检索结果-内蒙古大学图书馆

SR9009联合吲哚丙酸通过核因子κB信号通路减轻C2C12成肌细胞的炎症反应

中国组织工程研究 2025年第6期29卷 1220-1229页

作者：姬慧慧蒋旭张志敏邢运虹王亮亮李娜宋雨庭罗旭光崔慧林曹锡梅山西医科大学组织学与胚胎学教研室山西省晋中市030604 山西医科大学法医学院山西省晋中市030604 山西医科大学微生物免疫学教研室山西省晋中市030604 山西医科大学山西省临床级细胞治疗转化中试基地山西省晋中市030604

背景:钟基因Rev-erbα参与调节炎症,但激活Rev-erbα会增加心脑血管疾病风险。为降低相关风险,探索Rev-erbα激动剂SR9009联合其他药物来减轻骨骼肌成肌细胞炎症,奠定治疗炎症相关性骨骼肌萎缩的理论基础。目的:探讨脂多糖刺激C2C12成... 详细信息

背景:钟基因Rev-erbα参与调节炎症,但激活Rev-erbα会增加心脑血管疾病风险。为降低相关风险,探索Rev-erbα激动剂SR9009联合其他药物来减轻骨骼肌成肌细胞炎症,奠定治疗炎症相关性骨骼肌萎缩的理论基础。目的:探讨脂多糖刺激C2C12成肌细胞时吲哚丙酸、SR9009与核因子κB信号通路的关系。方法:①1μg/mL脂多糖刺激C2C12成肌细胞,RNA转录组测序结合KEGG通路富集分析信号通路。②CCK-8法检测C2C12成肌细胞活性,筛选吲哚丙酸的最佳给药浓度;然后将细胞分为空白对照组、脂多糖(1μg/mL)组、SR9009(10μmol/L)+脂多糖组、吲哚丙酸(80μmol/L)+脂多糖组、吲哚丙酸+SR9009+脂多糖组,ELISA检测细胞上清液中白细胞介素6水平,RT-qPCR检测白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、Toll样受体4、CD14 mRNA表达,Western blot检测NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达。③siRNA敲减Rev-erbα,RT-qPCR评估敲减效率,检测白细胞介素6、肿瘤坏死因子αmRNA表达。结果与结论:①与空白对照组比较,脂多糖时间依赖性抑制成肌细胞融合形成肌管,白细胞介素6、肿瘤坏死因子αmRNA表达水平升高,细胞上清液中白细胞介素6水平显著升高;KEGG通路分析支持脂多糖刺激激活核因子κB信号通路。②吲哚丙酸浓度>80μmol/L时抑制C2C12成肌细胞活性;吲哚丙酸和SR9009通过抑制核因子κB信号通路发挥抗炎作用,降低白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、Toll样受体4、CD14 mRNA表达水平,p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达比值低于脂多糖组。SR9009联合吲哚丙酸显著降低脂多糖诱导的炎症,Toll样受体4、CD14、白细胞介素6和肿瘤坏死因子αmRNA表达水平进一步下调,p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达比值显著低于吲哚丙酸+脂多糖组和SR9009+脂多糖组。③Rev-erbα随脂多糖刺激时间依赖性升高;siRNA敲减Rev-erbα效率达58%以上,成功敲减Rev-erbα后添加脂多糖,白细胞介素6和肿瘤坏死因子αmRNA表达较脂多糖组显著上调。④结果说明,Rev-erbα可以作为调节炎症反应的靶点,SR9009靶向激活Rev-erbα联合吲哚丙酸能抑制核因子κB信号通路显著减轻C2C12成肌细胞的炎症反应,联合抗炎效果优于单独干预。

关键词： Rev-erbα SR9009 吲哚丙酸脂多糖核因子κB信号通路 C2C12成肌细胞

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基于生物信息学筛选肝脏缺血-再灌注损伤泛凋亡关键基因

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器官移植 2025年第1期16卷 106-113页

作者：朱丽容郭乾杨洁张秋雯何贵柠虞燕青文宁董建辉李海滨孙煦勇广西医科大学基础医学院免疫学教研室南宁530021 广西医科大学第二附属医院移植医学研究所、广西器官移植临床医学研究中心、广西器官捐献与移植研究重点实验室广西医科大学第二附属医院全科医学科广西医科大学第二附属医院临床医学研究中心

目的探讨泛凋亡与肝脏缺血-再灌注损伤(HIRI)之间的关系,筛选HIRI的泛凋亡关键基因。方法通过基因表达综合数据库和GeneCards数据库获得泛凋亡相关差异表达基因(PDG)。通过基因本体(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)以及基因集富集... 详细信息

目的探讨泛凋亡与肝脏缺血-再灌注损伤(HIRI)之间的关系,筛选HIRI的泛凋亡关键基因。方法通过基因表达综合数据库和GeneCards数据库获得泛凋亡相关差异表达基因(PDG)。通过基因本体(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)以及基因集富集分析(GSEA)探索PDG相关的生物学途径。构建蛋白质相互作用网络。筛选关键基因,评估关键基因的诊断价值,并在HIRI小鼠中进行验证。基于转录样本中不同细胞类型相对丰度算法进行免疫细胞浸润分析。结果经筛选共获得16个PDG。GO结果显示,PDG与细胞代谢密切相关;KEGG结果显示,PDG主要富集在细胞凋亡等细胞死亡途径以及肿瘤坏死因子信号通路等免疫相关信号通路;GSEA结果显示,关键基因主要富集在丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路等免疫相关信号通路。筛选出DFFB和TNFSF102个关键基因,其在诊断HIRI方面准确度高,曲线下面积分别为0.964、1.000。免疫浸润分析结果显示,对照组静息自然杀伤细胞、M2型巨噬细胞等浸润较多,HIRI组M0型巨噬细胞、中性粒细胞、初始细胞等浸润较多。实时荧光定量聚合酶链反应结果显示,与Sham组比较,HIRI组小鼠肝组织DFFB信使RNA相对表达量增加,TNFSF10信使RNA相对表达量降低。Cibersort分析结果显示,初始B细胞浸润丰度与DFFB表达呈正相关(r=0.70,P=0.035),M2型巨噬细胞浸润丰度与TNFSF10表达呈正相关(r=0.68,P=0.045)。结论泛凋亡相关基因DFFB和TNFSF10可能是HIRI潜在的生物标志物和治疗靶点。

关键词：肝移植缺血-再灌注损伤泛凋亡生物信息学免疫微环境治疗靶点 DFFB TNFSF10

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大麻二酚对转化生长因子β1诱导肝星状细胞活化和肝纤维化的作用

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4965-4974页

作者：王联谢娜赵珮伶陈浩李芏酉王豫萍贵州医科大学附属医院临床检验中心贵州省贵阳市550003 贵州医科大学医学检验学院临床微生物学及免疫学教研室贵州省贵阳市550004

背景:大麻二酚具有抗炎、抗氧化等药理学作用,并且不具有精神活性,在肝脏疾病中的研究日渐增加,但其对肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号转导通路的作用尚未明确。目的:探讨大麻二酚对肝星状细胞中转化生长因子β1/Smad信号转导通路... 详细信息

背景:大麻二酚具有抗炎、抗氧化等药理学作用,并且不具有精神活性,在肝脏疾病中的研究日渐增加,但其对肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号转导通路的作用尚未明确。目的:探讨大麻二酚对肝星状细胞中转化生长因子β1/Smad信号转导通路的影响,研究其抗肝纤维化的可能机制。方法:(1)体外实验:选取大鼠肝星状细胞株(HSC-T6),分6组培养:对照组常规培养24 h,单纯药物组加入大麻二酚培养24 h,造模组加入转化生长因子β1培养24 h,造模+低剂量药物组、造模+高剂量药物组、造模+阳性对照组均加入转化生长因子β1培养24 h后分别加入1,5μmol/L大麻二酚或水飞蓟素培养24 h。培养结束后,检测各组细胞α-平滑肌肌动蛋白与Ⅰ型胶原mRNA表达、白细胞介素1β与肿瘤坏死因子α水平及Ⅰ型胶原、转化生长因子β1/Smad信号转导通路蛋白表达。(2)动物体内实验:将C57BL/6J小鼠随机分为5组,每组8只:假手术组不造模,造模组、造模+低剂量药物组、造模+高剂量药物组、造模+阳性对照组通过胆管结扎法建立肝纤维化模型,造模3周后分别腹腔注射4,8 mg/kg大麻二酚或水飞蓟素,1次/d,连续给药7 d。给药结束后,检测各组小鼠肝功能、肝脏病理形态及α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、转化生长因子β1/Smad信号转导通路相关蛋白表达。结果与结论:(1)体外实验:与对照组比较,造模组HSC-T6细胞α-平滑肌肌动蛋白与Ⅰ型胶原mRNA表达、白细胞介素1β与肿瘤坏死因子α水平以及Ⅰ型胶原、转化生长因子β1、p-Smad2/3蛋白表达均升高(P<0.05),Smad7蛋白表达降低(P<0.05);两种剂量大麻二酚处理可改善转化生长因子β1诱导的HSC-T6细胞上述指标的变化,并且以造模+高剂量药物组改善作用更明显;(2)体内实验:与假手术组比较,模型组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活性升高(P<0.05),肝组织中炎性细胞浸润及胶原含量增加(P<0.05),转化生长因子β1/Smad信号转导通路被激活,α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白表达升高(P<0.05);两种剂量大麻二酚干预可减轻造模小鼠上述指标的变化,并且以造模+高剂量药物组效果更明显;(3)结果表明,大麻二酚通过抑制肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号传导通路的激活抑制肝纤维化。

关键词：大麻二酚肝星状细胞肝纤维化信号转导通路转化生长因子β1/Smad HSC-T6细胞

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砷暴露通过激活ERK信号通路引起HepG2细胞脂质代谢紊乱

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现代食品科技 2025年第1期41卷 1-7页

作者：张文鑫曾淑娴田先兵吴杰根郭莲仙梁一广东医科大学医学技术学院检验医学研究所临床免疫学教研室广东省医学分子诊断重点实验室广东东莞523808 深圳市龙岗区妇幼保健院(汕头大学医学院龙岗妇幼临床学院)中心实验室广东深圳518172 广东医科大学公共卫生学院广东东莞523808

为探索食物砷暴露对肝脏脂质代谢的作用及其分子机制,该研究构建了长时间喂养含砷饲料的C57BL/6小鼠模型及HepG2细胞模型。利用透射电子显微镜观察小鼠肝脏切片的超微结构,通过免疫印迹及试剂盒法检测细胞脂质代谢相关指标。结果显示,... 详细信息

为探索食物砷暴露对肝脏脂质代谢的作用及其分子机制,该研究构建了长时间喂养含砷饲料的C57BL/6小鼠模型及HepG2细胞模型。利用透射电子显微镜观察小鼠肝脏切片的超微结构,通过免疫印迹及试剂盒法检测细胞脂质代谢相关指标。结果显示,砷暴露小鼠肝脏脂滴明显减少、变小。体外实验中,HepG2细胞在10、20、30、40μmol/L砷暴露后,固醇调节元件结合蛋白1c(Sterol Regulatory Element-Binding Protein 1c,SREBP-1c)相对表达分别为0.73、0.60、0.54、0.40,脂肪酸合成酶(Fatty Acid Synthase,FASN)相对表达水平分别为0.88、0.77、0.75、0.82;甘油三酯(Triglyceride,TG)相对表达分别为0.94、0.78、0.78、0.73;胆固醇(Total Cholesterol,TC)相对表达分别为0.95、0.73、0.70、0.57,细胞脂质代谢发生紊乱。细胞外信号调节激酶(Extracellular Signal-Regulated Kinase,ERK)磷酸化相对表达水平分别为5.72、23.78、33.20、47.17,ERK信号通路被激活。ERK抑制剂PD98059预处理后,HepG2细胞的SREBP-1c、FASN相对表达水平分别上升至1.2、1.3;TG、TC相对表达也分别恢复到1.2、1.2。该研究为ERK信号在砷暴露引起HepG2细胞脂质代谢紊乱中的作用提供了理论基础。

关键词：砷细胞外信号调节激酶脂质代谢

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血清CNPY2在胃癌中的表达水平及临床应用价值

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中国临床新医学 2025年第2期18卷 148-152页

作者：陈兰兰鞠瑛刘端瑞刘义庆刘芸张培莉彭美玉山东第二医科大学基础免疫学教研室潍坊261053 山东第一医科大学附属省立医院临床医学检验部济南250021

目的分析血清冠层成纤维细胞生长因子信号调节因子2(CNPY2)在胃癌中的表达水平及临床应用价值。方法收集2023年12月至2024年9月山东第一医科大学附属省立医院胃肠外科收治的65例胃癌患者的临床资料。其中早期胃癌39例(TNMⅠ期),进展期胃... 详细信息

目的分析血清冠层成纤维细胞生长因子信号调节因子2(CNPY2)在胃癌中的表达水平及临床应用价值。方法收集2023年12月至2024年9月山东第一医科大学附属省立医院胃肠外科收治的65例胃癌患者的临床资料。其中早期胃癌39例(TNMⅠ期),进展期胃癌26例(TNMⅡ期6例,TNMⅢ期17例,TNMⅣ期3例)。另选取该院同期胃部良性疾病患者43例作为良性组,以及体检健康者52名作为对照组。检测血清CNPY2、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原199(CA199)水平。通过受试者工作特征(ROC)曲线分析CNPY2、CEA、CA199对胃癌和早期胃癌的诊断效能。结果胃癌组CNPY2的中位浓度0.26 ng/mL高于良性组的0.21 ng/mL和对照组的0.21 ng/mL,胃癌组CEA的中位浓度2.21 ng/mL高于良性组的1.28 ng/mL和对照组的1.32 ng/mL,胃癌组CA199的中位浓度13.70 IU/mL高于对照组的9.26 IU/mL,差异有统计学意义(P<0.05)。TNMⅡ~Ⅳ期胃癌患者(22例)CNPY2的中位浓度0.27 ng/mL、CA199的中位浓度16.95 IU/mL分别高于TNMⅠ期胃癌患者(36例)CNPY2的中位浓度0.24 ng/mL、CA199的中位浓度11.05 IU/mL,低分化胃癌患者(34例)CNPY2的中位浓度0.27 ng/mL高于中高分化胃癌患者(24例)的0.25 ng/mL,人表皮生长因子受体2(HER2)阴性胃癌患者(18例)CEA的中位浓度3.44 ng/mL高于HER2阳性胃癌患者(40例)的1.88 ng/mL,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,CNPY2、CEA、CA199联合诊断胃癌[AUC(95%CI)=0.885(0.823~0.947)]和早期胃癌[AUC(95%CI)=0.857(0.780~0.933)]的效能较单项指标更高(P<0.05)。结论胃癌患者血清CNPY2水平明显升高,血清CNPY2、CEA、CA199联合检测可提高对胃癌和早期胃癌的诊断效能。

关键词：胃癌早期胃癌冠层成纤维细胞生长因子信号调节因子2 癌胚抗原糖类抗原199

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干扰素-γ在肿瘤免疫中的双重角色:抗肿瘤与促肿瘤作用

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生物过程 2025年第1期15卷 44-51页

作者：蓝轲王思涵宁仕勤黄嘉丽李晓泉广西医科大学第二临床医学院广西南宁广西医科大学基础医学院广西南宁广西医科大学基础医学院免疫学教研室广西南宁

干扰素-γ (IFN-γ)作为II型干扰素家族的核心成员,在肿瘤免疫调控中扮演着复杂的角色。一方面,IFN-γ可诱导肿瘤细胞凋亡、抑制血管生成、增强抗原呈递及细胞毒性T细胞功能,发挥显著的抗肿瘤作用。另一方面,低剂量或持续性的IFN-γ信... 详细信息

干扰素-γ (IFN-γ)作为II型干扰素家族的核心成员,在肿瘤免疫调控中扮演着复杂的角色。一方面,IFN-γ可诱导肿瘤细胞凋亡、抑制血管生成、增强抗原呈递及细胞毒性T细胞功能,发挥显著的抗肿瘤作用。另一方面,低剂量或持续性的IFN-γ信号可促进肿瘤干细胞特性、上皮–间质转化(EMT)及免疫检查点分子(如PD-L1)的表达,加剧肿瘤转移与免疫逃逸。本文系统地综述了IFN-γ的双向调控机制,IFN-γ与巨噬细胞、T细胞及抗原呈递细胞的动态相互作用,及IFN-γ免疫检查点抑制剂治疗中的关键作用。IFN-γ相关基因的表达水平与免疫治疗疗效密切相关,但其促肿瘤特性却限制其在临床中的应用。未来研究需进一步解析IFN-γ在肿瘤微环境中的作用,探索其靶向调控信号通路的策略,以优化癌症免疫治疗的精准性与安全性。本文为理解IFN-γ的免疫调控网络及其在肿瘤治疗中的应用提供了新的视角。Interferon-γ (IFN-γ), a core member of the type II interferon family, plays a complex dual role in tumor immune regulation. On one hand, IFN-γ can induce apoptosis in tumor cells, inhibit angiogenesis, enhance antigen presentation, and promote cytotoxic T cell function, thereby exerting significant anti-tumor effects. On the other hand, low doses of IFN-γ or persistent IFN-γ signaling may exacerbate tumor metastasis and immune escape by promoting stem cell characteristics, epithelial-to-mesenchymal transition (EMT), and the expression of immune checkpoint molecules such as PD-L1. This paper systematically reviews the bidirectional regulatory mechanisms of IFN-γ, dynamic interactions with macrophages, T cells, and antigen-presenting cells, as well as its critical role in immune checkpoint inhibitor therapy. Research indicates that the expression levels of IFN-γ-related genes are closely related to the efficacy of immunotherapy, but its protumor characteristics may limit clinical benefits. Future studies should further dissect the role of IFN-γ within the tumor microenvironment and develop strategies for targeted modulation of its signaling pathways to enhance the precision and safety of cancer immunotherapy. This paper provides new insights into understanding the immune regulatory network of IFN-γ and its application in cancer treatment.

关键词：干扰素-γ (IFN-γ) 肿瘤免疫免疫检查点抑制剂 JAK/STAT信号通路免疫逃逸肿瘤微环境

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肠道微生物群与儿童1型糖尿病发病机制相关研究现状

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国际内分泌代谢杂志 2025年第2期45卷 104-107页

作者：李佩奇亚森·买买提依明董丽明杨硕马依拉·买买提新疆医科大学儿科学院，乌鲁木齐　830011 新疆医科大学基础医学院免疫学教研室，乌鲁木齐　830011 新疆医科大学第一附属医院临床营养科，乌鲁木齐　830011

糖尿病是一种日益严重的慢性内分泌疾病，近年来，全球糖尿病发病率呈稳步上升的趋势。需要特别关注的是1型糖尿病(T1DM)，其在儿童中的患病率迅速增长，同时伴随的并发症严重，对患儿及其家庭造成了沉重负担。现阶段，国内外关于儿童T... 详细信息

糖尿病是一种日益严重的慢性内分泌疾病，近年来，全球糖尿病发病率呈稳步上升的趋势。需要特别关注的是1型糖尿病(T1DM)，其在儿童中的患病率迅速增长，同时伴随的并发症严重，对患儿及其家庭造成了沉重负担。现阶段，国内外关于儿童T1DM的研究已深入展开，近年来，研究人员开始密切关注肠道微生物与儿童T1DM的发生、发展之间的关系。肠道微生物群作为存在于人体肠道中的微生物集合，其组成、代谢物种类、丰度等因素均有可能对儿童T1DM的发生和发展产生影响。无论是针对小鼠或人体的相关研究，都显示了肠道微生物群与儿童T1DM之间存在一定的关联性。但是目前关于肠道微生物群与儿童T1DM的具体关联机制还不是很明确，某些关联结论还存在一定的争议。因此，探究肠道微生物群与儿童T1DM之间的关联因素，可以为儿童T1DM的预防、诊断和治疗提供新的思路和帮助。

关键词： 1型糖尿病儿童胃肠道微生物组免疫系统

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职业性铅接触对工人免疫功能指标的影响

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中华劳动卫生职业病杂志 2025年第1期43卷 37-43页

作者：李佐祥李燚李玲侯腾吴锡红陈友虹陈博商正玲贵州医科大学临床基础医学院免疫学教研室贵阳550025 贵州省第三人民医院(贵州省职业病防治院)检验科贵阳550008 贵州省第三人民医院(贵州省职业病防治院)职业病科贵阳550008

目的探讨职业性铅接触人群不同血铅负荷对其免疫功能部分指标的影响。方法于2023年10至12月,采用判断抽样方法,纳入贵州省某能源泉科技有限公司的126名职业性铅接触工人。通过问卷调查收集工人基本信息,电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)... 详细信息

目的探讨职业性铅接触人群不同血铅负荷对其免疫功能部分指标的影响。方法于2023年10至12月,采用判断抽样方法,纳入贵州省某能源泉科技有限公司的126名职业性铅接触工人。通过问卷调查收集工人基本信息,电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)检测研究人群血铅水平。根据血铅水平(血铅含量<200μg/L、200~400μg/L和>400μg/L)将工人分为组别1、组别2和组别3。采用流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群标志白细胞分化抗原(CD)和血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12p70、IL-17、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素(IFN)-γ表达水平,免疫散射比浊法测定血清中免疫球蛋白(Ig)A、IgG、IgM以及补体蛋白(C3、C4)水平。数据采用多组样本的秩和检验、χ^(2)检验或Fisher确切概率法进行统计分析。结果与组别1比较,组别2与组别3中铅接触人群的CD3^(+)CD8^(+)、CD4^(+)CD25^(+)细胞的占比降低(P<0.05),CD4^(+)CD95^(+)细胞占比增加(P<0.05);组别3中铅接触人群血清IL-1β、IL-2、IL-5、IL-8、IL-12p70、IFN-γ水平降低(P<0.05),组别2与组别3中铅接触人群血清中IgG、IgM水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析结果显示,研究对象血铅水平与外周血CD8^(+)CD95^(+)细胞、CD3^(+)CD8^(+)细胞、CD3^(-)CD16^(+)CD56^(+)细胞占比、IgG、IgM、IgA均呈负相关(r_(s)=-0.20、-0.22、-0.23、-0.24、-0.26、-0.35,P<0.05),与CD3^(+)CD4^(+)细胞呈正相关(r_(s)=0.18,P<0.05)。回归分析发现,血铅水平是CD8^(+)CD95^(+)细胞、CD3^(+)CD8^(+)细胞、CD3-CD16^(+)CD56^(+)细胞占比、IgG、IgM、IgA的影响因素(P<0.05)。结论不同的血铅负荷可导致职业性铅接触人群的外周血淋巴细胞亚群、细胞因子、免疫球蛋白水平发生异常改变,职业性铅接触人群体内铅负荷可能对其免疫功能产生一定影响。

关键词：铅职业接触淋巴细胞亚群细胞因子免疫球蛋白免疫功能相关性

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snx8a基因在早期斑马鱼胚胎中空间和时间特异性表达

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贵州医科大学学报 2025年第1期50卷 18-23页

作者：张乙进杨雁竹罗红莫大双舒莉萍江滟贵州医科大学医学检验学院临床微生物与免疫学教研室贵州贵阳550004 贵州医科大学基础医学院免疫学教研室&细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室&贵州省再生医学重点实验室贵州贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学实验动物中心贵州贵阳550025 贵州医科大学附属医院临床检验中心微生物免疫科贵州贵阳550004

目的探索snx8a基因在斑马鱼早期胚胎中的表达情况。方法使用Snap Gene 6.0.2软件对由NCBI数据库上拷贝的人类SNX8、斑马鱼Snx8a和Snx8b氨基酸序列进行氨基酸序列比对,利用转化连接、TA克隆等分子生物学方法构建原位杂交探针质粒;通过收... 详细信息

目的探索snx8a基因在斑马鱼早期胚胎中的表达情况。方法使用Snap Gene 6.0.2软件对由NCBI数据库上拷贝的人类SNX8、斑马鱼Snx8a和Snx8b氨基酸序列进行氨基酸序列比对,利用转化连接、TA克隆等分子生物学方法构建原位杂交探针质粒;通过收集不同发育时相的野生斑马鱼胚胎进行全胚胎原位杂交,观察斑马鱼早期胚胎中snx8a的空间表达情况、使用RT-qPCR检测斑马鱼早期发育不同时期snx8a基因的表达情况。结果氨基酸序列比对结果显示斑马鱼Snx8a较Snx8b与人的SNX8同源性更高;对构建的原位杂交探针质粒双酶切鉴定及测序结果显示,构建的探针质粒序列正确、质粒可用;全胚胎原位杂交结果显示,斑马鱼snx8a基因在胚胎一细胞期就开始表达,之后特异表达于斑马鱼头部及尾部造血区;RT-qPCR结果显示,snx8a基因表达逐渐升高,在胚胎12 hpf时达到峰值(P<0.05)。结论斑马鱼snx8a基因为母源性基因,其可能与斑马鱼神经发育和造血发育相关。

关键词：斑马鱼 snx8a基因生物信息学分析全胚胎原位杂交胚胎发育

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新型抗菌化合物HL-J6与金黄色葡萄球菌PBP1的相互作用研究

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陆军军医大学学报 2025年第9期47卷 912-921页

作者：徐铭琦史祥睿刘威段浩魏静邓炎江悦高英英李海波佳木斯大学临床医学院黑龙江佳木斯陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系微生物与生化药学教研室国家免疫生物制品工程技术研究中心重庆重庆大学药学院重庆陆军军医大学(第三军医大学)全军免疫学研究所重庆重庆医科大学附属巴南医院检验科重庆

目的探究新型抗菌化合物HL-J6与金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白1(penicillinbinding protein 1, PBP1)的相互作用。方法以MRSA252基因组DNA为模板,PBP1F/R为上下游引物,以Nde I/Xho I为酶切位点构建表达质粒pET30a-pbp1-39-608。将质... 详细信息

目的探究新型抗菌化合物HL-J6与金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白1(penicillinbinding protein 1, PBP1)的相互作用。方法以MRSA252基因组DNA为模板,PBP1F/R为上下游引物,以Nde I/Xho I为酶切位点构建表达质粒pET30a-pbp1-39-608。将质粒转入大肠杆菌中进行表达并通过亲和层析纯化获得PBP1-39-608蛋白;利用肽聚糖侧链主干肽的硫酯类似物S2d作为底物,测定HL-J6对PBP1-39-608转肽酶活性的抑制作用;用微量热泳动技术(microscale thermophoresis,MST)检测HL-J6与PBP1-39-608的亲和力,并通过细胞热转移实验(cell thermal shift assay,CETSA)确证结合作用;分别利用AutoDock Vina和Desmond软件进行分子对接和动力学模拟,明确HL-J6与PBP1-39-608蛋白的结合模式和关键氨基酸残基。结果成功构建pET30a-pbp1-39-608重组质粒,诱导表达后,经纯化获得相对分子质量约为65×103的PBP1-39-608蛋白;HL-J6可呈时间依赖性抑制PBP1-39-608的转肽酶活性(P<0.001);HL-J6与PBP1-39-608的结合解离常数Kd约为64.92μmol/L;分子对接结果显示HL-J6通过与ILE-348、ASN-370、THR-516、PHE-423等主要氨基酸残基相互作用结合在PBP1-39-608的活性口袋,结合评分为-8.38 kcal/mol(<-5.00 kcal/mol);动力学模拟结果显示二者结合后50 ns趋于稳定。结论 HL-J6可显著抑制金黄色葡萄球菌PBP1的转肽酶活性,并与其存在稳定的相互作用。

关键词：金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白 HL-J6 重组蛋白:相互作用

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