检索结果-内蒙古大学图书馆

蚌埠医学院学报 2012年第12期37卷 1407-1411页

作者：平慧汪渊梅传忠夏俊陈治文承泽农李胜泽石莹朱光能蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233030 安徽医科大学分子生物学实验室和生物化学与分子生物学教研室安徽省基因研究重点实验室安徽合肥230032 蚌埠医学院病理学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院肿瘤妇科安徽蚌埠233004

目的:探讨紧密连接蛋白occludin的表达与人宫颈癌发生、发展、转移和预后的关系。方法:原位杂交检测occludinmRNA的表达;免疫组织化学和Western blot检测occludin的表达,并结合44例患者的临床资料进行分析。结果:occludinmRNA的表达在... 详细信息

目的:探讨紧密连接蛋白occludin的表达与人宫颈癌发生、发展、转移和预后的关系。方法:原位杂交检测occludinmRNA的表达;免疫组织化学和Western blot检测occludin的表达,并结合44例患者的临床资料进行分析。结果:occludinmRNA的表达在宫颈癌的大体类型和分化程度间差异均有统计学意义(P<0.05);occludin的表达在宫颈癌分化程度间差异有统计学意义(P<0.05);宫颈癌旁组织的occludin表达水平高于宫颈癌组织(P<0.05);宫颈癌组织与宫颈癌旁组织及正常宫颈组织的occludin表达水平差异均有统计学意义(P<0.01);随访满5年和满3年存活患者的occludin mRNA和满3年存活患者的occludin表达水平均高于病死患者(P<0.05)。结论:occludin在人宫颈癌组织中低表达,其表达与宫颈癌分化程度及患者生存期皆有一定关系,可作为宫颈癌诊断和预后判断的新指标。

关键词：子宫颈肿瘤闭锁蛋白原位杂交免疫组织化学

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三氧化二砷对小鼠恶性黑素瘤抑制机制的探讨

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蚌埠医学院学报 2008年第4期33卷 386-388页

作者：黄桦陈治文陈正徐胡博王东萍蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室蚌埠安徽233030 蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心蚌埠安徽233030

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)对小鼠B16细胞实体瘤的生长抑制作用及对端粒酶活性表达的影响,旨在为临床治疗黑素瘤提供理论和实验依据。方法:以不同浓度As2O3作用的鼠黑素瘤B16细胞荷瘤小鼠,用TRAP-PAGE-银染法检测药物作用后瘤体组织端... 详细信息

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)对小鼠B16细胞实体瘤的生长抑制作用及对端粒酶活性表达的影响,旨在为临床治疗黑素瘤提供理论和实验依据。方法:以不同浓度As2O3作用的鼠黑素瘤B16细胞荷瘤小鼠,用TRAP-PAGE-银染法检测药物作用后瘤体组织端粒酶活性的表达;通过测定荷瘤小鼠瘤体大小和肿瘤组织内微血管密度来反映不同剂量As2O3的抑瘤作用。结果:As2O3能抑制鼠B16细胞实体瘤的生长,破坏肿瘤组织微血管的形成(P<0.01);As2O3能明显抑制鼠B16细胞实体瘤端粒酶的活性。结论:As2O3对于B16细胞实体瘤的生长有显著的抑制作用,这可能与其抑制肿瘤组织内微血管的形成和端粒酶表达活性有关。

关键词：黑素瘤三氧化二砷端粒酶细胞凋亡小鼠,近交C57BL

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索拉非尼联合5-氮杂-2'-脱氧胞苷对肝癌SMMC-7721细胞DNMT3B基因表达的影响

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蚌埠医学院学报 2017年第3期42卷 285-289页

作者：韩正阳崔兵刘纪君贺晓珊梅传忠蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心安徽蚌埠233030 蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233030

目的:探讨索拉非尼联合5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人肝癌细胞SMMC-7721的作用及其调控DNMT3B基因表达可能的分子机制。方法:单独及联合给药后以MTT法测定SMMC-7721的增殖,Transwell检测其侵袭,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western... 详细信息

目的:探讨索拉非尼联合5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人肝癌细胞SMMC-7721的作用及其调控DNMT3B基因表达可能的分子机制。方法:单独及联合给药后以MTT法测定SMMC-7721的增殖,Transwell检测其侵袭,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot法观察DNMT3B、p-Akt-Ser473及ERK蛋白的表达。结果:索拉非尼、5-Aza-CdR对肝癌SMMC-7721细胞半数抑制浓度(IC50)分别为11、6μmol/L,联合用药选取(6+4)μmol/L作为后续用药浓度。与对照组比较单药及联合用药均能抑制细胞侵袭、促进细胞凋亡、减少p-Akt-Ser473和DNMT3B蛋白的表达(P<0.05~P<0.01)。结论:索拉非尼和5-AzaCdR联合用药能有效降低索拉非尼用药浓度,降低肝癌SMMC-7721细胞DNMT3B蛋白表达水平。

关键词：肝肿瘤索拉非尼 5-氮杂-2'-脱氧胞苷

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石蜡包埋淋巴瘤组织线粒体DNA的提取及PCR扩增

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蚌埠医学院学报 2010年第4期35卷 334-336页

作者：马佳宋文庆杨清玲王惠蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院病理学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院临床检验诊断实验中心安徽蚌埠233030

目的:探讨从石蜡包埋组织标本获取线粒体DNA(mtDNA)并进行PCR扩增的有效方法。方法:选取27例石蜡包埋的淋巴瘤组织,分别使用二甲苯/乙醇和0.5%Tween-20进行脱蜡,改进裂解缓冲液的成分及浓度,酚/氯仿抽提以获取mtDNA并进行电泳和PCR分析... 详细信息

目的:探讨从石蜡包埋组织标本获取线粒体DNA(mtDNA)并进行PCR扩增的有效方法。方法:选取27例石蜡包埋的淋巴瘤组织,分别使用二甲苯/乙醇和0.5%Tween-20进行脱蜡,改进裂解缓冲液的成分及浓度,酚/氯仿抽提以获取mtDNA并进行电泳和PCR分析。结果:0.5%Tween-20法获取mtDNA纯度及浓度含量明显高于二甲苯/乙醇法(P<0.01);二甲苯/乙醇法和0.5%Tween-20法获取的mtDNA PCR扩增成功率分别为11.1%和40.7%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论:二甲苯/乙醇和0.5%Tween-20两种方法都可以扩增出mtDNA的目的片段,但0.5%Tween-20法操作简便,PCR扩增成功率高,不用接触二甲苯等有毒化学试剂,是一种较为理想的mtDNA提纯方法。

关键词： DNA复制线粒体DNA 聚合酶链反应淋巴瘤石蜡包埋组织

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外泌体介导的miR-18b-5p调控NEDD9对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响

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蚌埠医学院学报 2022年第2期47卷 141-145页

作者：杨硕杨清玲蚌埠医学院癌症转化医学安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233030

目的:探讨miR-18b-5p调控神经前体细胞表达下调蛋白9(NEDD9)对乳腺癌细胞侵袭、迁移的影响及其作用机制。方法:qRT-PCR检测人正常乳腺癌上皮细胞MCF-10A与2株乳腺癌细胞株(SKBR-3和SKBR-3/PR)中miR-18b-5p的表达水平;Western blotting检... 详细信息

目的:探讨miR-18b-5p调控神经前体细胞表达下调蛋白9(NEDD9)对乳腺癌细胞侵袭、迁移的影响及其作用机制。方法:qRT-PCR检测人正常乳腺癌上皮细胞MCF-10A与2株乳腺癌细胞株(SKBR-3和SKBR-3/PR)中miR-18b-5p的表达水平;Western blotting检测SKBR-3/PR细胞来源外泌体的表面标志物;CCK8和Transwell实验检测SKBR-3/PR细胞转染miR-18b-5p inhibitor并提取的外泌体与SKBR-3细胞共培养后对SKBR-3细胞增殖和侵袭、迁移能力。生物信息学预测软件Target Scan预测miR-18b-5p与NEDD9的靶向结合位点。双荧光素酶实验分析miR-18b-5p与NEDD9的靶向调控关系。Transwell实验检测上调NEDD9对SKBR-3细胞侵袭迁移能力的影响。结果:miR-18b-5p在乳腺癌细胞株中相对于正常乳腺癌上皮细胞中高表达(P<0.01);SKBR-3/PR细胞来源的外泌体高表达CD63和TSG101等特异性蛋白(P<0.01),SKBR-3/PR细胞转染miR-18b-5p inhibitor提取外泌体后对SKBR-3细胞的增殖、侵袭和迁移显著被抑制(P<0.01)。生物信息学软件Target Scan预测结果显示,NEDD93′UTR上存在潜在与miR-18b-5p靶向结合的位点,miR-18b-5p能够负向调控NEDD9基因表达(P<0.01)。过表达NEDD9能抑制SKBR-3细胞侵袭能力(P<0.01)。结论:miR-18b-5p通过靶向NEDD9促进乳腺癌细胞侵袭、迁移。

关键词：乳腺肿瘤外泌体 miRNA-18b-5p 神经前体细胞表达下调蛋白9

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14⁃3⁃3ζ蛋白在乳腺癌发生发展中的作用研究进展

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分子诊断与治疗杂志 2020年第4期12卷 538-541页

作者：董正远杨清玲陈昌杰蚌埠医学院癌症转化医学安徽省重点实验室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233000

14⁃3⁃3蛋白家族(14⁃3⁃3 protein family)是一类酸性且高度保守的小分子蛋白,广泛存在真核生物细胞内。14⁃3⁃3蛋白自身无明显的催化活性,主要与其他蛋白相互作用而发挥调控靶蛋白的作用。14⁃3⁃3ζ是14⁃3⁃3蛋白家族的重要成员之一,近几年... 详细信息

14⁃3⁃3蛋白家族(14⁃3⁃3 protein family)是一类酸性且高度保守的小分子蛋白,广泛存在真核生物细胞内。14⁃3⁃3蛋白自身无明显的催化活性,主要与其他蛋白相互作用而发挥调控靶蛋白的作用。14⁃3⁃3ζ是14⁃3⁃3蛋白家族的重要成员之一,近几年受到学者的广泛关注,且越来越多的学者开展14⁃3⁃3ζ与癌症的研究。本文综述了近几年研究者对14⁃3⁃3ζ与癌症的研究,尤其与乳腺癌耐药、复发、转移等相关研究,为乳腺癌的诊疗提供新思路、寻找新靶标。

关键词： 14⁃3⁃3ζ蛋白乳腺癌

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As_2O_3诱导人膀胱癌BIU-87细胞株凋亡及其对细胞周期的影响

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蚌埠医学院学报 2005年第1期30卷 11-13页

作者：夏俊陈俊霞盛甫秀崔秀云蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233003 大连医科大学生物化学与分子生物学教研室辽宁大连116027

目的 :观察三氧化二砷 (As2 O3 )对人膀胱癌BIU 87细胞株生长抑制作用 ,并探讨对细胞周期及凋亡的影响。方法 :CellTiter 96AqueousOne试剂检测BIU 87细胞株增殖活力 ;荧光染色观察凋亡细胞的形态学变化 ;流式细胞术分析细胞周期及凋亡... 详细信息

目的 :观察三氧化二砷 (As2 O3 )对人膀胱癌BIU 87细胞株生长抑制作用 ,并探讨对细胞周期及凋亡的影响。方法 :CellTiter 96AqueousOne试剂检测BIU 87细胞株增殖活力 ;荧光染色观察凋亡细胞的形态学变化 ;流式细胞术分析细胞周期及凋亡。结果 :As2 O3 与BIU 87细胞株生长抑制率之间有明显的浓度依赖关系 (P <0 .0 1) ,IC50 为 2 8.92 μmol/L ;荧光显微镜下观察到经As2 O3 作用的BIU 87细胞核膜消失 ,核染色质呈大小不等的小圆形碎片 ;流式细胞术结果表明 30 μmol/L的As2 O3 处理BIU 87细胞株 4 8h后 ,G0 /G1期细胞比例下降 ,S期细胞比例增加 ,凋亡率为 4 7.37%。结论 :As2 O3 能显著抑制BIU 87细胞株增殖 ;使细胞阻滞在S期 ,并进一步诱导细胞凋亡。

关键词：膀胱肿瘤三氧化二砷 BIU—87细胞株凋亡细胞周期

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三氧化二砷对人恶性黑素瘤A_(375)细胞抑制机制的探讨

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蚌埠医学院学报 2012年第11期37卷 1277-1279,1282页

作者：黄桦高洁蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院检验科安徽蚌埠233004

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)对人恶性黑素瘤A375细胞的生长抑制作用,以及对Caspase-3活性表达以及肿瘤细胞凋亡的影响,为临床治疗恶性黑素瘤提供理论和实验依据。方法:将不同浓度的As2O3作用于人恶性黑素瘤A375细胞,荧光染色观察A375细... 详细信息

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)对人恶性黑素瘤A375细胞的生长抑制作用,以及对Caspase-3活性表达以及肿瘤细胞凋亡的影响,为临床治疗恶性黑素瘤提供理论和实验依据。方法:将不同浓度的As2O3作用于人恶性黑素瘤A375细胞,荧光染色观察A375细胞的凋亡变化,流式细胞术检测A375细胞的凋亡率;用免疫组织化学染色法检测不同浓度As2O3作用于A375细胞后Caspase-3蛋白的表达;半定量RT-PCR法检测Survivin蛋白的表达。结果:荧光染色后镜下可见As2O3可致A375细胞的细胞核呈致密浓染的不规则黄绿色颗粒状或块状荧光的凋亡现象;As2O3能诱导A375细胞的凋亡,用5、10、20μmol/L的As2O3诱导A375细胞24 h:检测其细胞的凋亡率依次为7.07%、38.66%和4.34%,可诱导Caspase-3蛋白的表达,抑制Survivin蛋白的表达。结论:As2O3能致A375细胞形态改变,诱导细胞凋亡;As2O3可诱导A375细胞表达Caspase-3蛋白,抑制Survivin蛋白的表达。

关键词：黑素瘤三氧化二砷细胞凋亡 Caspase-3 Survivin A375细胞

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TRAIL胞膜外段融合蛋白在大肠埃希菌内可溶性表达

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蚌埠医学院学报 2003年第2期28卷 98-101页

作者：周海胜夏劲松陈治文夏俊刘贤锡蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233003 山东大学西校区分子生物学实验室山东济南250012

目的 :研究在大肠埃希菌体内可溶性表达肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 (TRAIL)胞膜外段融合蛋白 ,为其下一步的分离纯化奠定基础。方法 :依据原核表达载体 pGEX 2T多克隆位点限制性内切酶要求 ,设计TRAIL胞膜外段PCR引物 ,对TRAIL的... 详细信息

目的 :研究在大肠埃希菌体内可溶性表达肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 (TRAIL)胞膜外段融合蛋白 ,为其下一步的分离纯化奠定基础。方法 :依据原核表达载体 pGEX 2T多克隆位点限制性内切酶要求 ,设计TRAIL胞膜外段PCR引物 ,对TRAIL的克隆载体进行PCR扩增 ,回收目的片段后利用DNA连接酶构建TRAIL胞膜外段原核表达载体 ,应用相关的生物学软件对目的蛋白的理化性质及其溶解性进行预测。酶切鉴定后将阳性重组体转入大肠埃希菌DH5α体内 ,分别在不同浓度异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)、不同诱导温度、不同诱导时间作用下 ,利用SDS PAGE分析目的蛋白可溶性表达量。结果 :PCR扩增得到TRAIL胞膜外段DNA片段 ,酶切结果证实已成功构建了TRAIL胞膜外段原核表达载体 ,预测表明 95 %以上的TRAIL胞膜外段融合蛋白是以可溶性的形式表达 ,在 0 .1mmol/LIPTG、2 0℃诱导 3～ 4h ,目的蛋白可溶性表达量达峰值 ,占菌体蛋白的 2 8%。结论

关键词：肿瘤坏死因子细胞凋亡蛋白质表达大肠埃希菌

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紫杉醇长循环纳米胶束联合vMIP-ⅡN端肽逆转乳腺癌细胞耐药的研究

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蚌埠医学院学报 2020年第9期45卷 1141-1146页

作者：董正远许河南王文锐杨清玲陈昌杰癌症转化医学安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233030

目的:探讨紫杉醇长循环纳米载药胶束联合病毒巨噬细胞炎性蛋白Ⅱ(vMIP-Ⅱ)N端肽(NT21MP)对乳腺癌紫杉醇耐药细胞株(MCF-7/PR)耐药性的影响。方法:采用磺酰罗丹明B(SRB)染色法检测乳腺癌耐药细胞株MCF-7/PR的存活率;细胞划痕及Transwell... 详细信息

目的:探讨紫杉醇长循环纳米载药胶束联合病毒巨噬细胞炎性蛋白Ⅱ(vMIP-Ⅱ)N端肽(NT21MP)对乳腺癌紫杉醇耐药细胞株(MCF-7/PR)耐药性的影响。方法:采用磺酰罗丹明B(SRB)染色法检测乳腺癌耐药细胞株MCF-7/PR的存活率;细胞划痕及Transwell实验检测紫杉醇纳米载药胶束联合NT21MP对乳腺癌耐药细胞迁移、侵袭能力的影响;流式细胞术分析细胞凋亡、周期;Western blotting实验检测细胞凋亡、耐药及上皮间充质转化相关蛋白水平表达。结果:相对于紫杉醇组,紫杉醇纳米胶束更有效地抑制细胞增殖、迁移和侵袭,凋亡蛋白Bax、caspase3的蛋白表达水平上调,抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平下调,且耐药相关蛋白MRP、P-gp和EMT相关蛋白Vimentin、Slug表达水平下调,E-cadherin表达上调(P<0.01);相对于紫杉醇纳米胶束组,紫杉醇纳米胶束与NT21MP联合组对细胞增殖、迁移、侵袭、细胞周期的抑制,以及抗凋亡和逆转耐药作用更明显(P<0.01)。结论:紫杉醇纳米胶束可有效发挥逆转乳腺癌细胞耐药性的作用,且以紫杉醇纳米胶束联合多肽药物NT21MP作用更明显。

关键词：乳腺肿瘤病毒巨噬细胞炎性蛋白ⅡN端肽紫杉醇耐药

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