检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学会第15次全国红细胞疾病(贫血)学术会议

作者：冯格格崔雯蔡文宇秦铁军张悦徐泽锋方力维张宏丽潘丽娟胡耐博曲士强李冰肖志坚中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院 MDS诊疗中心中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院病理中心中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院 MDS诊疗中心

目的:通过巨核细胞免疫酶标染色来检测骨髓增生异常综合症(MDS)患者骨髓涂片中的异常巨核细胞,规范异常巨核细胞的分类以及探讨异常巨核细胞对患者的预后意义.方法:收集2000年1月至2014年4月于我院确诊的423例原发初治MDS病例资料.其中...

目的:通过巨核细胞免疫酶标染色来检测骨髓增生异常综合症(MDS)患者骨髓涂片中的异常巨核细胞,规范异常巨核细胞的分类以及探讨异常巨核细胞对患者的预后意义.方法:收集2000年1月至2014年4月于我院确诊的423例原发初治MDS病例资料.其中有完整随访资料者371例(88％),中位随访时间22 (1～180)月.我们将IPSS-R积分系统为极低危、低危和中危患者定义为较低危患者,而高危和极高危患者定义为较高危患者.通过对423例患者的骨髓涂片进行巨核细胞特异性抗体(CD41)免疫酶标染色,我们将异常巨核细胞分为7类:微小巨核(＜12 μm)、单圆核小巨核(12～40μm)、双圆核小巨核(12～40 μm)、多圆核小巨核(12～40 um)、单圆核巨核(≥40μm)、双圆核巨核(≥40 μm)以及多圆核巨核(≥40 μm).为评估其对预后的影响,我们从两个方面对这7类异常巨核细胞进行分组:(1)按照细胞大小分为小巨核组(＜40μm)以及非小巨核组(≥40μm);(2)按照细胞核数量分为单核巨核组、双核巨核组以及多核巨核组.同时,我们采用最小P值法确定了每一组巨核细胞对预后影响的最佳界值,分别是:小巨核组(≥25％),非小巨核组(≥5％),单核巨核组(≥30％),双核巨核组(≥1％).而多核巨核组在最佳界点处对预后仍无明显影响(P=0.10).结果:我们发现,随着异常巨核细胞的增加,MDS患者的骨髓原始细胞增加、血小板减少、IPSS-R危险度增加.在单因素分析中,小巨核组≥25％、单核巨核组≥30％患者的预后明显变差(中位生存期为19月[95 ％CI,14～23月]vs 46月[95 ％CI,28～64月]:P＜0.001;18月[95％CI,14～23月]vs 49月[95 ％CI,31～68月]:P＜0.001),而在多因素分析中,这种趋势超越了非小巨核组≥5％以及双核巨核组≥1％,成为影响MDS患者总生存的独立预后因素.在IPSS-R较低危组患者中,小巨核组≥25％、单核巨核组≥30％依然是影响生存的独立预后因素.结论:本研究显示临床实践中结合异常形态巨核细胞对MDS患者预后可做进一步分层判定,将小巨核及单核巨核纳入IPSS-R预后积分系统可以更准确的判断MDS患者的预后.

关键词：

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贴壁法和密度梯度离心法分离经血源性子宫内膜间充质干细胞的比较研究

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天津医科大学学报 2015年第6期21卷 525-529页

作者：袁晴杜雪袁碧波屈野周园石慧天津医科大学总医院妇产科天津300052 武警后勤学院病原生物与免疫学教研室天津300309 中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室干细胞医学中心天津300020

目的：比较贴壁法和密度梯度离心法对经血源性子宫内膜间充质干细胞（MB-MSCs）的分离效果。方法：选择25～35岁月经周期正常的健康女性的月经血，分别采用贴壁法和密度梯度离心法分离MB-MSCs并进行传代。镜下观察原代细胞形态变化；对... 详细信息

目的：比较贴壁法和密度梯度离心法对经血源性子宫内膜间充质干细胞（MB-MSCs）的分离效果。方法：选择25～35岁月经周期正常的健康女性的月经血，分别采用贴壁法和密度梯度离心法分离MB-MSCs并进行传代。镜下观察原代细胞形态变化；对比原代及第2、3代细胞传代时间；流式细胞仪检测表面标志物；阿尔辛兰染色检测其成软骨能力。结果：贴壁法分离的原代细胞呈聚集样生长，密度梯度离心法分离的原代细胞6 d后也呈聚集样生长。贴壁法分离原代细胞的传代时间（14.58±1.31）d明显快于密度梯度离心法（19.17±1.34）d，差异有显著意义（P〈0.05）；第2、3代细胞的传代时间两种分离方法差异无统计学意义（P〉0.05）。经流式细胞仪检测，两种方法分离的MB-MSCs阳性表面标志物CD44、CD29、CD105、CD73含量和阴性表面标志物CD31、CD45含量比较差异无统计学意义（P〉0.05），两种方法分离的第3代细胞经成软骨诱导后比较无显著差别。结论：采用贴壁法与密度梯度离心法分离MB-MSCs效果相似，但贴壁法更适用于早期快速获得纯度较高的细胞。

关键词：间充质干细胞子宫内膜经血贴壁法密度梯度离心法

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ABCB5和MDR1对急性髓系白血病耐药的影响

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中国药理学通报 2014年第9期30卷 1214-1219页

作者：李真真张晓龙杨雨琪张晴袁向飞范冬梅中国医学科学院·北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 天津医科大学药学院天津300070

目的探讨ABCB5和MDR1在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)干祖细胞系KG1a和来源于AML病人标本中的表达及对白血病耐药的影响。方法 FACS和Western blot的方法检测KG1a细胞表面ABCB5及MDR1蛋白表达产物P-gp的表达水平;利用lipo... 详细信息

目的探讨ABCB5和MDR1在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)干祖细胞系KG1a和来源于AML病人标本中的表达及对白血病耐药的影响。方法 FACS和Western blot的方法检测KG1a细胞表面ABCB5及MDR1蛋白表达产物P-gp的表达水平;利用lipo2000转染siRNA的方法瞬时干扰ABCB5的表达;FACS检测细胞内Rhodamine123的蓄积;MTT法确定维拉帕米(verapamil,Vera)对KG1a的无毒剂量,并检测KG1a、siABCB5-KG1a及联用无毒剂量维拉帕米的KG1a对阿霉素(adriamycin,ADR)的敏感性;Real time-PCR的方法检测AML病人标本中ABCB5及MDR1的表达水平。结果 KG1a高表达ABCB5和P-gp,Pgp表达量高于ABCB5;siABCB5瞬时干扰可以降低KG1a中ABCB5的表达水平,进而增加KG1a细胞中Rhodamine123的蓄积;siABCB5-KG1a对阿霉素的敏感性提高8.6倍;而联用无毒剂量维拉帕米使KG1a对阿霉素的敏感性提高67.4倍。ABCB5在71例AML临床标本中的表达水平明显高于健康组,其中在38例复发或难治型病例中的表达水平明显高于其余33例化疗敏感型病例(P<0.01),且ABCB5的mRNA表达水平与MDR1呈正相关。结论 ABCB5与已知的P-gp相同,也参与介导AML的多药耐药,这为复发及难治的AML病例的临床治疗提供新的潜在靶点。

关键词： ABCB5 P-gp 急性髓系白血病 siABCB5 多药耐药复发难治

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地西他滨治疗骨髓增生异常综合征——规范和探讨在我国的临床应用

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中华血液学杂志 2014年第3期35卷 185-186页

作者：肖志坚中国医学科学院、北京协和医科大学血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室

2006年5月2日美国FDA正式批准地西他滨用于骨髓增生异常综合征（MDS）患者治疗，适应证为国际预后积分系统（IPSS）积分为中危．1、中危一2和高危MDS患者。

关键词：骨髓增生异常综合征地西他滨临床应用治疗积分系统美国FDA 适应证 MDS

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胎盘来源细胞与母血、脐血细胞的嵌合

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中国组织工程研究 2014年第45期18卷 7327-7332页

作者：莫峥盛宏霞韩忠朝徐曼田宠张斌陈虎解放军军事医学科学院附属第307医院造血干细胞移植科北京市100071 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津市300020

背景:胎盘中含有丰富的细胞群,因其中CD34+细胞含量高而受到越来越多学者的关注,有望成为临床造血干细胞移植治疗血液病及其他恶性疾病的新来源。目的:探索胎盘来源细胞的数量、集落形成能力及其与母体的嵌合程度。方法:采用健康足月剖... 详细信息

背景:胎盘中含有丰富的细胞群,因其中CD34+细胞含量高而受到越来越多学者的关注,有望成为临床造血干细胞移植治疗血液病及其他恶性疾病的新来源。目的:探索胎盘来源细胞的数量、集落形成能力及其与母体的嵌合程度。方法:采用健康足月剖腹产妇的胎盘,灌注法及组织块消化法收集胎盘中细胞;流式细胞仪检测胎盘及脐血中CD34+细胞比例;培养细胞集落,定期观察集落形态并计数;序列特异性引物PCR扩增技术及序列特异性寡核苷酸探针方法检测胎盘、脐血和母亲外周血的HLA类型;短串联重复PCR方法检测胎盘细胞、脐血细胞和母亲外周血细胞的嵌合情况。结果与结论:胎盘中CD34+细胞数量明显优于脐血,且胎盘具有体外多种集落形成能力,集落形成良好,同时胎盘提取细胞中含有母体来源成分。提示胎盘中细胞数量及其基本生物学特性使其有潜力成为临床造血干细胞移植的新来源。

关键词：干细胞培养胎盘造血干细胞细胞集落序列特异性寡核苷酸探针嵌合移植脐血 antigens,CD34

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人类B细胞淋巴瘤耐药细胞株BJAB/ADR的建立及其耐药机制的初步研究

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白血病．淋巴瘤 2014年第3期23卷 144-147页

作者：鲍世琦姜琳琳张晓龙李真真邵晓枫齐怀丰杨雨琪熊冬生中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 鲁东大学生命科学学院肿瘤免疫研究实验室天津红日金博达生物技术有限公司天津医科大学药学院药学实验室

目的建立人类淋巴瘤B JAB多药耐药细胞株BJAB/ADR,并初步研究其耐药机制.方法采用多柔比星浓度梯度递增法建立人类B细胞淋巴瘤耐药细胞模型BJAB/ADR,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线;用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法鉴定耐药细胞株对多... 详细信息

目的建立人类淋巴瘤B JAB多药耐药细胞株BJAB/ADR,并初步研究其耐药机制.方法采用多柔比星浓度梯度递增法建立人类B细胞淋巴瘤耐药细胞模型BJAB/ADR,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线;用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法鉴定耐药细胞株对多种化疗药物的耐药性并计算耐药指数;提取耐药细胞株RNA,实时定量聚合酶链反应（PCR）法检测相关耐药基因MDR1 mRNA的表达;流式细胞术检测细胞表面P糖蛋白（Pgp）的表达;通过罗丹明外排实验,检测Pgp功能.结果成功建立B细胞淋巴瘤耐药细胞模型BJAB/ADR,并在160 ng/ml多柔比星溶液中稳定生长,耐药细胞较敏感细胞生长缓慢,细胞形态无明显变化.MTT检测结果表明BJAB/ADR细胞对多柔比星的耐药指数为43倍,同时对柔红霉素、依托泊苷、高三尖杉酯碱（HHT）及米托蒽醌（MX）也具有一定的耐药性.实时定量PCR结果表明,耐药细胞BJAB/ADR MDRl mRNA明显高于药物敏感细胞BJAB（P＜ 0.01）.流式细胞术检测结果显示,耐药细胞表面Pgp高表达;罗丹明外排实验表明Pgp对多柔比星具有外排功能,使B JAB/ADR细胞获得耐药特性.结论建立了人类B细胞淋巴瘤的耐药细胞株BJAB/ADR,其对多柔比星耐药性稳定,并呈现多药耐药细胞的基本生物学特性,为进一步研究肿瘤多药耐药发生的机制及逆转耐药提供有利的模型.

关键词：细胞系,肿瘤淋巴瘤,B细胞 BJAB ADR细胞 P糖蛋白多柔比星

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以硼替佐米为基础方案治疗56例伴肾功能损害的多发性骨髓瘤患者疗效分析

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中华血液学杂志 2013年第4期34卷 304-308页

作者：徐燕安刚邓书会隋伟薇冯晓燕李菲郝牧王亚非邱录贵中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 天津医科大学附属肿瘤医院

目的观察以硼替佐米（Btz）为基础的化疗方案在合并。肾功能不全的多发性骨髓瘤（MM）患者中的疗效及安全性。方法回顾性分析56例伴有肾功能不全且接受以Btz为基础方案化疗的MM患者的临床资料。结果56例患者中位年龄59（30～77）岁，K... 详细信息

目的观察以硼替佐米（Btz）为基础的化疗方案在合并。肾功能不全的多发性骨髓瘤（MM）患者中的疗效及安全性。方法回顾性分析56例伴有肾功能不全且接受以Btz为基础方案化疗的MM患者的临床资料。结果56例患者中位年龄59（30～77）岁，K型22例（39．3％），入型32例（57．1％）；其中IgD型9例（16．1％），轻链型14例（25．0％）。中位内生肌酐清除率（CrCI）为25．33（7．23～59．55）ml／min，轻、中、重度肾功能损害者分别为6、35、15例。34例可判断MM疗效的患者中总体反应率为82．4％，其中完全反应（CR）率32．4％，非常好的部分反应（VGPR）率为17．6％，部分反应（PR）率为26．5％。56例患者肾功能损害的总体反应率为89．3％，其中CR率为62．5％，PR率为14．3％，微小反应（MR）率为12．5％。达最佳肾脏反应的中位时间为25．5（5—240）d。轻度、中度及重度肾功能损害患者的中位总生存及疾病进展时间组问比较差异均无统计学意义。患者的主要不良反应谱与所报道的肾功能正常患者的不良反应谱相似。末梢神经炎发生率高达55．6％，其中10例患者停止Btz使用。结论IgD型及入限制型MM患者肾损害的发生率较高。以Btz为基础的化疗方案对伴有肾功能不全的MM患者高效、安全，同时能够快速逆转其肾功能损害。末梢神经炎是影响Btz应用的主要不良反应。

关键词：多发性骨髓瘤硼替佐米肾损害

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miR-106b～25基因簇增强乳腺癌MCF-7肿瘤干细胞相关耐药性

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中国药理学通报 2013年第8期29卷 1070-1075页

作者：胡蕴慧盛梦瑶张孝云李双静范冬梅熊冬生周圆中国医学科学院北京协和医学院血液病医院(血液学研究所) 实验血液学国家重点实验室天津300020 天津医科大学附属肿瘤医院乳腺三科天津300060

目的探讨乳腺癌细胞中miR-106b～25基因簇过表达与肿瘤耐药形成及乳腺癌干细胞特性的关系。方法利用慢病毒表达载体,在乳腺癌细胞系MCF-7中建立稳定过表达miR-106b～25基因簇,建立MCF-7-mirC细胞系,观察细胞对化疗药物敏感性的改变。利... 详细信息

目的探讨乳腺癌细胞中miR-106b～25基因簇过表达与肿瘤耐药形成及乳腺癌干细胞特性的关系。方法利用慢病毒表达载体,在乳腺癌细胞系MCF-7中建立稳定过表达miR-106b～25基因簇,建立MCF-7-mirC细胞系,观察细胞对化疗药物敏感性的改变。利用细胞毒性实验、耐药克隆形成实验、细胞衰老相关β-半乳糖苷酶染色对细胞的耐药状况进行评价;通过流式细胞术和实时定量PCR测定P-gp的表达;通过微球体(mammosphere)培养实验及对乙醛脱氢酶(ALDH1)活性的检测评价MCF-7-mirC肿瘤干细胞特性的变化。结果过表达miR-106b～25基因簇能帮助细胞更快脱离由阿霉素引起的细胞衰老状态,促进耐药克隆的生长。但是,miR-106b～25基因簇对P糖蛋白(P-gp)在mRNA和蛋白水平表达均无影响。对ALDH1的检测及mammo-sphere形成实验结果显示,过表达miR-106b～25基因簇能提高MCF-7细胞中肿瘤干细胞的比例。结论 miR-106b～25基因簇对乳腺癌MCF-7细胞耐药性的调控不依赖于P-gp表达,至少与促进肿瘤干细胞特性有关。

关键词： miR-106b^25 乳腺癌肿瘤干细胞肿瘤耐药细胞衰老 P糖蛋白

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地西他滨对造血系统肿瘤细胞热休克蛋白22表达的影响

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白血病．淋巴瘤 2013年第5期22卷 263-266页

作者：王丽娜崔雪莹马小彤任倩王楠中国医学科学院北京协和医院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 首都医科大学附属北京同仁医院血液科

目的探讨地西他滨（Aza-C）对造血系统肿瘤细胞热休克蛋白22（HSP22）表达的影响及可能的机制。方法半定量反转录聚合酶链反应（PCR）法检测HSP22在造血系统肿瘤细胞系以及造血系统肿瘤患者骨髓单个核细胞中的表达水平；去甲基化药物Aza... 详细信息

目的探讨地西他滨（Aza-C）对造血系统肿瘤细胞热休克蛋白22（HSP22）表达的影响及可能的机制。方法半定量反转录聚合酶链反应（PCR）法检测HSP22在造血系统肿瘤细胞系以及造血系统肿瘤患者骨髓单个核细胞中的表达水平；去甲基化药物Aza—C（2μmol／L）诱导上述细胞HSP22的表达；甲基化特异PCR法检测造血系统肿瘤细胞系、造血系统肿瘤患者和健康供者的骨髓单个核细胞中HSP22基因启动子甲基化状态。结果在检测的13个造血系统肿瘤细胞系、20例不同类型的造血系统肿瘤患者以及10名健康供者骨髓单个核细胞中均未发现HSP22基因的表达；Aza-C能诱导造血系统肿瘤细胞系及造血系统肿瘤患者骨髓单个核细胞中的HSP22表达；Aza-C处理过的造血系统肿瘤细胞系中HSP22基因启动子处于部分去甲基化状态，健康供者及造血系统肿瘤患者骨髓单个核细胞HSP22基因启动子处于高甲基化状态。结论Aza—C通过使HSP22基因启动子去甲基化诱导造血系统肿瘤细胞HSP22的表达。

关键词：血液肿瘤地西他滨热休克蛋白22

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过表达热休克蛋白22抑制造血系统恶性肿瘤细胞生长的研究

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白血病．淋巴瘤 2013年第12期22卷 706-711页

作者：崔雪莹马小彤王丽娜王楠任倩林永敏首都医科大学附属北京同仁医院血液科 100730 中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的探讨过表达热休克蛋白22（HSP22）对造血系统恶性肿瘤细胞生长和凋亡的影响.方法构建含HSP22或空载体的慢病毒表达载体,感染K562和Namalwa细胞;荧光显微镜及流式细胞术观察感染效率;反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot... 详细信息

目的探讨过表达热休克蛋白22（HSP22）对造血系统恶性肿瘤细胞生长和凋亡的影响.方法构建含HSP22或空载体的慢病毒表达载体,感染K562和Namalwa细胞;荧光显微镜及流式细胞术观察感染效率;反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot鉴定HSP22表达.采用细胞计数法测定细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,甲基纤维素半固体集落形成实验测定集落数,Annexin VPE／7-AAD流式细胞术检测细胞凋亡.在裸鼠皮下注射K562和Namalwa细胞进行成瘤实验以观察成瘤体积.结果与转导空载体的对照细胞相比,HSP22过表达能抑制Namalwa和K562细胞集落形成,每孔平均集落数转导pCDH1-MCS1-EF1-copGFP空载体的K562细胞为108,转导pCDH1-MCS1-EF1-copGFPHSP22的K562细胞为72,两者差异有统计学意义（P=0.000 16）;转导pCDH1-MCS1-EF1-copGFP空载体的Namalwa细胞为125,转导pCDH1-MCS1-EF1-copGFP-HSP22的Namalwa细胞为80,两者差异有统计学意义（P=0.000 37）.HSP22还能抑制Namalwa细胞体外增殖（第5天,P=0.015;第6天,P=0.042;第7天,P=0.048）,抑制K562细胞体内增殖（第21天,P=0.022）.K562、Namalwa细胞HSP22转导组与对照组间G0～G1期、G2～M期及S期细胞所占百分比差异均无统计学意义（均P＞ 0.05）.结论过表达HSP22能够抑制造血系统恶性肿瘤K562和Namalwa细胞的生长.

关键词：血液肿瘤热休克蛋白22 K562细胞 Namalwa细胞细胞凋亡

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