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四川大学学报（自然科学版） 2014年第3期51卷 592-596页

作者：王强王娅娜王程铖王玉姣吕士玉赵巍宁夏医科大学包虫病实验室银川750004 宁夏医科大学医学遗传学与细胞生物学教研室银川750004 宁夏回族自治区遗传与生殖重点实验室银川750004

表达纯化细粒棘球蚴重组蛋白14-3-3(rEg14-3-3)和Eg10(rEg10),分别免疫小鼠,8w后进行细粒棘球蚴原头蚴攻击感染.计算免疫保护力,检测脾组织中CD4+T、CD8+T细胞亚群以及T细胞增殖情况.实验结果表明,rEg14-3-3免疫组小鼠具有85.3%抵抗细... 详细信息

表达纯化细粒棘球蚴重组蛋白14-3-3(rEg14-3-3)和Eg10(rEg10),分别免疫小鼠,8w后进行细粒棘球蚴原头蚴攻击感染.计算免疫保护力,检测脾组织中CD4+T、CD8+T细胞亚群以及T细胞增殖情况.实验结果表明,rEg14-3-3免疫组小鼠具有85.3%抵抗细粒棘球绦虫感染的能力,而rEg10免疫组小鼠与对照组小鼠相比无免疫保护力;与PBS对照组相比,只有rEg 14-3-3免疫组的CD4+T细胞亚群的分布有明显差异,且rEg 14-3-3抗原能诱导淋巴细胞显著增殖.因此rEgl4-3-3蛋白能抑制细粒棘球蚴的生长,诱导小鼠产生高水平的免疫保护力,可作为疫苗候选分子.

关键词：细粒棘球绦虫 rEgl4-3-3 rEg10 免疫保护力

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冠心病患者数量皮纹学特征波动性不对称的研究

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人类学学报 2010年第4期29卷 431-436页

作者：陆宏霍正浩党洁师志云彭亮焦海燕钟慧军宁夏医科大学医学遗传与细胞生物学教研室银川750004 宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室银川750004 宁夏医科大学附属医院医学实验中心银川750004

本文研究了宁夏汉族男性256例(正常:128例;冠心病患者:128例)双手数量皮纹学特征及其波动性不对称,比较了其均值的差异性。结果表明:1)冠心病患者组与正常对照组相比较,指纹嵴线数、指纹总嵴线数及a-b嵴线数均值均低于正常对照组;2)冠... 详细信息

本文研究了宁夏汉族男性256例(正常:128例;冠心病患者:128例)双手数量皮纹学特征及其波动性不对称,比较了其均值的差异性。结果表明:1)冠心病患者组与正常对照组相比较,指纹嵴线数、指纹总嵴线数及a-b嵴线数均值均低于正常对照组;2)冠心病患者组双手atd角及a-b间距均值均高于对照组,双手atd角表现为显著增高(P<0.05),右手a-b嵴线数均值表现为患者组低于对照组,有显著性差异(P<0.01);3)冠心病患者组数量皮纹性状波动性不对称水平与对照组在FAⅡ(a-b嵴线数,P<0.01)及FAⅤ(atd角,P<0.05)两项上表现出显著增高;冠心病患者组a-b嵴线数FA分布在|R-L|≥7组显著增高(P<0.05)。

关键词：冠心病皮纹学波动性不对称拓印法

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细粒棘球绦虫Eg10诱导树突状细胞产生Th2免疫反应

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中国人兽共患病学报 2020年第6期36卷 439-447页

作者：王娅娜王婵王双宁夏医科大学基础学院医学遗传学与细胞生物学教研室银川750004 宁夏医科大学包虫病重点实验室银川750004 宁夏医科大学科学技术研究中心银川750004

目的研究细粒棘球绦虫蛋白10(antigen 10 of Echinococcus granulosus Eg10)对小鼠感染细粒棘球绦虫免疫机制的影响。方法通过体外培养骨髓来源的小鼠树突状细胞(Bone marrow dendritic cell,BMDC),用不同的抗原包囊囊液(hydatid fluid ... 详细信息

目的研究细粒棘球绦虫蛋白10(antigen 10 of Echinococcus granulosus Eg10)对小鼠感染细粒棘球绦虫免疫机制的影响。方法通过体外培养骨髓来源的小鼠树突状细胞(Bone marrow dendritic cell,BMDC),用不同的抗原包囊囊液(hydatid fluid HF)、Eg10、脂多糖(lipopolysaccharide LPS)单独或联合作用DC,共6组。通过扫描电镜和透射电镜观察各组DC形态学的变化;通过流式细胞仪检测DC的吞噬能力、迁移能力的变化、刺激T细胞增殖能力的变化及DC表面分子的表达情况;利用ELISA检测DC分泌各种细胞因子的变化。结果Eg10抑制DC向成熟状态发展,与囊液对照组相比,DC表面仅增多了褶皱,两者均可提高DC吞噬能力;刺激T细胞的增殖能力很弱,但是能够提高Treg细胞的含量;同时发现Eg10组DC表面分子MHCII和CD86的表达量高于空白组,分泌高含量的IL-10,IL-6。通过给予LPS联合刺激DC形态趋于半成熟状态,细胞表面树突增加,表面分子MHCII、CD80、CD40的表达增高,CD86的表达量降低;IL-10和IL-6的含量也相应的下降。结论Eg10诱导DC产生Th2反应。

关键词：树突状细胞 Eg10 免疫应答细粒棘球绦虫

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无精子症患者的染色体核型、Y染色体微缺失分析及诊断

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山东医药 2011年第42期51卷 24-26页

作者：刘春莲景万红彭亮焦海燕徐仙宁夏医科大学总医院银川750004 宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室宁夏医科大学医学遗传学与细胞生物学教研室

目的观察无精子症患者的异常染色体核型及Y染色体微缺失情况,并探讨诊断方法。方法采用染色体G显带及多重聚合酶链反应技术(PCR-RFLP)对96例无精子症患者(观察组)和40例正常生育者(对照组)进行外周血染色体核型分析及Y染色体基因检测,... 详细信息

目的观察无精子症患者的异常染色体核型及Y染色体微缺失情况,并探讨诊断方法。方法采用染色体G显带及多重聚合酶链反应技术(PCR-RFLP)对96例无精子症患者(观察组)和40例正常生育者(对照组)进行外周血染色体核型分析及Y染色体基因检测,采用放射免疫诊断技术检测血清性激素,采用经皮附睾穿刺精子抽吸术(PESA)/经皮睾丸穿刺精子抽吸术(TESA)进行睾丸精子学检查。结果观察组染色体核型异常者27例(占28.1%)、对照组2例;观察组共检出Y染色体AZF基因微缺失7例,其中AZFc缺失5例、AZFb+c缺失1例、AZFa+b+c缺失1例,对照组未检测到AZF缺失。观察组42例接受PESA/TESA,其中26例显微镜下可见精子(有精子组)、16例镜下未见精子(无精子组,术后组织病理学检查证实无精子);与有精子组相比,无精子组血清FSH及LH水平升高、T水平降低,P均<0.01。结论无精子症患者多表现为染色体核型异常和Y染色体基因AZF微缺失,遗传学分析和血清性激素水平检测有助于无精子症的诊断。

关键词：无精子症精子不育染色体核型 Y染色体 AZF微缺失性激素

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宁夏回族迟发性卟啉病一家系UROD基因突变分析

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中国皮肤性病学杂志 2011年第10期25卷 761-763页

作者：董灵娣喻楠霍正浩宁夏医科大学宁夏银川750004 宁夏医科大学附属医院皮肤科宁夏银川750004 宁夏医科大学遗传学与细胞生物学教研室宁夏银川750004

目的对宁夏地区首个回族迟发型卟啉病(PCT)家系进行uroporphyrinogen decarboxylase(UROD)基因的突变分析,以明确其分子病因。方法收集1个迟发性卟啉家系的外周血标本,用聚合酶链反应(PCR)扩增UROD基因的全部10个外显子,采用直接测序方... 详细信息

目的对宁夏地区首个回族迟发型卟啉病(PCT)家系进行uroporphyrinogen decarboxylase(UROD)基因的突变分析,以明确其分子病因。方法收集1个迟发性卟啉家系的外周血标本,用聚合酶链反应(PCR)扩增UROD基因的全部10个外显子,采用直接测序方法获得各外显子序列,并与NCBI网站公布的UROD的标准序列(NC号:000001.10)进行对比,对UROD基因的突变进行分析。结果该家系中的患者均为女性,家系成员UROD基因的10个外显子均扩增成功,与原始序列对比,未发现基因突变。结论 PCT家系UROD基因各外显子未发现突变。

关键词：迟发性卟啉病 UROD基因基因突变

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ERCC2单核苷酸多态性对宁夏原发性男性不育的影响

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中华男科学杂志 2014年第5期20卷 419-422页

作者：刘春莲焦海燕马强吴昕贾韶彤景万红阳清虎宁夏医科大学总医院生殖医学中心宁夏银川750004 宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学遗传学与细胞生物学教研室宁夏银川750004

目的：探讨DNA修复基因（ERCC2）单核苷酸多态性（SNPs）rs13181、rs1618536和SNPrs1799793对宁夏原发性男性不育的影响。方法：采用病例一对照研究方法，运用MassArraySNP技术，对宁夏地区351例原发性男性不育患者[年龄22—38（31．0&#... 详细信息

目的：探讨DNA修复基因（ERCC2）单核苷酸多态性（SNPs）rs13181、rs1618536和SNPrs1799793对宁夏原发性男性不育的影响。方法：采用病例一对照研究方法，运用MassArraySNP技术，对宁夏地区351例原发性男性不育患者[年龄22—38（31．0±4．2）岁]和327例健康生育对照人群[年龄19—42（33．04-5．9）岁]的ER—CC2SNPrs13181、m1618536和m1799793进行分型检测。结果：ERCC2SNPm13181、rs1618536和m1799793基因型频率和等位基因频率在病例组和对照组中的分布无统计学意义（P〉0．05），其中AnyG-anyA-anyA突变基因型频率在两组中分布具有统计学差异（OR=0．414，95％CI=0．176～0．970）。结论：ERCC2SNPrs13181、m1618536和rs1799793在宁夏地区男性原发性不育中存在交互作用，随着联合突变位点的增多，不育症的发病风险增加。

关键词： DNA修复基因,ERCC2 原发性男性不育单核苷酸多态性宁夏

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刚地弓形虫棒状体蛋白17(ROP17)真核表达载体的构建、表达及其激酶活性分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2014年第1期32卷 29-33页

作者：王海龙殷丽天张铁娥关丽孟晓丽刘红丽殷国荣山西医科大学医学寄生虫学研究所太原030001 山西医科大学生理学系太原030001 山西医科大学细胞生物学与遗传学教研室太原030001

目的构建刚地弓形虫RH株棒状体蛋白17(ROP17)真核表达载体,对表达产物进行激酶活性的检测和功能分析。方法根据刚地弓形虫ROP17蛋白编码基因(GenBank登录号为AM075203.1)设计引物,以弓形虫RH株速殖子总RNA为模板,RT-PCR扩增目的基因片段... 详细信息

目的构建刚地弓形虫RH株棒状体蛋白17(ROP17)真核表达载体,对表达产物进行激酶活性的检测和功能分析。方法根据刚地弓形虫ROP17蛋白编码基因(GenBank登录号为AM075203.1)设计引物,以弓形虫RH株速殖子总RNA为模板,RT-PCR扩增目的基因片段,克隆至真核表达载体p3×Flag-CMV-14,构建重组质粒p3×Flag-CMV-14/TgROP17。经菌液PCR、双酶切和测序鉴定正确后,用脂质体法转染至人胚肾细胞(HEK293T),RT-PCR和蛋白质印迹(Western blotting)分析表达产物;Western blotting检测其激酶活性;流式细胞术分析ROP17对转染宿主细胞凋亡的影响。结果 RT-PCR结果显示,从RH株弓形虫速殖子中扩增出约1 850 bp的基因片段。菌落PCR、双酶切和测序结果显示,重组质粒p3×Flag-CMV-14/TgROP17构建成功且序列正确。RT-PCR和Western blotting结果显示,在转染p3×Flag-CMV-14/TgROP17的细胞中有TgROP17的表达,基因片段大小为1 850bp,蛋白质相对分子质量(Mr)约为70 000,而转染空质粒组未见表达。Western blotting结果显示,ROP17可以磷酸化c-Jun蛋白;流式细胞术结果显示,ROP17抑制喜树碱(CPT)诱导的细胞凋亡,6 h和12 h的抑制率分别为20.6%和24.1%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建了真核表达载体p3×Flag-CMV-14/TgROP17,其表达产物具有激酶活性且能够抑制细胞凋亡。

关键词：刚地弓形虫棒状体蛋白17 真核表达丝氨酸苏氨酸激酶细胞凋亡

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四川省儿童中三种常见的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变型

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中华儿科杂志 2002年第6期40卷 371-372页

作者：何永蜀杜传书陶大昌陈芬杨春蕾徐鸣史红昆明医学院生物学教研室 650031 中山医科大学医学遗传学教研室四川大学基础医学院医学细胞生物学教研室成都市儿童医院

遗传性红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症是一组溶血性疾病的遗传基础，我国南方为高发区，在儿童中最为常见。发病的分子基础是G6PD基因突变，目前全世界已报道的G6PD突变类型已超过122种，中国人中G6PD突变型为15种，均为点突... 详细信息

遗传性红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症是一组溶血性疾病的遗传基础，我国南方为高发区，在儿童中最为常见。发病的分子基础是G6PD基因突变，目前全世界已报道的G6PD突变类型已超过122种，中国人中G6PD突变型为15种，均为点突变。其中最常见的有3种，即G1388A、G1376T和A95G突变，占50%以上。我国广东、广西、海南、云南等省和地区已进行了G6PD基因突变型研究。我们自2000年10月以来应用突变扩增系统（ARMS）方法，在G6PD缺乏症高发区四川省25例四川籍儿童中检测上述3种G6PD基因突变，现将结果报告如下。

关键词：四川儿童葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变型遗传性红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症疾病调查

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毛状分裂增强子1诱导肝干细胞向胆管细胞的分化

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西安交通大学学报（医学版） 2023年第4期44卷 505-510页

作者：张竞文于兵徐方李亚宁胡以平宁夏医科大学基础医学院代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏银川750004 海军军医大学细胞生物学教研室上海200003

目的探讨毛状分裂增强子1(hairy enhancer of split 1,Hes1)调控肝干细胞(liver epithelial progenitor cells,LEPCs)向胆管细胞分化的作用。方法将pTRE2hyg-Hes1和pTRE2hyg-EGFP-Hes1转染LEPCs,不同浓度强力霉素(doxycycline,DOX)诱导Hes1的表达。通过Western blotting、PCR、RT-PCR、Real-time PCR、免疫细胞化学和免疫荧光技术检测相关分子表达。以谷胱甘肽合成酶(glutathione synthetase,Gss)作为肝细胞分化的标记,以角蛋白19(keratin 19,Krt19)和肝核因子1β(hepatic nuclear factor 1β,HNF1β)为胆管细胞分化标记。结果RT-PCR和Real-time PCR检测结果显示,随着DOX浓度的增加,Hes1在LEPCs细胞中的表达逐渐增高,当DOX浓度为10μg/mL时,Hes1表达是未加DOX时的11.21倍,第5天Hes1的表达处于高峰,持续到第7天;Western blotting检测结果显示HES1蛋白表达也随着DOX浓度的增高而有所增加,HES1表达明显高于未经处理的LEPCs(P<0.05);免疫细胞化学染色显示,转染了pTRE2hyg-Hes1的细胞98%以上呈阳性染色,见于细胞核和细胞质。当Hes1在LEPCs细胞中表达上调后,Gss表达有所下降,Krt19和HNF1β表达增加。结论在pTet-on和pTRE2hyg-Hes1双转染的LEPCs中,Hes1上调可诱导LEPCs分化为胆管细胞。

关键词：毛状分裂增强子1 肝干细胞分化胆管细胞角蛋白19 谷胱甘肽合成酶肝核因子1β

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多巴胺受体基因多态性与海洛因依赖的关联性研究

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中国现代医学杂志 2012年第17期22卷 44-48页

作者：钟慧军彭亮徐惠娟霍正浩党洁刘军红朱永生宁夏生殖与遗传重点实验室(宁夏医科大学医学遗传学与细胞生物学教研室) 宁夏银川750004 宁夏大学生命科学学院宁夏银川750021

目的探讨多巴胺D1受体基因-48A/G、D2受体基因Taq1A及-141 ins/del、D3受体基因Ser 9Gly、D4受体基因-521C/T 5个多态性位点与海洛因依赖的相关性。方法严格按照诊断标准,选取无亲缘关系的海洛因依赖患者304例(海洛因依赖组)及健康体检... 详细信息

目的探讨多巴胺D1受体基因-48A/G、D2受体基因Taq1A及-141 ins/del、D3受体基因Ser 9Gly、D4受体基因-521C/T 5个多态性位点与海洛因依赖的相关性。方法严格按照诊断标准,选取无亲缘关系的海洛因依赖患者304例(海洛因依赖组)及健康体检者(正常对照组)320例提取基因组DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测5个多态性位点的基因型,采用SPSS 11.5软件分析各位点基因型、等位基因频率及组间差异。结果多巴胺D2受体基因Taq1A位点的基因型及等位基因频率分布在海洛因依赖组与正常对照组间差异有统计学意义(P<0.05),海洛因依赖组Taq1A位点的等位基因A1频率显著高于正常对照组(χ2=5.591,P=0.018,OR=1.314,95%CI=1.048～1.647);多巴胺D4受体基因-521C/T位点的基因型及等位基因频率分布在海洛因依赖组与正常对照组间差异有统计学意义(P<0.05),海洛因依赖组等位基因T频率显著高于正常对照组(χ2=9.663,P=0.002,OR=1.224,95%CI=0.970～1.545)。结论多巴胺D2受体基因Taq1A和多巴胺D4受体基因-521C/T位点多态性可能与海洛因依赖有关,携带有Taq1A多态性位点A1等位基因与-521C/T多态性位点T等位基因的个体可能更容易对海洛因产生依赖。

关键词：多巴胺受体多态性海洛因

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