检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学通报 2017年第11期44卷 2511-2521页

作者：周莲谢小林顾振红陈美标姚青朱红惠广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东广州510070 华南农业大学园艺学院广东广州510642

【目的】建立废弃羽毛液体发酵工艺,优化发酵条件,提高羽毛降解率及氨基酸产量,研发新型、高效复合氨基酸肥料。【方法】利用解淀粉芽孢杆菌3-2发酵羽毛,探究温度、发酵时间、羽毛含量、单一碳源、复合碳氮源、金属离子等对废弃羽毛降... 详细信息

【目的】建立废弃羽毛液体发酵工艺,优化发酵条件,提高羽毛降解率及氨基酸产量,研发新型、高效复合氨基酸肥料。【方法】利用解淀粉芽孢杆菌3-2发酵羽毛,探究温度、发酵时间、羽毛含量、单一碳源、复合碳氮源、金属离子等对废弃羽毛降解效果以及发酵液中氨基酸种类和含量的影响。【结果】废弃羽毛降解率与氨基酸总产量呈负相关。随着发酵时间延长,羽毛降解率增加,当发酵温度为37°C、羽毛添加量为1%、以乳糖为外加碳源、添加Mg2+时,羽毛降解率最高,达到81.92%。随着羽毛添加量增加,氨基酸总含量也增加(在20%范围以内),当发酵温度为37°C、降解时间为108 h、羽毛添加量为10%、乳糖添加量为0.5%、不添加复合碳氮源、不添加金属离子时,氨基酸的种类最全(富含17种氨基酸),总含量最高,达到20.861 g/kg。【结论】利用解淀粉芽孢杆菌3-2发酵废弃羽毛生产氨基酸复合肥料是一种可靠、环保、经济的方法,获得的氨基酸肥料营养齐全。研究结果为新型复合氨基酸肥料的研发提供技术支撑。

关键词：解淀粉芽孢杆菌废弃羽毛发酵氨基酸工艺优化

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食源性致病沙门氏菌血清型生物标志物的研究

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现代食品科技 2017年第5期33卷 288-292,310页

作者：董蓉吴清平张菊梅于泓鹏马连营郭伟鹏广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 广东工业大学轻工化工学院广东广州510006

寻找食源性致病沙门氏菌(Salmonella)血清型生物标志物,是研发食源性致病微生物鉴定及监控技术的基础。本文基于代谢组学技术提取5种沙门氏菌血清型8株标准菌株胞内代谢产物,对各菌株进行胞内代谢轮廓分析,并构建指纹图谱和PCA分析。研... 详细信息

寻找食源性致病沙门氏菌(Salmonella)血清型生物标志物,是研发食源性致病微生物鉴定及监控技术的基础。本文基于代谢组学技术提取5种沙门氏菌血清型8株标准菌株胞内代谢产物,对各菌株进行胞内代谢轮廓分析,并构建指纹图谱和PCA分析。研究发现,各血清型之间的产物在种类和丰度上具有较大差异,其中肠炎沙门氏菌血清型的特异性产物为硫基乙酸和α-羟基-戊二酸,伤寒沙门氏菌血清型特有产物为N-乙酰基-天冬氨酸、2(1H)-嘧啶酮和L-苏糖酸,鼠伤寒沙门氏菌血清型特有产物为肉豆蔻酸甲酯和甘油醚葡萄糖苷,猪霍乱沙门氏菌血清型特有产物1,4-萘醌,亚利桑那沙门菌血清型特有产物为3-吡啶甲酸三甲酯;通过聚类分析和PCA分析可以明显区分这5种沙门氏菌血清型。因此以上特异性产物有望作为各自血清型的潜在生物标志物。

关键词：代谢组学沙门氏菌生物标志物指纹图谱

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微生物实验室进化的研究进展

微生物实验室进化的研究进展

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中国化工学会第五届生物化工技术创新及产业发展研讨会暨第二届生物化工青年学者论坛

作者：朱晁谊朱牧孜李爽华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510006 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

当前,微生物细胞工厂的构建逐渐成为工业上生产大宗和精细化学品的重要手段.然而,微生物遗传背景的复杂性及表型间相互影响的不可预测性限制了人们对微生物的理性改造.因此,在缺乏遗传背景基础上仍能获得目标表型的微生物实验室进化手... 详细信息

当前,微生物细胞工厂的构建逐渐成为工业上生产大宗和精细化学品的重要手段.然而,微生物遗传背景的复杂性及表型间相互影响的不可预测性限制了人们对微生物的理性改造.因此,在缺乏遗传背景基础上仍能获得目标表型的微生物实验室进化手段逐渐成为当今生物化工领域的研究热点.近年来,随着微生物连续培养技术及体内连续进化策略的深入研究,微生物实验室进化取得了较大进展.基于此,笔者将对近年来微生物实验室进化策略进行综述,为其后续研究及应用提供借鉴.

关键词：基因工程微生物实验室基因突变库连续培养技术

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野生虫草无性型分离株分子鉴定及遗传多样性的研究

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现代食品科技 2017年第4期33卷 108-113,167页

作者：冯德龙胡惠萍黄龙花谢意珍吴清平霍光华江西农业大学生物科学与工程学院江西南昌330045 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物新技术公共实验室广东广州510070

虫草具有较高的食用与药用价值,本文以19株野生虫草分离株为研究材料,利用ITS引物进行PCR扩增、测序,并从Genbank上下载虫草属相关序列,构建系统发育树,并对19株虫草无性型分离物进行ERIC-PCR扩增,同时还检测了上述无性分离物发酵液中... 详细信息

虫草具有较高的食用与药用价值,本文以19株野生虫草分离株为研究材料,利用ITS引物进行PCR扩增、测序,并从Genbank上下载虫草属相关序列,构建系统发育树,并对19株虫草无性型分离物进行ERIC-PCR扩增,同时还检测了上述无性分离物发酵液中虫草素的含量。系统发育分析表明在分子水平上19株虫草的无性型分离菌株,都为蛹虫草(Cordyceps militaris)。与高雄山虫草(***)、蝉花(***)、古尼虫草(***)以及冬虫夏草(***)平均遗传距离分别为0.1269、0.1228、0.2251和0.2354,在遗传距离上,与高雄山虫草和蝉花较近,与冬虫夏草较远。ERIC-PCR相似系数在0.8水平上,可以将19个蛹虫草菌株分为3组,相似系数在0.9水平上19株蛹虫草菌种可以分为8组。对蛹虫草发酵液中虫草素含量检测发现,所有蛹虫草无性型分离物发酵液都含有虫草素,最高的可达到126.33 mg/L,为现有的蛹虫草生产菌株JD的119倍。

关键词：虫草鉴定遗传多样性虫草素

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深红虫草高产卵孢菌素的培养基筛选及发酵条件优化

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菌物学报 2017年第4期36卷 503-511页

作者：卢梦梦潘清灵李赛妮王磊郝再彬章卫民桂林理工大学化学与生物工程学院广西桂林541006 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

本研究以提高深红虫草Cordyceps cardinalis C033次级代谢产物卵孢菌素的产量为目标,对其产卵孢菌素的培养基进行筛选,并利用单因素和正交试验对深红虫草产卵孢菌素的发酵条件进行了优化。结果表明,深红虫草产卵孢菌素的最适发酵培养基... 详细信息

本研究以提高深红虫草Cordyceps cardinalis C033次级代谢产物卵孢菌素的产量为目标,对其产卵孢菌素的培养基进行筛选,并利用单因素和正交试验对深红虫草产卵孢菌素的发酵条件进行了优化。结果表明,深红虫草产卵孢菌素的最适发酵培养基为马铃薯‐蛋白胨‐葡萄糖培养基,最佳发酵参数为:发酵时间6d,培养基初始p H 7.0,接种量6%,培养温度24℃,每500m L锥形瓶装液量100m L,摇瓶转速120r/min。用最佳培养基进行发酵条件优化后获得卵孢菌素448.70μg/m L,产量是优化前的10.14倍。该研究结果为菌株C033在农业害虫防治上的应用奠定了基础。

关键词：深红虫草卵孢菌素培养基发酵优化

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曲霉N1-14’高产L-苹果酸相关基因的克隆与分析

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现代食品科技 2017年第2期33卷 76-82页

作者：乐贤松吴军林吴清平张菊梅郭伟鹏中国科学院南海海洋研究所广东广州510301 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物新技术公共实验室广东广州510070 中国科学院大学北京100049 广东环凯微生物科技有限公司广东广州510643

为了解曲霉(Aspergillus sp.)N1-14’的高产L-苹果酸(LMA)机制,提取其总DNA作模板,设计同源引物扩增包含丙酮酸羧化酶基因(pyc)和苹果酸脱氢酶基因(mdh)全长的片段并测序,再参考测序结果找到丙酮酸羧化酶(PYC)和苹果酸脱氢酶(MDH)的编码... 详细信息

为了解曲霉(Aspergillus sp.)N1-14’的高产L-苹果酸(LMA)机制,提取其总DNA作模板,设计同源引物扩增包含丙酮酸羧化酶基因(pyc)和苹果酸脱氢酶基因(mdh)全长的片段并测序,再参考测序结果找到丙酮酸羧化酶(PYC)和苹果酸脱氢酶(MDH)的编码区,设计引物从N1-14’总cDNA扩增出其编码序列并通过TA克隆测序。测序结果显示pyc基因编码区长3582 bp,编码1193aa,分析结果显示PYC氨基酸序列在曲霉属内相当保守,同源性高达90%以上,其中N1-14’在两个保守位点出现突变,833位的A位于一个环区和1022位的F位于α-螺旋中部,可能与其高产酸活性相关;mdh编码区全长1023 bp,编码340aa。MDH氨基酸序列高度保守,突变株同样有两个保守区出现氨基酸点突变,且两点均出现在α-螺旋区域。本试验主要克隆两个曲霉N1-14’产L-苹果酸通路关键酶基因,分析其种属的特异性及预测特异氨基酸位点的功能,为继续探究N1-14’的高产LMA机制及相应的基因工程改造提升产酸水平奠定基础。

关键词：曲霉N1-14’ PYC MDH 序列分析

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Mcc在脱色希瓦氏菌S12电极呼吸中的作用

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微生物学通报 2017年第7期44卷 1547-1554页

作者：孔冠楠许玫英宋达杨永刚中国科学院南海海洋研究所广东广州510301 广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东广州510070 中国科学院大学北京100049 省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东广州510070 广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

【目的】研究脱色希瓦氏菌S12周质空间c型细胞色素Mcc的功能,进一步探索和补充微生物胞外电子传递过程的机制。【方法】借助自杀质粒敲除mcc基因,通过细胞浓度测定和激光共聚焦显微镜比较分析突变株和野生株之间的浮游细胞和生物膜的生... 详细信息

【目的】研究脱色希瓦氏菌S12周质空间c型细胞色素Mcc的功能,进一步探索和补充微生物胞外电子传递过程的机制。【方法】借助自杀质粒敲除mcc基因,通过细胞浓度测定和激光共聚焦显微镜比较分析突变株和野生株之间的浮游细胞和生物膜的生长情况,并比较分析二者在微生物燃料电池电极还原、铁还原和胞外偶氮染料还原过程中的功能。【结果】Mcc缺失对铁还原和偶氮还原没有影响,但却造成电极呼吸活性下降34.1%;与野生株相比,mcc突变株的好氧生长和厌氧浮游细胞生长无明显影响,但却显著抑制了电极表面生物膜的形成。【结论】Mcc是希瓦氏菌S12电极呼吸过程中周质空间电子传递的重要组分之一,缺失会显著抑制其电极呼吸效率以及生物膜的形成。

关键词：希瓦氏菌周质空间细胞色素c 胞外电子传递

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垂枝红千层叶化学成分的研究

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天然产物研究与开发 2017年第6期29卷 954-958页

作者：黎灿谭海波邱声祥徐汉虹刘洪新杨晓云华南农业大学农药系天然农药与化学生物学教育部重点实验室广州510642 中国科学院华南植物园广东省应用植物学重点实验室广州510650 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070

本实验研究了垂枝红千层(Callistemon viminalis)叶化学成分及其杀虫活性。采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、反相C18柱色谱分离化合物,通过波谱技术分析确定所得化合物的结构。采用饲料载毒法对垂枝红千层中含量较高的化合物2、4... 详细信息

本实验研究了垂枝红千层(Callistemon viminalis)叶化学成分及其杀虫活性。采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、反相C18柱色谱分离化合物,通过波谱技术分析确定所得化合物的结构。采用饲料载毒法对垂枝红千层中含量较高的化合物2、4、10进行了甜菜夜蛾的杀虫活性初筛。从垂枝红千层叶体积分数95%乙醇提取物的乙酸乙酯部分离得到13个化合物,分别鉴定为3,3',4'-三甲氧基鞣花酸(1)、槲皮素(2)、5,4'-二羟基-7-甲氧基-6,8-二甲基黄酮(3)、山奈酚(4)、5-羟基-7,4'-二甲氧基-6-甲基黄酮(5)、杜鹃素(6)、没食子酸甲酯(7)、原儿茶酸(8)、没食子酸(9)、2,6-二羟基-4-甲氧基异戊烯基间苯三酚(10)、vimifoliol(11)、丁二酸(12)及白桦酸(13)。化合物1~9、11、12均为首次从该植物中分离得到。杀虫活性研究表明间苯三酚类化合物10具有较强的杀甜菜夜蛾活性,其活性接近阳性对照药鱼藤酮,值得进一步深入的研究。

关键词：垂枝红千层化学成分结构鉴定甜菜夜蛾

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利用“移树养苗”策略挖掘粤蓝链霉菌隐性活性次级代谢产物

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生物技术通报 2017年第9期33卷 145-152页

作者：林海州陈洲琴王燕郭俊朱红惠邓名荣中国科学院南海海洋研究所广州510301 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070 中国科学院大学北京100049 广东省科技图书馆广州510070

利用适当的策略激活粤蓝链霉菌中潜在的隐性次级代谢途径,以期获得新的活性物质。以粤蓝链霉菌突变株DMR1为研究对象,该突变株的主导产物榴菌素的关键生物合成基因gra-orf1-3被敲除,不能产生榴菌素。通过改变营养条件、添加诱导物和热... 详细信息

利用适当的策略激活粤蓝链霉菌中潜在的隐性次级代谢途径,以期获得新的活性物质。以粤蓝链霉菌突变株DMR1为研究对象,该突变株的主导产物榴菌素的关键生物合成基因gra-orf1-3被敲除,不能产生榴菌素。通过改变营养条件、添加诱导物和热激等方法处理菌株,利用琼脂糖扩散法及TLC-生物显影等方法检测发酵粗提物的抑菌活性。结果显示,突变株DMR1的高氏一号和ISP3培养基发酵粗提物对枯草芽孢杆菌ATCC6633、金黄色葡萄球菌ATCC6538以及耐药的金黄色葡萄球菌ATCC43300和206具有显著抑菌活性;添加3%DMSO诱导后,高氏一号和ISP3培养基的发酵粗提物不仅对上述菌株的抑制活性增强,还具有抑制大肠杆菌ATCC8739、白色念珠菌ATCC10231以及多株耐药菌大肠杆菌和沙门氏菌的活性。粤蓝链霉菌中新发现的活性物质对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌以及酵母菌具有广泛的抗菌活性,且部分发酵粗提物对所有测试的耐药菌均具有显著活性,有可能是新型的抗生素。结果也表明"移树养苗"策略能够提高隐性活性次级代谢产物的挖掘效率。

关键词：隐性次级代谢产物 “移树养苗”策略激活多重耐药菌粤蓝链霉菌

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人工诱导方法对白木香萜类相关基因表达量影响研究

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时珍国医国药 2017年第5期28卷 1207-1210页

作者：冯美柔樊云飞陈晓东周欣章卫民高晓霞广东药科大学药学院广东广州510006 仙乐健康科技股份有限公司广东汕头515041 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

目的研究不同人工诱导方法对白木香结香过程中萜类相关基因表达量的影响。方法 "小孔滴注法"进行甲酸、甲酸结合镰刀菌人工诱导试验,手工割取诱导前、后12个月内的白木香结香部位,实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)测定As-HMGR、As-... 详细信息

目的研究不同人工诱导方法对白木香结香过程中萜类相关基因表达量的影响。方法 "小孔滴注法"进行甲酸、甲酸结合镰刀菌人工诱导试验,手工割取诱导前、后12个月内的白木香结香部位,实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)测定As-HMGR、As-DXS1、As-DXS2基因表达水平。结果 As-HMGR、As-DXS1、As-DXS2回归方程分别为Y=-3.580X+40.11、Y=-3.424X+38.38、Y=-3.728X+41.84,相关系数均大于0.997,线性关系均良好。甲酸、甲酸结合镰刀菌诱导过程中,As-DXS1与As-DXS2的表达模式相近,前8个月表达水平较低,随后显著升高。甲酸诱导时,As-HMGR基因从2个月开始表达,呈现先升高后下降再升高的趋势;甲酸结合镰刀菌诱导时,初期相对表达量缓慢升高,6个月时达到峰值,随后急剧下降。人工诱导12个月As-HMGR、As-DXS1的相对表达量,甲酸诱导高于甲酸结合镰刀菌诱导(P<0.05)。结论甲酸、甲酸结合镰刀菌诱导白木香结香过程中As-HMGR基因在伤害早期响应伤害胁迫,As-DXS1、As-DXS2基因在后期响应,为进一步研究白木香萜类次生代谢产物表达与调控,改善人工沉香品质奠定基础。

关键词：白木香人工诱导 As-HMGR As-DXS

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