检索结果-内蒙古大学图书馆

复旦学报（医学版） 2004年第1期31卷 69-70,77页

作者：高建军丰盛梅顾淑珠金慰芳王洪复复旦大学放射医学研究所骨代谢研究室上海200032

目的明确γ射线照射致淋巴细胞DNA损伤的量效关系,拟合曲线方程。方法采用聚苯乙烯凹槽单层铺胶后进行碱性单细胞凝胶电泳,观察γ射线外照射引起的人外周血淋巴细胞DNA损伤效应。应用IPP软件采集“彗星”尾长,利用SPSS软件进行数据分... 详细信息

目的明确γ射线照射致淋巴细胞DNA损伤的量效关系,拟合曲线方程。方法采用聚苯乙烯凹槽单层铺胶后进行碱性单细胞凝胶电泳,观察γ射线外照射引起的人外周血淋巴细胞DNA损伤效应。应用IPP软件采集“彗星”尾长,利用SPSS软件进行数据分析和曲线拟合。结果 γ射线照射导致淋巴细胞DNA单链断裂,DNA断片电泳图像清晰。“彗星”尾长与照射剂量正相关(r=0.907,P<0.01),量效曲线的拟合方程为y=109.369319-40.258796x+13.636240x^2(P<0.001)。结论一元二次方程可以很好反映淋巴细胞DNA断片迁移长度与γ射线照射剂量之间的量效曲线。

关键词：受照剂量 γ射线照射曲线拟合碱性单细胞凝胶电泳淋巴细胞DNA损伤量效关系

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碱性单细胞凝胶电泳铺胶技术的改进

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复旦学报（医学版） 2004年第3期31卷 311-312页

作者：高建军丰盛梅金慰芳复旦大学放射医学研究所骨代谢研究室上海200032

目的　聚苯乙烯孔槽单层铺胶技术在碱性单细胞凝胶电泳中的可行性研究。方法　自制聚苯乙烯孔槽的载胶片 ,将 1%低熔点凝胶与淋巴细胞混合后单层铺胶 ,经 6Gyγ射线照射后进行碱性单细胞凝胶电泳 ,观察胶面和淋巴细胞的DNA损伤情况。结... 详细信息

目的　聚苯乙烯孔槽单层铺胶技术在碱性单细胞凝胶电泳中的可行性研究。方法　自制聚苯乙烯孔槽的载胶片 ,将 1%低熔点凝胶与淋巴细胞混合后单层铺胶 ,经 6Gyγ射线照射后进行碱性单细胞凝胶电泳 ,观察胶面和淋巴细胞的DNA损伤情况。结果　载胶片孔槽单层灌胶后胶面平整 ,操作过程无脱落 ;淋巴细胞DNA电泳图像清晰 ,6Gy照射产生的“彗星”形态特征明显。结论　采用聚苯乙烯孔槽进行单层铺胶的技术。

关键词：碱性单细胞凝胶电泳铺胶技术聚苯乙烯孔槽琼脂糖 γ射线照射

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不同浓度地塞米松诱导大鼠间充质干细胞向成骨细胞的分化

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复旦学报（医学版） 2003年第2期30卷 164-166,F003页

作者：盛辉王洪复高建军金慰芳顾淑珠复旦大学放射医学研究所骨代谢研究室上海200032

目的　观察不同浓度地塞米松 (DEX)诱导大鼠间充质干细胞 (MSCs)向成骨细胞分化。方法　采用原代MSCs体外培养技术 ,取大鼠后肢双侧股骨和胫骨骨髓 ,通过静置贴壁获取MSCs。以DEX、β 甘油磷酸钠和抗坏血酸作为诱导剂 ,测定诱导后细胞的... 详细信息

目的　观察不同浓度地塞米松 (DEX)诱导大鼠间充质干细胞 (MSCs)向成骨细胞分化。方法　采用原代MSCs体外培养技术 ,取大鼠后肢双侧股骨和胫骨骨髓 ,通过静置贴壁获取MSCs。以DEX、β 甘油磷酸钠和抗坏血酸作为诱导剂 ,测定诱导后细胞的MTT增殖率 ,碱性磷酸酶 (ALP)活性以及矿化结节形成能力。应用ALP染色法观察细胞形态 ,并在倒置相差显微镜下观察诱导过程中细胞形态的变化。结果　低浓度 (10 -8、10 -9、10 -10 mol/L)DEX诱导后的细胞形态由长梭形逐渐变为立方形 ,ALP表达明显升高 (P <0 .0 1)并且能够形成矿化结节 ;高浓度 (10 -6、10 -7mol/L)DEX明显抑制MSCs的增殖 (P <0 .0 1) ,抑制ALP表达 (P <0 .0 1) ,细胞形态由饱满的长梭形变为胞质宽大的扁平形 ,呈瘫痪状 ,且不能形成矿化结节。结论　低浓度DEX能够诱导大鼠MSCs向成骨细胞分化。

关键词：间充质干细胞成骨细胞地塞米松细胞分化

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体外培养人成骨细胞BGP、IGF-1基因表达的增龄改变

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复旦学报（医学版） 2002年第2期29卷 105-108页

作者：于明香金慰芳顾淑珠王洪复复旦大学放射医学研究所骨代谢研究室上海200032

目的　探讨体外培养不同年龄组人成骨细胞BGP、IGF 1基因表达的增龄改变规律。方法　选择≤ 5岁、3 0～ 4 0岁、5 0～ 60岁、≥ 70岁 4个年龄组的松质骨 ,用 1∶1DMEM HamF 12培养液进行培养。不同年龄组两代人成骨细胞培养至 14d抽提... 详细信息

目的　探讨体外培养不同年龄组人成骨细胞BGP、IGF 1基因表达的增龄改变规律。方法　选择≤ 5岁、3 0～ 4 0岁、5 0～ 60岁、≥ 70岁 4个年龄组的松质骨 ,用 1∶1DMEM HamF 12培养液进行培养。不同年龄组两代人成骨细胞培养至 14d抽提细胞内总RNA ,应用RT PCR方法半定量检测BGP、IGF 1基因表达情况 ,并进行各年龄组比较。结果　各年龄组体外培养至 14d的两代人成骨细胞所抽提的细胞内总RNA量随增龄而降低 (男r=- 0 .783 ,女r=- 0 .873 ,均P <0 .0 0 1) ;各年龄组成骨细胞均检测到BGP与IGF 1的mRNA表达。BGP与IGF 1mRNA表达量于幼年组较低 ,3 0～ 4 0岁最高 ,之后随年龄增长逐渐降低 ,其表达量和年龄明显相关 (BGP男r2 =0 .3 2 8,女r2 =0 .3 0 1;IGF 1男r2 =0 .3 0 3 ,女r2 =0 .3 3 8,均P <0 .0 5 ) ,性别之间未见明显差异。结论　体外培养人成骨细胞的总RNA量随增龄而降低 ,不同年龄组人成骨细胞均表达BGP、IGF 1mRNA 。

关键词：人成骨细胞体外培养基因表达增龄 BGD IGF-1

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γ射线对体外培养骨细胞的作用观察

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辐射研究与辐射工艺学报 2002年第1期20卷 40-46页

作者：高建军高林峰金慰芳王洪复魏道林李凌波高艳虹周轶复旦大学放射医学研究所骨代谢研究室上海200032

采用137Csγ射线 (剂量率为 1Gy/min)单次照射的方法 ,研究了电离辐射对体外培养成骨细胞形态、增殖能力、ALP活性、矿化能力和骨钙素mRNA水平以及破骨细胞形态和凋亡率的影响。结果表明 ,低剂量电离辐射可影响成骨细胞功能 ,促进破骨... 详细信息

采用137Csγ射线 (剂量率为 1Gy/min)单次照射的方法 ,研究了电离辐射对体外培养成骨细胞形态、增殖能力、ALP活性、矿化能力和骨钙素mRNA水平以及破骨细胞形态和凋亡率的影响。结果表明 ,低剂量电离辐射可影响成骨细胞功能 ,促进破骨细胞凋亡发生 ,表现为成骨细胞增殖率、ALP活性和骨钙素mRNA水平不同程度下降和矿化结节形成能力的双相变化 (0 .5— 1Gy的促进作用和 6Gy的抑制作用 ) ;

关键词：辐射成骨细胞破骨细胞 γ射线骨损伤体外培养骨质疏松症脆性骨折

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15Gy ^(137)Csγ射线照射大鼠肾脏对骨代谢的影响

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辐射研究与辐射工艺学报 2003年第1期21卷 63-68页

作者：高林峰王洪复徐陪康徐爱红朱飞鹏复旦大学放射医学研究所骨代谢研究室上海200032

观察了γ射线照射大鼠双侧肾脏对骨代谢的影响。6月龄雄性SD大鼠20只,随机分为对照组(n=10)和双侧肾脏γ射线照射组(n=10)。应用137Csγ射线照射装置每侧肾脏照射15Gy,剂量率为0.91Gy/min,照射后饲养3个月。收集24h尿,处死动物,收集血... 详细信息

观察了γ射线照射大鼠双侧肾脏对骨代谢的影响。6月龄雄性SD大鼠20只,随机分为对照组(n=10)和双侧肾脏γ射线照射组(n=10)。应用137Csγ射线照射装置每侧肾脏照射15Gy,剂量率为0.91Gy/min,照射后饲养3个月。收集24h尿,处死动物,收集血、肾脏、腰椎、股骨、胫骨标本。测定血肌酐、尿素氮、钙、磷、25(OH)D3、1,25(OH)2D3、PTH和尿生白、β2微球蛋白、钙、磷、PYD/肌酐等指标。肾脏标本作光镜和透射电镜观察。第1—4腰椎和右侧股骨作骨密度测定,第3腰椎和右侧股骨作成分分析,第4腰椎和左侧胫骨上段作形态计量学分析。结果表明,射线致肾小球、肾小管和肾间质病理性损伤。与假手术组比较,射线照射组血尿素氮、肌酐和尿β2微球蛋白分别升高26％(p<0.05)、9％和29.6％(p<0.05),血清钙降低4％,血清磷升高2％,尿钙增加24％,尿磷减少35％(p<0.05),血清碱性磷酸酶活性提高17％(p<0.05),血清25(OH)D3变化不明显,而1,25(OH)2D3降低54.9％(p<0.05)血清PTH升高27.3％(p<0.05),尿PYD/肌酐值增加31.7％(p<0.05),腰椎骨密度降低13.0％(p<0.05),第4腰椎骨矿盐含量降低13.1％(p<0.05),右侧股骨骨密度、干重和灰重分别降低3.5％(p<0.05)、7.6％(p<0.05)和11.6％(p<0.05),骨小梁体积、平均骨小梁厚度和结点末端比分别下降13.

关键词： γ射线照射肾脏骨代谢放射治疗肾性骨病老年人代谢性骨病

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α骨化醇对肾辐射损伤大鼠骨密度、骨形态计量和骨生物力学的影响

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辐射研究与辐射工艺学报 2003年第3期21卷 210-213页

作者：朱飞鹏王洪复高林峰金慰芳复旦大学放射医学研究所骨代谢研究室上海200032

观察了α骨化醇对肾辐射损伤骨质疏松大鼠骨密度、骨形态计量和骨生物力学的影响,6月龄健康雄性SD大鼠32只,随机分为4组,每组8只,分别是模型组(Model),假手术组(Sham),α骨化醇治疗组(Bone one),治疗对照组(Fosamax)。肾脏局部辐射制备... 详细信息

观察了α骨化醇对肾辐射损伤骨质疏松大鼠骨密度、骨形态计量和骨生物力学的影响,6月龄健康雄性SD大鼠32只,随机分为4组,每组8只,分别是模型组(Model),假手术组(Sham),α骨化醇治疗组(Bone one),治疗对照组(Fosamax)。肾脏局部辐射制备骨质疏松模型,照射后1周开始给药,α骨化醇治疗组给予萌格旺0.1μg·kg^(-1) BW·d,对照组给予福善美10mg·kg^(-1) BW.d.药物用硝酸纤维素钠(CMC)制成混悬液,1mL/只,灌胃给予,连续3个月,动物颈动脉放血处死,收取L1-L4腰椎及右侧股骨,分别测定骨密度、骨形态计量和生物力学指标。结果表明,α骨化醇治疗组与模型组比较,腰椎骨密度明显提高(p<0.01),骨小梁体积、宽度显著增加,骨小梁间距变小(p<0.05,p<0.01),股骨、腰椎的最大载荷及最大应力明显增强(p<0.05,p<0.01)。α骨化醇对肾局部辐射诱导的骨质疏松模型大鼠的骨密度、骨形态计量和骨生物力学等指标有明显的改善作用。

关键词： α骨化醇肾脏辐射损伤骨形态计量骨生物力学骨密度大鼠

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电离辐射对体外培养肾小管上皮细胞1α羟化酶表达的影响

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辐射研究与辐射工艺学报 2006年第1期24卷 34-38页

作者：许莹莹金慰芳王洪复复旦大学放射医学研究所骨代谢研究室上海200032

研究电离辐射对体外培养肾小管上皮细胞1α羟化酶表达的影响。采用实时荧光定量(Real?timeQuantitativePolymeraseChainReaction,Real?timeQ?PCR)技术与透射电镜等方法,观察3Gy、5Gy和10Gy137Csγ射线单次照射(剂量率为0.85Gy/min)体外培养肾小管上皮细胞后1α羟化酶mRNA表达水平及细胞线粒体形态的改变,并与不受照(0Gy)组比较。结果表明,低剂量(3Gy)γ射线照射24h后即出现肾小管上皮细胞1α羟化酶mRNA表达水平的明显降低(p<0.05),且随受照剂量的增加下降幅度增大;电镜观察显示受照后肾小管上皮细胞线粒体呈现肿胀、基质变薄、电子密度减低、嵴断裂、数量减少与排列紊乱等变化。

关键词：电离辐射肾小管上皮细胞 1α羟化酶维生素D3

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成纤维生长因子(FGF)23基因沉默对甲状旁腺激素(PTH)促成骨细胞分化作用的影响

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复旦学报（医学版） 2013年第3期40卷 286-291页

作者：王金凤徐小雅丁巧灵周轶金慰芳王洪复高建军复旦大学放射医学研究所骨代谢研究室上海200032

目的研究内源性成纤维生长因子23(fibroblast growth factor 23,FGF23)对甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)促成骨细胞分化作用的影响。方法采用酶消化法分离培养新生SD大鼠头盖骨成骨细胞,应用小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA... 详细信息

目的研究内源性成纤维生长因子23(fibroblast growth factor 23,FGF23)对甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)促成骨细胞分化作用的影响。方法采用酶消化法分离培养新生SD大鼠头盖骨成骨细胞,应用小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰技术(RNAi)沉默成骨细胞FGF23表达,应用MTT法和PNPP法检测细胞增殖和碱性磷酸酶(alkaline phosphates,ALP)活性,应用real-time RT-PCR法检测其FGF23、ALP和骨钙素(osteocalcin,OCN)等基因mRNA水平,研究PTH对培养成骨细胞和FGF23基因沉默细胞的作用。结果 rhPTH1-34对培养成骨细胞增殖促进作用明显,分化促进作用弱。1×10-10～1×10-8mol/L rhPTH1-34作用3天,细胞增殖率增加31.6%～50.5%(P<0.05),而细胞比活性未见明显改变。同时其ALP和OCN转录水平轻度上调,分别较对照组增加35%(P<0.05)和16%(P>0.05)。rhPTH1-34上调成骨细胞FGF23mRNA水平(4倍),该作用可被针对FGF23特异的shRNA转染所抑制。FGF23基因沉默后PTH促分化作用明显增强,其ALP和OCN mRNA水平分别较对照组增加1.8倍(P<0.05)和5.8倍(P<0.05),显示内源性FGF23对PTH促分化的干扰作用。结论内源性FGF23可能参与PTH促分化作用的调节,FGF23上调可干扰PTH的促成骨细胞分化作用。

关键词：甲状旁腺激素(PTH) 成纤维细胞生长因子(FGF)23 RNA干扰(RNAi) 成骨细胞大鼠

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雌激素水平对大豆苷原(DAI)促成大鼠骨细胞分化作用的影响

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复旦学报（医学版） 2015年第2期42卷 191-197,203页

作者：丁巧灵王金凤徐小雅周轶金慰芳王洪复高建军复旦大学放射医学研究所骨代谢研究室上海200032

目的观察基础雌激素（estrogen）水平对大豆苷原（daizein,DAI）促成骨细胞分化作用的影响。方法采用酶消化法分离培养新生SD大鼠头盖骨成骨细胞,通过培养液中添加17β-雌二醇改变培养微环境（包括空白对照）雌激素水平,应用MTT法和对... 详细信息

目的观察基础雌激素（estrogen）水平对大豆苷原（daizein,DAI）促成骨细胞分化作用的影响。方法采用酶消化法分离培养新生SD大鼠头盖骨成骨细胞,通过培养液中添加17β-雌二醇改变培养微环境（包括空白对照）雌激素水平,应用MTT法和对硝基苯磷酸盐（p-nitropheny-phosate,PNPP）法检测细胞增殖率和碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性,应用real-time PCR法检测其雌激素受体α（ERa）、雌激素受体β（ERβ）和过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR）γ的mRNA水平变化,研究雌激素基础水平变化对DAI促成骨细胞分化作用的影响。结果培养环境中雌二醇水平升高致DAI的促分化作用减弱。其中100nmol/L DAI组ALP比活性较对照组的增幅由雌激素补充前的23%分别降至8%（17β-雌二醇为100pmol/L）和-11%（17β-雌二醇为1 000pmol/L）,显示基础雌激素水平对DAI促分化的拮抗作用。为避免培养液中血清雌激素的可能影响,进一步采用去激素血清培养（含2%去激素胎牛血清）。此时补充17β-雌二醇至100pmol/L,DAI各剂量组细胞ALP比活性较对照组明显增加（16%~21%,P〈0.05）。继续补充雌激素至1 000和10 000pmol/L时,其作用反而减弱。该结果显示,DAI促成骨细胞分化作用与雌激素基础水平有关,低雌激素状态（≤100pmol/L）可增强其作用。为进一步探索其作用机制,我们初步观察了雌激素（100pmol/L）和DAI（100nmol/L）单独或联合作用下成骨细胞ERa、ERβ和PPARγ受体表达变化。结果显示,100pmol/L 17β-雌二醇明显上调ERβ表达,并部分抵抗DAI下调ERβ的作用。结论 DAI的促成骨分化作用与基础雌激素水平有关,低雌激素（≤100pmol/L）状态有利于DAI的促分化作用,而雌激素水平升高可减弱其促分化作用。

关键词：成骨细胞大豆苷原(DAI) 雌激素碱性磷酸酶(ALP) 大鼠

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