检索结果-内蒙古大学图书馆

渔业现代化 2022年第6期49卷 77-83页

作者：管立平谢晶晶李伟豪陈昊震温振中孙成波广东海洋大学水产学院广东湛江524088 南方海洋科学与工程广东省实验室(湛江) 广东湛江524025 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东湛江524088

为探讨一种赖氨酸芽孢杆菌对凡纳滨对虾生长、存活和养殖水质的影响。设1个试验组和1个对照组,每组3个平行,125尾对虾/桶,初始体质量(5.18±0.13)g、体长(9.40±0.18)cm、水温(26±2)℃、盐度30、试验时间10 d。试验组定期... 详细信息

为探讨一种赖氨酸芽孢杆菌对凡纳滨对虾生长、存活和养殖水质的影响。设1个试验组和1个对照组,每组3个平行,125尾对虾/桶,初始体质量(5.18±0.13)g、体长(9.40±0.18)cm、水温(26±2)℃、盐度30、试验时间10 d。试验组定期添加浓度为0.463×10^(9) CFU/mL的赖氨酸芽孢杆菌菌液,试验组和对照组NH_(4)^(+)-N质量浓度变化范围分别为(0.05±0.01)~(5.51±0.09)mg/L、(0.05±0.01)~(6.07±0.22)mg/L。NO_(2)^(-)-N质量浓度变化范围分别为(0.07±0.01)~(0.13±0.01)mg/L、(0.07±0.01)~(0.19±0.01)mg/L。NO_(3)^(-)-N质量浓度变化范围分别为(0.07±0.01)~(0.81±0.07)mg/L、(0.07±0.01)~(1.26±0.07)mg/L。pH的变化范围分别为(7.10±0.01)~(7.74±0.01)、(7.03±0.01)~(7.74±0.01)。结果显示:赖氨酸芽孢杆菌对养殖水体中的NH_(4)^(+)-N、NO_(2)^(-)-N和NO_(3)^(-)-N的控制及pH调控具有极显著效果(P<0.01);试验组和对照组终末体质量分别为(7.01±0.38)g、(6.78±0.23)g终末体长分别为(9.67±0.08)cm、(9.63±0.04)cm,试验组相比于对照组有明显的提高但两者不存在显著性差异(P>0.05);试验组存活率(77.07%±1.22%)显著高于对照组(71.73%±2.81%)具有显著效果(P<0.05)。研究表明,赖氨酸芽孢杆菌有助于促进凡纳滨对虾生长、存活和水质调控。

关键词：赖氨酸芽孢杆菌凡纳滨对虾水质净化生长指标

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鰤鱼诺卡氏菌特异性PCR检测方法的建立

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基因组学与应用生物学 2021年第7期40卷 2656-2665页

作者：陈国权黄碧艳张子雯莫静怡柯玉涵夏立群广东海洋大学深圳研究院广东省水生动物健康评估工程技术研究中心深圳海水经济动物种苗健康评价公共技术服务平台深圳518120 广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室湛江524088

鱼类诺卡氏菌病(fish nocardiosis)是一种常见的严重危害全球水产养殖业的鱼类疾病。鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)是鱼类诺卡氏菌病的主要病原菌之一。本研究对已报道的鰤鱼诺卡氏菌17个不同菌株全基因组数据进行比对分析,筛选获得... 详细信息

鱼类诺卡氏菌病(fish nocardiosis)是一种常见的严重危害全球水产养殖业的鱼类疾病。鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)是鱼类诺卡氏菌病的主要病原菌之一。本研究对已报道的鰤鱼诺卡氏菌17个不同菌株全基因组数据进行比对分析,筛选获得种内保守、种间变异的特异性基因组片段,并设计特异性引物,建立鰤鱼诺卡氏菌特异性PCR检测方法。设计的特异性引物仅能扩增获得鰤鱼诺卡氏菌的特异性片段,其他近缘菌和常见菌均无PCR扩增片段,且PCR检测灵敏度核酸浓度达80 pg/μL,菌液浓度达8.6 CFU/μL。用该PCR检测方法检测人工感染鰤鱼诺卡氏菌和阴性对照组杂交鳢各组织,结果显示,只能从感染鰤鱼诺卡氏菌的鱼组织中扩增出阳性片段。本研究基于鰤鱼诺卡氏菌不同菌株全基因组数据比对分析,所建立的PCR检测方法比之前的分子检测方法更具科学性、可靠性。该PCR检测方法可以提供一种快速、准确、灵敏的鰤鱼诺卡氏菌检测方式。

关键词：鰤鱼诺卡氏菌基因组片段检测方法特异性

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水解单宁对珍珠龙胆石斑鱼生长性能、抗氧化能力、肠道组织结构与菌群多样性的影响

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动物营养学报 2021年第2期33卷 1020-1035页

作者：朱旭枫黄洋黄俊杭李广丽朱春华广东海洋大学水产学院湛江524088 广东省名特优鱼类生殖调控与繁育工程技术研究中心湛江524088 广东省海水养殖生物育种工程实验室湛江524088 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室湛江524088

本试验旨在研究水解单宁对珍珠龙胆石斑鱼(Epinephelus lanceolatus♂×Epinephelus fuscoguttatus♀)生长性能、抗氧化能力、肠道组织结构与菌群多样性的影响。选取600尾初始体重为(21.43±1.31) g的珍珠龙胆石斑鱼,随机分为5... 详细信息

本试验旨在研究水解单宁对珍珠龙胆石斑鱼(Epinephelus lanceolatus♂×Epinephelus fuscoguttatus♀)生长性能、抗氧化能力、肠道组织结构与菌群多样性的影响。选取600尾初始体重为(21.43±1.31) g的珍珠龙胆石斑鱼,随机分为5组,每组3个重复,每个重复40尾。在基础饲料配方的基础上分别以0(F0组,作为对照组)、0.05%(F1组)、0.10%(F2组)、0.15%(F3组)和0.20%(F4组)的水解单宁替代等量微晶纤维素,配制5种试验饲料,进行为期60 d的养殖试验。结果表明:F2组的增重率(WGR)和特定生长率(SGR)显著高于F0组(P<0.05),饲料系数(FCR)则显著低于F0组(P<0.05)。肥满度(CF)和存活率(SR)各组之间均无显著差异(P>0.05)。与F0组相比,F2和F3组血清和肝脏碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)和超氧化物歧化酶(SOD)活性以及肝脏过氧化氢酶(CAT)、锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的mRNA相对表达量显著升高(P<0.05)。与F0组相比,F1、F2、F3组的肠道绒毛高度显著增加(P<0.05),F3组的肌层厚度显著增加(P<0.05)。Illumina MiSeq测序结果显示,添加水解单宁的各试验组肠道菌群的Shannon指数和Chao1指数均高于F0组。从门水平看,各组肠道菌群中优势菌门均为变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和厚壁菌门(Firmicutes)。与F0组相比,各试验组肠道菌群中变形菌门的比例降低,放线菌门、拟杆菌门和厚壁菌门的比例增加。主坐标分析和UPGMA聚类分析发现,F2和F3组的微生物群落较为接近,而与F0组差别较大。综上可知,饲料中添加0.10%~0.15%的水解单宁可提高珍珠龙胆石斑鱼的生长性能,增强鱼体免疫及抗氧化能力,改善肠道组织结构,优化肠道菌群结构。以WGR为评价指标,通过回归方程确定珍珠龙胆石斑鱼饲料中水解单宁的适宜添加量为0.10%。

关键词：珍珠龙胆石斑鱼生长抗氧化能力肠道组织形态肠道菌群

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2株水产病原气单胞菌拮抗菌的筛选鉴定及生物学特性

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水产科学 2022年第6期41卷 927-937页

作者：龙梦樊慧敏江遥夏洪丽程俊喻大鹏夏立群鲁义善广东海洋大学深圳研究院广东省水生动物健康评估工程技术研究中心深圳市海水经济动物种苗健康评价公共技术服务平台广东深圳518120 深圳市大鹏新区科技创新服务中心广东深圳518120 中国科学院水生生物研究所湖北武汉430072 广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东湛江524088

气单胞菌是水产养殖鱼类的重要病原菌,暂无针对多种气单胞菌感染防治的有效措施。红树林沉积物中芽孢杆菌丰富,是活性微生物的重要储库。笔者自深圳东涌红树林沉积物中筛选获得2株对6种鱼类病原性气单胞菌均具有较强拮抗活性的菌株AH10... 详细信息

气单胞菌是水产养殖鱼类的重要病原菌,暂无针对多种气单胞菌感染防治的有效措施。红树林沉积物中芽孢杆菌丰富,是活性微生物的重要储库。笔者自深圳东涌红树林沉积物中筛选获得2株对6种鱼类病原性气单胞菌均具有较强拮抗活性的菌株AH10和AQ1,基于形态学、生理生化特性和分子生物学分析结果,将2株拮抗菌鉴定为解淀粉芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌。生物学特性测试结果表明,2株菌的生长特性相似,最适生长温度为32℃、pH 5~7、盐度0~20。药敏试验结果显示,2株菌除对四环素耐药、对链霉素中度敏感外,对绝大多数抗生素均高度敏感。拮抗试验结果显示,2株菌除对嗜水气单胞菌、舒氏气单胞菌等6种气单胞菌具有拮抗作用外,亦均对爱德华氏菌、类志贺邻单胞菌等水产病原菌具有拮抗作用。其中,解淀粉芽孢杆菌AH10和贝莱斯芽孢杆菌AQ1分别对类志贺邻单胞菌和杀鲑气单胞菌的拮抗作用最强。生物安全试验表明,2株菌对斑马鱼和鲢均无致病性,生物安全性良好。本研究结果可为水产养殖中气单胞菌病的生物防治提供新的微生物资源,具有较好的应用前景和进一步研究价值。

关键词：气单胞菌出血性败血症贝莱斯芽孢杆菌解淀粉芽孢杆菌拮抗活性益生菌

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水解单宁对副溶血弧菌感染凡纳滨对虾血液及血细胞免疫指标的影响

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广东海洋大学学报 2021年第3期41卷 12-19页

作者：朱旭枫邓秋霞郭慧李广丽朱春华广东海洋大学水产学院广东省名特优鱼类生殖调控与繁育工程技术研究中心广东省海水养殖生物育种工程实验室广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东湛江524088

【目的】研究水解单宁饲养的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)在副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticu)胁迫24 h后的生理响应,初步探究水解单宁对凡纳滨对虾血液和血细胞的影响。【方法】在基础饲料中分别添加质量分数为0%(对照组)、0.05... 详细信息

【目的】研究水解单宁饲养的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)在副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticu)胁迫24 h后的生理响应,初步探究水解单宁对凡纳滨对虾血液和血细胞的影响。【方法】在基础饲料中分别添加质量分数为0%(对照组)、0.05%、0.10%、0.15%和0.20%的水解单宁(HTs),饲喂凡纳滨对虾60 d。对对虾注射0.2 mL的副溶血弧菌(2.5×10^(8) CFU·mL^(-1)),感染24 h后,分析血细胞凋亡率、活性氧含量(ROS)、一氧化氮含量(NO)、酯酶活性、Toll样受体(TLR)和热休克蛋白70(HSP70)基因的表达水平;测定血清的碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、超氧化物歧化酶(SOD),总抗氧化能力(T-AOC)和溶菌酶(LZM)活性。【结果】在感染副溶血弧菌24 h后,实验组对虾的血细胞凋亡率,ROS、NO水平显著低于对照组,酯酶活性显著高于对照组(P<0.05)。实验组凡纳滨对虾血清的AKP、ACP、SOD活性,T-AOC和LZM活性均显著高于对照组(P<0.05)。实验组对虾血细胞TLR和HSP70基因的表达水平显著上调(P<0.05)。【结论】饲料中添加水解单宁可提高凡纳滨对虾的非特异性免疫能力和抗氧化功能,阻止氧化损伤的发生,清除机体受到刺激产生的ROS和NO,增强酯酶活性,减少细胞凋亡,从而提高凡纳滨对虾抗副溶血弧菌感染的能力。

关键词：凡纳滨对虾水解单宁副溶血弧菌非特异性免疫抗氧化血细胞

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尼罗罗非鱼ICAM-1基因克隆及其mRNA表达分析

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基因组学与应用生物学 2021年第7期40卷 2557-2564页

作者：陆枝黎源汪志文夏洪丽鲁义善简纪常广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室湛江524088 广东海洋大学深圳研究院广东省水生动物健康评估工程技术研究中心深圳市海水经济动物种苗健康评价公共技术服务平台深圳518120

细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)是介导细胞识别、粘附的重要粘附分子,参与细胞的信号转导与活化、炎症反应和免疫应答等一系列重要生理病理过程。本研究克隆鉴定了尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)ICAM-... 详细信息

细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)是介导细胞识别、粘附的重要粘附分子,参与细胞的信号转导与活化、炎症反应和免疫应答等一系列重要生理病理过程。本研究克隆鉴定了尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)ICAM-1 cDNA全长(命名为On-ICAM-1),并对该基因进行生物信息学分析,运用荧光定量PCR方法对无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)刺激后On-ICAM-1在各组织中的m RNA表达模式进行了研究。结果显示,该基因ORF为1059 bp,编码352个氨基酸,分子质量为38.8 kD,等电点为5.55。On-ICAM-1序列与美妊丽鱼(Astatotilapia calliptera)、布氏朴丽鱼(Haplochromis burtoni)和三湖慈鲷(Pundamilia nyererei)的基因序列相似度较高,分别为89.80%、88.10%和71.02%。该基因编码蛋白氨基酸序列的的比对结果表明,ICAM-1在慈鲷科其他鱼类中高度保守。On-ICAM-1基因在健康尼罗罗非鱼的10种组织中均有表达,在胸腺组织中的表达量最高,其次是鳃、肠道和皮肤,在头肾组织的表达量最低。经无乳链球菌刺激后,On-ICAM-1基因在鳃、肠道、脾、脑、胸腺中的表达显著下调,且呈时序性表达。鳃、脾均在12 h表达量最低,肠道、脑、胸腺也在12 h时表达量下调,且都在24 h开始上调。该研究表明On-ICAM-1表达可以被无乳链球菌诱导并参与尼罗罗非鱼的免疫应答过程。

关键词：尼罗罗非鱼 ICAM-1 基因克隆 mRNA表达分析无乳链球菌

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哈维氏弧菌glyA基因的克隆及原核表达分析

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广东农业科学 2020年第6期47卷 84-90页

作者：孙国荣马少鸿韦光本张依琳谭慧明蔡双虎广东海洋大学水产学院/广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东湛江524088

【目的】哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)是存在于海水中的正常菌群,但近几年大密度养殖使它成为海水鱼致病甚至死亡的原因之一。对哈维氏弧菌ZJ0603株中的glyA基因进行克隆及原核表达分析,以期为下一步研制亚单位疫苗奠定基础。【方法】应... 详细信息

【目的】哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)是存在于海水中的正常菌群,但近几年大密度养殖使它成为海水鱼致病甚至死亡的原因之一。对哈维氏弧菌ZJ0603株中的glyA基因进行克隆及原核表达分析,以期为下一步研制亚单位疫苗奠定基础。【方法】应用PCR技术克隆哈维氏弧菌菌株ZJ0603的glyA基因,并对其编码的丝氨酸羟甲基转移酶(serine hydroxylmethyltransferase,SHMT)进行理化性质、信号肽、亚细胞定位及高级结构分析。将克隆获得的glyA基因与表达载体pET-28a连接构建重组质粒pET-28a-glyA,然后构建BL21-pET-28a-glyA重组菌株,测序后选取正确的菌株用IPTG诱导并对重组蛋白进行Western blot分析鉴定。对表达重组菌株BL21-pET-28a-glyA的表达条件进行优化以获得大量蛋白。【结果】生物信息学分析结果表明,glyA基因全长为1296 bp,共编码431个氨基酸,SHMT的理论等电点为6.18,不稳定系数为28.66,总平均亲水性为-0.200,整体表现为亲水且分布在细胞质中,预期蛋白分子量为46.60 ku。成功构建表达重组质粒pET-28a-glyA并转入表达菌株中,经IPTG诱导后进行Western blot分析,结果表明成功获得了SHMT重组蛋白。【结论】用控制变量法对表达条件优化后发现,IPTG最佳诱导时间、浓度以及温度分别为4 h、0.4 mmol/L和37℃。

关键词：哈维氏弧菌 glyA基因克隆原核表达条件优化

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一株大鲵虹彩病毒的分离及鉴定

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淡水渔业 2022年第4期52卷 11-17页

作者：喻大鹏程俊夏洪丽夏立群蔡佳鲁义善广东海洋大学深圳研究院深圳518108 广东海洋大学水产学院广东湛江524088 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东湛江524088 广东省水生动物健康评估工程技术研究中心深圳518018 武汉临空港经济技术开发区农业发展投资集团有限公司武汉430040 武汉晟丰农业开发有限公司武汉430040

2020年5月,广东广州某野生动物保护基地爆发疑似病毒引发的疾病。现场采样发现,病鲵体长约2 m,反应迟钝,体表有出血点或溃疡症状。本研究采用胖头鲤肌肉细胞系(fat head minnow epithelial cells,FHM)培养、超薄切片透射电镜观察、病毒... 详细信息

2020年5月,广东广州某野生动物保护基地爆发疑似病毒引发的疾病。现场采样发现,病鲵体长约2 m,反应迟钝,体表有出血点或溃疡症状。本研究采用胖头鲤肌肉细胞系(fat head minnow epithelial cells,FHM)培养、超薄切片透射电镜观察、病毒主要衣壳蛋白(major capsid protein,MCP)克隆与测序分析等方法,从患病大鲵中分离得到一株病毒,鉴定其属于虹彩病毒科蛙病毒属,命名为大鲵虹彩病毒广州分离株(CGSIV-GZ)。FHM经患病大鲵组织匀浆液接种后出现细胞圆缩、死亡、脱落等典型的细胞病变症状。将感染后的FHM细胞制作超薄切片,通过电镜观察发现,FHM细胞中存在大量直径约100~120 nm具囊膜的正六边形成熟病毒粒子,形态与虹彩病毒相似。根据虹彩病毒MCP基因保守区域序列设计特异性引物对病鲵组织样本进行PCR扩增,获得了431 bp的目的基因片段,测序后经采用BLAST软件分析,发现其与GenBank中的蛙病毒衣壳蛋白基因同源性达96%~99%。确认本次野生动物保护基地大鲵发生大规模死亡是蛙病毒感染所致。

关键词：大鲵(Andrias davidianus) 虹彩病毒科透射电镜胖头鲤肌肉细胞系分离鉴定

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红笛鲷SR-BⅠ基因的原核表达及条件优化

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安徽农学通报 2021年第3期27卷 1-5,48页

作者：王一帆陈子茵贾新蕾黄增朝吕静黄郁葱广东海洋大学水产学院/广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨水产经济动物病害控制广东省普通高等学校重点实验室广东湛江524088

根据GenBank上登录的红笛鲷SR-BⅠ基因设计引物,采用RT-PCR方法扩增该基因胞外段序列,然后将该基因胞外段序列定向克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,将重组质粒转入大肠杆菌BL21进行IPTG诱导表达,并对重组表达菌株的表达条件进行优化。... 详细信息

根据GenBank上登录的红笛鲷SR-BⅠ基因设计引物,采用RT-PCR方法扩增该基因胞外段序列,然后将该基因胞外段序列定向克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,将重组质粒转入大肠杆菌BL21进行IPTG诱导表达,并对重组表达菌株的表达条件进行优化。结果显示,成功构建了原核表达载体pET28a-SR-BI,并能在大肠杆菌BL21中表达,表达的融合蛋白分子量为50.0ku。融合蛋白的最佳诱导表达温度、IPTG浓度和时间分别为16℃、0.05mmol/L和8h。研究结果为进一步研究SR-BI的功能奠定了基础。

关键词：红笛鲷 SR-BⅠ基因原核表达条件优化

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卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)热休克蛋白HSP30基因的克隆与组织表达

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安徽农业科学 2021年第2期49卷 81-86页

作者：肖梓颖王一帆梁雪茹黄郁葱广东海洋大学水产学院/广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨水产经济动物病害控制广东省普通高等学校重点实验室广东湛江524088

[目的]获得卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)HSP30基因并探讨其组织表达。[方法]采用RACE的方法从卵形鲳鲹脾组织克隆HSP30基因的cDNA全序列,并用荧光定量PCR分析在健康鱼及哈维氏弧菌感染后HSP30基因的组织表达。[结果]HSP30基因cDNA序列... 详细信息

[目的]获得卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)HSP30基因并探讨其组织表达。[方法]采用RACE的方法从卵形鲳鲹脾组织克隆HSP30基因的cDNA全序列,并用荧光定量PCR分析在健康鱼及哈维氏弧菌感染后HSP30基因的组织表达。[结果]HSP30基因cDNA序列全长913 bp,包含5′非编码区(5′UTR)89 bp、3′非编码区(3′UTR)188 bp,开放阅读框(ORF)636 bp,编码211个氨基酸。预测其氨基酸序列成熟肽的蛋白分子质量为24.1 kD,理论等电点为5.62。HSP30包括N-末端序列(NTS)、α-晶状体蛋白结构域(ACD)、C-末端序列(CTS)和C-末端延伸(CTE)。系统进化分析结果显示卵形鲳鲹HSP30与高体鰤(Seriola dumerili)HSP30聚为一支。卵形鲳鲹HSP30基因在各组织中均有不同程度的表达,其中肝组织中表达量最高,其次为皮肤、肌肉、脾、心、肾,其他组织的表达量较低。哈维弧菌侵染卵形鲳鲹后,肝、脾和肾组织中HSP30基因mRNA表达量均升高,肝组织中变化最显著。[结论]成功克隆了卵形鲳鲹HSP30基因,为进一步揭示卵形鲳鲹HSP30的抗菌免疫应答机制提供了理论依据。

关键词：卵形鲳鲹热休克蛋白 HSP30 基因克隆组织表达

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