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微生物与感染 2006年第1期1卷 15-20页

作者：周晓辉刘玲刘华项黎袁正宏浙江省温州医学院生命科学院复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的为了克服基因枪接种乙型肝炎表面抗原(HBsAg)DNA疫苗诱生的免疫应答以Th2为主的缺点,在基因枪接种质粒HBsAg DNA疫苗的同时共导入或共表达乙型肝炎病毒壳(HBV core)基因作为佐剂,以促进其所诱生的HBsAg特异性的Th2型免疫应答向Tn1... 详细信息

目的为了克服基因枪接种乙型肝炎表面抗原(HBsAg)DNA疫苗诱生的免疫应答以Th2为主的缺点,在基因枪接种质粒HBsAg DNA疫苗的同时共导入或共表达乙型肝炎病毒壳(HBV core)基因作为佐剂,以促进其所诱生的HBsAg特异性的Th2型免疫应答向Tn1型转换。方法构建可单独或共同表达HBsAg或核心抗原(HBcAg)的DNA免疫用载体pIRKS／core、pIRES／C149、pIRES／S、pIRES／S／Core和pIRES／S／C149,并在真核细胞进行表达验证。对BALB／c雌鼠进行免疫并检测小鼠免疫后的特异性体液免疫和细胞免疫指标。结果共导入或共表达HBV core基因能增强基因枪接种HBsAg DNA疫苗诱生的Th1型免疫应答水平,包括HBsAg特异的IgG2a应答、CTL活性、IFN-γ产生能力等。结论以HBV core基因为佐剂能促进基因枪接种HBsAg DNA疫苗诱生的Th2型免疫应答向Th1型免疫应答转换。

关键词：基因枪核酸疫苗免疫应答类型乙型肝炎病毒壳基因

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流感裂解疫苗H3N2-抗H3N2免疫原性复合物滴鼻诱导小鼠黏膜免疫应答的研究

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微生物与感染 2006年第1期1卷 3-6,56页

作者：姚忻陈列胜蔡明勇邵一斌闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 上海生物制品研究所

目的研究流感裂解病毒疫苗抗原抗体复合物滴鼻诱生小鼠黏膜免疫应答。方法分别以15μgH3N2、H3N2- CpG、H3N2-鼠抗H3N2及H3N2-PEG滴鼻免疫小鼠,检测肺泡灌洗液抗H3N2 IgA、血清抗H3N2 IgG效价。取免疫小鼠脾细胞,体外抗原刺激,用定量酶... 详细信息

目的研究流感裂解病毒疫苗抗原抗体复合物滴鼻诱生小鼠黏膜免疫应答。方法分别以15μgH3N2、H3N2- CpG、H3N2-鼠抗H3N2及H3N2-PEG滴鼻免疫小鼠,检测肺泡灌洗液抗H3N2 IgA、血清抗H3N2 IgG效价。取免疫小鼠脾细胞,体外抗原刺激,用定量酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清液IFN-γ及IL-4分泌水平。结果H3N2-抗H3N2免疫原性复合物诱生的抗H3N2 IgA效价明显高于H3N2单独免疫组(P<0．01),而与H3N2-CpG组无显著性差异。此外,复合物诱生的血清抗H3N2也高于H3N2单独免疫组(P<0．05)。H3N2-CpG组诱生的IFN-γ水平明显升高,而其他组之间无明显差异。结论流感病毒血凝素抗原抗体复合物、血凝素抗原加CpG佐剂可以诱生较强的局部黏膜免疫和体液免疫。这两组诱生的IgA效价均明显高于H3N2单独免疫组。另外,H3N2-CoG组小鼠的脾脏细胞经特异性抗原诱导后培养上清液中的IFN-γ水平明显升高。

关键词：流感病毒抗原抗体复合物黏膜免疫

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汉坦病毒S片段荧光定量PCR参考标准品的构建

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上海预防医学 2006年第9期18卷 432-434页

作者：周欣李燕婷沈荣明沈微娟瞿涤复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部重点实验室上海200032 上海市疾病预防控制中心上海200336

[目的]构建汉坦病毒S片段标准品,用于实时荧光定量PCR检测汉坦病毒。[方法]对S片段基因进行序列分析,利用引物设计软件设计出一对引物和一条荧光探针,提取病人总RNA,逆转录为cDNA,经PCR扩增,产物纯化后与PMD 18-T Vector连接,转化到大... 详细信息

[目的]构建汉坦病毒S片段标准品,用于实时荧光定量PCR检测汉坦病毒。[方法]对S片段基因进行序列分析,利用引物设计软件设计出一对引物和一条荧光探针,提取病人总RNA,逆转录为cDNA,经PCR扩增,产物纯化后与PMD 18-T Vector连接,转化到大肠杆菌DH5α,筛选得到标准品的质粒,提取质粒并进行定量。[结果]重组S片段基因质粒进行荧光定量PCR扩增出现强烈的荧光值增长,表明基因已成功克隆。以不同稀释水平的标准品进行扩增,统计学分析显示C t值与标准品浓度的对数存在良好线性关系,回归系数在0.99以上。成功制备并获得稳定的S片段重组质粒。[结论]该方法能大量制备质粒标准品,如何进行荧光RT-PCR条件的优化是关键所在。

关键词： S片段实时荧光定量PCR 标准品

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DOTS-Plus:控制耐多药结核病的有力武器

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上海预防医学 2006年第5期18卷 225-226页

作者：沈鑫梅建高谦上海市疾病预防控制中心上海200336 复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室上海200032

结核病仍然是全球最为严重的传染病之一.据世界卫生组织(WHO)估计,全球约1/3的人口感染结核,同时,每年新发活动性结核超过800万,约有200万人死于结核病.WHO推荐DOTS(Directly Observed Treatment,short-course,直接观察下短程督导化疗)... 详细信息

结核病仍然是全球最为严重的传染病之一.据世界卫生组织(WHO)估计,全球约1/3的人口感染结核,同时,每年新发活动性结核超过800万,约有200万人死于结核病.WHO推荐DOTS(Directly Observed Treatment,short-course,直接观察下短程督导化疗)策略以控制结核病的蔓延.DOTS虽然可以治愈85%以上的结核病人,但是短程化疗方案却不能完全治愈耐多药结核病(MDR-TB,至少同时对利福平和异胭肼耐药)患者,其治愈率一般不超过60%,即使在初治患者中也仅为40%左右,复治患者只有20%[2].因此,有相当一部分耐多药结核病人长期具有传染性,引起耐多药结核病的传播.与此同时,全球耐药及耐多药结核病的发病形势却十分严峻.据世界卫生组织/国际防痨与肺部疾病联盟(WHO/IUATLD)全球结核病耐药监测项目报告,虽然全球平均耐多药率仅为1%,但是在许多结核病高发地区,耐多药率却高达10%以上[3].值得注意的是,在占全球40%结核病患者的中国和印度,耐多药率也十分严重.在印度,新病人中有3.4%是耐多药患者,而据第四次全国结核病流调发现,我国的耐多药率更是高达10%以上.耐多药结核病已对全球结核病控制构成了严重的威胁.因此,除了DOTS策略外,必须在结核耐多药率较高的国家和地区采取另一种特殊而有效的治疗策略,以防止耐多药结核的传播.为了达到这一目的,WHO于1998年提出了DOTS-Plus策略。[第一段]

关键词：耐多药结核病结核病控制结核病患者世界卫生组织武器短程督导化疗短程化疗方案耐多药率 DOTS策略结核病人

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乙型肝炎病毒与干扰素在宿主细胞相互作用的研究

乙型肝炎病毒与干扰素在宿主细胞相互作用的研究

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首届北京地坛感染病学术会议

作者：袁正宏医学分子病毒学教育部卫生部重点实验室复旦大学上海医学院上海市公共卫生中心复旦大学生物医学研究院

@@目前Ⅰ型干扰素（下简称干扰素）已被临床广泛用于慢性乙型肝炎的治疗，但尚存在治疗效果有限、目前仍不清楚HBV与Ⅰ型干扰素在细胞内如何相互作用以拮抗干扰素的治疗等缺点。

关键词：乙型肝炎病毒干扰素宿主细胞拮抗干扰素

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适合我国结核分枝杆菌菌株基因型分型的方法

适合我国结核分枝杆菌菌株基因型分型的方法

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中华医学会结核病学分会2006年学术会议

作者：张璐陈婧高谦董海燕万康林沈鑫桂晓红梅建复旦大学上海医学院教育部医学分子病毒学重点实验室中国疾病预防控制中心传染病预防控制所上海市疾病预防控制中心结核病防治科

以结核分枝杆菌基因分型技术为基础的分子流行病学可以帮助我们更好的掌握结核病的流行病学信息,现已被广泛应用。IS 6110 RFLP分型方法是研究结核病分子流行病学的金标准,但其技术上要求高,所需时间长。以PCR技术为基础的可变DNA 串联... 详细信息

以结核分枝杆菌基因分型技术为基础的分子流行病学可以帮助我们更好的掌握结核病的流行病学信息,现已被广泛应用。IS 6110 RFLP分型方法是研究结核病分子流行病学的金标准,但其技术上要求高,所需时间长。以PCR技术为基础的可变DNA 串联重复区(variable number of tandem repeat,VNTR)和结核分枝杆菌散在分布重复

关键词：结核分枝杆菌菌株基因型分型分子流行病学分布重复单位

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表皮葡萄球菌AtlE蛋白介导生物膜起始黏附的相关机制

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世界感染杂志 2006年第5期6卷 469-469页

作者：欧元祝朱于莉陈洁敏秦智强江娟杨晓梅瞿涤复旦大学上海医学院教育部卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的探讨表皮葡萄球菌atlE基因编码的AtlE蛋白介导生物膜起始黏附的相关机制。方法采用RT-PCR法检测表皮葡萄球菌atlE基因在不同时期的表达水平，用紫外分光光度计检测DNA的方法检测了相应时期的胞外DNA的释放量，并用DNA酶（DNase□）... 详细信息

目的探讨表皮葡萄球菌atlE基因编码的AtlE蛋白介导生物膜起始黏附的相关机制。方法采用RT-PCR法检测表皮葡萄球菌atlE基因在不同时期的表达水平，用紫外分光光度计检测DNA的方法检测了相应时期的胞外DNA的释放量，并用DNA酶（DNase□）研究表皮葡萄球菌胞外DNA在生物膜形成和起始黏附中的作用；采用pBT2质粒同源重组敲除的方法构建了表皮葡萄球菌1457的atlE基因突变株。研究atlE基因敲除突变对起始黏附能力、生物膜形成及胞外DNA释放能力的影响。结果表皮葡萄球菌atlE基因的表达与胞外DNA的释放量有相关性；DNA酶能影响未成熟生物膜且能降低起始黏附能力；□atlE菌株胞外DNA的释放减少，起始黏附能力明显降低，不形成生物膜。结论表皮葡萄球菌atlE基因编码的AtlE蛋白能通过释放胞外DNA在表皮葡萄球菌的生物膜起作用。

关键词：表皮葡萄球菌生物膜形成黏附能力 E蛋白 Atl 关机介导 PCR法检测

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美国微生物学会杂志摘要

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微生物与感染 2006年第4期1卷 250-250页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

*** Einstein医学院的Casadevail提出了对人类的微生物毒力组学的概念，他认为土壤中的微生物通过相互作用可获得在动物宿主中致病的特性。每一种在土壤中栖身的微生物都有一套综合性特性，例如获得铁或产生分解蛋白的酶。当各种土壤微... 详细信息

*** Einstein医学院的Casadevail提出了对人类的微生物毒力组学的概念，他认为土壤中的微生物通过相互作用可获得在动物宿主中致病的特性。每一种在土壤中栖身的微生物都有一套综合性特性，例如获得铁或产生分解蛋白的酶。当各种土壤微生物间互相传递基因后，这些微生物则可以获得在动物及人群中传播的特性，其中尤为重要的是能在37℃生长。作者认为微生物的毒力组学应包括所有能在宿主中致病的毒力基因，但每一种微生物具有独特的毒力基因（或基因簇），从而可具有独特的致病特性。

关键词：微生物学会土壤微生物致病特性摘要杂志美国毒力基因生物毒力

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美国微生物学会杂志摘要

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微生物与感染 2006年第3期1卷 187-187页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

1．美国德州MD Anderson癌症研究中心开发了一种颗粒，是带有金（金属）的重组丝状M-13噬菌体的颗粒，据称可以用作影像诊断试剂，并还可能具有可将药物导入损伤组织的潜在作用。该组研究人员曾发现人血管系统具有特异的分子标记，并被... 详细信息

1．美国德州MD Anderson癌症研究中心开发了一种颗粒，是带有金（金属）的重组丝状M-13噬菌体的颗粒，据称可以用作影像诊断试剂，并还可能具有可将药物导入损伤组织的潜在作用。该组研究人员曾发现人血管系统具有特异的分子标记，并被称“邮编”（zip codes）。根据这一特性，他们利用重组噬菌体DNA可展示一些肽，从而可以识别这些“邮编”，而与之结合并到达特殊的组织内。

关键词：微生物学会美国噬菌体DNA 摘要杂志诊断试剂潜在作用分子标记

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微生物与感染 2006年第1期1卷 57-57页

作者：闻玉梅复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

1．目前，禽流感仍是全球微生物学界普遍关心的问题。Webster认为单纯扑杀感染的禽不是一项有效措施。泰国曾以扑杀感染禽的方法控制了疫情近1年，但HSN1病毒已重返。因HSNl病毒在亚洲野鸟中存在，故控制禽流感不能仅靠扑杀。由于在亚... 详细信息

1．目前，禽流感仍是全球微生物学界普遍关心的问题。Webster认为单纯扑杀感染的禽不是一项有效措施。泰国曾以扑杀感染禽的方法控制了疫情近1年，但HSN1病毒已重返。因HSNl病毒在亚洲野鸟中存在，故控制禽流感不能仅靠扑杀。由于在亚洲的小养殖场是散养，没有将家禽与野鸟隔离的网等设施，疫苗免疫成为很重要的措施。印度尼西亚科技部的Amin Soebandrio认为有些疫苗质量有问题，禽类免疫后禽类感染H5N1病毒后不死，反而继续排毒。据认为，好的疫苗注射1次即可产生有效保护，因此应不断研发质量高的用于禽类的疫苗。

关键词：微生物学会 News ASM H5N1病毒摘要杂志美国疫苗免疫疫苗质量印度尼西亚

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