检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物与感染 2020年第6期15卷 360-369页

作者：荆沙马泽林赵超复旦大学上海医学院基础医学院教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032 国家老年疾病临床医学研究中心(复旦大学附属华山医院) 上海200040

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)合成的蛋白调节细胞脂质代谢的研究不断被报道,但乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B virus surface antigen,HBsAg)与脂质代谢的相互调控研究较少,且机制尚不明确。本研究通过对细胞转录组学的分析... 详细信息

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)合成的蛋白调节细胞脂质代谢的研究不断被报道,但乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B virus surface antigen,HBsAg)与脂质代谢的相互调控研究较少,且机制尚不明确。本研究通过对细胞转录组学的分析,揭示HBsAg对脂质代谢的调控机制。选用稳定表达HBsAg的细胞系HepG2-S-G2与其对照细胞系HepG2-neo-F4进行转录组学分析。利用定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)、蛋白质印迹法(Western blot,WB)分别检测重要差异基因OXCT1和CYP4F3在mRNA水平和蛋白水平的表达差异。为验证HBsAg促进脂质合成上调的表型,对两种细胞系进行油红O染色并检测细胞脂肪酸、总胆固醇水平。进一步对稳定转染HBV的细胞系HepG2.2.15进行降脂处理,以观察细胞上清液中HBsAg与脂质合成之间是否存在相互调控。结果显示,参与脂质代谢的差异基因发生显著变化,提示HBsAg引起了宿主细胞脂质合成途径的上调和消耗途径下调。定量PCR结果显示,相对于HepG2-neo-F4细胞,HepG2-S-G2细胞的3-酮酸辅酶A转移酶1(3-oxoacid CoA-transferase 1,OXCT1)mRNA水平升高约9倍,与转录组测序结果基本一致;CYP4F3基因在HepG2-S-G2细胞中转录相对下调。WB结果显示,OXCT1和CYP4F3蛋白表达均出现相应的显著上调或下调,并且趋势与转录组分析一致。油红O染色以及细胞脂肪酸、总胆固醇水平检测结果证实HepG2-S-G2细胞中脂滴更明显,且游离脂肪酸和总胆固醇均显著升高。降脂处理结果显示细胞上清液中HBsAg显著降低。上述结果表明,HBsAg可上调脂质代谢、促进脂质合成,提示降脂可能成为抑制HBsAg的潜在有效途径。

关键词：乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒表面抗原脂质代谢转录组学

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安全、便捷技术再生一次性医用口罩的实验研究

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微生物与感染 2020年第1期15卷 31-35页

作者：宋武慧潘滨阚海东徐燕意易志刚复旦大学上海医学院基础医学院教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032 复旦大学公共卫生学院环境卫生学教研室上海200032

在防控新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)疫情中,为了减少病毒的传播,一次性医用口罩是普通民众必不可缺少的防护品。然而,随着2019-nCoV的蔓延,口罩短缺现象严重。本研究旨在探讨一次性医用外科口罩(口罩)的再生方法,以... 详细信息

在防控新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)疫情中,为了减少病毒的传播,一次性医用口罩是普通民众必不可缺少的防护品。然而,随着2019-nCoV的蔓延,口罩短缺现象严重。本研究旨在探讨一次性医用外科口罩(口罩)的再生方法,以达到既有个人防护的效果又能节省资源。用流行性感冒病毒(简称流感)模拟2019-nCoV污染口罩,采用常用的恒温烘箱干烤及电吹风机热风处理2种方法,对表面污染有流感病毒的医用口罩进行病毒灭活,洗脱口罩上已灭活处理的病毒,感染Mardin-Darby狗肾细胞(Mardin-Darby canine kidney cell,MDCK细胞),观察细胞病变并定量检测病毒基因组拷贝数以评价病毒灭活效果。同时采用抽滤系统和PM 2.5监测仪对以2种相似热灭活方式处理过的口罩滤过截留PM 2.5的效果进行评价。结果显示电吹风机30 min热风处理后病毒基因组拷贝数降低至原来的1/1000000~1/10000000,接近未感染组,但烘箱56℃30 min干热处理仅灭活部分病毒。2种热灭活方式对口罩的PM 2.5滤过截留效果无显著影响。本研究提供了一个安全、便捷处理一次性医用外科口罩的方法,为个人防护用品口罩表面污染病毒的灭活及其再生利用提供了科学依据。然而,应注意的是在口罩匮乏的非常时期,普通人群可采用该简便技术再生口罩后再次使用,但该方法再生的口罩不适合密切接触患者的人群、医护人员及实验室工作人员使用。

关键词：热灭活医用口罩滤过截留流行性感冒病毒新型冠状病毒

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构建表达Flag-GPI的重组乙型肝炎病毒载体

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微生物与感染 2019年第4期14卷 199-208页

作者：胡孔颖谷陈建吴敏乐陶帅刘楠楠刘晶谢幼华复旦大学上海医学院基础医学院病原生物学系教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032 上海市浦东医院复旦大学附属浦东医院检验科上海201399

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)是小型的嗜肝DNA病毒,能够特异性地感染人肝实质细胞。HBV的易感性可以归于多个方面,包括细胞表面的受体以及细胞内的蛋白或其他因子,目前对HBV易感性的了解还有待深入。本课题利用课题组原有的HBV ... 详细信息

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)是小型的嗜肝DNA病毒,能够特异性地感染人肝实质细胞。HBV的易感性可以归于多个方面,包括细胞表面的受体以及细胞内的蛋白或其他因子,目前对HBV易感性的了解还有待深入。本课题利用课题组原有的HBV 5c3c载体和糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI)的特性,构建了重组HBV载体5c3c-CD59-Flag-GPI和5c3cT-Flag-GPI,转染Huh7细胞后可以将Flag标签锚定在细胞膜上,且可利用Flag抗体通过流式细胞术对其进行分选。在回补HBV包膜蛋白的情况下,5c3cT-Flag-GPI能包装形成完整的重组HBV颗粒。本研究为后续优化重组HBV的包装效率,进而为HBV易感性研究提供工具并奠定基础。

关键词：乙型肝炎病毒 5c3c 糖基磷脂酰肌醇重组乙型肝炎病毒载体

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人类诺如病毒反向遗传体系的构建与验证

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微生物与感染 2021年第2期16卷 71-78页

作者：陈水叶宋武慧易志刚复旦大学上海医学院基础医学院病原生物学系教育部/卫健委/医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032 复旦大学附属上海市公共卫生临床中心上海201508

为验证已报道的能复制人类诺如病毒(human norovirus,HuNoV)GⅡ.3 U201感染性克隆的复制能力,进一步在HuNoV临床病毒株中寻找更优序列,构建能高效复制的感染性克隆,本研究合成含有T7启动子和EF-1α启动子的HuNoV GⅡ.3 U201全长序列,构... 详细信息

为验证已报道的能复制人类诺如病毒(human norovirus,HuNoV)GⅡ.3 U201感染性克隆的复制能力,进一步在HuNoV临床病毒株中寻找更优序列,构建能高效复制的感染性克隆,本研究合成含有T7启动子和EF-1α启动子的HuNoV GⅡ.3 U201全长序列,构建质粒pU201和pEF-1α-U201及对应的病毒RNA聚合酶失活的突变质粒。在COS 7细胞和Huh 7细胞中分别共转染T7聚合酶与pU201以及单独转染pEF-1α-U201,利用实时荧光定量聚合酶链反应检测转染后不同时间点细胞内病毒RNA水平。结果显示,与对照组相比,pU201和pEF-1α-U201的病毒RNA水平升高约2倍和3倍。为便于检测HuNoV复制,在pU201和pEF-1α-U201质粒中分别插入NanoLuc TM荧光素酶报告基因,并命名为pU201-Nluc和pEF-1α-U201-Nluc。将质粒分别转染COS 7细胞和Huh 7细胞,检测转染后不同时间点Nluc荧光素酶活性。结果显示,pEF-1α-U201-Nluc的Nluc荧光素酶活性相较于对照组增高近2倍,而pU201-Nluc无明显升高,提示EF-1α启动子起始病毒复制优于T7启动子。为寻找优于HuNoV GⅡ.3 U201的HuNoV序列,合成HuNoV GⅡ.4临床病毒株全长序列,将其插入EF-1α启动子载体中并转染细胞,于不同时间点检测上清及细胞中病毒RNA水平。结果显示,上清及细胞中病毒RNA水平与对照组相比无显著差异。以上结果提示,已报道可复制的HuNoV GⅡ.3 U201反向遗传体系复制效率有限,且HuNoV反向遗传体系复制能力可能与不同序列的病毒相关。

关键词：人类诺如病毒 T7启动子 EF-1α启动子感染性克隆亚基因组克隆临床病毒株

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高血压患者严重急性呼吸综合征冠状病毒2型的易感性和血管紧张素转换酶抑制剂用药探讨

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微生物与感染 2020年第5期15卷 316-321页

作者：顾可羿汪慧菁赵超上海健康医学院基础医学院神经精神药理学实验室上海201318 复旦大学上海医学院基础医学院教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032 复旦大学附属华山医院国家老年疾病临床医学研究中心上海200041

严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)引起的2019冠状病毒病(coronavirus disease 2019,COVID-19)呈现出两个高比例态势,一是病毒感染者合并高血压比例较高;二是合并高血压的病毒感染者发展为重症和危重病例的比例高。这提示病毒感染与高血压之间存在密切联系,因此对高血压患者这一特殊群体的合理用药提出了需求。本文通过分析血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2),即SARS-CoV-2的功能性受体与ACE之间的平衡关系,探讨高血压与病毒易感性之间的联系,以及高血压人群罹患COVID-19可能的发病规律。由于高血压群体中,血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensin converting enzyme inhibitors,ACEI)的应用占有重要地位,本文从药理学和病原学角度进行分析,对该人群病毒感染前后的高血压用药给出指导建议,以供临床参考。

关键词： 2019冠状病毒病高血压血管紧张素转换酶2 血管紧张素转换酶抑制剂

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从效应蛋白多样性看革兰氏阳性菌Ⅶ型分泌系统功能多样性

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微生物与感染 2024年第3期19卷 177-185页

作者：张旸王德禹吴旸复旦大学上海医学院基础医学院教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海市病原微生物与感染前沿科学研究基地上海200032

Ⅶ型分泌系统(type VII secretion system,T7SS)是唯一的仅存在于革兰氏阳性细菌中的分泌系统。T7SS在细菌与细菌、细菌与宿主、细菌与环境的相互作用中发挥着重要功能,与细菌的生长和致病性密切相关。T7SS的功能多样性与其所分泌的效... 详细信息

Ⅶ型分泌系统(type VII secretion system,T7SS)是唯一的仅存在于革兰氏阳性细菌中的分泌系统。T7SS在细菌与细菌、细菌与宿主、细菌与环境的相互作用中发挥着重要功能,与细菌的生长和致病性密切相关。T7SS的功能多样性与其所分泌的效应蛋白的多样性密切相关。因此,本文将围绕T7SS所分泌的效应蛋白展开讨论,对效应蛋白的结构和功能、分泌机制及其基因转录水平的调控方式等研究进行综述,以期为进一步研究细菌的T7SS提供新的思路。

关键词： Ⅶ型分泌系统结核分枝杆菌金黄色葡萄球菌效应蛋白

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脑膜炎败血伊丽莎白菌耐药性的研究进展

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微生物与感染 2022年第1期17卷 47-54页

作者：巫祺乐方子璇袁舒颖陈妍雯陈力孙桂芹浙江中医药大学医学技术与信息工程学院浙江杭州310053 复旦大学上海医学院基础医学院教育部、卫健委、医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032

脑膜炎败血伊丽莎白菌(Elizabethkingia meningoseptica,EM)可引起肺部感染、新生儿脑膜炎、菌血症等疾病,医院重症监护病房检出率较高,是院内感染的重要病原体之一。随着抗菌药物的广泛使用,EM对β-内酰胺类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类... 详细信息

脑膜炎败血伊丽莎白菌(Elizabethkingia meningoseptica,EM)可引起肺部感染、新生儿脑膜炎、菌血症等疾病,医院重症监护病房检出率较高,是院内感染的重要病原体之一。随着抗菌药物的广泛使用,EM对β-内酰胺类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类等临床常用抗菌药物呈多重耐药,给临床治疗带来极大困难。目前EM的耐药机制研究主要集中于产生药物灭活酶、药物作用靶位改变、外排泵、形成生物膜等方面。EM可同时携带多个耐药基因,如GOB、BlaB、CME等,从而介导多重耐药。本文就国内外EM耐药现状、耐药机制进行综述,旨在为预防和控制EM的医院内感染提供参考。

关键词：脑膜炎败血伊丽莎白菌耐药耐药基因耐药机制

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从菌群和免疫的角度理解2019新型冠状病毒增龄易感的潜在机制

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老年医学与保健 2020年第2期26卷 321-324页

作者：邬永琳赵超杨浩肖振明复旦大学上海医学院基础医学院教育部/卫健委/医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032 国家老年疾病临床医学研究中心(复旦大学附属华山医院) 上海200040

2019年12月下旬,多家卫生机构报告了与中国湖北省武汉市流行病学相关的不明原因肺炎患者。中国疾病预防控制中心采集了暴发早期的标本,确定了肺炎的来源,并在肺炎患者中检测到1种新型冠状病毒——2019新型冠状病毒(2019 novel coronavir... 详细信息

2019年12月下旬,多家卫生机构报告了与中国湖北省武汉市流行病学相关的不明原因肺炎患者。中国疾病预防控制中心采集了暴发早期的标本,确定了肺炎的来源,并在肺炎患者中检测到1种新型冠状病毒——2019新型冠状病毒(2019 novel coronavirus, 2019-nCoV)^([1])。2020年1月24日,国内首次报告了2019-nCoV^([1]),随后世界卫生组织将该毒感染引起的肺炎命名为2019冠状病毒病(coronavirus disease 2019, COVID-19)。

关键词：肺炎患者卫生机构流行病学冠状病毒病潜在机制

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慢性乙型肝炎患者外周血循环免疫复合物的临床意义探索

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微生物与感染 2022年第6期17卷 347-359页

作者：唐怡洁邬敏陆伟冯艳玲袁正宏张小楠张占卿复旦大学附属上海市公共卫生临床中心上海201508 复旦大学上海医学院基础医学院教育部/卫健委/中国医科院医学分子病毒学重点实验室上海200032 堪培拉大学澳大利亚首都直辖区2617

免疫复合物的形成是病毒在感染过程中造成机体损伤的重要原因之一。对病毒感染者进行免疫复合物的定量有助于监测疾病进展,了解病毒与宿主之间的相互作用。本研究对早期固相C1q结合荧光免疫法进行优化,并利用补体分子C1q特异性结合慢性... 详细信息

免疫复合物的形成是病毒在感染过程中造成机体损伤的重要原因之一。对病毒感染者进行免疫复合物的定量有助于监测疾病进展,了解病毒与宿主之间的相互作用。本研究对早期固相C1q结合荧光免疫法进行优化,并利用补体分子C1q特异性结合慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者血液中的循环免疫复合物(circulating immune complex,CIC),通过荧光标记的羊抗人IgG对CIC进行检测。针对220例CHB患者、20例非乙型肝炎的肝炎患者、20例健康者、10例CHB功能性治愈者,分析了CHB患者中的CIC水平及其与CHB诊断所用病毒学指标、肝功能生化指标之间的关系。结果显示:约97%的CHB患者存在CIC水平升高,且与病毒学指标乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B virus surface antigen,HBsAg)(r=0.1973,P=0.0058)、HBV DNA(r=0.2178,P=0.0023)显著正相关;与肝脏损伤相关生化指标丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)(r=0.1580,P=0.0200)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)(r=0.1513,P=0.0353)呈正相关,而与补体C4(r=-0.21,P=0.003)呈负相关。不同程度的炎症和纤维化患者之间CIC和补体水平有显著性差异,且随临床分期产生相应波动。在免疫耐受期和低复制期,患者CIC水平较低而补体水平升高;在免疫激活期和HBV e抗原(HBV e antigen,HBeAg)阴性肝炎患者中的结果则相反。结果提示,CHB患者血液循环中存在CIC生成所造成的肝脏损伤及补体大量消耗,对CIC进行监测能在一定程度上反映CHB患者潜在的肝损伤。

关键词：乙型肝炎病毒免疫复合物补体肝脏炎症

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利用36B4基因扩增效率评价PBMC基因组DNA的制备质量

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中国当代医药 2016年第28期23卷 4-7页

作者：周丹崔晓娴孙淑惠蒋琳荣星喻汪慧菁赵超史虹莉复旦大学附属华山医院健康管理中心上海201206 复旦大学老年医学研究中心和上海市老年医学临床重点实验室上海200032 复旦大学基础医学院教育部/卫计委医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的建立一种评价PBMC基因组DNA制备质量的简便有效的方法。方法本研究采用实时定量PCR技术,对样本中的单拷贝基因36B4进行扩增,以考察扩增效率与样品质量之间的关系。结果经DNaseⅠ处理的基因组DNA中的36B4扩增效率显著低于未处理样品... 详细信息

目的建立一种评价PBMC基因组DNA制备质量的简便有效的方法。方法本研究采用实时定量PCR技术,对样本中的单拷贝基因36B4进行扩增,以考察扩增效率与样品质量之间的关系。结果经DNaseⅠ处理的基因组DNA中的36B4扩增效率显著低于未处理样品。采用该方法,对18份健康志愿者的血液标本基因组样品进行检测分析,结果显示,其可以有效地评估血液标本基因组制备质量。结论该方法可用于评价健康体检标本采集中的流程和操作对体检的影响,提高涉及基因组DNA检测体检项目的准确性。

关键词：单拷贝基因基因组DNA 血液标本定量PCR

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