目的 基于网络药理学方法，探讨防风在砷暴露引起的小鼠肝肾损伤中的作用机制，特别是其对铁死亡的调控效应。方法 通过中药系统药理学数据库与分析平台（traditional chinese medicine systems pharmacology database and analysis pla...
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目的 基于网络药理学方法，探讨防风在砷暴露引起的小鼠肝肾损伤中的作用机制，特别是其对铁死亡的调控效应。方法 通过中药系统药理学数据库与分析平台（traditional chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform, TCMSP）、中药综合数据库（traditional Chinese medicine integrated database, TCMID）、中药百科全书数据库（encyclopedia of traditional chinese medicine, ETCM）数据库收集防风中18味中药有效成分及预测靶点；通过GeneCards数据库获取肝损伤、肾损伤及砷中毒靶点，并在铁死亡数据库（ferroptosis database, FerrDb）中获取铁死亡靶点；确定交集靶点后，构建蛋白质-蛋白质相互作用网络（protein-protein interaction, PPI）,进行基因本体论（gene ontology, GO）功能注释，京都基因与基因百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes, KEGG）分析；为验证上述预测，将36只昆明小鼠随机分为正常对照组（Control）、亚砷酸钠（Sodium arsenite, NaAsO2）模型组、防风低剂量（NaAsO2+L）组、防风中剂量（NaAsO2+M）组、防风高剂量（NaAsO2+H）组以及二巯基丙磺酸钠（sodium dimercaptopropanesulfonate, DMPS）阳性药（NaAsO2+D）组，共6组；通过对应药物灌胃30 d后，HE染色观察小鼠肝、肾病理变化，Western blot检测肝、肾组织中炎症因子[核因子E2相关因子2（anti-nuclear factor erythroid 2-related factor 2 antibody, Nrf2）、白细胞介素-1β（anti-interleukin-1 beta antibody, IL-1β）、IL-18]、铁死亡相关蛋白[谷胱甘肽过氧化物酶4（anti-Glutathione peroxidase 4 antibody, GPX4）、溶质载体家族7成员11（anti-solute carrier family 7 member 11 antibody, SLC7A11）、环氧合酶2（anti-cyclooxygenase-2 antibody, COX2）]以及PI3K/AKT通路蛋白[磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶（anti-phosphorylated Phosphoinositide 3-kinase antibody, p-PI3K）、磷脂酰肌醇3-激酶（anti-phosphoinositide 3-kinase antibody, PI3K）、磷酸化蛋白激酶B（anti-phospho-AKT antibody, p-AKT）、蛋白激酶B（anti-AKT antibody, AKT）]的表达，采用生化试剂盒检测各组小鼠肝、肾组织中Fe2+、丙二醛（malondialdehyde, MDA）、谷胱甘肽（glutathione, GSH）的含量。结果 网络药理学显示，氯霉素A、亥矛酚苷、川白酯内酯等18种防风化合物被筛选出来；筛选出2 655个肝损伤靶点，2 300个肾损伤靶点，防风活性成分靶点72个，2 224个砷靶点，1 546个铁死亡靶点，PPI分析预测AKT1、ESR1、CASP8、IL6、TP53等可能是其治疗砷致肝、肾铁死亡的重要靶点；KEGG富集分析预测PI3K/AKT与防风调节砷诱导肝、肾铁死亡密切相关；动物实验结果显示，与Control相比，NaAsO2处理小鼠肝、肾细胞边界不清、细胞肿胀、炎性细胞大量浸润，炎症细胞因子（IL-1β、IL-18）、MDA、Fe2+、COX2含量增加，Nrf2、GSH、GPX4、SC7A11、p-PI3K以及p-AKT水平降低（P<0.05）;与NaAsO2模型组相比，防风高、中、低剂量组和NaAsO2+D组小鼠肝、肾组织中细胞损伤、炎性细胞浸润、炎性细胞因子、铁死亡相关蛋白、PI3K/AKT通路蛋白、Fe2+、MDA及GSH水平的变化均被不同程度逆转（P<0.05）。结论 防风调控铁死亡缓解NaAsO2暴露介导的小鼠肝、肾组织损伤，其作用机制可能与抑制炎症反应和激活PI3K/AKT信号通路有关。
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