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c-Myc、mTOR、HIF-1α基因启动子区域DNA甲基化与类风湿关节炎的相关性

中华临床免疫和变态反应杂志 2019年第1期 611-616页

作者：黄海燕邹荣鑫李晓可褚赞波施善芬应颖彭勇张顺陈勇宁波市第二医院风湿免疫科宁波大学医学院宁波市第二医院干细胞与再生医学实验室

目的探讨基因(c-Myc、mTOR、HIF-1α)启动子区甲基化在类风湿关节炎(rheuma-toid arthritis,RA)发病中的作用。方法采集45例RA患者和45例健康对照者的外周血,通过焦磷酸测序技术检测c-Myc,mTOR与HIF-1α基因的甲基化水平。SPSS 20. 0... 详细信息

目的探讨基因(c-Myc、mTOR、HIF-1α)启动子区甲基化在类风湿关节炎(rheuma-toid arthritis,RA)发病中的作用。方法采集45例RA患者和45例健康对照者的外周血,通过焦磷酸测序技术检测c-Myc,mTOR与HIF-1α基因的甲基化水平。SPSS 20. 0进行统计学分析,并用Medcalc软件进行受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析。双侧P值<0. 05认为具有统计学差异。结果 HIF-1α位点1 (position 1,pos1)和c-Myc (pos 2、3、4、5、6)甲基化水平RA组与健康对照组比较均具有统计学差异(P <0. 05),经过Bonferroni校正后,c-Myc (pos 5、6)位点甲基化水平两组仍具有统计学差异(经Bonferroni校正后的P’值分别为0. 028和0. 042,P’值<0. 05)。基因c-Myc (pos 5、6)位点在RA组与健康对照组的甲基化率分别为pos 5:9. 2%(8. 1%,10. 2%),10. 0%(9. 2%,10. 9%),经Bonferroni校正后P’=0. 028; pos 6:7. 5%(6. 4%,8. 2%),8. 3%(7. 5%,9. 0%),经Bonferroni校正后P’=0. 042。ROC曲线显示,c-Myc (pos 5、6)对诊断RA准确性较低(ROC曲线下面积:0. 5～0. 7,P <0. 05),当c-Myc pos 5甲基化率≤9. 48%时,灵敏性(SE)和特异性(SP)值最大(SE为0. 69,SP为0. 67)。血红蛋白(hemoglobin,HB)在c-Myc (pos 2、4、6)位点上具有统计学差异(P<0. 05),其中基因c-Myc各位点的甲基化率与HB的相关系数分别为(pos 2:r=0. 306,P=0. 041;pos 4:r=0. 299,P=0. 046; pos 6:r=0. 334,P=0. 025)。结论结合基因功能分析,c-Myc (pos 5、6)低甲基化水平可能增加类风湿关节炎的发病风险,c-Myc (pos 2、4、6)可能通过调控辅助性T细胞(Thelper cell 17,Th17)/调节性T细胞(regulatory cell,Treg)平衡参与RA伴慢性病性贫血(anemia of chro-nic disease,ACD)的发病过程。

关键词： c-Myc mTOR HIF-1α 类风湿关节炎 DNA甲基化

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转化生长因子β在肝癌中的作用研究进展

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浙江医学 2018年第15期40卷 1765-1768页

作者：胡笑蓉蔡挺郭莳雨林静黄丹丹付丽云舒明张顺宁波市第二医院干细胞与再生医学实验室 315010 宁波市第二医院呼吸内科 315010 宁波市第二医院肝病科 315010 宁波市第二医院肝胆外科 315010

转化生长因子β(TGF-β)是一种多功能蛋白,也是肝细胞肝癌肿瘤微环境的重要组成成分。TGF-β在肝癌早期对肝癌细胞起抑制作用,在肝癌中后期则促进肝癌细胞增殖、侵袭和转移,且诱导机体免疫抑制、微血管生成及肝癌细胞耐药,对肝癌起双向... 详细信息

转化生长因子β(TGF-β)是一种多功能蛋白,也是肝细胞肝癌肿瘤微环境的重要组成成分。TGF-β在肝癌早期对肝癌细胞起抑制作用,在肝癌中后期则促进肝癌细胞增殖、侵袭和转移,且诱导机体免疫抑制、微血管生成及肝癌细胞耐药,对肝癌起双向调节作用。TGF-β在肝癌中的作用机制较为复杂,对TGF-β在肝癌发生、发展过程中扮演的角色及相关机制进行深入研究可为寻找肝癌治疗的新靶点提供理论参考。本文就TGF-β在肝癌中的作用研究进展作一综述。

关键词：转化生长因子β 肝细胞肝癌综述上皮细胞间质化

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c-Myc、mTOR、HIF-1α基因启动子区域DNA甲基化与类风湿关节炎的相关性

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中华临床免疫和变态反应杂志 2018年第6期12卷 611-616页

作者：黄海燕邹荣鑫李晓可褚赞波施善芬应颖彭勇张顺陈勇宁波市第二医院风湿免疫科浙江宁波315010 宁波大学医学院浙江宁波315211 宁波市第二医院干细胞与再生医学实验室浙江宁波315010

目的探讨基因(c-Myc、mTOR、HIF-1α)启动子区甲基化在类风湿关节炎(rheuma-toid arthritis,RA)发病中的作用。方法采集45例RA患者和45例健康对照者的外周血,通过焦磷酸测序技术检测c-Myc,mTOR与HIF-1α基因的甲基化水平。SPSS 20. 0进... 详细信息

目的探讨基因(c-Myc、mTOR、HIF-1α)启动子区甲基化在类风湿关节炎(rheuma-toid arthritis,RA)发病中的作用。方法采集45例RA患者和45例健康对照者的外周血,通过焦磷酸测序技术检测c-Myc,mTOR与HIF-1α基因的甲基化水平。SPSS 20. 0进行统计学分析,并用Medcalc软件进行受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析。双侧P值<0. 05认为具有统计学差异。结果 HIF-1α位点1 (position 1,pos1)和c-Myc (pos 2、3、4、5、6)甲基化水平RA组与健康对照组比较均具有统计学差异(P <0. 05),经过Bonferroni校正后,c-Myc (pos 5、6)位点甲基化水平两组仍具有统计学差异(经Bonferroni校正后的P'值分别为0. 028和0. 042,P'值<0. 05)。基因c-Myc (pos 5、6)位点在RA组与健康对照组的甲基化率分别为pos 5:9. 2%(8. 1%,10. 2%),10. 0%(9. 2%,10. 9%),经Bonferroni校正后P'=0. 028; pos 6:7. 5%(6. 4%,8. 2%),8. 3%(7. 5%,9. 0%),经Bonferroni校正后P'=0. 042。ROC曲线显示,c-Myc (pos 5、6)对诊断RA准确性较低(ROC曲线下面积:0. 5～0. 7,P <0. 05),当c-Myc pos 5甲基化率≤9. 48%时,灵敏性(SE)和特异性(SP)值最大(SE为0. 69,SP为0. 67)。血红蛋白(hemoglobin,HB)在c-Myc (pos 2、4、6)位点上具有统计学差异(P<0. 05),其中基因c-Myc各位点的甲基化率与HB的相关系数分别为(pos 2:r=0. 306,P=0. 041;pos 4:r=0. 299,P=0. 046; pos 6:r=0. 334,P=0. 025)。结论结合基因功能分析,c-Myc (pos 5、6)低甲基化水平可能增加类风湿关节炎的发病风险,c-Myc (pos 2、4、6)可能通过调控辅助性T细胞(Thelper cell 17,Th17)/调节性T细胞(regulatory cell,Treg)平衡参与RA伴慢性病性贫血(anemia of chro-nic disease,ACD)的发病过程。

关键词： c-Myc mTOR HIF-1α 类风湿关节炎 DNA甲基化

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SLC2A9、SLC22A12、ABCG2、P2RX7基因启动子区甲基化与原发性痛风

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中华临床免疫和变态反应杂志 2018年第5期12卷 510-516页

作者：应颖陈勇张顺黄海燕李晓可邹荣鑫褚赞波黄娴倩彭勇干敏芝耿保庆朱梦雅王筱萍宁波市第二医院风湿免疫科浙江宁波315010 宁波市第二医院肝细胞与再生医学实验室浙江宁波315010 宁波大学医学院 310000

目的探讨基因(SLC2A9、SLC22A12、ABCG2和P2RX7)启动子区甲基化在原发性痛风中的作用。方法于2016年1月至2017年1月在宁波市第二医院纳入原发性痛风患者50例,同期纳入50例健康体检者作为对照,采集所有受检者的外周血,采用焦磷酸测序技... 详细信息

目的探讨基因(SLC2A9、SLC22A12、ABCG2和P2RX7)启动子区甲基化在原发性痛风中的作用。方法于2016年1月至2017年1月在宁波市第二医院纳入原发性痛风患者50例,同期纳入50例健康体检者作为对照,采集所有受检者的外周血,采用焦磷酸测序技术检测SLC2A9、SLC22A12、ABCG2和P2RX7基因的甲基化率。采用SPSS 20. 0统计学软件对痛风组和对照组间的DNA甲基化率进行比较。结果痛风组患者SLC2A9 (pos 1、3、4、5、7)低于对照组、SLC22A12pos 2高于对照组,ABCG2 (pos 1、2、4、5、6)甲基化率明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0. 05)。其中痛风组与对照组SLC2A9基因各位点的甲基化率分别明显不同[pos 1:(0. 56±0. 05)%比(1. 27±0. 12)%,P=0. 042; pos 3:(0. 07±0. 01)%比(0. 82±0. 03)%,P=0. 012; pos 4:(1. 22±0. 23)%比(2. 69±0. 78)%,P=0. 043; pos 5:(0. 01±0. 00)%比(0. 76±0. 13)%,P=0. 003; pos 7:(0. 01±0. 00)%比(0. 87±0. 03)%,P=0. 003];基因SLC22A12 [pos 2:(94. 05±1. 13)%比(93. 15±2. 04)%,P=0. 008];基因ABCG2 [pos 1:(0. 76±0. 12)%比(1. 52±0. 34)%,P=0. 007; pos 2:(0. 12±0. 01)%比(0. 68±0. 11)%,P=0. 033; pos 4:(1. 06±0. 02)%比(1. 82±0. 32)%,P=0. 033;pos 5:(0. 10±0. 01)%比(0. 90±0. 02)%,P=0. 017; pos 6:(0. 04±0. 00)%比(0. 58±0. 03)%,P=0. 004]。但分析该3个基因的功能,只有基因SLC2A9的结果可解释痛风的发病机制。结论 SLC2A9(pos 1、3、4、5、7)低甲基化水平可能增加原发性痛风的风险。

关键词：基因启动子区原发性痛风甲基化表观遗传

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耐药基因与管家基因的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌亲缘关系研究

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中华医院感染学杂志 2016年第3期26卷 485-487页

作者：张顺黄左安胡珊珊费秋萍胡笑蓉江雪陈琳蔡挺宁波市第二医院干细胞与再生医学实验室浙江宁波315010

目的探讨耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药基因及可移动遗传元件遗传标记的携带情况及菌株之间的亲缘关系。方法收集2013年1-12月医院住院患者中分离到的20株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌,用gyrA与parC基因测序确认菌种,再采用聚合酶链反应(P... 详细信息

目的探讨耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药基因及可移动遗传元件遗传标记的携带情况及菌株之间的亲缘关系。方法收集2013年1-12月医院住院患者中分离到的20株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌,用gyrA与parC基因测序确认菌种,再采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析56种获得性耐药基因、12种MGEs标记、膜孔蛋白基因(ompK35、ompK36)以及喹诺酮类作用靶位基因(gyrA、parC),最后对检测结果作样本聚类分析。结果 20株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌共检出6种β-内酰胺类药物获得性耐药基因、2种膜孔蛋白基因、5种氨基糖苷类药物获得性耐药基因、2种喹诺酮类药物作用靶位基因、1种喹诺酮类药物获得性耐药基因、8种可移动遗传元件标记;样本聚类分析提示,10号为孤立株,其余19株呈明显的聚集性(A家族);A家族可分为A1和A2;A1又可分为A1-1和A1-2;A1-1再可分为A1-1-1和A1-1-2小家族;A1-1-1和A1-1-2小家族聚集性更为明显,并分别出现克隆播散。结论获得性耐药基因与管家基因检测结果提供了本组菌株耐药的遗传基础,并且与耐药表型相对应,样本聚类分析是监控医院感染实用手段。

关键词：肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类耐药基因可移动遗传元件样本聚类分析亲缘性

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耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药元件分析研究

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中华医院感染学杂志 2016年第1期26卷 4-6,25页

作者：张顺黄左安胡珊珊费秋萍高雪明黄丹丹陈琳蔡挺宁波市第二医院干细胞与再生医学实验室浙江宁波315010

目的探讨一组耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌获得性耐药基因及可移动遗传元件遗传标记的携带情况及关联性。方法收集2013年1-12月宁波市第二医院住院患者中分离到的20株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌,用gyrA与parC测序确认菌种,再采用聚合酶链反... 详细信息

目的探讨一组耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌获得性耐药基因及可移动遗传元件遗传标记的携带情况及关联性。方法收集2013年1-12月宁波市第二医院住院患者中分离到的20株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌,用gyrA与parC测序确认菌种,再采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类共56种获得性耐药相关基因和12种可移动遗传元件遗传标记,最后对检测结果作指标聚类分析。结果 20株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌每株均检出获得性耐药基因与可移动遗传元件标记,20株菌共检出6种β-内酰胺类获得性耐药基因、4种氨基糖苷类获得性耐药基因、1种16SrRNA甲基化酶基因、8种可移动遗传元件遗传标记,指标聚类分析提示bla KPC与ISKpn6相强关联,bla OXA-1与tnp513相强关联,17株bla KPC-2阳性菌bla KPC-ISKpn6连锁检测均为阳性。结论肺炎克雷伯菌中携带的耐药基因和耐药表表型相对应,携带bla KPC-2和bla IMP-4是该组菌耐碳青霉烯类的重要原因。

关键词：肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类获得性耐药基因可移动遗传元件指标聚类分析

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肝硬化大鼠肝缺血-再灌注损伤后Bsep、Mrp2表达在胆汁淤积中的作用研究

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浙江医学 2015年第16期37卷 1371-1374,1379页

作者：舒明王火平胡笑蓉黄左安黄丹丹王咖张顺宁波市第二医院肝胆外科 315010 江西省九江市第三人民医院肝胆外科宁波市第二医院干细胞与再生医学实验室 315010

目的研究肝硬化大鼠肝缺血-再灌注损伤(HIRI)后胆汁淤积的部分分子机制。方法将健康SD大鼠随机分成A、B、C 3组,每组15只,建立肝硬化、HIRI模型。A组为正常大鼠HIRI组,B组为肝硬化大鼠假手术组,C组为肝硬化大鼠HIRI组。每组大鼠肝门阻... 详细信息

目的研究肝硬化大鼠肝缺血-再灌注损伤(HIRI)后胆汁淤积的部分分子机制。方法将健康SD大鼠随机分成A、B、C 3组,每组15只,建立肝硬化、HIRI模型。A组为正常大鼠HIRI组,B组为肝硬化大鼠假手术组,C组为肝硬化大鼠HIRI组。每组大鼠肝门阻断时间为30min。分别检测各组大鼠术后第1、3、5天的胆汁DBil、TBil含量,血清AST、ALT、TBil、DBil含量;Western blot分析各组大鼠术后第1、3、5天胆盐输出泵(Bsep)、多耐药相关蛋白2(Mrp2)表达变化;免疫组织化学法分析Bsep蛋白的细胞亚定位。结果术后第1天,C组大鼠胆汁TBil、DBil含量均低于A组(均P<0.05);术后第3天,C组大鼠胆汁TBil、DBil含量均低于A组和B组(均P<0.05);术后第5天,3组大鼠胆汁TBil、DBil含量比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。C组大鼠术后第1、3天血清AST、ALT水平均高于A组,术后第1、3、5天血清TBil、DBil含量均高于A、B组(均P<0.05)。术后第1、3、5天,C组大鼠Bsep蛋白表达量均低于A组,术后第3、5天均低于B组(均P<0.05);C组Mrp2表达均低于A、B组(均P<0.05)。肝细胞Bsep蛋白明显向细胞质移位。结论与正常肝脏相比,硬化肝对缺血耐受能力差,HIRI后硬化肝的胆汁淤积情况更加严重。Bsep、Mrp2表达降低以及Bsep蛋白由细胞膜向细胞质移位的改变在硬化肝HIRI后胆汁淤积中起了重要作用。

关键词：肝缺血-再灌注损伤肝硬化胆汁淤积

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