检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物制品学杂志 2025年

作者：鲁丹方一泰罗德炎王慧军事科学院军事医学研究院病原微生物生物安全全国重点实验室安徽医科大学基础医学院

目的建立一种DC2.4细胞源性外泌体的提取方法，并对其进行表征分析和功能鉴定。方法采用差速离心法提取DC2.4细胞上清中的外泌体，利用透射电子显微镜观察其形态特征，纳米粒度及Zeta电位分析仪检测其粒径大小、多分散性指数（polydis... 详细信息

目的建立一种DC2.4细胞源性外泌体的提取方法，并对其进行表征分析和功能鉴定。方法采用差速离心法提取DC2.4细胞上清中的外泌体，利用透射电子显微镜观察其形态特征，纳米粒度及Zeta电位分析仪检测其粒径大小、多分散性指数（polydispersity index,PDI）及Zeta电位，Western blot检测外泌体标志性蛋白CD9、TSG101、Hsp70的表达；ELISA法检测DC2.4细胞源性外泌体特异性蛋白主要组织相容性复合物（major histocompatibility complex,MHC）-Ⅰ、MHC-Ⅱ、CD86含量，并通过荧光显微镜观察巨噬细胞RAW64.7摄取外泌体的情况。结果从DC2.4细胞上清中分离提取的外泌体形态呈“茶托”状囊泡结构，直径30～200 nm；囊泡粒径主峰为154.56 nm，大小集中分布于（154.56±1.48）nm,PDI为0.086±0.027,Zeta电位为（-10.895±1.88）mV；表达CD9、TSG101、Hsp70蛋白；表面MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、CD86含量分别为488.94、762.37、0.365 ng/mL，差异有统计学意义（F=406.2,P <0.000 1）;RAW264.7细胞能够摄取DC2.4细胞源性外泌体。结论成功建立了一种DC2.4细胞源性外泌体的提取方法，为今后外泌体参与疫苗递送的研究奠定了实验基础。

关键词： DC2.4细胞外泌体主要组织相容性复合物-Ⅰ

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人体疟原虫乳酸脱氢酶基因多态性及B细胞表位预测

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中国血吸虫病防治杂志 2022年第1期34卷 28-35页

作者：黄和荣董莹邓艳徐艳春陈梦妮刘言张苍林安徽医科大学临床医学院基础医学部安徽合肥230031 云南省寄生虫病防治所、云南省疟疾研究中心、云南省虫媒传染病防控研究重点实验室云南普洱665000

目的分析4种人体疟原虫乳酸脱氢酶(Plasmodium lactate dehydrogenase,pLDH)基因多态性并预测pLDH肽链B细胞抗原表位。方法收集传染病报告信息管理系统中登记的云南省疟疾病例血样和流行病学等信息。采用巢式PCR技术扩增4种人体疟原虫p... 详细信息

目的分析4种人体疟原虫乳酸脱氢酶(Plasmodium lactate dehydrogenase,pLDH)基因多态性并预测pLDH肽链B细胞抗原表位。方法收集传染病报告信息管理系统中登记的云南省疟疾病例血样和流行病学等信息。采用巢式PCR技术扩增4种人体疟原虫pLDH基因并测序,应用MEGA 7.0.26和DnaSP 5.10软件分析4种人体疟原虫p LDH基因DNA序列多态性,并采用免疫表位数据库(IEDB)预测pLDH肽链B细胞抗原表位。结果分别从153份间日疟、29份恶性疟、17份卵形疟和11份三日疟患者血样中获得间日疟原虫LDH(PvLDH)、恶性疟原虫LDH(PfLDH)、卵形疟原虫LDH(PoLDH)、三日疟原虫LDH(PmLDH)基因测序序列,分别定义15、2、4、2种单倍型,核苷酸多样性指数(π)为0.104。Po LDH基因种内分化程度较高,π为0.012;PvLDH、PfLDH和PmLDH基因π值均<0.001。4种人体疟原虫pLDH肽链可预测到4~5个/链的B细胞抗原活性区,活性得分约0.430;其中活性区短肽"86-PGKSDKEWNRD-96"为4种人体疟原虫共有的B细胞抗原表位,"266-GQYGHS(T)-271"仅出现在PvLDH和PoLDH肽链,PvLDH、PfLDH肽链特有的B细胞抗原表位分别是"212-EEVEGIFDR-220"和"208-LISDAE-213"。结论PoLDH基因多态性可能来自微弱的负向纯化选择,PvLDH、PfLDH、PmLDH基因则可能维持了相对保守状态。p LDH肽链近C端可能存在可区分间日疟、恶性疟原虫感染的B细胞抗原表位"212-EEVEGIFDR-220"和"208-LISDAE-213"。

关键词：人体疟原虫乳酸脱氢酶基因多态性 B细胞表位表位预测

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青蒿琥酯体外抗弓形虫作用的实验研究

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蚌埠医学院学报 2023年第8期48卷 1018-1023,1029页

作者：崔洁吴心悦王小莉杨小迪夏惠沈继龙陈兴智蚌埠医学院显微形态综合实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院临床医学院安徽蚌埠233030 蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030 安徽医科大学安徽省人兽共患病重点实验室安徽合肥230032

目的:观察青蒿琥酯(Artesunate,Art)对体外培养的弓形虫感染模型的抑制作用。方法:采用表达绿色荧光蛋白的转基因弓形虫RH株(RH-GFP)感染小鼠腹腔巨噬细胞(Macrophage,Mφ),建立体外作用模型并分为对照组(0.9%氯化钠溶液阴性对照);Art组... 详细信息

目的:观察青蒿琥酯(Artesunate,Art)对体外培养的弓形虫感染模型的抑制作用。方法:采用表达绿色荧光蛋白的转基因弓形虫RH株(RH-GFP)感染小鼠腹腔巨噬细胞(Macrophage,Mφ),建立体外作用模型并分为对照组(0.9%氯化钠溶液阴性对照);Art组,药物浓度分别为1.5625、3.125、6.25、12.5、25、50、100和200μg/mL;阿奇霉素(Azithromycin,Azm)组(阳性对照),药物浓度分别为12.5、25、50、100、200、400、800和1600μg/mL;Art+Azm组,药物浓度分别为:Art1.5625+Azm12.5、Art3.125+Azm25、Art6.25+Azm50、Art12.5+Azm100、Art25+Azm200和Art50+Azm400μg/mL。各组孵育24 h后以流式细胞仪检测感染体系中虫体和细胞比例变化,以吉姆萨染色观察速殖子形态和结构变化。结果:与对照组相比,Art组弓形虫速殖子比例自3.125μg/mL起随着药物浓度的增加明显下降(P<0.01),50μg/mL时游离虫体比例低于0.3%,Mφ感染率低于1.6%。Azm组速殖子在400μg/mL时比例低于0.6%,Mφ感染率低于3.5%。Art+Azm组中Art12.5+Azm100μg/mL起速殖子比例低于0.04%,此时Mφ感染率低于1.8%。吉姆萨染色显示,各组随着药物浓度增加,弓形虫速殖子由香蕉状逐渐肿胀变形,细胞质内呈泡沫状,内部结构崩塌瓦解,直至细胞膜破裂内容物溢出,视野内仅残留固缩深染的胞核或碎片。结论:体外实验中,Art可显著杀伤弓形虫游离速殖子,降低宿主细胞感染率,该抗虫效果在一定范围内与浓度呈正相关。

关键词：青蒿琥酯刚地弓形虫体外巨噬细胞流式细胞术

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同一品牌不同系列卷烟烟气气溶胶的显微红外光谱研究

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安徽农业科学 2024年第24期52卷 154-157,202页

作者：王健李超王欣葛少林安徽省气溶胶解析调控及生物效应重点实验室安徽合肥230088 安徽中烟工业有限责任公司安徽合肥230088 安徽医科大学第二附属医院安徽合肥230601 安徽医科大学基础医学院安徽合肥230031

[目的]用显微红外光谱测定同一品牌不同系列卷烟的烟气气溶胶,建立快速区分模型。[方法]利用显微红外光谱测定同一品牌不同系列卷烟的烟气气溶胶,应用主成分分析(PCA)建立模型,并与传统方法测定的烟气烟碱量、烟气水分、焦油量、一氧化... 详细信息

[目的]用显微红外光谱测定同一品牌不同系列卷烟的烟气气溶胶,建立快速区分模型。[方法]利用显微红外光谱测定同一品牌不同系列卷烟的烟气气溶胶,应用主成分分析(PCA)建立模型,并与传统方法测定的烟气烟碱量、烟气水分、焦油量、一氧化碳量进行比较。[结果]显微红外光谱分析结果显示,H7、H11、H12、B1、B13和B14与其他样本距离较远,与传统方法测定结果基本吻合。[结论]显微红外光谱能快速区分同一品牌不同系列卷烟的烟气气溶胶,为卷烟的品质鉴定提供了一种新方法。

关键词：烟气气溶胶显微红外光谱主成分分析

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电离辐射诱导人肠上皮细胞焦亡机制

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军事医学 2024年第4期48卷 241-250页

作者：王琼洪剑郭瑾段君昭丁可昕台福敏郑晓飞葛常辉安徽医科大学基础医学院合肥230032 军事科学院军事医学研究院放射生物学北京市重点实验室北京100850 解放军总医院第八医学中心北京100091 解放军总医院京南医疗区北京100071

目的探讨消皮素E(GSDME)介导的细胞焦亡参与辐射诱导的肠损伤分子机制及消皮素(GSDM)蛋白家族是否通过通用的信号通路调控细胞焦亡。方法利用人正常结肠上皮NCM460细胞和人结肠癌HT-29细胞辐射不同剂量及辐射后不同时间,通过观察焦亡小... 详细信息

目的探讨消皮素E(GSDME)介导的细胞焦亡参与辐射诱导的肠损伤分子机制及消皮素(GSDM)蛋白家族是否通过通用的信号通路调控细胞焦亡。方法利用人正常结肠上皮NCM460细胞和人结肠癌HT-29细胞辐射不同剂量及辐射后不同时间,通过观察焦亡小泡、细胞存活、焦亡执行蛋白的切割进行焦亡指标的检测,对HT-29细胞过表达GSDME并辐射后通过RNA测序技术,对焦亡相关差异基因进行富集分析,筛选相关通路差异基因进行验证。结果辐射诱导NCM460细胞发生显著的细胞焦亡,HT-29细胞过表达GSDME后辐射诱导GSDME激活发生显著的细胞焦亡。成功模拟人肠细胞焦亡状态,过表达GSDME-N和GSDMD-N具有超过50%的焦亡状态下的差异基因;测序分析显示,焦亡状态下的基因主要富集在免疫反应、炎症反应和Rap1信号通路等。结论GSDME激活介导了辐射诱导肠细胞焦亡的发生,GSDM蛋白家族通过通用的调控模式参与细胞焦亡,辐射通过免疫反应、炎症反应和Rap1信号通路诱导GSDME/D激活调控细胞焦亡。

关键词：细胞焦亡电离辐射 RNA测序消皮素肠细胞

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重组Ⅲ型人源化胶原蛋白关键质量参数分析方法建立

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中国药学杂志 2024年第10期59卷 938-944页

作者：崔新玲孟晓光曹俊霞阚莹李红梅赵丙春李萍周伟中国计量科学研究院国家市场监督管理总局营养与健康化学计量及应用重点实验室北京100029 蛋白质药物国家工程研究中心北京102206 安徽医科大学基础医学院合肥230032 华熙生物科技股份有限公司济南250101

目的针对重组Ⅲ型人源化胶原蛋白的关键质量参数进行检测方法研究。方法采用基质辅助激光解吸/飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)及尺寸排阻色谱与多角度光散... 详细信息

目的针对重组Ⅲ型人源化胶原蛋白的关键质量参数进行检测方法研究。方法采用基质辅助激光解吸/飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)及尺寸排阻色谱与多角度光散射联用(size exclusion chromatography with multi-angle light scattering,SEC-MALS)法测定相对分子质量及其分布;采用毛细管凝胶电泳(capillary electrophoresis sodium dodecyl sulfate,CE-SDS)和分子排阻高效液相色谱(size exclusion high performance liquid chromatography,SE-HPLC)分析纯度;采用离子交换法和毛细管区带电泳(capillary zone electrophoresis,CZE)分离分析电荷异构体;采用“双”酶切肽图法进行一级结构鉴别试验和序列覆盖率分析。结果MALDI-TOF MS测得相对分子质量45.01×10^(3);SEC-MALS得到其单体相对分子质量为45.17×10^(3)(±0.226%);两种相对分子质量测定方法结果一致。CE-SDS(非还原)纯度为98.77%,其他成分1.23%;SE-HPLC纯度为98.07%,其他成分1.93%;两种纯度测定方法结果一致。强阳离子交换共鉴定到14种电荷异构体组分,其中酸性峰占比52.08%,主峰占比26.22%,碱性峰占比21.70%;CZE鉴定到8种电荷异构体组分,其中酸性峰占比52.10%,主峰占比25.27%,碱性峰占比22.63%;两种电荷异构体鉴别方法,酸性组分、主峰与碱性组分,分布规律一致。“双”酶切肽图法实现重组Ⅲ型人源化胶原蛋白的序列100%覆盖,实测序列与预期序列一致。结论建立了重组Ⅲ型人源化胶原蛋白关键质量参数分析方法,该方法具有保证产品安全、有效、质量可控的特点,为我国重组Ⅲ型人源化胶原蛋白的质量控制提供了参考依据。

关键词：重组Ⅲ型人源化胶原蛋白相对分子质量分布电荷异构体序列覆盖率质量控制

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假单胞菌属中新型Inc_(pGRT1)质粒的遗传特性及其潜在传播风险

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安徽医科大学学报 2023年第8期58卷 1261-1266页

作者：李昕悦王鹏陈方舟穆小飞卢秀慧贺家琪郑亚丽周冬生殷喆安徽医科大学基础医学院合肥230032 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的分析来自假单胞菌的Inc_(pGRT1)质粒的基因组结构和遗传特征,阐明其潜在的传播风险。方法对临床分离菌株15420352进行分纯和保种后提取基因组DNA,随后进行全基因组测序。测序获得了质粒p420352-strA的完整序列,并对其进行质粒型... 详细信息

目的分析来自假单胞菌的Inc_(pGRT1)质粒的基因组结构和遗传特征,阐明其潜在的传播风险。方法对临床分离菌株15420352进行分纯和保种后提取基因组DNA,随后进行全基因组测序。测序获得了质粒p420352-strA的完整序列,并对其进行质粒型别判断。对所有5个已测序的同型别质粒进行了骨架区和外源插入区的精细注释,其中包括本研究中测序的1个质粒p420352-strA和来自GenBank的4个质粒。主要通过RAST、Plasmidfinder、Blast、ResFinder和ISfinder等核定质粒的ORFs并筛查耐药毒力等相关的关键基因。结果 5个质粒被划分为新的Inc_(pGRT1)型质粒。它们均存在保守的IncpGRT1骨架标记,除主复制子repAInc_(pGRT1)外,还筛查到这些质粒均获取了一个辅复制子。5个IncpGRT1质粒携带了至少3个不同的主要外源插入区:srp区域、msr区域、Tn5053家族转座子。这些质粒中共发现3个已知的涉及2类抗生素耐药和重金属抗性的基因:strA、strB、mer。并发现在这些质粒里携带了至少1种毒力因子msr和5种关键的转运蛋白srp、emrE、mod、phn及lpt。结论 IncpGRT1型质粒已经成为一些耐药基因及毒力基因在假单胞菌属中积累和传播的重要载体,并提高了菌株的环境适应性。

关键词：假单胞菌属移动元件质粒比较基因组学

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基于CRISPR/dCas9-SAM系统筛选胃癌细胞增殖相关基因

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安徽医科大学学报 2022年第11期57卷 1693-1698页

作者：彭玉巩琦凡台福敏王田田葛常辉郑晓飞秦宜德付汉江安徽医科大学基础医学院合肥230032 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所放射生物学北京重点实验室北京100850

目的利用CRISPR/dCas9-SAM系统探究影响胃癌细胞AGS增殖相关基因,分析其在胃癌发生发展中的作用。方法针对胃癌与正常胃组织差异表达的基因设计sgRNA,构建包装后获得慢病毒文库。以该文库感染AGS细胞后不同时间点作为筛选压力,收取第0、... 详细信息

目的利用CRISPR/dCas9-SAM系统探究影响胃癌细胞AGS增殖相关基因,分析其在胃癌发生发展中的作用。方法针对胃癌与正常胃组织差异表达的基因设计sgRNA,构建包装后获得慢病毒文库。以该文库感染AGS细胞后不同时间点作为筛选压力,收取第0、7、14天3个时间点的AGS细胞。高通量测序分析感染后不同时间点AGS细胞中sgRNA富集情况,获得与AGS细胞增殖相关差异基因。结果生物信息学显示与0 d组相比,7 d组、14 d组分别获得阴性筛选差异基因42、45个,阳性筛选差异基因59、40个。其中7 d组和14 d组中阴性筛选和阳性筛选共有的基因各11个。结论筛选获得11个抑制AGS细胞增殖的基因,其中5个为蛋白编码基因,6个为长链非编码RNA(lncRNA)基因;筛选获得11个促进AGS细胞增殖的候选基因,其中3个为蛋白编码基因,8个为lncRNA基因。为进一步功能验证、全面解析胃癌发生发展过程奠定基础。

关键词： CRISPR/dCas9-SAM系统细胞增殖胃癌长链非编码RNA

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复方苦参注射液生物碱类成分及血中移行成分的分析

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安徽中医药大学学报 2023年第4期42卷 93-97页

作者：张莉吴欢尹艳艳安徽医科大学基础医学院药理学教研室安徽合肥230032 安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038

目的利用超高效液相色谱—电喷雾离子化—四极杆飞行时间质谱(ultra-high-performance liquid chromatography-electrospray ionization-quadrupole time-of-flight mass spectrometry,UHPLC-ESI-QTOF/MS)结合UNIFI构建靶向筛查策略分析复方苦参注射液(Compound Kushen Injection,CKI)的生物碱类成分及血中移行成分。方法首先,采用ESI-QTOF/MS的全信息串联质谱技术采集经UHPLC分离的CKI样品及其空白样品、CKI给药后的大鼠血浆样品及空白血浆样品的信息;然后,建立CKI生物碱化学成分数据库,与MS E数据一同导入UNIFI进行靶向筛查;依据母离子、碎片离子的精确质量对筛查出的化合物进行识别;最后,使用MassLynx 4.1工作站对UNIFI输出的结果进行核实。结果本实验共分离、鉴定了20种CKI生物碱,其中17种生物碱能在大鼠血浆中被检出。结论该方法能够快速分析CKI生物碱类成分及其血中移行成分,可为CKI的质量控制及药效物质研究提供参考。

关键词：超高效液相色谱电喷雾离子化四极杆飞行时间质谱全信息串联质谱技术复方苦参注射液生物碱类成分血中移行成分

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大气压低温等离子体抑制甲状腺未分化癌CAL-62细胞生长的机制研究

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安徽大学学报（自然科学版） 2023年第1期47卷 93-102页

作者：吴慧刘芳张利伟刘磊宋文成王宏志安徽医科大学基础医学院安徽合肥230032 中国科学院合肥物质科学研究院安徽省医学物理与技术重点实验室健康与医学技术研究所安徽合肥230031 中国科学院合肥肿瘤医院安徽合肥230031 安徽职业技术学院环境与生命健康学院安徽合肥230061

为了探究大气压低温等离子体(CAP)抑制间变性甲状腺癌的作用机制,应用转录组测序技术,借助生物信息学分析手段研究CAP对CAL-62的抑制作用,筛选出差异基因进行KEGG富集分析和GO分类,最后选取部分基因进行Western blot(WB)验证.结果表明,... 详细信息

为了探究大气压低温等离子体(CAP)抑制间变性甲状腺癌的作用机制,应用转录组测序技术,借助生物信息学分析手段研究CAP对CAL-62的抑制作用,筛选出差异基因进行KEGG富集分析和GO分类,最后选取部分基因进行Western blot(WB)验证.结果表明,与对照组相比CAP处理组共有674个差异表达基因,以BIK和CDKN1C等为代表的287个基因上调表达,以TANC2、ESM1和CBL等为代表的387个基因下调表达.KEGG富集分析表明差异基因主要富集在MAPK、Rap1等信号通路及癌症转录失调等.GO分类表明差异基因主要富集在免疫反应、细胞凋亡过程等方面.WB检测部分差异基因的变化趋势,得到与转录组相一致的结果.该研究从转录组学角度去解释CAP抑制CAL-62细胞的机制,以期为CAP应用于甲状腺未分化癌治疗提供一定的理论基础.

关键词：大气压低温等离子体甲状腺未分化癌转录组细胞凋亡抑制机制

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