检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学报 2005年第5期45卷 680-684页

作者：陈祥赵娟高崧焦新安刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

采用抑制差减杂交技术(Suppression subtractive hybridization,SSH)对禽致病性大肠杆菌E037株(血清型O78)与非致病菌株K-12MG1655以及同一O2血清型高致病菌株E058与低致病菌株E526进行基因组差异片段克隆与分析。从E037株中共检出17个... 详细信息

采用抑制差减杂交技术(Suppression subtractive hybridization,SSH)对禽致病性大肠杆菌E037株(血清型O78)与非致病菌株K-12MG1655以及同一O2血清型高致病菌株E058与低致病菌株E526进行基因组差异片段克隆与分析。从E037株中共检出17个特异性差异片段,E058株中共检出32个特异性差异片段。经同源分析,这些序列可分为4类:质粒相关序列、噬菌体相关序列、已知功能序列、未知功能序列。这些差异片段包含许多重要的大肠杆菌毒力相关基因,如大肠杆菌素、气杆菌素受体、铁基因簇等。49个片段中,14个片段与其它微生物基因组同源性较高。结果表明,大肠杆菌高致病株与低致病菌株或非致病菌株基因组间存在较多差异基因,其中包括毒力、毒力相关基因、代谢以及噬菌体等基因成分。

关键词：禽致病性大肠杆菌抑制差减杂交基因组差异

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

A型流感病毒的反向遗传技术研究进展

引用

中国生物工程杂志 2005年第3期25卷 1-5页

作者：卢建红刘秀梵邵卫星扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

A型流感病毒基因组为单股负义RNA ,分为 8个片段。反向遗传技术即从克隆的cDNA产生病毒的过程 ,是研究RNA病毒、也是研究A型流感病毒基因结构与功能的新技术。介绍了A型流感病毒反向遗传技术的发展 ,完全以质粒为基础的新操作系统及其... 详细信息

A型流感病毒基因组为单股负义RNA ,分为 8个片段。反向遗传技术即从克隆的cDNA产生病毒的过程 ,是研究RNA病毒、也是研究A型流感病毒基因结构与功能的新技术。介绍了A型流感病毒反向遗传技术的发展 ,完全以质粒为基础的新操作系统及其在研究病毒的生命周期、致病性、产生基因修饰的疫苗候选株等方面的应用。

关键词： A型流感病毒基因修饰质粒基因结构 RNA 生病疫苗候选株反向遗传致病性基因组

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

表达PWD和ED保护性抗原的两种重组菌的免疫原性研究

引用

扬州大学学报（农业与生命科学版） 2005年第3期26卷 8-11页

作者：杨健美陈祥高崧刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室

采用已构建的能表达致断奶仔猪腹泻(PW D)和仔猪水肿病(ED)大肠杆菌保护性抗原F edA-S tx 2e B-F aeG融合蛋白的重组菌BL 21(pFSF aeG)和重组菌X 4550(pFSF aeG),经IPTG诱导后制成抗原,经口服及灭活后制成油乳剂苗免疫小鼠后,检测IgG抗... 详细信息

采用已构建的能表达致断奶仔猪腹泻(PW D)和仔猪水肿病(ED)大肠杆菌保护性抗原F edA-S tx 2e B-F aeG融合蛋白的重组菌BL 21(pFSF aeG)和重组菌X 4550(pFSF aeG),经IPTG诱导后制成抗原,经口服及灭活后制成油乳剂苗免疫小鼠后,检测IgG抗体水平的变化。结果表明:重组菌经灭活后免疫小鼠能够诱导产生针对上述3种保护性抗原的特异性抗体IgG。免疫效力试验结果显示,两种重组菌的最佳免疫途径均为灭活后经腹腔免疫。

关键词：大肠杆菌断奶仔猪腹泻仔猪水肿病重组菌抗体检测免疫效力

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

利用8质粒系统拯救A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)株禽流感病毒

引用

微生物学报 2005年第3期45卷 373-376页

作者：石火英卢建红陈素娟孙蕾刘秀梵刘玉良扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

应用反向遗传技术将含有1998年中国大陆分离株H9N2亚型禽流感病毒(Avianinfluenzavirus,AIV)的8个基因片段的质粒共转染COS_1细胞,产生了与野生病毒生物学特性相同的H9N2亚型AIV。将A Chicken Shanghai F 98(CK SH F 98)株H9N2亚型AIV的... 详细信息

应用反向遗传技术将含有1998年中国大陆分离株H9N2亚型禽流感病毒(Avianinfluenzavirus,AIV)的8个基因片段的质粒共转染COS_1细胞,产生了与野生病毒生物学特性相同的H9N2亚型AIV。将A Chicken Shanghai F 98(CK SH F 98)株H9N2亚型AIV的8个基因组cDNA分别克隆到polⅠ_polⅡ转录表达载体pHW2 0 0 0中,构建成8个转录表达载体重组质粒。将这8个质粒共转染COS_1细胞,2 4h后收获细胞及上清接种SPF鸡胚,4 8h后收取鸡胚尿囊液继续进行鸡胚传代,产生能致死鸡胚的病毒。经血凝、血凝抑制试验、序列分析和电镜观察,证实产生了CK SH F 98(H9N2 )株AIV。

关键词：反向遗传技术 H9N2亚型AIV 质粒转染

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

H5N1亚型禽流感病毒A/duck/Shandong/093/2004株的全基因克隆及序列分析

引用

微生物学报 2005年第5期45卷 690-696页

作者：龙进学王曲直卢建红刘玉良刘秀梵扬州大学畜牧兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

应用流感病毒通用引物[4]和H5N1亚型禽流感(Avian influenza virus,AIV)的型特异性引物,成功的扩增出H5N1亚型禽流感病毒A/duck/Shandong/093/2004株(简称A/D/SD/04)的全基因序列(包括5′和3′端的非编码区序列).A/D/SD/04的基因组核苷酸全序列与18株网上公布的禽流感基因序列进行比较和分析,结果与4株鸭源H5N1的5～7个基因具99%以上的同源性;与14株H5N1有至少一个以上内部基因同源性在95%以上.与H9亚型AIV代表株A/Quail/Hongkong/G1/97(简称G1株)和A/Chicken/Beijing/1/94(简称BJ94)比较,除了非结构基因(Nonstructural gene,NS)与G1株的同源性为95.3%外,其余基因均在36.6%～92.1%之间.说明A/D/SD/04没有H9N2基因的直接整合,是H5N1毒株在自然界的重组株.推导的HA氨基酸序列分析,A/D/SD/04 的血凝素(Heamgglutinin,HA)裂解位点与比较的16株AIV的序列一致,是高致病性禽流感的分子特征(PQRERRRKKR/G),第226位氨基酸是对禽类和哺乳细胞均具有亲嗜性的蛋氨酸(Met).神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)在第48位氨基酸(颈部)后有20个氨基酸的缺失,但非结构蛋白(NS)没有在79～84氨基酸发生缺失.碱性聚合酶2(PB2)的627位氨基酸是亲禽类细胞的谷氨酸(Glu,E).结合生物学特性和分子特征,A/D/SD/04对小鼠的致病力是由多种因素决定,其可能是一株对鸡高度致病,并逐渐获得对哺乳动物致病能力的中间重组病毒.

关键词： H5N1亚型禽流感病毒通用引物全基因组序列序列分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

用8质粒病毒拯救系统产生H9N2/WSN重组A型流行性感冒病毒

引用

病毒学报 2005年第1期21卷 48-53页

作者：卢建红邵卫星刘玉良贾立军韦栋平石火英刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

把禽流行性感冒(流感)病毒A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)的血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因cDNA克隆至polⅠpolⅡ双向转录和表达载体pHW2000,用这两种质粒与8质粒病毒拯救系统中流感病毒A/WSN/33(H1N1)6个内部基因cDNA的质粒组合(6+2重... 详细信息

把禽流行性感冒(流感)病毒A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)的血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因cDNA克隆至polⅠpolⅡ双向转录和表达载体pHW2000,用这两种质粒与8质粒病毒拯救系统中流感病毒A/WSN/33(H1N1)6个内部基因cDNA的质粒组合(6+2重排),共转染COS 1细胞,产生了能在鸡胚中高滴度增殖的H9N2/WSN重组病毒。用A/WSN/33的8个基因cDNA质粒作对照,也产生了转染子病毒。经过EID50测定和MDCK感染实验,新基因型H9N2/WSN病毒感染鸡胚的能力强(EID50为10-11/0.2ml),而且对鸡胚的毒力弱,在不加胰酶的情况下不使MDCK细胞产生病变。经电镜观察,两个转染子病毒的形态与野生型流感病毒相似。反向遗传操作技术的建立,为对禽流感病毒基因功能和疫苗构建等方面的研究提供了新的手段。

关键词： A型流行性感冒病毒 H9N2亚型禽流感病毒共转染 8质粒系统反向遗传操作技术血凝素神经氨酸酶

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸭源H10亚型禽流感病毒血凝素基因的序列分析及其致病特性

引用

中国兽医科技 2005年第9期35卷 684-688页

作者：张评浒唐应华薛峰刘晓文钱忠明郝贵杰刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

采用血清学试验和RT-PCR方法从华东地区家养水禽中分离鉴定出多株H10亚型禽流感病毒,对其中1株A/Duck/Yangzhou/502/2003(简称Dk/YZ/502/03)的血凝素(HA)基因进行了序列测定,并与GenBank中登录的其他序列进行了比较。结果显示,Dk/YZ/502... 详细信息

采用血清学试验和RT-PCR方法从华东地区家养水禽中分离鉴定出多株H10亚型禽流感病毒,对其中1株A/Duck/Yangzhou/502/2003(简称Dk/YZ/502/03)的血凝素(HA)基因进行了序列测定,并与GenBank中登录的其他序列进行了比较。结果显示,Dk/YZ/502/03株血凝素基因与哺乳动物水貂分离株A/Mink/Sweden/84(H10N4)的同源性最高;其推导的氨基酸剪切位点序列为P-E-I-M-Q-G-R,为典型低致病性禽流感病毒的特征序列,这与该毒株对SPF鸡和BALB/c小鼠的低致病特性相吻合。

关键词：禽流感病毒测序 H10亚型血凝素致病性剪切位点

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

华东地区部分猪源大肠杆菌K 88黏附素的生物学特性

引用

中国兽医学报 2005年第5期25卷 474-477页

作者：陈祥高崧王雷李文杰曹传闺焦新安刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

近年来,从华东地区患腹泻仔猪中分离到一些表达K 88菌毛的大肠杆菌,这些菌株只与K 88 a因子单抗反应,而不与b、c、d因子单抗反应。通过K 88常规血清交叉吸收试验、SDS-PAGE、W estern印迹,表明这些菌株不仅与K 88ac参考菌株C 83907制备... 详细信息

近年来,从华东地区患腹泻仔猪中分离到一些表达K 88菌毛的大肠杆菌,这些菌株只与K 88 a因子单抗反应,而不与b、c、d因子单抗反应。通过K 88常规血清交叉吸收试验、SDS-PAGE、W estern印迹,表明这些菌株不仅与K 88ac参考菌株C 83907制备的c因子血清反应,而且与以分离株SEC 586制备且经K 88ab、K 88ac、K 88ad参考菌株吸收后的血清也反应。对分离株SEC 586、SEC 464的K 88主要亚单位结构基因faeG的克隆、测序,发现该基因由846对核苷酸组成,编码菌毛主要亚单位的262个氨基酸及21个氨基酸的信号肽,比国外报道的K 88ac F aeG亚单位(263个氨基酸)少了1个氨基酸,比K 88ab、K 88ad(265个氨基酸)少了3个氨基酸。SEC 586、SEC 464菌株的F aeG亚单位氨基酸序列的同源性为97.7%,它们与K 88ac的同源性为94.7%和96.2%;与K 88ab的同源性为90.1%和91.2%;与K 88ad的同源性为87.0%和88.6%。结果表明,新分离的K 88ac大肠杆菌黏附素主要亚单位已发生了部分变异。

关键词：大肠杆菌 K88黏附素单克隆抗体 faeG

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

PRRSV间接免疫荧光检测法的建立和应用

引用

中国兽医科技 2005年第4期35卷 256-260页

作者：彭长凌高崧刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

以猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) ATCC VR 2332 株人工单独感染3 头3 周龄仔猪,并用PRRSV ATCC VR 2332株和猪圆环病毒2型(PCV2)联合感染2 头3 周龄仔猪,每日检查试验猪体温、采食情况及临床表现,并用HerdChek IDEXX 试剂盒测其血清抗... 详细信息

以猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) ATCC VR 2332 株人工单独感染3 头3 周龄仔猪,并用PRRSV ATCC VR 2332株和猪圆环病毒2型(PCV2)联合感染2 头3 周龄仔猪,每日检查试验猪体温、采食情况及临床表现,并用HerdChek IDEXX 试剂盒测其血清抗体。PRRSV+PCV2联合感染猪分别在感染后1、3周剖杀,PRRSV单独感染猪和健康对照猪分别在感染后1、2和3周剖杀,对全部试验猪的肺组织进行灌洗处理以获得肺泡巨噬细胞(PAM),用PAM进行抹片,同时用肺组织直接进行触片做间接免疫荧光(IIF)检测。结果表明,用所获得的3 株单克隆抗体均检测到人工感染猪肺组织中的PRRSV抗原。另外,用IIF检测7 头临床疑似PRRS病猪的PAM抹片,其中沭阳县的2头猪呈现阳性反应;对这2头猪的肺组织进行病毒分离,在盲传到第4代时Marc 145细胞上产生明显的细胞病变,进一步证实用所获得的3株单克隆抗体检测临床样品的结果准确而可靠,且获得的3株单克隆抗体均可通过IIF用于检测猪肺组织中的PRRSV抗原。

关键词： PRRSV 荧光检测法猪生殖与呼吸综合征病毒猪圆环病毒2型单克隆抗体应用肺泡巨噬细胞间接免疫荧光联合感染肺组织 ATCC 检查试验临床表现采食情况血清抗体人工感染阳性反应病毒分离细胞病变临床样品抗体检测

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鹅源新城疫病毒单克隆抗体的研制及其与不同NDV毒株的反应性

引用

中国兽医科技 2005年第5期35卷 341-345页

作者：胡顺林吴艳涛刘文博刘玉良刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

以鹅源新城疫病毒(NDV)作为免疫原免疫BALB/c小鼠,获得了5 株具有HI特性的单克隆抗体,分别命名为2G5、3A4、3B5、6B1 和8C5,其腹水HI 效价分别为214、212、29、215 和28。竞争ELISA结果表明,2G5、3A4、3B5和6B1在HN蛋白上所针对的表位... 详细信息

以鹅源新城疫病毒(NDV)作为免疫原免疫BALB/c小鼠,获得了5 株具有HI特性的单克隆抗体,分别命名为2G5、3A4、3B5、6B1 和8C5,其腹水HI 效价分别为214、212、29、215 和28。竞争ELISA结果表明,2G5、3A4、3B5和6B1在HN蛋白上所针对的表位属于同一抗原区,而8C5针对的表位为另一抗原区。将上述5株单抗与不同来源的NDV进行了HI排谱试验。结果显示,同一抗原区4株单抗的反应谱比较一致,而与另一抗原区单抗8C5 的反应谱明显不同。5 株单抗与鹅源NDV毒株的反应性较强,而与鸽源NDV毒株的反应性较弱。这5 株单抗用HRP标记后再与不同单抗进行交叉夹心ELISA,得到了一个新的系统(2G5 8C5)。用该系统对NDV分离株做排谱试验。结果显示,该系统与鹅源NDV分离株的反应性较好,表明所建立的新系统可用于鹅源NDV的检测。

关键词：鹅源新城疫病毒单克隆抗体毒株反应谱 HI排谱试验

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：