目的：观察T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域（T cell immunoglobulin and ITIM domain,TIGIT）在三阴性乳腺癌（triplenegative breast cancer,TNBC）患者肿瘤组织及外周血CD8+T细胞的表达，探讨新型TIGIT阻断药物替瑞利尤单抗对TNBC患者...
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目的：观察T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域（T cell immunoglobulin and ITIM domain,TIGIT）在三阴性乳腺癌（triplenegative breast cancer,TNBC）患者肿瘤组织及外周血CD8+T细胞的表达，探讨新型TIGIT阻断药物替瑞利尤单抗对TNBC患者外周血CD8+T细胞功能的影响。方法：通过TCGA数据库、免疫组化染色检测TIGIT在TNBC肿瘤组织的表达，流式细胞术检测TNBC患者外周血CD8+T细胞TIGIT、程序性死亡蛋白（programmed cell death protein 1,PD-1）的共表达与细胞因子分泌功能。构建CD8+T细胞与TNBC细胞系HCC-1937、MDA-MB-231细胞共培养模型，使用流式细胞术、共聚焦荧光成像检测替瑞利尤单抗对TNBC患者CD8+T细胞抗肿瘤功能的影响。结果：TIGIT在TNBC患者肿瘤组织和外周血CD8+T细胞中表达升高（P<0.05）。与健康对照组相比，TNBC患者外周血TIGIT+PD1+CD8+T细胞数量显著增加，CD8+T细胞干扰素γ（interferongamma,IFN-γ）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-alpha,TNF-α）和颗粒酶B（granzyme B,GB）分泌能力显著降低，TIGIT+CD8+T细胞IFN-γ、TNF-α分泌能力较TIGIT-CD8+T细胞显著降低（P<0.05）。替瑞利尤单抗处理后，TIGIT+CD8+T细胞IFN-γ和TNF-α分泌能力显著增强（P<0.05）。在共培养模型中，替瑞利尤单抗可恢复TNBC患者CD8+T细胞诱导肿瘤细胞凋亡的能力，与恩沃利单抗联合使用能进一步增强其诱导凋亡能力。结论：替瑞利尤单抗可改善CD8+T细胞免疫抑制状态，恢复其肿瘤杀伤功能，与恩沃利单抗的联合使用能进一步增强其抗肿瘤作用。
目的探讨转录因子特异性蛋白1(specificity protein 1,SP1)在NF-κB相关性长链非编码RNA(NF-κB interacting long non-coding RNA,NKILA)影响增生性瘢痕成纤维细胞凋亡中的作用。方法提取并培养增生性瘢痕组织及其瘢痕旁邻近的正常皮...
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目的探讨转录因子特异性蛋白1(specificity protein 1,SP1)在NF-κB相关性长链非编码RNA(NF-κB interacting long non-coding RNA,NKILA)影响增生性瘢痕成纤维细胞凋亡中的作用。方法提取并培养增生性瘢痕组织及其瘢痕旁邻近的正常皮肤组织中人皮肤成纤维细胞作为实验细胞系,免疫荧光鉴定成纤维细胞;qRT-PCR检测人瘢痕旁正常皮肤组织来源的成纤维细胞(NSFBs)和增生性瘢痕组织来源的成纤维细胞(HSFBs)中NKILA mRNA的表达水平;构建NKILA的干扰片段,实验分组为:空白对照组、si-NC组、si-NKILA 1组、si-NKILA 2组、si-NKILA 3组,qRT-PCR检测si-NKILA干扰效率;Western blot检测空白对照组、si-NC组、si-NKILA组HSFBs中凋亡指标Bcl-2和Bax的表达水平,流式细胞术检测各组HSFBs凋亡率;构建SP1的干扰片段,实验分组为:空白对照组、si-NC组、si-SP11组、si-SP12组、si-SP13组,qRT-PCR检测si-SP1的干扰效率;qRT-PCR检测干扰转录因子SP1后HSFBs中NKILA mRNA的表达水平。结果与NSFBs相比,NKILA在HSFBs中表达明显升高(P<0.001)。干扰NKILA表达后,Bax蛋白表达水平与Bcl-2蛋白表达水平比值显著增加(P<0.001),HSFBs凋亡率明显增加(P<0.001);干扰转录因子SP1表达后,HSFBs中NKILA的表达下降(P<0.01)。结论lncRNA NKILA抑制增生性瘢痕成纤维细胞凋亡,且受转录因子SP1调控。
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