检索结果-内蒙古大学图书馆

生物学杂志 2019年第6期36卷 36-41页

作者：李晟赵德蕊张声祥施圆圆杨青山王晨凯单春苗吴家文安徽中医药大学药学院合肥230012 安徽中医药大学研究生院合肥230012 安徽中医药大学科研实验中心新安医学教育部重点实验室合肥230038 安徽道地中药材品质提升协同创新中心合肥230012 安徽省中医药科学院合肥230012

克隆了中药材异叶天南星(Arisaema heterophyllum Blume)叶中凝集素(lectin)基因(Ahltn)的开放阅读框(ORF),并对其编码蛋白AhLTN的性质和结构进行了分析。首先从植物异叶天南星的新鲜叶片中提取总RNA,通过逆转录获取cDNA,经PCR扩增Ahlt... 详细信息

克隆了中药材异叶天南星(Arisaema heterophyllum Blume)叶中凝集素(lectin)基因(Ahltn)的开放阅读框(ORF),并对其编码蛋白AhLTN的性质和结构进行了分析。首先从植物异叶天南星的新鲜叶片中提取总RNA,通过逆转录获取cDNA,经PCR扩增Ahltn后与pMD19-T载体连接构成重组质粒,然后转化到大肠杆菌感受态细胞中培养,经菌液PCR鉴定后再进行测序验证,确定目的基因被成功克隆,进一步运用各种生物信息学软件对AhLTN的理化性质、进化关系和空间结构进行分析。结果显示,克隆获得了Ahltn的ORF,此基因片段长度为561 bp,编码186个氨基酸的蛋白质,经生物信息学分析AhLTN属于稳定蛋白,AhLTN与铁皮石斛的凝集素亲缘关系最近,四级结构显示其为二聚体,且两个单体的C末端发生了交换,每个单体中含有11个β折叠,呈“三棱镜”型,3个面均有保守的甘露糖结合区域。为天南星植物凝集素基因和蛋白功能的进一步研究和开发利用奠定了基础。

关键词：异叶天南星凝集素基因克隆生物信息学分析

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新藤黄酸对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

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安徽中医药大学学报 2019年第3期38卷 68-71页

作者：鲍金平陈贺骏涛侯梅程卉苏婧婧李庆林安徽中医药大学科研实验中心安徽合肥230038 省部共建新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038

目的探讨新藤黄酸对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度的新藤黄酸培养细胞24、48 h后,采用MTT法观察新藤黄酸对细胞生长的抑制作用;倒置显微镜下观察HUVECs细胞形态变... 详细信息

目的探讨新藤黄酸对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度的新藤黄酸培养细胞24、48 h后,采用MTT法观察新藤黄酸对细胞生长的抑制作用;倒置显微镜下观察HUVECs细胞形态变化;通过DAPI染色后倒置荧光显微镜观察新藤黄酸对细胞形态学的影响;通过Annexin V-FITC/PI双染及流式细胞术检测新藤黄酸对HUVECs细胞凋亡率的影响;Western blot检测新藤黄酸对HUVECs中凋亡相关蛋白Caspase-3的表达变化。结果 MTT检测结果显示新藤黄酸能够明显抑制HUVECs的增殖,并呈时效及量效关系;荧光显微镜观察结果显示,新藤黄酸作用HUVECs后出现大量凋亡细胞;流式细胞术结果显示,与空白对照组相比,随着新藤黄酸浓度的增加,细胞凋亡率明显增加;Western blot检测结果表明Caspase-3蛋白表达水平显著增加。结论新藤黄酸对HUVECs有明显的抑制作用,其作用机制可能是通过诱导细胞凋亡实现的。

关键词：新藤黄酸人脐静脉内皮细胞细胞凋亡

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独活药材香豆素类成分的高效液相色谱指纹图谱研究

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安徽中医药大学学报 2019年第1期38卷 87-92页

作者：王斌周安杨沫刘先华韩燕全安徽中医药大学科研实验中心安徽合肥230038 安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038 安徽中医药大学第一附属医院安徽合肥230031

目的建立独活中香豆素类成分的高效液相色谱指纹图谱分析方法,为独活药材的质量控制提供依据。方法采用C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以水-甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速1.2mL/min,柱温25℃,检测波长330nm。结果建立了独活药材香... 详细信息

目的建立独活中香豆素类成分的高效液相色谱指纹图谱分析方法,为独活药材的质量控制提供依据。方法采用C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以水-甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速1.2mL/min,柱温25℃,检测波长330nm。结果建立了独活药材香豆素类成分的高效液相色谱特征指纹图,标定了15个共有色谱峰,采用相似度评价、聚类分析、主成分分析对所收集的15批样品进行指纹图谱模式识别研究,对6个共有峰借助对照品进行了指认,采用高效液相色谱-电喷雾离子源-质谱技术并结合文献报道对其余9个共有峰进行了初步归属。15批独活药材的相似度结果为0.797～0.979。运用聚类分析,15批独活药材可大致聚成5类。结论该法所建立的独活药材香豆素类成分指纹图谱特征性强,为该药材的质量控制提供了实验依据。

关键词：独活香豆素高效液相色谱指纹图谱主成分分析聚类分析

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苦参双功能核酸酶1的体外表达及结构性质分析

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生物学杂志 2019年第2期36卷 17-21页

作者：赵德蕊廖怡刘苗苗杨青山吴家文安徽中医药大学研究生院合肥230012 安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室科研实验中心合肥230038 安徽中医药大学药学院合肥230012 安徽道地中药材品质提升协同创新中心合肥230038 安徽省中医药科学院合肥230038

植物双功能核酸酶1影响植株生长、发育及衰老,且研究表明其具有抗肿瘤活性。基于苦参转录组数据克隆了苦参(Sophora flavescens Ait.)中双功能核酸酶1基因的开放读码框(SfBFN1),分析其编码蛋白的理化性质和结构特点。采用RT-PCR方法扩增... 详细信息

植物双功能核酸酶1影响植株生长、发育及衰老,且研究表明其具有抗肿瘤活性。基于苦参转录组数据克隆了苦参(Sophora flavescens Ait.)中双功能核酸酶1基因的开放读码框(SfBFN1),分析其编码蛋白的理化性质和结构特点。采用RT-PCR方法扩增SfBFN1基因片段,纯化后与pET22b (+)载体连接并转化到大肠杆菌感受态细胞BL21,并以不同的诱导条件,筛选其体外表达的最适宜条件。结果获得了SfBFN1的开放读码框片段,长度为984 bp,编码327个氨基酸,SfBFN1蛋白分子质量约为36.2 ku;利用PHYRE2在线软件预测SfBFN1蛋白的部分三级结构,其富含α螺旋与β折叠,5个α螺旋包裹着7个β折叠,构成了蛋白质立体结构的框架。研究为SfBFN1蛋白开发成为抗癌蛋白质药物制剂奠定了实验基础。

关键词：苦参双功能核酸酶1 基因克隆生物信息学分析

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丹皮酚对MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞线粒体自噬和死亡的保护作用

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中国药理学通报 2018年第12期34卷 1655-1661页

作者：王训翠朱国旗赖桂华李庆林安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室科研实验中心安徽合肥230038 安徽医科大学基础医学院药理学教研室安徽合肥230032

目的研究线粒体自噬在MPP^+损伤SH-SY5Y细胞中的发生及丹皮酚的干预作用。方法以1 mmol·L^(-1) MPP^+诱导SH-SY5Y细胞损伤建立帕金森病模型。采用MTT和LDH法分别检测不同浓度的丹皮酚对MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞存活率和损伤度的影响... 详细信息

目的研究线粒体自噬在MPP^+损伤SH-SY5Y细胞中的发生及丹皮酚的干预作用。方法以1 mmol·L^(-1) MPP^+诱导SH-SY5Y细胞损伤建立帕金森病模型。采用MTT和LDH法分别检测不同浓度的丹皮酚对MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞存活率和损伤度的影响;MDC染色荧光显微镜下检测自噬空泡聚集;流式细胞术定量分析细胞内酸性自噬泡的形成;透射电镜观察线粒体自噬现象;激光共聚焦检测溶酶体和线粒体共定位;Western blot检测线粒体自噬相关蛋白parkin、LC3和Beclin-1的表达变化。结果在1～100μmol·L^(-1)浓度范围内,预先加入丹皮酚能拮抗MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞损伤,并呈一定的量效关系;SH-SY5Y细胞经MPP^+处理24 h,观察到自噬现象,出现自噬空泡增多,自噬水平增加,并存在较多的线粒体与溶酶体共定位的现象,LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白表达增加,parkin表达降低。预先加入丹皮酚后能逆转这些现象。结论丹皮酚抑制MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞线粒体自噬的发生,阻止神经细胞的死亡。

关键词：丹皮酚线粒体自噬 MPP^+ SH-SY5Y细胞细胞死亡帕金森病

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槐糖脂通过线粒体途径诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的机制

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山西医科大学学报 2019年第4期50卷 427-432页

作者：成利娟杨莉蒋磊侯梅马晓静安徽省第二人民医院药剂科合肥230041 安徽中医药大学科研实验中心新安医学教育部重点实验室合肥工业大学生物与医学工程学院

目的探讨槐糖脂抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖的作用,并阐明其诱导SGC-7901细胞线粒体凋亡的机制。方法不同浓度(40,80,160,320μg/ml)槐糖脂作用于人胃癌SGC-7901细胞,与未加槐糖脂处理的空白对照组进行比较,观察各浓度槐糖脂作用组中人... 详细信息

目的探讨槐糖脂抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖的作用,并阐明其诱导SGC-7901细胞线粒体凋亡的机制。方法不同浓度(40,80,160,320μg/ml)槐糖脂作用于人胃癌SGC-7901细胞,与未加槐糖脂处理的空白对照组进行比较,观察各浓度槐糖脂作用组中人胃癌SGC-7901细胞的变化。倒置显微镜观察槐糖脂作用后细胞活力变化,并采用CCK-8法检测各浓度槐糖脂作用后细胞的存活率; DAPI染色,荧光显微镜观察槐糖脂作用后细胞形态变化;罗丹明123(Rhodamine 123)染色,流式细胞术检测槐糖脂作用组及未加槐糖脂处理的空白对照组细胞内线粒体膜电位水平;采用Western blot检测各组Bcl-2、Bax、Cyt-C、Caspase 3及Caspase 9蛋白表达水平。结果与空白对照组比较,槐糖脂作用组人胃癌SGC-7901细胞活力下降,细胞存活率显著降低(P <0. 05),且降低程度与槐糖脂剂量成正相关,细胞形态呈现明显的凋亡样改变;与空白对照组比较,槐糖脂作用组人胃癌SGC-7901细胞线粒体膜电位显著降低(P <0. 05),Bax蛋白的表达量明显增加(P <0. 05),Bcl-2蛋白表达显著降低(P <0. 05),Cyt-C、Caspase 3及Caspase 9蛋白水平显著升高(P <0. 05)。结论槐糖脂能够抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖,其机制可能是通过线粒体凋亡途径诱导细胞发生凋亡。

关键词：胃癌槐糖脂线粒体途径细胞凋亡

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酸枣仁皂苷A对脂多糖诱导星形胶质细胞C6氧化损伤的保护作用

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安徽中医药大学学报 2018年第2期37卷 71-76页

作者：李冰洁张睿李庆林安徽中医药大学科研实验中心新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038

目的采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导星形胶质细胞C6的氧化应激模型,以研究酸枣仁皂苷A(Jujuboside A,JuA)的抗氧化活性。方法体外培养大鼠星形胶质细胞C6。采用MTT法检测各组细胞的存活率,采用Western blot法检测星形胶质细胞... 详细信息

目的采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导星形胶质细胞C6的氧化应激模型,以研究酸枣仁皂苷A(Jujuboside A,JuA)的抗氧化活性。方法体外培养大鼠星形胶质细胞C6。采用MTT法检测各组细胞的存活率,采用Western blot法检测星形胶质细胞标记蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的活化情况,采用Griess还原法测定细胞上清液中一氧化氮(nitric oxide,NO)水平,采用流式细胞术检测各组细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,采用ELISA测定各组细胞内丙二醛(malondialdehyde,MDA)和谷胱甘肽(L-glutathione,GSH)水平以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性。结果 0.125~50μmol/L JuA对C6细胞存活率无明显影响(P>0.05);1μg/mL LPS可以明显升高C6细胞GFAP蛋白表达水平,显著升高细胞上清液中NO和细胞内ROS、MDA水平,降低细胞内GSH水平和SOD活性,差异均有统计学意义(P<0.05)。与LPS组比较,12.5、25、50μmol/L JuA可以明显抑制LPS诱导的GFAP表达,降低细胞上清液中NO水平,降低细胞内ROS、MDA水平,升高细胞内GSH水平和SOD活性,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 JuA对LPS诱导的星形胶质细胞氧化损伤具有一定的保护作用。

关键词：脂多糖酸枣仁皂苷A 氧化应激 C6细胞

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酸枣仁皂苷A对脂多糖诱导小胶质细胞活化的影响及神经保护作用

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中国临床药理学与治疗学 2018年第2期23卷 126-131页

作者：张睿李冰洁李庆林安徽中医药大学科研实验中心安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038

目的:研究酸枣仁皂苷A(Ju A)对脂多糖(LPS)诱导BV-2小胶质细胞神经炎症发生的影响及神经炎症导致的神经元细胞损伤的保护作用。方法:以LPS(1μg/mL)刺激BV-2小胶质细胞24 h建立神经炎症模型,采用不同浓度的Ju A(2.5、5、10μmol/L)进行... 详细信息

目的:研究酸枣仁皂苷A(Ju A)对脂多糖(LPS)诱导BV-2小胶质细胞神经炎症发生的影响及神经炎症导致的神经元细胞损伤的保护作用。方法:以LPS(1μg/mL)刺激BV-2小胶质细胞24 h建立神经炎症模型,采用不同浓度的Ju A(2.5、5、10μmol/L)进行干预。MTT法检测Ju A单独及联合LPS对BV-2细胞存活率的影响;Griess法检测Ju A对激活的BV-2细胞NO释放的影响;ELISA法检测BV-2细胞上清液中TNF-α、IL-1β分泌水平;DCFH-DA探针法检测BV-2细胞内ROS水平;MTT法检测Ju A干预后的BV-2条件培养基对正常小鼠海马神经元细胞(HT-22)存活率的影响。结果:MTT结果显示,Ju A在浓度范围内对BV-2的存活率无明显影响。Griess和ELISA实验结果表明,Ju A可抑制激活的BV-2细胞NO、TNF-α、IL-1β释放水平,同时Ju A还可抑制细胞内ROS水平。此外,Ju A干预的BV-2条件培养基可抑制神经炎症对HT-22海马神经元细胞的损伤。结论:Ju A可在体外抑制LPS诱导的BV-2细胞的炎症发生并保护HT-22细胞因神经炎症受到的损伤。

关键词：酸枣仁皂苷A 小胶质细胞海马神经元细胞神经炎症神经保护

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清咽口服液治疗慢性咽炎的临床观察

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中国医药指南 2018年第31期16卷 28-29页

作者：苏婧婧李庆林安徽中医药大学科研实验中心新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038

目的考察清咽口服液治疗慢性咽炎的临床效果。方法将慢性咽炎患者108例随机分为治疗组54例和对照组54例,治疗组服用清咽口服液,对照组采用空白对照。结果与对照组比较,治疗组咽部症状改善率均显著升高(P <0.01),总积分显著降低(P <... 详细信息

目的考察清咽口服液治疗慢性咽炎的临床效果。方法将慢性咽炎患者108例随机分为治疗组54例和对照组54例,治疗组服用清咽口服液,对照组采用空白对照。结果与对照组比较,治疗组咽部症状改善率均显著升高(P <0.01),总积分显著降低(P <0.01);治疗组前后自身配对比较,咽部症状总积分低于服用前(P <0.01);与对照组比较,治疗组咽后壁滤泡增生、黏膜水肿的改善率显著升高(P <0.05),总积分显著降低(P <0.01);治疗组前后自身配对比较,咽部症状总积分低于服用前,差异有统计学意义(P <0.01)。结论清咽口服液对慢性咽炎有一定的治疗效果。

关键词：清咽口服液慢性咽炎临床观察疗效分析

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清咽口服液清咽功能的实验研究

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中医药临床杂志 2018年第9期30卷 1634-1636页

作者：苏婧婧李庆林安徽中医药大学科研实验中心新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038

目的:考察清咽口服液的清咽作用。方法:大、小鼠每日分别经口给予不同剂量的清咽口服液,阴性对照组给予等量蒸馏水。连续灌胃30d后,进行大鼠棉球植入实验、大鼠足趾肿胀实验、小鼠耳肿胀实验。结果:与阴性对照组比较,清咽口服液高剂量... 详细信息

目的:考察清咽口服液的清咽作用。方法:大、小鼠每日分别经口给予不同剂量的清咽口服液,阴性对照组给予等量蒸馏水。连续灌胃30d后,进行大鼠棉球植入实验、大鼠足趾肿胀实验、小鼠耳肿胀实验。结果:与阴性对照组比较,清咽口服液高剂量组大鼠肉芽肿净量、1h组织肿胀率、小鼠耳肿胀率均明显降低(P<0.05)。结论:动物实验结果表明清咽口服液具有清咽效果。

关键词：清咽口服液大鼠小鼠清咽

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