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人参皂苷Rg_(1)抑制NLRP3炎症小体对2型糖尿病小鼠视网膜病变的保护作用

中国中药杂志 2022年第2期47卷 476-483页

作者：李彬张大传李学望董夏男李卫平李维祖合肥市第三人民医院眼科安徽合肥230022 安徽医科大学药理学教研室/抗炎免疫药理学教育部重点实验室/国家中医药管理局中药药理三级实验室安徽合肥230032

人参皂苷Rg_(1)是传统名贵中药人参的主要活性成分之一。研究显示,人参皂苷Rg_(1)具有抗氧化应激、抗炎、抗衰老及神经保护等广泛的药理学作用。糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病最常见的并发症,也是造成中老年人... 详细信息

人参皂苷Rg_(1)是传统名贵中药人参的主要活性成分之一。研究显示,人参皂苷Rg_(1)具有抗氧化应激、抗炎、抗衰老及神经保护等广泛的药理学作用。糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病最常见的并发症,也是造成中老年人群视力下降和失明的主要原因。最新研究显示,人参皂苷Rg_(1)对DR也有明显的保护作用,但其对DR的保护作用及机制研究较少,仍需要进一步研究。该实验主要研究人参皂苷Rg_(1)对2型糖尿病小鼠视网膜病变的保护作用及机制。采用高脂饲料(high fat diet,HFD)+链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导2型糖尿病小鼠模型,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色观察小鼠视网膜病理学情况;采用免疫组化研究核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptors 3,NLRP3)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在视网膜的定位及表达情况;采用Western blot检测视网膜核因子-κB(NF-κB)、p-NF-κB、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1(caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)、瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(transient receptor potential channel protein 6,TRPC6)、活化T细胞核因子2(activated T-cell nuclear factor 2,NFAT2)和VEGF的表达情况。结果显示,人参皂苷Rg_(1)处理能明显减轻2型糖尿病小鼠视网膜病理学损伤;免疫组化结果显示,人参皂苷Rg_(1)明显降低2型糖尿病小鼠视网膜神经节细胞、中网状层和外网状层NLRP3和VEGF的表达;免疫印迹结果显示,人参皂苷Rg_(1)明显降低2型糖尿病小鼠视网膜p-NF-κB、NLRP3、caspase-1、IL-1β、TRPC6、NFAT2和VEGF的表达。这些研究结果表明,人参皂苷Rg_(1)处理能明显减轻2型糖尿病小鼠视网膜病变,其机制可能与抑制视网膜NLRP3炎症小体和VEGF表达有关。该研究为临床应用人参皂苷Rg_(1)治疗糖尿病视网膜病变提供实验依据。

关键词：人参皂苷Rg_(1) 糖尿病视网膜病变 NLRP3炎症小体血管转化生长因子

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人参皂苷Rg1下调NOX2-NLRP1减轻PC12细胞缺氧再复氧损伤的作用

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中国药理学通报 2021年第8期37卷 1068-1075页

作者：黄茸茸陆松侠孙玲玲张晗丁世欣李维祖安徽新华学院药学院药理学教研室安徽合肥230088 安徽医科大学药理学教研室抗炎免疫药理学教育部重点实验室国家中医药管理局中药药理三级实验室安徽合肥230032

目的研究人参皂苷Rg1在PC12细胞缺氧再复氧损伤中的作用及可能的机制。方法将PC12细胞随机分6组,除空白对照组外,其余各组均缺氧缺糖6 h,再复氧复糖24 h制作OGD/R模型,各药物组均在造模前2 h给予相应药物预处理。采用DCFH-DA法检测细胞... 详细信息

目的研究人参皂苷Rg1在PC12细胞缺氧再复氧损伤中的作用及可能的机制。方法将PC12细胞随机分6组,除空白对照组外,其余各组均缺氧缺糖6 h,再复氧复糖24 h制作OGD/R模型,各药物组均在造模前2 h给予相应药物预处理。采用DCFH-DA法检测细胞ROS生成,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,ELISA法检测细胞上清中LDH活力与IL-1β含量,Western blot法检测细胞中NOX2、p22phox、p47phox、NLRP1、ASC、Caspase-1、PSD95、Tau、p-Tau蛋白表达水平,并观察人参皂苷Rg1的干预作用。结果Tempol、Apocynin和Rg1(5、10μmol·L^(-1))组能明显抑制ROS生成和细胞凋亡,并能明显减少细胞上清中LDH释放与IL-1β含量;Apocynin和Rg1(5、10μmol·L^(-1))组可明显下调细胞中NOX2、p22phox和p47phox蛋白表达,Tempol、Apocynin和Rg1(5、10μmol·L^(-1))组可使NLRP1、Caspase-1、ASC、IL-1β、p-Tau的蛋白表达明显下降,并使PSD95蛋白表达明显升高。结论Rg1可通过抑制NOX2-NLRP1通路以减轻PC12细胞的缺血/再灌注损伤。

关键词：人参皂苷Rg1 脑缺血/再灌注损伤 OGD/R模型 PC12细胞 NADPH氧化酶2 NLRP1炎症小体

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复方苦参注射液生物碱类成分及血中移行成分的分析

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安徽中医药大学学报 2023年第4期42卷 93-97页

作者：张莉吴欢尹艳艳安徽医科大学基础医学院药理学教研室安徽合肥230032 安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038

目的利用超高效液相色谱—电喷雾离子化—四极杆飞行时间质谱(ultra-high-performance liquid chromatography-electrospray ionization-quadrupole time-of-flight mass spectrometry,UHPLC-ESI-QTOF/MS)结合UNIFI构建靶向筛查策略分析复方苦参注射液(Compound Kushen Injection,CKI)的生物碱类成分及血中移行成分。方法首先,采用ESI-QTOF/MS的全信息串联质谱技术采集经UHPLC分离的CKI样品及其空白样品、CKI给药后的大鼠血浆样品及空白血浆样品的信息;然后,建立CKI生物碱化学成分数据库,与MS E数据一同导入UNIFI进行靶向筛查;依据母离子、碎片离子的精确质量对筛查出的化合物进行识别;最后,使用MassLynx 4.1工作站对UNIFI输出的结果进行核实。结果本实验共分离、鉴定了20种CKI生物碱,其中17种生物碱能在大鼠血浆中被检出。结论该方法能够快速分析CKI生物碱类成分及其血中移行成分,可为CKI的质量控制及药效物质研究提供参考。

关键词：超高效液相色谱电喷雾离子化四极杆飞行时间质谱全信息串联质谱技术复方苦参注射液生物碱类成分血中移行成分

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临床药理学课程思政教育的实践与思考

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科教文汇 2022年第15期 88-90页

作者：汪庆童魏伟张玲玲严尚学吴成义安徽医科大学临床药理研究所/临床药理学教研室/抗炎免疫药物教育部重点实验室/抗炎免疫药物安徽省协同创新中心安徽合肥230032

临床药理学是一门蕴含丰富思政元素的医学专业课程,是对医学生进行“医者仁心”教育的有效载体。该文对临床药理学课程思政教学总体设计和实施进行了探索和思考,旨在将临床药理学这一医学桥梁课程建设成为医学生教育中课程思政建设的排... 详细信息

临床药理学是一门蕴含丰富思政元素的医学专业课程,是对医学生进行“医者仁心”教育的有效载体。该文对临床药理学课程思政教学总体设计和实施进行了探索和思考,旨在将临床药理学这一医学桥梁课程建设成为医学生教育中课程思政建设的排头兵。

关键词：临床药理学课程思政医学生教育教学方法改革

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白果内酯对Aβ25-35诱导HT22细胞损伤及NLRP-1炎症小体激活的影响

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中成药 2020年第9期42卷 2317-2323页

作者：黄茸茸陆松侠许燕李维祖安徽新华学院药学院药理教研室安徽合肥230088 安徽医科大学药理学教研室抗炎免疫药理学教育部重点实验室国家中医药管理局中药药理三级实验室安徽合肥230032

目的研究白果内酯对Aβ25-35诱导HT22细胞损伤及NLRP-1炎症小体激活的影响。方法Aβ25-35(1μmol/L)诱导HT22建立细胞损伤模型,同时白果内酯(6、12、24μmol/L)和NADPH氧化酶抑制剂(DPI,15μmol/L)处理24 h,采用CCK-8法检测细胞活力,Ann... 详细信息

目的研究白果内酯对Aβ25-35诱导HT22细胞损伤及NLRP-1炎症小体激活的影响。方法Aβ25-35(1μmol/L)诱导HT22建立细胞损伤模型,同时白果内酯(6、12、24μmol/L)和NADPH氧化酶抑制剂(DPI,15μmol/L)处理24 h,采用CCK-8法检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI双染法检测神经元细胞凋亡率,流式法(DCFH-DA荧光探针)测定细胞内ROS生成,ELISA法测定IL-1β、IL-6、TNF-α水平,Western blot法检测NLRP-1、ASC、caspase-1的蛋白表达。结果与对照组比较,模型组细胞活力下降(P<0.01),神经元细胞凋亡率提高(P<0.01),同时,ROS的生成、细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平及NLRP-1、ASC、caspase-1的蛋白表达均增多(P<0.01);与模型组比较,白果内酯(12、24μmol/L)组能提高细胞活力,减少ROS生成,降低IL-1β、IL-6、TNF-α水平与神经元细胞凋亡率(P<0.05,P<0.01),白果内酯(24μmol/L)组能抑制细胞NLRP-1、ASC及caspase-1的蛋白表达(P<0.01)。结论白果内酯对Aβ25-35诱导的小鼠海马神经元HT22细胞损伤具有较好的保护作用,其机制可能与抑制NADPH氧化酶-ROS介导的NLRP-1炎症小体激活有关。

关键词：白果内酯阿尔茨海默病 Aβ25-35 ROS NLRP-1 ASC caspase-1

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二苯乙烯苷抑制NADPH氧化酶对小鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用

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中国实验动物学报 2019年第2期27卷 208-214页

作者：薛威唐虹孙雨倩江勤黄大可董六一安徽医科大学药理学教研室抗炎免疫药理学教育部重点实验室国家中医药管理局中药药理三级实验室合肥230032 安徽医科大学临床医学院合肥230032 安徽医科大学基础医学院合肥230032

目的探讨二苯乙烯苷(TSG)抑制NADPH氧化酶对小鼠脑缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用。方法将100只实验小鼠随机分成5组:假手术组、模型组,TSG低剂量组(3 mg/kg),TSG中剂量组(6 mg/kg),TSG高剂量组(12 mg/kg),每组20只。通过双侧颈总动脉... 详细信息

目的探讨二苯乙烯苷(TSG)抑制NADPH氧化酶对小鼠脑缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用。方法将100只实验小鼠随机分成5组:假手术组、模型组,TSG低剂量组(3 mg/kg),TSG中剂量组(6 mg/kg),TSG高剂量组(12 mg/kg),每组20只。通过双侧颈总动脉结扎造成小鼠脑缺血2 h,再灌注24 h后处死小鼠。采用HE染色法对小鼠脑组织进行病理学检测,采用DHE染色法和ESR波谱仪检测脑组织中活性氧(ROS)水平,采用Western blot法检测脑组织中NOX4和cleaved caspase-3/9蛋白的表达。结果小鼠脑缺血再灌注后,缺血区皮层脑组织出现严重的病理性损伤,其ROS水平显著升高,脑组织中NOX4蛋白表达显著上调,凋亡相关蛋白cleaved caspase-3/9蛋白表达量显著增加。TSG可以显著减轻小鼠缺血再灌注脑组织的病理性损伤,抑制ROS的产生,显著下调氧化应激蛋白NOX4的表达,并显著抑制凋亡相关蛋白cleaved caspase-3/9蛋白的表达。结论 TSG可通过抑制脑组织氧化应激蛋白NOX4的表达,减少活性氧的生成,并抑制凋亡相关蛋白cleaved caspase-3/9过度表达,对小鼠脑缺血再灌注损伤起保护作用。

关键词：二苯乙烯苷脑缺血再灌注 NADPH氧化酶活性氧凋亡小鼠

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CXCL12/CXCR4在佐剂性关节炎大鼠脾脏中的表达及芍药苷-6′-O-苯磺酸酯的作用

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中国药理学通报 2018年第5期34卷 639-644页

作者：高梅章敏司敏陈镜宇魏伟安徽医科大学临床药理研究所抗炎免疫药理学教育部重点实验室抗炎免疫药物安徽省协同创新中心安徽合肥230032

目的观察CXCL12及其受体CXCR4在佐剂性关节炎(adjuvant-induced arthritis,AA)大鼠脾脏中的表达,以及芍药苷-6'-O-苯磺酸酯(CP-25)对其的影响。方法完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)诱导AA模型,随机分为正常对照组、... 详细信息

目的观察CXCL12及其受体CXCR4在佐剂性关节炎(adjuvant-induced arthritis,AA)大鼠脾脏中的表达,以及芍药苷-6'-O-苯磺酸酯(CP-25)对其的影响。方法完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)诱导AA模型,随机分为正常对照组、模型组、CP-25(50 mg·kg^(-1))组和甲氨蝶呤(methotrexate,MTX,0.5 mg·kg^(-1))组。造模后d 14~28给药。HE染色观察脾脏的病理情况;免疫组化法和ELISA法检测脾脏中CXCL12的表达;免疫组化法和Western blot法检测脾脏CXCR4的表达。结果与正常对照组相比,AA大鼠脾脏动脉周围淋巴鞘的细胞密度增加,淋巴小结增多,脾脏中CXCL12和CXCR4表达增加;CP-25可以明显减少AA大鼠脾脏动脉周围淋巴鞘的细胞密度,改善淋巴小结增生,下调脾脏中CXCL12和CXCR4表达,且CXCL12和CXCR4表达与脾脏病理呈正相关。结论 AA大鼠脾脏CXCL12和CXCR4的高表达与脾脏病理改变有关,CP-25减少AA大鼠脾脏中CXCL12和CXCR4的表达可能是其发挥抗炎免疫调节作用的机制之一。

关键词：佐剂性关节炎脾脏 CXCL12 CXCR4 芍药苷-6′-O-苯磺酸酯完全弗氏佐剂

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丹皮酚对MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞线粒体自噬和死亡的保护作用

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中国药理学通报 2018年第12期34卷 1655-1661页

作者：王训翠朱国旗赖桂华李庆林安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室科研实验中心安徽合肥230038 安徽医科大学基础医学院药理学教研室安徽合肥230032

目的研究线粒体自噬在MPP^+损伤SH-SY5Y细胞中的发生及丹皮酚的干预作用。方法以1 mmol·L^(-1) MPP^+诱导SH-SY5Y细胞损伤建立帕金森病模型。采用MTT和LDH法分别检测不同浓度的丹皮酚对MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞存活率和损伤度的影响... 详细信息

目的研究线粒体自噬在MPP^+损伤SH-SY5Y细胞中的发生及丹皮酚的干预作用。方法以1 mmol·L^(-1) MPP^+诱导SH-SY5Y细胞损伤建立帕金森病模型。采用MTT和LDH法分别检测不同浓度的丹皮酚对MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞存活率和损伤度的影响;MDC染色荧光显微镜下检测自噬空泡聚集;流式细胞术定量分析细胞内酸性自噬泡的形成;透射电镜观察线粒体自噬现象;激光共聚焦检测溶酶体和线粒体共定位;Western blot检测线粒体自噬相关蛋白parkin、LC3和Beclin-1的表达变化。结果在1～100μmol·L^(-1)浓度范围内,预先加入丹皮酚能拮抗MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞损伤,并呈一定的量效关系;SH-SY5Y细胞经MPP^+处理24 h,观察到自噬现象,出现自噬空泡增多,自噬水平增加,并存在较多的线粒体与溶酶体共定位的现象,LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白表达增加,parkin表达降低。预先加入丹皮酚后能逆转这些现象。结论丹皮酚抑制MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞线粒体自噬的发生,阻止神经细胞的死亡。

关键词：丹皮酚线粒体自噬 MPP^+ SH-SY5Y细胞细胞死亡帕金森病

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趋化因子受体CCR7调节树突细胞免疫反应及其在类风湿关节炎中的作用

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免疫学杂志 2015年第8期31卷 723-726页

作者：陈镜宇魏伟安徽医科大学临床药理研究所抗炎免疫药物教育部重点实验室抗炎免疫药物安徽省工程技术研究中心安徽省中药研究与开发重点实验室安徽省中药抗炎免疫药理学科技创新团队和安徽省"115"产业创新团队合肥230032

趋化因子受体CCR7在树突细胞(dendritic cells,DC)迁移和维持机体免疫功能平衡中发挥重要作用。CCR7引导DC的归巢、介导淋巴结内DC对T细胞活化,从而启动免疫反应。CCR7及其配体的表达以及功能的异常与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis... 详细信息

趋化因子受体CCR7在树突细胞(dendritic cells,DC)迁移和维持机体免疫功能平衡中发挥重要作用。CCR7引导DC的归巢、介导淋巴结内DC对T细胞活化,从而启动免疫反应。CCR7及其配体的表达以及功能的异常与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)密切相关,阐明CCR7对DC免疫反应的调节作用及其在RA中的作用,可以进一步揭示RA的病理机制,也为治疗炎症和自身免疫病提供新的思路。

关键词： CCR7 树突细胞免疫反应类风湿关节炎

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Smads蛋白家族在大鼠放射性肝纤维化形成过程中的表达

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实验动物与比较医学 2015年第3期35卷 188-194页

作者：高世乐胡宗涛秦峰朱杰黄德武董六一解放军第105医院肿瘤三科合肥230031 安徽医科大学安徽省实验动物中心合肥230032 安徽医科大学药理学教研室教育部抗炎免疫药理学重点实验室国家中医药管理局中药药理三级实验室合肥230032

目的探讨Smad2/3/7、TGF-β1蛋白在大鼠放射性肝纤维化（RHF）形成过程中的表达情况.方法建立雄性SD大鼠RHF模型.将实验大鼠随机分为正常对照组、照射组（2周、4周、8周、12周、26周）,除正常对照组外,其余各组大鼠均制备成RHF模型.... 详细信息

目的探讨Smad2/3/7、TGF-β1蛋白在大鼠放射性肝纤维化（RHF）形成过程中的表达情况.方法建立雄性SD大鼠RHF模型.将实验大鼠随机分为正常对照组、照射组（2周、4周、8周、12周、26周）,除正常对照组外,其余各组大鼠均制备成RHF模型.在照射后第2周、4周、8周、12周、26周末,分别剖检各组大鼠,取肝脏标本备用.光学显微镜下观察大鼠肝脏组织HE染色变化,免疫组织化学法测大鼠肝脏组织Smad2/3/7、TGF-β1蛋白含量表达.结果与正常对照组相比,照射组大鼠肝脏损伤及纤维化程度明显增加,肝脏组织免疫组织化学Smad2蛋白含量增加（P＜0.05）,Smad3、TGF-β1蛋白含量明显增加（P＜0.01）,Smad7蛋白含量明显减少（P＜0.01）.结论随着大鼠RHF的加重,Smad2/3、TGF-β1蛋白表达增加,Smad7蛋白表达下调.

关键词： Smads蛋白家族大鼠放射性肝纤维化(RHF)

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