检索结果-内蒙古大学图书馆

色谱 2011年第4期29卷 335-341页

作者：王志鹏暨南大学医学院微生物与免疫学教研室广东广州510632

建立了采用变性高效液相色谱（DHPLC）对α-血红蛋白稳定蛋白（AHSP）基因进行基因分型和突变筛查的新方法。将AHSP基因序列分成6个片段,因第一、二、四、六个片段均含有1~2个常见单核苷酸多态性（single nu-cleotide polymorphism,SNP... 详细信息

建立了采用变性高效液相色谱（DHPLC）对α-血红蛋白稳定蛋白（AHSP）基因进行基因分型和突变筛查的新方法。将AHSP基因序列分成6个片段,因第一、二、四、六个片段均含有1~2个常见单核苷酸多态性（single nu-cleotide polymorphism,SNP）位点,需单个标本分别进行检测;第三、五个片段不含有常见SNP位点,采用DHPLC结合DNA（脱氧核糖核酸）池的方法进行检测。以基因测序为金标准对所建立的AHSP基因检测方法进行方法学评价,结果显示：40个样品的DHPLC检测结果与测序结果之间完全吻合,说明所建立的检测方法能对AHSP基因6种常见SNP进行准确基因分型。应用DHPLC对365个样品的AHSP基因进行检测,发现2个罕见SNP（11 810G〉A和12 802C〉T）;同时还发现2个错义突变（AHSP D29V和AHSP V56G）,AHSP D29V突变为新突变,AH-SP V56G为罕见突变。结果表明采用DHPLC法可有效地对AHSP基因进行基因分型和突变筛查。

关键词：变性高效液相色谱 α-血红蛋白稳定蛋白基因基因分型突变筛查

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HCV-C蛋白抗原在人肝细胞株中的表达和鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2006年第4期22卷 423-426页

作者：李君武许小亮李科暨南大学医学院微生物与免疫学教研室广东广州510632

目的:构建HCV-C蛋白基因的真核表达载体,并在正常人肝细胞HL-7702中表达与鉴定。方法:从含有丙肝病毒全长基因的重组质粒pBRTM/HCV1-3011质粒中,扩增HCVcore基因片段,构建pcDNA3.1(-)/core重组真核表达质粒。然后采用阳离子多聚体将其... 详细信息

目的:构建HCV-C蛋白基因的真核表达载体,并在正常人肝细胞HL-7702中表达与鉴定。方法:从含有丙肝病毒全长基因的重组质粒pBRTM/HCV1-3011质粒中,扩增HCVcore基因片段,构建pcDNA3.1(-)/core重组真核表达质粒。然后采用阳离子多聚体将其转染人正常肝细胞HL-7702,用免疫组化染色(SP)法检测HCVC蛋白的表达,并通过Westernblot进行鉴定。结果:所克隆的HCV-C基因片段的大小为573bp,序列正确。成功地构建了pcDNA3.1(-)/core重组表达质粒。以其转染HL-7702细胞后,用SP免疫组化染色法检测到了C蛋白的表达。Westernblot显示,其相对分子质量(Mr)约为21000。结论:构建的真核表达载体pcD-NA3.1(-)/core在人肝细胞中能有效表达HCV-C蛋白,为以后相应抗体的制备打下了基础。

关键词： HCV C蛋白真核表达

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细胞因子在登革病毒感染人皮肤成纤维细胞中的作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2005年第7期25卷 583-587页

作者：江振友温筱芸暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632

目的探讨登革病毒(denguevirus,DV)对人皮肤成纤维细胞(HSF)的感染性和细胞因子在DV感染HSF中的作用。方法采用微量病毒空斑法检测登革Ⅱ型病毒(denguetype-2virus,DV2)感染HSF后病毒繁殖动态变化,间接免疫荧光法检测HSF内DV抗原。透射... 详细信息

目的探讨登革病毒(denguevirus,DV)对人皮肤成纤维细胞(HSF)的感染性和细胞因子在DV感染HSF中的作用。方法采用微量病毒空斑法检测登革Ⅱ型病毒(denguetype-2virus,DV2)感染HSF后病毒繁殖动态变化,间接免疫荧光法检测HSF内DV抗原。透射电镜观察病毒感染细胞的超微结构改变。用不同浓度的IL-6、TNF-α、GM-CSF分别作用于DV2感染HSF的不同环节(病毒吸附时和病毒吸附后),于感染后48h收集感染上清,测病毒滴度;用DV2感染HSF后,于不同时间收集感染上清,用ELISA法定量测定IL-6、TNF-α的含量。结果病毒感染后24h即可在培养上清中测出病毒,病毒滴度在48h达到高峰,以后逐渐下降。用间接免疫荧光法证明感染的HSF胞浆及胞膜上携带DV抗原。在光镜和电镜下,感染细胞均未见明显的形态和结构改变。在病毒吸附时10ng/ml浓度的IL-6能显著提高病毒产量;在病毒吸附时和吸附后100ng/ml浓度的TNF-α能抑制病毒的产量。GM-CSF对DV感染HSF无明显影响。DV感染能促进HSF分泌IL-6;对TNF-α的分泌无明显影响。结论HSF是DV的允许性细胞。HSF可能是蚊叮咬后在原位组织中首先支持DV感染的细胞之一;细胞因子在DV感染HSF的致病和免疫过程中起重要作用。

关键词：登革病毒人皮肤成纤维细胞细胞因子免疫学登革病毒感染间接免疫荧光法 GM-CSF TNF-α 超微结构改变病毒感染细胞

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分泌型PD-L1真核表达载体的构建、表达及其体外效应的初步研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第11期26卷 1009-1012页

作者：胡萍季煜华李君武林绍强韦静李小兰黄泽棋暨南大学医学院微生物和免疫学教研室广州510632 暨南大学组织移植与免疫中心

目的构建分泌型PD-L1真核表达载体,并对其生物学活性进行初步研究。方法以RT-PCR方法从孕鼠胎盘中获得程序性死亡因子-1(programmed death-1,PD-1)配体PD-L1的胞外段基因片段,定向连接于pcDNA3．1上构建真核表达载体pcDNA-PDL1；用脂质... 详细信息

目的构建分泌型PD-L1真核表达载体,并对其生物学活性进行初步研究。方法以RT-PCR方法从孕鼠胎盘中获得程序性死亡因子-1(programmed death-1,PD-1)配体PD-L1的胞外段基因片段,定向连接于pcDNA3．1上构建真核表达载体pcDNA-PDL1；用脂质体将重组子导入NIT细胞,转染后的NIT命名为NITp。以Western blot鉴定重组蛋白的表达。MTT比色法检测NITp细胞培养上清对同种混合淋巴细胞培养反应的影响；用ELISA试剂盒检测NITp细胞培养上清对反应性T细胞分泌的细胞因子的影响。结果RT-PCR得到约730bp目的基因片段,测序结果显示该目的基因与Gen- Bank上的序列相符；Western blot分析提示NITp分泌性表达目的蛋白；NITp培养上清可抑制混合淋巴细胞增殖,其效应呈剂量依赖性；反应性T细胞分泌的细胞因子检测结果显示,培养上清中IL-4、IFN-γ、IL-2水平降低,与正常对照组差异有统计学意义。结论成功构建PD-L1基因真核表达载体pcDNA-PDL1,PD-L1蛋白对同种细胞刺激的增殖反应有抑制作用,并可在一定程度上抑制特异性T细胞的活化。

关键词： PD-L1 混合淋巴细胞培养细胞因子 1型糖尿病

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登革病毒感染对人血管内皮细胞PGIS表达及PGI_2分泌的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2007年第1期23卷 48-51页

作者：江振友肖瑞暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632

目的:研究登革病毒感染对人血管内皮细胞分泌血管活性物质前列环素(PGI2)的影响,以了解登革出血热/登革休克综合征(DHF/DSS)的发病机制。方法:用登革病毒Ⅱ型感染人脐静脉内皮细胞(HUVEC),于感染后6、12、24、48、72、96h,分别收集病毒... 详细信息

目的:研究登革病毒感染对人血管内皮细胞分泌血管活性物质前列环素(PGI2)的影响,以了解登革出血热/登革休克综合征(DHF/DSS)的发病机制。方法:用登革病毒Ⅱ型感染人脐静脉内皮细胞(HUVEC),于感染后6、12、24、48、72、96h,分别收集病毒感染的HUVEC,用RT-PCR检测细胞内前列环素合酶(PGIS)mRNA的水平;分别收集病毒感染的上清液,用放射免疫检测法测定PGI2的含量。结果:登革病毒感染可使PGISmRNA的水平增高,导致HUVEC分泌PGI2的量明显升高。在病毒感染后48、72、96h,与对照组比较HUVEC表达PGISmRNA的水平和HUVEC分泌PGI2的量明显升高(P<0.05)。结论:DV2感染可显著上调HUVEC中PGISmRNA转录及PGI2的分泌,导致登革病毒所致血管内皮细胞的功能障碍,可能与DHF/DSS的发病机制有关。

关键词：登革病毒血管内皮细胞前列环素合酶前列环素

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IL-6对血管内皮细胞活性及TFmRNA表达的影响

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四川大学学报（医学版） 2006年第2期37卷 234-237页

作者：唐小龙江振友董军刘小澄蔡淑玉肖瑞卢燕茹暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室暨南大学医学院病理生理学教研室安徽理工大学医学院暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室(广州510632)

目的研究IL-6对脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)组织因子(TF)的mRNA水平的影响。方法应用胰酶消化HUVECs并进行传代培养,用第二、三代细胞进行试验。测定IL-6(0.5ng/mL)处理前后细胞活性,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞内TFmRNA水平... 详细信息

目的研究IL-6对脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)组织因子(TF)的mRNA水平的影响。方法应用胰酶消化HUVECs并进行传代培养,用第二、三代细胞进行试验。测定IL-6(0.5ng/mL)处理前后细胞活性,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞内TFmRNA水平。结果72h内,IL-6对HUVECs的活性的影响与正常对照组相比差异无统计学意义。IL-6作用HUVECs6h即诱导TFmRNA表达,12h达到高峰,以后表达减弱,72h不能检测到mRNA;对照组TFmRNA不表达或表达极弱。结论IL-6(0.5ng/mL)对HUVECs的活性不造成直接的影响,同时在24～48h内IL-6(0.5ng/mL)可诱导HUVECsTF表达,这可能与IL-6作为前炎症因子诱导急性炎症反应时相的血液循环障碍相关。

关键词：白细胞介素-6 组织因子人脐静脉血管内皮细胞反转录聚合酶链反应

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原因不明不孕症妇女月经周期与解脲脲原体感染关系的探讨

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中国病理生理杂志 1995年第5期11卷 500-503页

作者：刘小澄林晨黄环珍袁桂秀罗伟中广州暨南大学医学院微生物免疫学教研室

本文检查了７４例不明原因的不孕症妇女生殖道解脲脲原体感染的情况，其中３９例阳性（５２．７０％），正常组５１例１４例阳性（２７．４５％），两组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。同时观察到解脲脲原体检出率的高低与月经周期... 详细信息

本文检查了７４例不明原因的不孕症妇女生殖道解脲脲原体感染的情况，其中３９例阳性（５２．７０％），正常组５１例１４例阳性（２７．４５％），两组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。同时观察到解脲脲原体检出率的高低与月经周期有关，排卵前７天至排卵后８天不孕症组的阳性率为６３％（３２／４７），明显高于卵泡早期２３％（３／１３）（Ｐ＜０．０１）和黄体晚期２８．５７％（４／１４）（Ｐ＜０．０１），正常组的阳性率为５５．５５％（１０／１８），明显高于卵泡早期７．６９％（１／１３）（Ｐ＜０．０５）和黄体晚期１５％（３／２０）（Ｐ＜０．０５）。提示女性生殖道的解脲脲原体感染与月经周期和性激素水平的变化有关，排卵前后几天解脲脲原体感染率的增高与导致不孕有一定的关系。

关键词：不育女性不育症解脲性激素月经

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登革病毒受体的研究进展

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第二军医大学学报 2006年第1期27卷 97-100页

作者：肖瑞江振友暨南大学医学院微生物与免疫学教研室广州510632

登革病毒(dengue virus,DEN virus)受体研究一直是登革病毒研究的热点之一,已提出的可能受体有蛋白质类、Fc受体类、乙酰硫酸肝素、与CD14相关的细胞表面结构(CD14-associated cell surface structure)等。近来,有关登革病毒在多种易感... 详细信息

登革病毒(dengue virus,DEN virus)受体研究一直是登革病毒研究的热点之一,已提出的可能受体有蛋白质类、Fc受体类、乙酰硫酸肝素、与CD14相关的细胞表面结构(CD14-associated cell surface structure)等。近来,有关登革病毒在多种易感细胞上特异性受体成分的研究取得重大进展,已从多种登革病毒易感细胞株中分离出多个与登革病毒表面蛋白区域结合的受体组分:如热休克蛋白(heat-shock protein,HSP)、GRP78(Bip)、LAMR1、DC-SIGN等。本文就登革病毒相关细胞受体的最新研究进展作一综述。

关键词：登革热病毒病毒受体综述文献细胞表面结构

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血清标本中HBsAg免疫复合物对检测HBsAg的影响

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中国病理生理杂志 1996年第2期12卷 172-174页

作者：林晨罗伟中刘小澄韦静宋爱华暨南大学医学院微生物免疫学教研室

０．５ｍｏｌ／ＬＨＣｌ处理ｌｈ后解离ＨＢｓＡｇ一抗Ｈｈ免疫复合物，并变性抗ＨＢｓＡｇ抗体而对ＨＢｓＡｇ免疫反应性无影响，３４例临床抗ＨＢｓ＋血清样品经ＨＣｌ处理前后，常规ＥＬＩＳＡ检测ＨＢＳＡｇ比较，结果：酸处理前Ｈ... 详细信息

０．５ｍｏｌ／ＬＨＣｌ处理ｌｈ后解离ＨＢｓＡｇ一抗Ｈｈ免疫复合物，并变性抗ＨＢｓＡｇ抗体而对ＨＢｓＡｇ免疫反应性无影响，３４例临床抗ＨＢｓ＋血清样品经ＨＣｌ处理前后，常规ＥＬＩＳＡ检测ＨＢＳＡｇ比较，结果：酸处理前ＨＢｓＡｇ阳性率为１１．７６％，处理后增加至４１．１８％（Ｐ＜０．０１），实验表明血清样品经酸处理后能明显提高临床乙肝ＨＢｓＡｇ检出率。

关键词：乙型肝炎表面抗原 ELISA

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肿瘤坏死因子(TNF)对人鼻咽癌与肺癌细胞株作用的超微结构观察

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中华肿瘤杂志 1990年第2期12卷 89-91+163页

作者：赵启勋李新章暨南大学医学院微生物与免疫学教研室

本文用电镜观察了兔天然TNF对人类鼻咽癌与肺癌细胞株作用的超微结构变化。结果表明,TNF作用后的靶细胞病变主要在细胞质,而细胞膜的病变不明显。鼻咽癌细胞质呈高度空泡样变性,并见只有完整细胞膜的"亮细胞"。肺癌细胞线粒... 详细信息

本文用电镜观察了兔天然TNF对人类鼻咽癌与肺癌细胞株作用的超微结构变化。结果表明,TNF作用后的靶细胞病变主要在细胞质,而细胞膜的病变不明显。鼻咽癌细胞质呈高度空泡样变性,并见只有完整细胞膜的"亮细胞"。肺癌细胞线粒体的外膜扩张后,与内膜相分离,嵴完全消失。TNF对肿瘤细胞超微结构水平上的破坏性改变结果提示,它可能在鼻咽癌与肺癌等临床治疗上有一定意义。

关键词：肿瘤坏死因子细胞毒效应超微结构观察

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