检索结果-内蒙古大学图书馆

2011年中国水产学会学术年会

作者：杨世平吴灶和简纪常广东海洋大学广东省海洋开发研究中心仲恺农业工程学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东海洋大学水产学院

本文在饲料中添加了不同形式的沼泽生红冬孢酵母(干酵母和活酵母)(Rhodosporidium paludigenum),研究其对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)抗氧化相关基因表达的影响。经过14d的实验,结果发现投喂干酵母后,凡纳滨对虾肝胰腺中SODMn、CA... 详细信息

本文在饲料中添加了不同形式的沼泽生红冬孢酵母(干酵母和活酵母)(Rhodosporidium paludigenum),研究其对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)抗氧化相关基因表达的影响。经过14d的实验,结果发现投喂干酵母后,凡纳滨对虾肝胰腺中SODMn、CAT基因的表达呈现上升趋势,GPx、铁蛋白基因的表达与对照组之间没有明显差异,硫氧化还原蛋白基因的表达呈现下调趋势。投喂活酵母后,凡纳滨对虾肝胰腺中SODMn、CAT、GPx、铁蛋白、硫氧化还原蛋白基因的表达均呈现上升趋势。投喂干酵母后,凡纳滨对虾血细胞中SODMn基因的表达呈现下调趋势,CAT、GPx基因的表达与对照组相比呈现明显上升—下降—上升的波动变化趋势,铁蛋白基因的表达均呈现上升趋势。投喂活酵母后,凡纳滨对虾血细胞中SODMn、CAT、GPx基因的表达也呈现下调趋势,而铁蛋白基因的表达呈现上升趋势。结果表明,饲料中添加不同形式的沼泽生红冬孢酵母可以增加对虾肝胰腺中部分抗氧化相关基因表达量,提高对虾的抗抗氧化能力。

关键词：沼泽生红冬孢酵母凡纳滨对虾抗氧化相关基因定量PCR

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鱼类非特异性细胞毒性细胞(NCC)的研究进展

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中国水产科学 2010年第2期17卷 374-380页

作者：魏世娜简纪常吴灶和鲁义善闫秀英广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨广东省高等学校水产经济动物病害控制重点实验室广东湛江524025

自然杀伤细胞(NK)进化上的前体细胞在鱼类中被称作非特异性细胞毒性细胞(NCC),主要来源于血液和淋巴器官,是防御细菌、病毒、寄生性原生动物等入侵的第一道防线,在非特异性免疫中起重要作用,还具有体外杀伤肿瘤细胞的功能。近年来免疫... 详细信息

自然杀伤细胞(NK)进化上的前体细胞在鱼类中被称作非特异性细胞毒性细胞(NCC),主要来源于血液和淋巴器官,是防御细菌、病毒、寄生性原生动物等入侵的第一道防线,在非特异性免疫中起重要作用,还具有体外杀伤肿瘤细胞的功能。近年来免疫荧光显微镜技术表明NCAMP-1和NCCRP-1两种受体蛋白均表达于NCC膜上,并且这种免疫细胞从鱼类到哺乳动物上的进化是保守的,这些膜蛋白在鱼类炎症反应期可能通过颗粒胞吐途径参与抗菌的先天性免疫。本文就NCC的分离鉴定、形态结构、功能受体作用机制等方面的研究成果作一综述,旨在为深入研究NCC在鱼类先天性防御中的作用提供依据。

关键词：非特异性细胞毒性细胞分离鉴定 NCC受体

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溶藻弧菌诱导凡纳滨对虾消减文库的构建及其表达序列标签分析

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水生生物学报 2010年第1期34卷 157-163页

作者：蔡小辉鲁义善吴灶和简纪常王蓓蔡双虎广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点试验室暨广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室湛江524025

利用抑制消减杂交技术构建了溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)诱导的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)血淋巴细胞cDNA文库。用DNAMAN5.2.2软件对560条高质量的ESTs进行聚类,共获得239个Unigenes。与GenBank进行BLASTx和BLASTn同源比较,其中66.9%为已知功能基因,33.1%为未知功能基因,GO分类将其分为7类,包括能量和基础代谢类相关的基因为第一大类占36%,免疫相关基因占15%,其他基因占8%,信号转导类占3%,抗氧化酶和凋亡相关蛋白均为2%,核蛋白类占1%。实验结果表明凡纳滨对虾在溶藻弧菌诱导下可产生一系列特异基因的表达,通过对文库的分析显示,基于PCR方法建立的SSH文库为取得大量免疫相关基因的ESTs序列提供了可能。

关键词：凡纳滨对虾溶藻弧菌抑制消减杂交(SSH) 表达序列标签(EST)

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流沙湾海区异养菌和弧菌动态变化规律研究

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渔业现代化 2010年第1期37卷 20-24页

作者：丁燏申玉春吴灶和简纪常刘莹王威朱春华广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东海洋大学水产学院湛江524025

对流沙湾海区异养菌、弧菌动态变化规律及其优势菌群进行了初步探讨。采用平板稀释法对异养菌和弧菌数量进行了周年检测；对优势菌株进行分离纯化，并对代表性月份样品优势菌中的孤菌进行菌种鉴定。结果显示，流沙湾海区的异养菌和弧菌... 详细信息

对流沙湾海区异养菌、弧菌动态变化规律及其优势菌群进行了初步探讨。采用平板稀释法对异养菌和弧菌数量进行了周年检测；对优势菌株进行分离纯化，并对代表性月份样品优势菌中的孤菌进行菌种鉴定。结果显示，流沙湾海区的异养菌和弧菌密度分别为8．8×10^3～9．60×10^5cfu／mL和1．0×10^3-2．45×10^4cfu／mL，其中异养菌数量高峰出现在6月，弧菌数量高峰出现在12月，异养菌、弧菌数量与水温变化的相关性不明显；流沙湾海区优势菌群中存在着溶藻弧菌等多种致病性弧菌。

关键词：异养菌弧菌优势菌群流沙湾

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溶藻弧菌HY9901鞭毛蛋白flaB基因的克隆及原核表达

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水产学报 2010年第1期34卷 139-146页

作者：梁海鹰夏立群吴灶和简纪常鲁义善中国科学院南海海洋研究所广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东省水产经济动物病害控制重点实验室中国科学院研究生院

参照GenBank上登录的弧菌鞭毛蛋白flaB基因序列设计引物,PCR扩增溶藻弧菌HY9901株的flaB全长基因,序列分析结果显示该基因为1134bp,编码377个氨基酸。与GenBank中其它弧菌的同源基因序列比对显示,溶藻弧菌flaB基因与副溶血弧菌flaB基因... 详细信息

参照GenBank上登录的弧菌鞭毛蛋白flaB基因序列设计引物,PCR扩增溶藻弧菌HY9901株的flaB全长基因,序列分析结果显示该基因为1134bp,编码377个氨基酸。与GenBank中其它弧菌的同源基因序列比对显示,溶藻弧菌flaB基因与副溶血弧菌flaB基因的同源性最高(92%)。将该基因定向克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达出带His-tag的融合蛋白,分子量大小与预期一致。优化的表达条件为28℃,0.4mmol/LIPTG浓度诱导10h。用纯化后的融合蛋白免疫SPF级小鼠,制备了多克隆抗体。Western-blotting结果表明鼠抗FlaB血清不仅能与诱导后的重组蛋白发生反应,而且能与天然的溶藻弧菌全菌蛋白发生反应,提示鞭毛蛋白FlaB可能是溶藻弧菌的重要保护性抗原之一,为下一步进行FlaB蛋白免疫原性的研究以及疫苗的制备奠定了基础。

关键词：溶藻弧菌鞭毛蛋白 flaB基因原核表达

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用免疫蛋白质组学方法筛选哈氏弧菌免疫反应蛋白

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水产学报 2010年第4期34卷 635-642页

作者：李岩庞欢瑛鲁义善吴灶和简纪常广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东海洋大学水产学院广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室广东海洋大学水产学院中国科学院南海海洋研究所中国科学院研究生院

用免疫蛋白质组学的研究方法鉴定了哈氏弧菌的免疫反应蛋白。将哈氏弧菌接种于TSB培养基28℃培养18h,利用裂解液裂解细菌,提取全菌可溶性蛋白,一向电泳采用7cmpH4～7的胶条进行等电聚焦,二向用12.5%的SDS-PAGE胶分离蛋白质,考马斯亮蓝染... 详细信息

用免疫蛋白质组学的研究方法鉴定了哈氏弧菌的免疫反应蛋白。将哈氏弧菌接种于TSB培养基28℃培养18h,利用裂解液裂解细菌,提取全菌可溶性蛋白,一向电泳采用7cmpH4～7的胶条进行等电聚焦,二向用12.5%的SDS-PAGE胶分离蛋白质,考马斯亮蓝染色,获得双向电泳图谱,再结合免疫转印技术检测免疫反应的蛋白质,利用ImageMaster 2D Platinum进行配对分析得到15个非特异性的免疫反应性蛋白点,30个特异性的免疫反应性蛋白点。经过鉴定得到13种非特异性的免疫反应性蛋白质,这其中有2对蛋白在胶上的位置不同,但鉴定为同一种蛋白;同时得到28种特异性的免疫反应性蛋白质,有一个蛋白点没有在数据库中查找到相对应的蛋白质,还有1对蛋白在胶上的位置不同,但鉴定为同一种蛋白。将特异性免疫反应蛋白鉴定结果与非特异性比较发现有1对蛋白鉴定为同一种蛋白;另外,No.17和No.19是F0F1 ATP synthase的两个亚基。特异性免疫反应蛋白鉴定结果中有6个蛋白质是已知的其他细菌的具有免疫反应的蛋白,分别为OmpN,OmpW,OmpU,alanine dehydrogenase,Elongation factor Ts(EF-Ts),cysteine synthase成功建立了哈氏弧菌的免疫蛋白质组学研究方法,筛选出28种具有特异性免疫反应的蛋白质,为哈氏弧菌的免疫蛋白研究提供理论依据和操作框架。

关键词：哈氏弧菌免疫蛋白质组学全菌可溶性蛋白双向电泳

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广东流沙湾4个测站2个周日潮流观测的准调和分析

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台湾海峡 2010年第3期29卷 408-413页

作者：张静孙省利吴灶和陈春亮张瑜斌广东海洋大学水产学院广东湛江524025 广东海洋大学海洋资源与环境监测中心广东湛江524025 广东海洋大学广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东湛江524025

采用短期资料的潮流准调和分析方法,对水深为4.4～17.0 m的流沙湾4个测站2个周日潮流观测获得的表、中、底层的潮流资料进行了分析,分别计算了4个测站O1、K1、M2、S2、M4、MS4共6个主要分潮的潮流调和常数,并给出了各观测站位在各层的... 详细信息

采用短期资料的潮流准调和分析方法,对水深为4.4～17.0 m的流沙湾4个测站2个周日潮流观测获得的表、中、底层的潮流资料进行了分析,分别计算了4个测站O1、K1、M2、S2、M4、MS4共6个主要分潮的潮流调和常数,并给出了各观测站位在各层的潮流椭圆要素.计算结果表明:流沙湾主要为日潮流海区,其中湾外为规则日潮流,湾内为不规则日潮流;湾外主要分潮流的北分量一般大于东分量,而湾内主要分潮流的北分量一般小于东分量.观测期间余流的流向主要呈西北向,最大余流流速出现在湾内地形突然收窄处,且在湾内中层余流流速要大于表、底层余流流速.整个海区潮流的可能最大流速表层在57～107 cm/s之间,中层在53～106 cm/s之间,底层在34～98 cm/s之间.流沙湾湾外潮流主要为顺时针的旋转流运动,湾内为带有旋转流的往复流运动.

关键词：海洋动力学潮流准调和分析余流周日变化流沙湾

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溶藻弧菌全菌可溶性蛋白二维图谱的建立及部分蛋白分子的鉴定

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中国水产科学 2010年第3期17卷 404-413页

作者：庞欢瑛李岩鲁义善简纪常吴灶和中国科学院南海海洋研究所广东广州510301 中国科学院研究生院北京100049 广东海洋大学水产学院广东湛江524025 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东湛江524025 广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室广东湛江524025

本研究采用蛋白质组学技术,建立了溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)ZJ03培养至稳定期的蛋白质组双向电泳图谱,并对部分蛋白分子进行了肽质量指纹图谱分析鉴定。首先将溶藻弧菌接种于TSB培养基28℃培养24 h,利用裂解液裂解细菌,提取全菌... 详细信息

本研究采用蛋白质组学技术,建立了溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)ZJ03培养至稳定期的蛋白质组双向电泳图谱,并对部分蛋白分子进行了肽质量指纹图谱分析鉴定。首先将溶藻弧菌接种于TSB培养基28℃培养24 h,利用裂解液裂解细菌,提取全菌可溶性蛋白,荧光染料标记,24 cm pH4 ～ 7的胶条进行等电聚焦,再用12.5%的胶进行SDS-PAGE。2-D胶经过分析,得到902±8个蛋白斑点,重复胶的匹配点数为866±28,匹配率为96%。从双向电泳图谱中选取68个高丰度蛋白质点进行肽质量指纹图谱鉴定,其中60个在NMPDR数据库中得到鉴定,另外8个在NCBI数据库中得到鉴定。鉴定的蛋白中发现Serine protein kinase、purine nucleoside phosphorylase 和Alkyl hydroperoxide reductase subunit C-like protein存在修饰现象,它们在胶上均有2种表现形式。对68个蛋白进行了细胞功能的分类,发现能量代谢蛋白最多,占43%;其次是转运和结合蛋白,占9%;第三是外膜蛋白,占8%。经CMR操纵子预测软件分析预测到2个操纵子,它们均参与了能量代谢过程。研究结果为溶藻弧菌在不同生长条件下的比较蛋白质组学以及该菌强毒株和无毒株的比较研究提供了基础资料。

关键词：蛋白质组学溶藻弧菌全菌可溶性蛋白肽质量指纹图谱双向电泳

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新加坡石斑鱼虹彩病毒ORF086蛋白的原核表达、纯化及抗体制备

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上海海洋大学学报 2010年第1期19卷 1-6页

作者：夏立群张红莲梁海鹰刘森林广东海洋大学水产学院广东湛江524025 中山大学生命科学学院广东广州510275 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东湛江524088

新加坡石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)是导致石斑鱼养殖严重经济损失的主要病原体。本研究构建了含有新加坡石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)ORF086基因的重组表达质粒载体pET32a-ORF086,将其转... 详细信息

新加坡石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)是导致石斑鱼养殖严重经济损失的主要病原体。本研究构建了含有新加坡石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)ORF086基因的重组表达质粒载体pET32a-ORF086,将其转化到大肠杆菌中进行融合表达,经SDS-PAGE分析和Western blot鉴定,证实重组大肠杆菌融合表达了SGIV ORF086蛋白。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isoprophl-thio-β-D-galactopyranoside,IPTG)浓度、诱导温度、诱导时间等诱导表达条件的优化,确定在0.7 mmol/L IPTG、16℃诱导14 h时可溶性SGIV ORF086重组蛋白占重组蛋白的60%。经镍琼脂糖凝胶柱纯化重组蛋白,纯化度达95%以上。用纯化的SGIV ORF086蛋白免疫小鼠,获得了高效特异的SGIV ORF086抗血清。

关键词：新加坡石斑鱼虹彩病毒原核表达多克隆抗体 SGIV ORF086重组蛋白

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多鳞鱚消化系统的形态学和组织学研究

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水产科学 2010年第6期29卷 339-343页

作者：曹剑香简纪常黄洋杜涛广东海洋大学广东省海洋开发研究中心广东湛江524025 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点试验室暨广东省高等学校水产经济动物病害控制重点实验室广东湛江524025 广东海洋大学高新科技园广东湛江524025

采用解剖和光镜技术研究多鳞鱚消化系统的形态学和组织学。试验结果表明,多鳞鱚消化道由口咽腔、食道、胃、幽门盲囊、小肠和直肠构成。口咽腔较小,具绒毛状颌齿,舌三角形,黏膜上皮为复层鳞状上皮,上皮含少量味蕾和较多杯状细胞。食道... 详细信息

采用解剖和光镜技术研究多鳞鱚消化系统的形态学和组织学。试验结果表明,多鳞鱚消化道由口咽腔、食道、胃、幽门盲囊、小肠和直肠构成。口咽腔较小,具绒毛状颌齿,舌三角形,黏膜上皮为复层鳞状上皮,上皮含少量味蕾和较多杯状细胞。食道黏膜也为复层上皮,从食道到胃,杯状细胞逐渐减少,上皮由复层上皮逐渐变为单层柱状上皮,肌肉层发达。胃为"Y"型胃,其盲囊部发达,黏膜上皮为单层柱状上皮,贲门部和盲囊部上皮下有一厚层胃腺组织。小肠短,肠道系数为0.56,上皮为具微绒毛的单层柱状上皮,杯状细胞前肠较多,中肠较少,后肠无,幽门盲囊4个,结构与小肠相似。直肠上皮为单层柱状上皮,上皮含少量杯状细胞,肌肉层较小肠发达。肝小叶不明显,肝细胞索明显。胰腺为弥散型,散布在肝脏组织中。

关键词：多鳞鱚消化系统形态学组织学

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