检索结果-内蒙古大学图书馆

广东海洋大学学报 2008年第3期28卷 88-92页

作者：黄建军简纪常吴灶和丁燏广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室广东湛江524025

应用PCR技术扩增16S rRNA基因和amoA(ammonia monooxygenase subunit A)的基因片段,并测定其序列,对一株源于海水养殖水体的高效氨氧化细菌(ammonia-oxidizing bacteria,AOB)进行了系统发育分析。结果表明,经PCR扩增得到了1 098 bp的16S rRNA基因片段和491 bp的amoA基因片段,将其序列用NCBI-Blast软件在GenBank数据库中进行同源性检索后发现,该菌株的16S rRNA基因序列和amoA基因序列分别与亚硝化单胞菌Nitrosomonas ***20的相对应基因片段相似性分别为98.4%和96.7%。在此基础上构建了系统发育树,表明用该菌株的16S rRNA基因片段和amoA基因片段构建的系统发育树均与亚硝化单胞菌属类聚在一起,结合该菌株形态和生理生化特性,鉴定该株氨氧化细菌属亚硝化单胞菌。

关键词：氨氧化细菌 16S rRNA amoA 聚合酶链反应同源性分析

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十二烷基苯磺酸钠对奥尼罗非鱼免疫毒性的研究

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南方水产 2008年第3期4卷 33-37页

作者：余坦健简纪常林兴简贺君黄郁葱广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室广东湛江524025 福建省康地饲料开发有限公司福建福州350007

用5种浓度的十二烷基苯磺酸钠(sodiumdodecyl benzene sulfonic,SDBS)浸泡刺激奥尼罗非鱼(Tilapianilotica♀×***♂)8周,每2周采血样1次,测定免疫指标。0.05和0.10mg·L-1组对奥尼罗非鱼的氯化硝基四氮唑兰(nitro blue tetrazo... 详细信息

用5种浓度的十二烷基苯磺酸钠(sodiumdodecyl benzene sulfonic,SDBS)浸泡刺激奥尼罗非鱼(Tilapianilotica♀×***♂)8周,每2周采血样1次,测定免疫指标。0.05和0.10mg·L-1组对奥尼罗非鱼的氯化硝基四氮唑兰(nitro blue tetrazolium,NBT)阳性细胞和IgM含量无影响。0.40mg·L-1组在第8周时,IgM含量显著下降,而NBT阳性细胞突然急剧下降,与对照组相比差异极显著。0.70mg·L-1组从第4周起,NBT阳性细胞和IgM含量开始减少,第6周时差异显著。1.00mg·L-1组NBT阳性细胞数在第2周时量就已经有减少,但与对照组相比差异不显著,到第4周时差异极其显著;在第4周时IgM含量有显著差异,第6周后差异极显著。攻毒试验表明,0.40、0.70和1.00mg·L-1组的死亡率均高于对照组。以上结果表明,当SDBS浓度大于0.40mg·L-1时,奥尼罗非鱼免疫功能不同程度受到抑制,对NBT阳性细胞和IgM的影响存在着时间与剂量效应。

关键词：十二烷基苯磺酸钠(SDBS) 奥尼罗非鱼免疫指标 NBT阳性细胞 IgM

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应用RD-PCR技术构建溶藻弧菌的cDNA文库

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水产学报 2007年第6期31卷 731-736页

作者：王蓓吴灶和简纪常鲁义善广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室广东湛江 524025

应用限制性显示PCR（RD-PCR）技术构建溶藻弧菌poly（A）化mRNA的cDNA文库,筛选,收集巧妙地解决了由于细菌mRNA poly（A）化位点的高度多态性、用常规方法构建原核cDNA文库所遇到的文库大量重复冗余的难题。并进行筛选、收集cDNA片段进... 详细信息

应用限制性显示PCR（RD-PCR）技术构建溶藻弧菌poly（A）化mRNA的cDNA文库,筛选,收集巧妙地解决了由于细菌mRNA poly（A）化位点的高度多态性、用常规方法构建原核cDNA文库所遇到的文库大量重复冗余的难题。并进行筛选、收集cDNA片段进行测序,根据测序结果进行生物信息学分析和结果验证。实验结果表明,我们成功地构建了溶藻弧菌poly （A）化mRNA的cDNA文库,获得一百多个基因片段并对其中53个基因片段进行测序分析,获得了如细菌Ⅲ型分泌系统易位蛋白、趋药性传感器、类丝氨酸蛋白酶等毒力相关因子的基因片断。并且在一定程度上证实了poly（A）化在细菌中不是个别和偶然的现象。实验结果说明了我们所构建的溶藻弧菌poly（A）化mRNA的cDNA文库质量高,文库基因片段的重复性低,筛选基因片段效率高、目的性强。本文并探讨了限制性显示PCR技术在细菌poly（A）化mRNA的cDNA1文库构建中的应用价值。

关键词：溶藻弧菌 cDNA文库限制性显示PCR

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凡纳滨对虾血清凝集素、溶血素的特性研究

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海洋科学 2006年第6期30卷 1-5页

作者：曹剑香简纪常吴灶和鲁义善广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室广东湛江524025

对凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）的血清凝集素和溶血素部分特性的研究结果表明，凡纳滨对虾血清凝集素热稳定性较差，温度高于50℃时，活性呈明显减弱至无活性，其最适温度为25～45℃；最适pH为8～9；盐度为24～48时，凝集活性最... 详细信息

对凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）的血清凝集素和溶血素部分特性的研究结果表明，凡纳滨对虾血清凝集素热稳定性较差，温度高于50℃时，活性呈明显减弱至无活性，其最适温度为25～45℃；最适pH为8～9；盐度为24～48时，凝集活性最强，当盐度超过48或者低于6时，凝集活性较差；凝集素活性能被浓度高于16mmol／L（包括16mmol／L）EDTA—Na2，D-葡萄糖，D-果糖及D-半乳糖完全抑制。Cu3^2＋使凝集素的活性完全丧失，而Ca^2＋和Mg^2＋能使凝集活性明显增强。45～60℃时，溶血素活性逐渐增强，60℃时达到最高；当pH6～9时，溶血素的活性较强；盐度为18～36时，能增强溶血素的活性；EDTA—Na2对溶血素的活性几乎无影响；Cu^2＋使溶血素丧失活性，Mg^2＋能增强溶血活性，Mn^2＋对溶血素的活性没看影响,而Ca^2＋知Ra^2＋时溶血素有轻微的抑制作用。

关键词：凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei) 凝集素溶血素

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注射溶藻弧菌疫苗对南美白对虾免疫功能的影响

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水产科学 2006年第7期25卷 330-333页

作者：曹剑香简纪常吴灶和广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东省教育厅水产经济病害控制重点实验室广东湛江524025

应用溶藻弧菌疫苗注射南美白对虾,测定了弧菌疫苗对南美白对虾免疫指标的影响以及疫苗的免疫保护作用。结果表明,注射溶藻弧菌疫苗后,血清凝集效价增强,24 h时活力达到最高值,尤其是1.08×108cell/ml组的凝集效价升高最明显,为对照... 详细信息

应用溶藻弧菌疫苗注射南美白对虾,测定了弧菌疫苗对南美白对虾免疫指标的影响以及疫苗的免疫保护作用。结果表明,注射溶藻弧菌疫苗后,血清凝集效价增强,24 h时活力达到最高值,尤其是1.08×108cell/ml组的凝集效价升高最明显,为对照组的6.0倍;在24 h时,3个试验组的凝集效价均明显高于对照组(P<0.05)。溶菌活力注射后6 h即达到最高值,1.08×107、1.08×108cell/ml组的溶菌活力明显高于对照组(P<0.05)。抗菌活力在注射后3 h时最高,明显高于对照组。溶血活力在注射疫苗后有所增强,注射后6 h时1.08×106、1.08×107cell/ml组的活力达到最高,而1.08×108cell/ml组12 h时活力达到峰值。注射疫苗对血清超氧化物歧化酶活力基本没有影响。1.08×106、1.08×107、1.08×108cell/ml对南美白对虾的免疫保护率分别为46.3%、61.0%和75.6%。

关键词：南美白对虾溶藻弧菌疫苗免疫保护率

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大亚湾网箱养殖水体弧菌种类组成及变化

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湛江海洋大学学报 2006年第4期26卷 42-48页

作者：吴建平蔡创华周毅频吴灶和中国科学院南海海洋研究所广东广州510301 广东海洋大学广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室广东湛江524025

研究了海水网箱养殖海域弧菌数量变化、种类组成及其相关因素．探讨弧菌数量的变化与鱼病的关系。结果表明：网箱内水体弧菌数量为390-230mL^-1．平均为20．6×10^2mL^-1,网箱外水体为130～1450mL^-1，平均为530mL^-1．非养殖对照... 详细信息

研究了海水网箱养殖海域弧菌数量变化、种类组成及其相关因素．探讨弧菌数量的变化与鱼病的关系。结果表明：网箱内水体弧菌数量为390-230mL^-1．平均为20．6×10^2mL^-1,网箱外水体为130～1450mL^-1，平均为530mL^-1．非养殖对照海区为10-390mL^-1．平均为190mL^-1。养殖海区弧菌数量呈现明显的季节性变化．尤其是网箱水体．对照海区只在9月数量较高．其他时间变化不大。平均数量网箱内大于网箱外．网箱外大于对照海区。水体中出现的弧菌种类有河流弧菌Vibrio fluvialis．创伤弧菌Vibrio vulnif gicus．霍乱弧菌Vibrio cholerae．副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus．溶藻弧菌Vibrio alginolyticus．美人鱼弧菌Vibrio damsela．拟态弧菌Vibrio mimicus和好利斯弧菌Vibrio hollisae，美人鱼弧菌、溶藻弧菌和霍乱弧菌占有较大优势。弧种数量与海水温度、盐度及营养盐有相关性．但其相关性因不同种和不同点而不同。检测期间．网箱养殖鱼类无明显流行病发生．但弧菌的高峰期明显与报道的鱼病高峰期相吻合。

关键词：弧菌种类组成分布季节变化网箱水体大亚湾

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大亚湾网箱养殖区异养细菌和弧菌的数量动态

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湛江海洋大学学报 2006年第3期26卷 21-25页

研究了大亚湾网箱养殖水体中细菌的数量动态,以探讨其变化规律与鱼病的关系。结果表明:总细菌、弧菌的数量变化各异,网箱内、网箱外和对照海区细菌数量分布与变化不同。养殖区异养细菌丰值期在4-5月份,5月份最高;网箱水体弧菌的丰值期在... 详细信息

研究了大亚湾网箱养殖水体中细菌的数量动态,以探讨其变化规律与鱼病的关系。结果表明:总细菌、弧菌的数量变化各异,网箱内、网箱外和对照海区细菌数量分布与变化不同。养殖区异养细菌丰值期在4-5月份,5月份最高;网箱水体弧菌的丰值期在6-11月,最高在8月;网箱外丰值期在7-9月,最高在8月,对照海区最高值在9月,其他时间变化不大。无论是异养菌还是弧菌,细菌值大小顺序为网箱内、网箱外、对照海区。弧菌数量与部分环境因子相关性较为密切,但相关程度随不同空间而不同,可能受其他环境条件影响。弧菌的高值期与弧菌病的流行期相吻合,鱼体受伤或其他原因引起细菌感染也会使水体中细菌数量升高。

关键词：网箱养殖异养细菌弧菌分布大亚湾

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海水养殖鱼类弧菌病病原生物学及其免疫防治

海水养殖鱼类弧菌病病原生物学及其免疫防治

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中国水产学会鱼病学专业委员会第六次会员代表大会暨国际学术讨论会

作者：吴灶和简纪常广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室

近年来,由于高密度集约化养殖所带来的多种负因子影响,海水养殖鱼类病害的种类、发病频率及危害性逐年增加,其中弧菌病是海水鱼类养殖过程中主要病害之一,死亡率常在80％左右,造成巨大的经济损失.2003年,我们从广东湛江特呈岛网箱养殖... 详细信息

近年来,由于高密度集约化养殖所带来的多种负因子影响,海水养殖鱼类病害的种类、发病频率及危害性逐年增加,其中弧菌病是海水鱼类养殖过程中主要病害之一,死亡率常在80％左右,造成巨大的经济损失.2003年,我们从广东湛江特呈岛网箱养殖的红鳍笛鲷身上分离、纯化到一株高致病性病原菌Ls-1.该菌为革兰氏阴性短杆菌,有运动性,菌落半透明,最适温度28～30℃,需盐生长,氧化酶反应阳性,发酵葡萄糖不产气,不发酵肌醇,对弧菌抑制剂0/129敏感.经API-ID32E细菌鉴定系统及弧菌科细菌生化鉴定管鉴定,该菌为一株溶藻弧菌(Vibrio aginolyticus);其对红鳍笛鲷的半数致死量为6.32×105cfu/mL. 首先对溶藻弧菌的致病因子进行了研究，提取并纯化了溶藻弧菌的胞外产物（EC). 其次，对溶藻弧菌的保护性抗原进行了筛选。我们还提取了溶藻弧菌的外膜蛋白（OMP），并对其在紫红笛绸中兔疫保护性进行研究。再次，对机体的免疫学进行了研究。分别从赤点石斑鱼和紫红笛绸的血清中分离纯化了其免疫球蛋白IgM，对其特性进行了研究。最后，还制备了多种溶藻弧菌疫苗，并对疫苗的效果进行了现场评价，如上所述,我们对溶藻弧菌的病原生物学、流行病学和免疫学等方面进行了细致的研究,这将为弧菌病的研究和防治打下坚实的理论基础.

关键词：海水养殖鱼类弧菌病病原生物学免疫防治

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溶藻弧菌疫苗对凡纳滨对虾免疫功能的影响

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湛江海洋大学学报 2004年第6期24卷 11-17页

作者：曹剑香简纪常吴灶和湛江海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室广东湛江524025

应用溶藻弧菌疫苗饲喂凡纳滨对虾,测定了弧菌疫苗对凡纳滨对虾免疫指标的影响以及疫苗的免疫保护作用。结果发现,投喂弧菌疫苗后,溶菌活力在12～20d内迅速增强,在20d时活力达到最高,VF1组高于VF2和VF3组,但VF2和VF3之间差异不显著... 详细信息

应用溶藻弧菌疫苗饲喂凡纳滨对虾,测定了弧菌疫苗对凡纳滨对虾免疫指标的影响以及疫苗的免疫保护作用。结果发现,投喂弧菌疫苗后,溶菌活力在12～20d内迅速增强,在20d时活力达到最高,VF1组高于VF2和VF3组,但VF2和VF3之间差异不显著;凝集效价在投喂后的第8天开始升高,在14d时达到最高,实验组的凝集活力均高于对照组,但实验组之间无明显的差异;而超氧化物歧化酶(SOD)活力和溶血活力变化不明显。以每克饲料含疫苗细胞1.0×109、 1.0×108和1.0×107个的浓度投喂,对凡纳滨对虾的免疫保护率分别为66.7%、46.7%和13.3%。可见弧菌疫苗对凡纳滨对虾的免疫保护率随疫苗浓度的增大而升高。

关键词：凡纳滨对虾免疫指标免疫保护率影响因素溶藻弧菌疫苗

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红鳍笛鲷弧菌病病原的研究

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湛江海洋大学学报 2004年第6期24卷 1-5页

作者：李永芹简纪常吴灶和湛江海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室广东湛江524025

从广东湛江特呈岛鱼排取患病红鳍笛鲷进行病原分离、纯化,得到一株病原菌Ls 1。该菌为革兰阴性短杆菌,有运动性,菌落半透明,最适温度28～30℃,需盐生长,氧化酶反应阳性,发酵葡萄糖不产气,不发酵肌醇,对弧菌抑制剂O/129敏感。经API... 详细信息

从广东湛江特呈岛鱼排取患病红鳍笛鲷进行病原分离、纯化,得到一株病原菌Ls 1。该菌为革兰阴性短杆菌,有运动性,菌落半透明,最适温度28～30℃,需盐生长,氧化酶反应阳性,发酵葡萄糖不产气,不发酵肌醇,对弧菌抑制剂O/129敏感。经API ID32E细菌鉴定系统及弧菌科细菌生化鉴定管鉴定,该菌为一株溶藻弧菌(Vibrioaginolyticus);其对红鳍笛鲷的半数致死量为6.32 ×105mL-1。药敏试验结果表明,该菌对阿莫西林、先锋V不敏感,对新生霉素、卡那霉素、多粘菌素B、四环素中度敏感,而对庆大霉素、氟哌酸、氯霉素、红霉素、链霉素和复方新诺明等有较高的敏感性。

关键词：红鳍笛鲷弧菌病病原溶藻弧菌细菌鉴定药敏试验

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