检索结果-内蒙古大学图书馆

中国组织工程研究 2023年第10期27卷 1501-1506页

作者：陈春晓姜乐涛沈悦闫家凯李克石宇林文正李翰文陈昊扬州大学医学院-转化医学研究院江苏省扬州市225002 江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏省扬州市225000 大连医科大学骨科辽宁省大连市116000 苏州大学附属第一医院骨科江苏省苏州市215006 扬州大学附属医院江苏省扬州市225000

背景:骨髓间充质干细胞作为组织工程的理想种子细胞,已证实力学刺激有引导其分化的作用。研究表明,干细胞存在着机械记忆,即力学刺激所引起的改变可能会长期影响干细胞的命运。目的:观察骨髓间充质干细胞对力学刺激的记忆效应,解析其发... 详细信息

背景:骨髓间充质干细胞作为组织工程的理想种子细胞,已证实力学刺激有引导其分化的作用。研究表明,干细胞存在着机械记忆,即力学刺激所引起的改变可能会长期影响干细胞的命运。目的:观察骨髓间充质干细胞对力学刺激的记忆效应,解析其发生的表观遗传学机制。方法:(1)分离原代小鼠骨髓间充质干细胞,检测其三系分化能力,传至第3代待用;(2)利用拉伸仪,体外给予小鼠骨髓间充质干细胞机械刺激,检测细胞拉伸前后的成骨分化情况;(3)流式细胞仪检测拉伸后细胞干性;(4)将拉伸处理与未处理的细胞消化后铺种在常规12孔板,继续培养14 d后检测细胞的成骨分化情况;(5)免疫荧光染色检测并筛选造成干细胞机械记忆的关键组蛋白修饰变化,初步明确表观遗传调控的可能机制。结果与结论:(1)5%形变,0.5 Hz,6 h/d,为期7 d的机械刺激可以引导小鼠骨髓间充质干细胞向成骨方向分化;(2)重新铺种培养皿后,拉伸处理后的细胞仍能保持干性且继续向成骨方向分化;(3)结果显示,骨髓间充质干细胞对机械刺激存在记忆效应,这种效应可能与力学刺激导致的组蛋白H3K4me3修饰有关。

关键词：细胞机械记忆表观遗传修饰骨髓间充质干细胞成骨分化 H3K4me3

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兔抗小鼠Tubby样蛋白2(TULP2)多克隆抗体的制备与应用

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第5期38卷 452-459页

作者：徐文华翁子睿葛婷婷陆雯婷孟诗奇牛长敏郑英扬州大学医学院妇产与生殖医学研究所组织学与胚胎学教研室江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225001

目的制备兔抗小鼠Tubby(Tub)样蛋白2(TULP2)多克隆抗体并检测TULP2蛋白在小鼠睾丸中的表达情况。方法分别将TULP2蛋白编码序列全长和TULP2蛋白含Tub结构域的羧基端(TULP2-C)插入pET-30a(+)质粒中,构建pET-30a(+)-TULP2和pET-30a(+)-TULP2-C原核表达重组质粒。将两种质粒分别转化入大肠杆菌*** BL21中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导原核蛋白表达。利用组氨酸(His)融合蛋白纯化柱纯化TULP2和TULP2-C原核蛋白,用梯度浓度的尿素复性。分别以复性后的TULP2和TULP2-C原核蛋白为抗原免疫成年雄性新西兰大白兔,获得两种类型的TULP2多克隆抗体。应用ELISA测定多克隆抗体的效价,Western blot法及免疫荧光技术确定自制多克隆抗体的有效性及特异性。结果成功构建了pET-30a(+)-TULP2以及pET-30a(+)-TULP2-C重组质粒,并且通过IPTG诱导,表达出TULP2和TULP2-C原核重组蛋白。ELISA检测两种抗体滴度均达到1∶1000000。Western blot法、免疫荧光染色结果显示,利用TULP2-C原核蛋白为免疫原制备的抗体特异性较差。而利用TULP2全长蛋白为免疫原制备的多克隆抗体可以特异识别成年野生型小鼠睾丸中内源性的TULP2蛋白,而且可用于免疫荧光组织化学染色,结果显示TULP2在成年野生型小鼠的圆形精子细胞及其后变形期的精子细胞中表达。结论应用TULP2全长蛋白为抗原可成功制备兔抗小鼠TULP2多克隆抗体,可同时用于Western blot法及免疫荧光组织化学染色。

关键词： Tubby样蛋白2(TULP2) 多克隆抗体精子发生

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基于柔性SERS基底拉曼光谱法快速检测水果表面的福美双

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分析试验室 2021年第8期40卷 869-874页

作者：周心雨孙悦冉梦林曹小卫扬州大学医学院转化医学研究中心扬州225001 江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室扬州225001 江苏省中西医结合老年病防治重点实验室扬州225001

采用海胆状金纳米粒子(GNUs)柔性表面增强拉曼散射(SERS)基底,检测了水果表皮的福美双残留。GNUs表面尖锐的突起能够极大增强周围电磁场,提高检测灵敏度。与普通柔性基底相比,这种高粘性的SERS基底具有不易老化和不易脱胶等优点。评估了... 详细信息

采用海胆状金纳米粒子(GNUs)柔性表面增强拉曼散射(SERS)基底,检测了水果表皮的福美双残留。GNUs表面尖锐的突起能够极大增强周围电磁场,提高检测灵敏度。与普通柔性基底相比,这种高粘性的SERS基底具有不易老化和不易脱胶等优点。评估了SERS基底的灵敏度、重现性和稳定性。通过简单的"粘贴-剥离"法,利用组装的柔性基底对雪花梨表面的福美双残留进行了原位检测。在1×10^(-10)~1×10^(-4)mol/L范围内,雪花梨表面的福美双浓度的对数与SERS强度呈线性关系,GNUs柔性基底对福美双的检测限为92 pmol/L,方法可用于食品安全、环境检测、公共安全等领域。

关键词：海胆状金纳米粒子福美双表面增强拉曼散射柔性基底

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哺乳动物纤毛/鞭毛内运输在精子形成中的作用及机制研究进展

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遗传 2021年第11期43卷 1038-1049页

作者：葛婷婷袁露徐文华郑英扬州大学医学院组织学与胚胎学教研室江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室扬州225009

纤毛/鞭毛是真核生物细胞表面伸出的进化保守的细胞器,独特的位置和特性使它们在细胞运动和信号传递等生命过程发挥重要作用。哺乳动物纤毛/鞭毛的组装和维持都依赖纤毛/鞭毛内运输(intraflagellar transport,IFT)。IFT是由IFT复合体A... 详细信息

纤毛/鞭毛是真核生物细胞表面伸出的进化保守的细胞器,独特的位置和特性使它们在细胞运动和信号传递等生命过程发挥重要作用。哺乳动物纤毛/鞭毛的组装和维持都依赖纤毛/鞭毛内运输(intraflagellar transport,IFT)。IFT是由IFT复合体A和复合体B在驱动蛋白或马达蛋白驱动下的双向运输系统。该过程可将货物蛋白在胞体的合成位点与纤毛/鞭毛尖端的装配位点之间进行运输。鞭毛是哺乳动物精子产生动力的特异性细胞器,其完整性对精子正常功能至关重要。近年来研究表明,IFT在哺乳动物精子鞭毛形成和雄性生殖能力方面必不可少。本文对参与IFT的蛋白在精子鞭毛形成中的作用和机制进行了综述,以探讨其在男性不育症中的发病机制,为不育症的诊断和治疗提供理论基础。

关键词：纤毛/鞭毛内运输精子形成雄性不育

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假基因RPL34-PS1促进B细胞淋巴瘤生长的研究

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2021年第2期42卷 52-56,67页

作者：刘金晶周芳超张毅郁多男扬州大学医学院/江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225009

通过将假基因RPL34-PS1的序列克隆至MSCV-PIG载体上后,包装反转录病毒并感染小鼠B淋巴瘤细胞38B9,构建稳定过表达RPL34-PS1的38B9细胞系。对体外培养的细胞进行计数观察细胞增殖;利用流式检测技术观察细胞的凋亡和周期;进行小鼠皮下荷... 详细信息

通过将假基因RPL34-PS1的序列克隆至MSCV-PIG载体上后,包装反转录病毒并感染小鼠B淋巴瘤细胞38B9,构建稳定过表达RPL34-PS1的38B9细胞系。对体外培养的细胞进行计数观察细胞增殖;利用流式检测技术观察细胞的凋亡和周期;进行小鼠皮下荷瘤试验观察体内成瘤并进行相关机制研究。结果表明:假基因RPL34-PS1对体外培养的38B9的生长速率、周期及凋亡无显著影响,但在体内能显著增加B细胞淋巴瘤的生长,其促进体内肿瘤生长的机制可能是肿瘤微环境中T淋巴细胞数量的减少之故,说明RPL34-PS1在微环境中靶向免疫细胞以促进肿瘤生长,RPL34-PS1可能可作为B细胞淋巴瘤的临床治疗的一个潜在靶点。

关键词：假基因 RPL34-PS1 B细胞淋巴瘤 T细胞

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uc.12+A在B细胞淋巴瘤中的功能研究

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2021年第2期42卷 57-62页

作者：张欣华婧刘金晶杨哲郭俊荣戴华张艳青扬州大学医学院/江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225009

从C57BL/6野生型小鼠骨髓中分选出正常B细胞,应用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测uc.12+A在小鼠正常B细胞和B淋巴瘤细胞的表达水平。通过分子克隆将uc.12+A基因序列构建到pMSCV-PIG反转录病毒表达载体上,包装成反转录病毒感染小鼠B淋巴... 详细信息

从C57BL/6野生型小鼠骨髓中分选出正常B细胞,应用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测uc.12+A在小鼠正常B细胞和B淋巴瘤细胞的表达水平。通过分子克隆将uc.12+A基因序列构建到pMSCV-PIG反转录病毒表达载体上,包装成反转录病毒感染小鼠B淋巴瘤细胞38B9和人Burkitt淋巴瘤细胞Romas,经嘌呤霉素筛选后形成稳定过表达uc.12+A的B淋巴瘤细胞系uc.12+A-38B9和uc.12+A-Romas。流式细胞术检测细胞凋亡和周期,体外细胞计数比较细胞增殖情况,小鼠皮下荷瘤测量肿瘤重量。结果表明:与小鼠正常B细胞相比,uc.12+A在小鼠B淋巴瘤细胞中的表达水平增高。这一研究提示过表达uc.12+A显著促进B淋巴瘤细胞的增殖,减少其凋亡并增加B细胞淋巴瘤的成瘤速率。

关键词：超保守rna B淋巴瘤细胞细胞增殖凋亡

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WWOX促进弥漫性大B淋巴瘤增殖作用初探

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2022年第6期43卷 80-86页

作者：许康节詹万达万晓洁王杰戴华扬州大学医学院(转化医学研究院) 江苏扬州225009 江苏省人兽共患病学重点实验室江苏扬州225009 扬州大学附属医院病理科江苏扬州225009 江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225009

为研究WWOX在人弥漫性大B淋巴瘤(DLBCL)中的作用,首先对TCGA数据库中人WWOX(hWWOX)在DLBCL样本中的表达进行分析;随后在B细胞淋巴瘤细胞株Romas、OCI-Ly7(Ly7)、38B9及临床组织样本中对上述生物信息学分析结果进行验证;通过构建稳定过表... 详细信息

为研究WWOX在人弥漫性大B淋巴瘤(DLBCL)中的作用,首先对TCGA数据库中人WWOX(hWWOX)在DLBCL样本中的表达进行分析;随后在B细胞淋巴瘤细胞株Romas、OCI-Ly7(Ly7)、38B9及临床组织样本中对上述生物信息学分析结果进行验证;通过构建稳定过表达hWWOX的淋巴瘤细胞系进一步分析hWWOX过表达对DLBCL细胞增殖的影响;最后对该细胞内Jak2-Stat3通路的活化水平进行探究。结果表明:TCGA数据库DLBCL中hWWOX高表达并在B细胞淋巴瘤细胞株中得到验证;IHC结果显示,53%的DLBCL患者组织中hWWOX高表达。Western blot结果显示,过表达hWWOX的细胞系Ly7-hWWOX得到成功构建,MTT试验表明该稳转细胞株的增殖能力较对照组显著增强,且细胞中p-Jak2、p-Stat3水平显著上调。综上,hWWOX在DLBCL中主要通过上调Jak2-Stat3信号通路而促进癌细胞增殖,这为DLBCL的临床研究和治疗提供靶标。

关键词： WWOX 弥漫性大B细胞淋巴瘤 Jak2-Stat3信号通路

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人参皂苷Rg3对鱼藤酮纳米脂质载体诱导的帕金森病模型大鼠黑质神经元的保护作用

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淮海医药 2023年第4期41卷 331-336,340页

作者：侯晓丽张亚慧唐迎乐程宏扬州市职业大学医学院江苏扬州225000 扬州大学医学院/江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室/扬州大学转化医学研究院江苏扬州225000

目的:探讨人参皂苷Rg3对鱼藤酮纳米脂质载体诱导的帕金森病模型大鼠黑质神经元的保护作用。方法:采用雄性成年大鼠(SD)36只,随机分为对照组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组和阳性药物组,每组6只,分别编号1~6号。各组大鼠均于造... 详细信息

目的:探讨人参皂苷Rg3对鱼藤酮纳米脂质载体诱导的帕金森病模型大鼠黑质神经元的保护作用。方法:采用雄性成年大鼠(SD)36只,随机分为对照组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组和阳性药物组,每组6只,分别编号1~6号。各组大鼠均于造模前3 d开始给药,每天1次,连续31 d,低剂量组给予3 mg/kg Rg3灌胃,中剂量组给予6 mg/kg Rg3灌胃,高剂量组给予12 mg/kg Rg3灌胃,阳性药物组给予11 mg/kg司来吉兰灌胃,对照组及模型组给予同等剂量羧甲基纤维素钠(CMC-Na)灌胃。灌胃3 d后,除对照组外其余5组大鼠均皮下注射鱼藤酮纳米脂质载体(R-NLC),首剂量给予0.5 mg/kg,第2次给予0.8 mg/kg,此后每次1 mg/kg,2 d一次,连续28 d,对照组皮下注射同等剂量空白纳米脂质载体。采用肌僵直实验和外观行为表现评分考察外观行为学表现;黑质HE染色和透射电镜观察神经元形态和细胞超微结构情况。结果:给药28 d后,模型组外观行为表现评分高于对照组(P<0.05),Rg3低、中、高剂量干预后,外观行为表现评分低于模型组(P<0.05)。肌僵直实验中,模型组大鼠比对照组大鼠移动潜伏期时间延长(P<0.05),而Rg3低、中、高剂量组移动潜伏期时间低于模型组(P<0.05)。HE染色可见,与对照组相比,模型组大鼠黑质正常神经元数目减少,神经元有早期细胞凋亡的特征,Rg3干预能避免模型大鼠黑质神经元形态的变化,减少细胞凋亡的产生,使存活的神经元数目增多。透射电镜结果显示,与对照组相比,模型组大鼠黑质神经元出现细胞凋亡特征,经过低、中、高剂量Rg3干预,大鼠黑质神经元的超微结构基本正常,未见细胞凋亡特征。结论:Rg3对R-NLC诱导的黑质能神经元损伤有保护作用,可减少神经元的凋亡。

关键词：帕金森病人参皂苷Rg3 细胞凋亡神经保护鱼藤酮

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精子头尾耦合装置异常在无头精子综合症发病机制中的作用

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中国男科学杂志 2023年第4期37卷 122-127页

作者：许林巍葛婷婷郑英扬州大学医学院组织学与胚胎学教研室江苏扬州225009 江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225009

精子发生是一个复杂且有序的发育过程,包括精原细胞有丝分裂增殖、精母细胞减数分裂以及精子形成三个阶段。在精子形成过程中,头尾耦合装置(headtail coupling apparatus,HTCA)的形成对精子头尾连接至关重要[1]。HTCA定位于精子颈部,包... 详细信息

精子发生是一个复杂且有序的发育过程,包括精原细胞有丝分裂增殖、精母细胞减数分裂以及精子形成三个阶段。在精子形成过程中,头尾耦合装置(headtail coupling apparatus,HTCA)的形成对精子头尾连接至关重要[1]。HTCA定位于精子颈部,包含近端中心粒(proximal centrioles,Pc)。

关键词：精子发生无头精子综合征头尾耦合装置

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锦菊素对银屑病模型小鼠的药效学作用及其机制探究

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中国药理学通报 2022年第12期38卷 1801-1808页

作者：张悦陆奕杨婧雯王钰凯张梦莹周芳王广基许正新扬州大学医学院药理学教研室江苏扬州225000 中国药科大学江苏省药物代谢动力学重点实验室中国医学科学院“中药复杂组分PK-PD结合研究”创新单元江苏南京210009 江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室江苏扬州225000

目的探讨锦菊素对咪喹莫特诱导的银屑病模型小鼠的药效作用及其机制。方法建立咪喹莫特乳膏涂抹小鼠背部皮肤诱导的银屑病模型,以皮损面积及严重程度指数、病理学和炎症因子水平及相关分子生物学数据的变化作为效应学指标,观察不同浓度... 详细信息

目的探讨锦菊素对咪喹莫特诱导的银屑病模型小鼠的药效作用及其机制。方法建立咪喹莫特乳膏涂抹小鼠背部皮肤诱导的银屑病模型,以皮损面积及严重程度指数、病理学和炎症因子水平及相关分子生物学数据的变化作为效应学指标,观察不同浓度的锦菊素给药后以上参数的变化并分析其可能的作用机制。结果与模型组相比,锦菊素可明显改善咪喹莫特诱导的小鼠皮肤红斑、鳞屑、增厚等症状,PASI评分明显降低;组织病理学相关指标显示,锦菊素干预组能够剂量依赖性地减轻小鼠表皮增厚情况,降低表皮细胞中Ki67的表达水平。炎症因子及分子生物学结果表明,锦菊素干预组小鼠皮肤组织中S100a8、S100a9、IL-17A、IL-6、IL-1β表达降低,血清中IL-2、IL-4、TNF-α、IFN-γ及IL-17A表达降低。淋巴结中Th17细胞比例降低,Treg细胞比例增加。此外,锦菊素还能够下调咪喹莫特诱导的P65蛋白磷酸化水平升高,显著抑制P65入核,提示锦菊素能够抑制咪喹莫特诱导的P65蛋白活化。结论锦菊素能够改善咪喹莫特诱导的银屑病模型小鼠的症状和体征,该项作用可能与抑制角质细胞中P65蛋白磷酸化相关。

关键词：锦菊素银屑病咪喹莫特 Th17细胞 Treg细胞炎症

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