粒免疫小鼠脾细胞生产了高水平的特异性淋巴细胞增殖活性,且明显高于空载质粒免疫小鼠;特异抗原诱导的TR421-CTP37.4质粒免疫小鼠脾细胞对SP2/0-hCGβ细胞的CTL活性明显高于SP2/0-preS2/S细胞(P＜0.01);空质粒免疫小鼠接种SP2/0-hCGβ细胞后成瘤率为100%,瘤重达3.37g,而TR421-CTP37.4质粒免疫小鼠的成瘤率为66.7%,瘤重为0.61g,两组比较有显著差异(P＜0.01).结论:异位hCGβ-CTP37基因免疫所诱导的特异性免疫应答具有抗肿瘤作用,为肿瘤的基因免疫生物治疗提供新的途径.

关键词：人绒毛膜促性腺激素基因免疫肿瘤生物治疗

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趋化因子及其受体在连接天然免疫与获得性免疫中的作用

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生命的化学 2003年第3期23卷 215-217页

作者：徐焕宾王缨熊思东复旦大学上海医学院免疫学系、教育部分子医学重点实验室、上海基因免疫与疫苗研究中心上海200032

病原侵入组织引起天然免疫中巨噬细胞(M)分泌趋化因子,趋化因子/趋化因子受体的表达与非成熟树突状细胞(DC)的迁移、成熟、归巢以及获得性免疫应答密切相关.整个过程涉及许多趋化因子和趋化因子受体的表达变化,正是这种表达变化的精... 详细信息

病原侵入组织引起天然免疫中巨噬细胞(M)分泌趋化因子,趋化因子/趋化因子受体的表达与非成熟树突状细胞(DC)的迁移、成熟、归巢以及获得性免疫应答密切相关.整个过程涉及许多趋化因子和趋化因子受体的表达变化,正是这种表达变化的精细调节启动了免疫细胞的定向迁移、归巢和游走,搭起天然免疫和获得性免疫的桥梁.本文综述了趋化因子和趋化因子受体在连接天然免疫和获得性免疫应答中的重要作用.

关键词：趋化因子和趋化因子受体树突状细胞迁移天然免疫获得性免疫

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β1,4-半乳糖基转移酶-I表达质粒在许旺细胞中的转染与鉴定

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解剖学研究 2003年第1期25卷 21-24,T004页

作者：沈爱国丁斐朱敏龚蕾蕾王汉洲顾建新复旦大学上海医学院基因研究中心上海200032 南通医学院江苏省神经再生重点实验室南通226001

目的　构建 β1,4 半乳糖基转移酶 I(β1,4 galactosyltransferaseI,β 1,4 GalT I)表达质粒 ,并将其转染到许旺细胞中 ,为探讨周围神经许旺细胞表达 β 1,4 GalT I的生物学意义提供研究基础。方法　构建 β 1,4 GalT I表达质粒 ... 详细信息

目的　构建 β1,4 半乳糖基转移酶 I(β1,4 galactosyltransferaseI,β 1,4 GalT I)表达质粒 ,并将其转染到许旺细胞中 ,为探讨周围神经许旺细胞表达 β 1,4 GalT I的生物学意义提供研究基础。方法　构建 β 1,4 GalT I表达质粒 ,并将其转染到分离培养的许旺细胞中 ;用特异识别 β1,4 半乳糖苷键的蓖麻凝集素 I(RicinusCommunisAgglutinin I,RCA I)免疫组织化学方法和NorthernBlot鉴定转染情况。结果　通过酶切鉴定和测序分析 ,实验成功构建 β 1,4 GalT I表达质粒。将构建的表达质粒转染到许旺细胞中 ,经鉴定表明 ,转染的表达质粒在许旺细胞中能表达 β 1,4 GalT I,并随转染浓度增高而表达增加。结论　β 1,4 GalT I在许旺细胞中的转染和表达 ,对分析许旺细胞表达 β 1,4 GalT I的意义如对其自身增殖的影响和对神经元生长作用。

关键词： β1,4-半乳糖基转移酶-I 许旺细胞转染鉴定表达质粒周围神经生物学蓖麻凝集素-I 大鼠免疫组织化学

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自身抗原表位基因免疫诱导SLE样综合征小鼠模型的建立

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动物医学进展 2003年第6期24卷 70-72页

作者：吴瑾吴厚生熊思东复旦大学上海医学院免疫学系教育部分子医学重点实验室上海基因免疫与疫苗研究中心上海200032

通过自身抗原SmB/B′主要表位进行基因免疫,诱导系统性红斑狼疮(SLE)样综合征的动物模型,为进一步探讨SLE的发病机理奠定基础.以RT-PCR的方法获得SmB/B′主要表位编码基因,构建表达载体pcDNA3-SmB/B′,基因免疫后以免疫印迹法检测抗Sm... 详细信息

通过自身抗原SmB/B′主要表位进行基因免疫,诱导系统性红斑狼疮(SLE)样综合征的动物模型,为进一步探讨SLE的发病机理奠定基础.以RT-PCR的方法获得SmB/B′主要表位编码基因,构建表达载体pcDNA3-SmB/B′,基因免疫后以免疫印迹法检测抗Sm抗体、ELISA检测抗dsDNA抗体、免疫荧光法检测肾脏损伤.结果显示基因免疫后小鼠均产生抗Sm抗体、抗dsDNA抗体,且能诱发动物肾小球IgG类免疫复合物的沉积,表明自身抗原表位的基因免疫能成功诱导SLE样综合征小鼠模型.

关键词：自身抗原系统性红斑狼疮样综合征基因免疫

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