检索结果-内蒙古大学图书馆

中华实用诊断与治疗杂志 2025年第1期39卷 1-8页

作者：李强明白玉张静姚文健王建军魏立河南省人民医院胸外科郑州大学人民医院河南郑州450003 新乡医学院基础医学院病理学教研室河南新乡453000 郑州大学第一附属医院中心手术部河南郑州450003

目的采用生物信息学方法筛选GATAD2A调控食管鳞状细胞癌(ESCC)的关键基因和通路,探讨GATAD2A在ESCC中作用的分子机制。方法取对数生长期ESCC细胞株KYSE-150,分为敲低组(转染GATAD2A-siRNA)和对照组(转染NC-siRNA)。转染60 h取2组细胞... 详细信息

目的采用生物信息学方法筛选GATAD2A调控食管鳞状细胞癌(ESCC)的关键基因和通路,探讨GATAD2A在ESCC中作用的分子机制。方法取对数生长期ESCC细胞株KYSE-150,分为敲低组(转染GATAD2A-siRNA)和对照组(转染NC-siRNA)。转染60 h取2组细胞,采用Trizol法提取总RNA,采用转录组测序(RNA-Seq)技术检测mRNA表达,应用R软件DEGseq包筛选差异表达基因,应用R软件的clusterProfiler包对差异表达基因进行基因本体(GO)功能注释分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析、基因集富集分析(GSEA)。应用STRING 12.0在线软件构建差异表达基因的蛋白互作网络(PPI),使用Cytoscape软件的MCODE插件对PPI网络进行聚类分析,筛选出得分最高的关键子网络,使用CytoHubba插件对关键子网络中的基因进行节点度计算,筛选PPI网络核心位置的节点基因,并对节点基因进行GO/KEGG分析。自TCGA数据库收集82例ESCC患者癌组织PPI分析中节点度≥10的基因表达以及预后数据,以基因表达的中位数为阈值将ESCC患者分为高、低表达组,比较高表达组与低表达组的总生存期,筛选出影响预后的基因作为关键基因。自TCGA数据库选取ESCC患者癌组织GATAD2A及关键基因的表达数据,采用Spearman法分析GATAD2A与关键基因表达的相关性。自GTEx数据库收集正常食管组织关键基因的表达数据,与ESCC组织进行比较。结果 (1)敲低组与对照组差异表达基因有888个。与对照组比较,敲低组表达上调基因275个,表达下调基因613个。(2)GO功能注释分析结果显示,前10个差异表达的基因主要参与细胞外刺激反应、细胞因子生成的正向调控、上皮细胞增殖等生物学过程。KEGG富集分析结果显示,前10个差异表达的基因主要在人乳头瘤病毒感染、PI3K/Akt信号通路、癌症相关miRNA等通路中富集。GSEA分析结果显示,差异表达基因主要在DNA合成与复制、细胞周期相关通路中富集。(3)PPI网络分析结果显示,差异表达基因共包括1 903条边缘数和486个节点基因。关键子网络包括160条边缘数和35个节点基因。GO/KEEG分析发现,节点基因主要在细胞周期调控、缺氧反应、细胞黏附等生物学过程相关。(4)PPI关键子网络筛选出13个节点度≥10的基因,Kaplan-Meier生存分析显示EGFR低表达组(EGFR表达<6.98)中位总生存期(3.99年)长于EGFR高表达组(EGFR表达≥6.98)(2.09年)(P=0.047),mTOR低表达组(mTOR表达<3.21)中位总生存期(3.73年)长于mTOR高表达组(mTOR表达≥3.21)(1.78年)(P=0.022)。ESCC组织EGFR、mTOR表达[5.30(4.47,6.38)、4.45(4.12,4.78)]均高于正常食管组织[4.44(4.14,4.70)、4.39(4.05,4.64)](U=31 720.00、52 290.00,P均<0.05)。ESCC组织GATAD2A表达为5.93(5.55,6.38),与EGFR、mTOR表达均呈正相关(r=0.295,P=0.007;r=0.398,P<0.001)。结论 GATAD2A调控ESCC的机制可能与激活EGFR和PI3K/Akt/mTOR信号通路相关。

关键词：食管鳞状细胞癌 KYSE-150细胞 GATAD2A 转录组测序信号通路

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miR-27 a调控Sfrp1对肾小管上皮细胞EMT的影响

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贵州医科大学学报 2022年第9期47卷 1007-1013页

作者：田平平邹琴卢雨微郭兵石明隽新乡医学院三全学院护理学院河南新乡453003 贵州医科大学基础医学院病理生理学教研室贵州贵阳550025

目的探讨高糖培养肾小管上皮细胞中miR-27 a调控分泌型卷曲相关蛋白1(Sfrp1)对细胞向间质细胞转分化(EMT)的影响。方法将NRK-52E细胞分为正常糖(NG组)和高糖(HG组)两组,利用RT-qPCR检测NRK-52E细胞中miR-27 a、Sfrp 1的表达情况,Western... 详细信息

目的探讨高糖培养肾小管上皮细胞中miR-27 a调控分泌型卷曲相关蛋白1(Sfrp1)对细胞向间质细胞转分化(EMT)的影响。方法将NRK-52E细胞分为正常糖(NG组)和高糖(HG组)两组,利用RT-qPCR检测NRK-52E细胞中miR-27 a、Sfrp 1的表达情况,Western blot检测NRK-52E细胞中Sfrp1、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅳ型胶原(col-Ⅳ)的蛋白表达;将NRK-52E细胞分为野生型Sfrp 1-3′UTR+miR-27 a mimics阴性对照组(wt Sfrp 1-3′UTR+miR-27 a mnc组)、野生型Sfrp 1-3′UTR+miR-27 a mimics组(wt Sfrp 1-3′UTR+miR-27 a m组)、突变型Sfrp 1-3′UTR+miR-27 a mimics阴性对照组(mt Sfrp 1-3′UTR+miR-27 a mnc组)以及突变型Sfrp 1-3′UTR+miR-27 a mimics组(mt Sfrp 1-3′UTR+miR-27 a m),通过双荧光素酶报告基因检测系统检测萤火虫荧光值与海肾荧光值的比值,验证miR-27 a对Sfrp1表达的影响;在高糖诱导下,利用细胞转染实验将NRK-52E细胞设miR-27 a mimics阴性对照组(miR-27 a mnc组)、miR-27 a mimics组(miR-27 a m组)、miR-27 a inhibitor阴性对照组(miR-27 a inc组)以及miR-27 a inhibitor组(miR-27 a i组),通过RT-qPCR检测各组细胞中miR-27 a、Sfrp 1 mRNA的表达,Western blot检测各组细胞中Sfrp1、E-cadherin、α-SMA、col-Ⅳ蛋白的表达水平。结果RT-qPCR结果显示,与NG组比较,HG组miR-27 a表达水平增高(P<0.05),Sfrp 1 mRNA表达水平降低(P<0.05);Western blot结果显示,与NG组比较,HG组α-SMA、col-Ⅳ蛋白水平增高(P<0.05),Sfrp1、E-cadherin蛋白表达水平降低(P<0.05);荧光素酶报告基因显示,wt Sfrp 1-3′UTR+miR-27 a m组荧光素酶活性明显低于wt Sfrp 1-3′UTR+miR-27 a mnc组(P<0.05),而mt Sfrp 1-3′UTR+miR-27a mnc组与mt Sfrp 1-3′UTR+miR-27 a m组荧光素酶活性未见明显变化(P>0.05);细胞转染RT-qPCR结果显示,与miR-27 a mnc组比较,miR-27 a m组miR-27 a表达增加(P<0.05),而Sfrp 1 mRNA表达降低(P<0.05);与miR-27 a inc组比较,miR-27 a i组miR-27 a表达降低(P<0.05),而Sfrp 1 mRNA表达增加(P<0.05);Western blot结果显示,与miR-27 a mnc组比较,miR-27 a m组α-SMA、col-Ⅳ蛋白表达增加(P<0.05),Sfrp1、E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05);与miR-27a inc组比较,miR-27 a i组α-SMA、col-Ⅳ蛋白表达降低(P<0.05),Sfrp1、E-cadherin蛋白表达增加(P<0.05)。结论miR-27 a可以通过抑制Sfrp1的表达促进肾小管EMT,参与糖尿病肾病肾纤维化的发生。

关键词： miR-27 a 分泌型卷曲相关蛋白1 NRK-52E 上皮细胞向间质细胞转分化肾脏纤维化糖尿病肾病

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疫情期间钉钉结合超星学习通的PBL教学法在病理学教学中的应用

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科技创新导报 2021年第2期18卷 229-233页

作者：朱会芳贺国洋张哲莹胡育菡新乡医学院基础医学院病理学教研室河南新乡453000

探讨疫情期间采用钉钉直播平台结合超星学习通平台的病例讨论式基于问题的学习(PBL)教学法在病理学教学中的应用。选取新乡医学院2018级本科临床医学专业学生90人,随机分为三组:(1)研究组:采用钉钉直播平台结合超星学习通平台的病例讨论... 详细信息

探讨疫情期间采用钉钉直播平台结合超星学习通平台的病例讨论式基于问题的学习(PBL)教学法在病理学教学中的应用。选取新乡医学院2018级本科临床医学专业学生90人,随机分为三组:(1)研究组:采用钉钉直播平台结合超星学习通平台的病例讨论式PBL教学法;(2)对照组1:采用基于钉钉直播平台的病例讨论式PBL教学法;(3)对照组2:采用基于超星学习通平台的病例讨论式PBL教学法。每组30人。授课结束后,围绕授课内容的重点难点进行测验,然后对三组学生的测验成绩做分析并进行问卷调查以评价教学效果。从测验成绩来看,研究组学生的成绩明显优于对照组1和对照组2(P<0.05),而对照组1和对照组2的学生成绩差异无统计学意义(P>0.05)。通过在病理学教学中采用钉钉直播平台结合超星学习通平台的病例讨论式PBL教学法教学效果好,有利于提高课堂教学效率及学生满意度,并有助于提升学生的综合素质,符合新冠肺炎疫情期间病理学教学的需求。

关键词：钉钉直播平台超星学习通病理学教学 PBL教学新冠肺炎疫情

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医学机能实验混合式学习模式的设计和应用

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科技视界 2021年第2期 102-104页

作者：史世强许晴晴常晓宾新乡医学院三全学院生物与基础医学实验教学中心河南新乡453000 新乡医学院三全学院病理学教研室河南新乡453000

医学机能学实验是医学生重要的基础实践课,学生普遍反映这门课程难学、难记、难操作,导致在以往教学过程中难以收到良好的教学效果。本研究发现,在医学机能实验教学中开展混合式学习,能够充分发挥学生学习能动性,显著提高学生学习成绩,... 详细信息

医学机能学实验是医学生重要的基础实践课,学生普遍反映这门课程难学、难记、难操作,导致在以往教学过程中难以收到良好的教学效果。本研究发现,在医学机能实验教学中开展混合式学习,能够充分发挥学生学习能动性,显著提高学生学习成绩,改善医学机能学实验的教学效果。

关键词：医学机能学实验混合式学习雨课堂爱课程

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髓母细胞瘤中预后标志物的加权基因共表达网络筛选

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中华医学杂志 2020年第6期100卷 460-464页

作者：杜宝顺袁磊孙来广张哲莹河南省新乡市中心医院神经外二科新乡453003 新乡医学院三全学院新乡453003 新乡医学院病理学教研室新乡453003

目的探讨应用加权基因共表达网络分析(WGCNA)方法寻找髓母细胞瘤中特异表达的基因模块,筛选可能诊断和治疗髓母细胞瘤的标记基因。方法采用WGCNA对髓母细胞瘤中与生存相关的基因模块进行鉴定。利用Cytoscape软件构建共表达网络。采用Kap... 详细信息

目的探讨应用加权基因共表达网络分析(WGCNA)方法寻找髓母细胞瘤中特异表达的基因模块,筛选可能诊断和治疗髓母细胞瘤的标记基因。方法采用WGCNA对髓母细胞瘤中与生存相关的基因模块进行鉴定。利用Cytoscape软件构建共表达网络。采用Kaplan Meier(KM)分析方法对核心基因进行生存分析。结果根据WGCNA分析结果发现绿色模块与生存性状显著相关。对绿色模块基因进行分析结果显示,利用cytoscape软件筛选出了与生存性状相关性最大的核心基因UBE2G1,并进行了鉴定。结论UBE2G1可能作为一个候选的诊断性生物标志物和一个有希望的治疗靶点。

关键词：生物信息学共表达模块髓母细胞瘤泛素连接蛋白E2G1

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护理硕士专业学位研究生心理弹性与职业倦怠的相关性

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新乡医学院学报 2020年第3期37卷 261-265页

作者：张会敏孙羽燕刘玉青李健袁帅吴凯旋高杰任峰新乡医学院护理学院基础护理学教研室河南新乡453003 新乡医学院研究生处河南新乡453003 新乡医学院基础医学院病理学教研室河南新乡453003 新乡医学院人事处河南新乡453003

目的调查护理硕士专业学位(MNS)研究生的职业倦怠和心理弹性现状,并探讨二者的相关性。方法采用网络问卷调查方式,选取18所高校的226名MNS研究生为研究对象,采用自制一般人口社会学变量问卷、简化版心理弹性量表(CD-RISC)和职业倦怠量表... 详细信息

目的调查护理硕士专业学位(MNS)研究生的职业倦怠和心理弹性现状,并探讨二者的相关性。方法采用网络问卷调查方式,选取18所高校的226名MNS研究生为研究对象,采用自制一般人口社会学变量问卷、简化版心理弹性量表(CD-RISC)和职业倦怠量表(MBIGS)调查MNS研究生的一般资料、心理弹性和职业倦怠情况,并探讨MNS研究生心理弹性与职业倦怠的相关性。结果226名MNS研究生的心理弹性总分为70.08±6.49,其中乐观、自强、坚韧维度得分分别为13.29±0.32、30.26±0.21、41.32±0.94;心理弹性得分与性别、年龄、参加临床实践时长、婚恋状况、居住地、年级、是否独生子女、经济状况等一般人口社会学资料无关(P>0.05)。226名MNS研究生的职业倦怠总分为35.49±0.32,其中情绪耗竭、去个性化、个人成就感降低维度得分分别为16.35±0.44、9.89±0.58、9.25±0.57。MNS研究生的情绪耗竭得分与年龄、婚恋、居住地、是否独生子女和临床实践时长有关(F/t=3.226、2.912、5.319、3.971、-2.550,P<0.05),其中25~30岁、>30岁MNS研究生的情绪耗竭维度得分高于≤25岁的MNS研究生(P<0.05);已婚MNS研究生的情绪耗竭维度得分高于有恋人和无恋人的MNS研究生(P<0.05);城镇居住的MNS研究生的情绪耗竭维度得分高于农村居住的MNS研究生(P<0.05);独生子女MNS研究生的情绪耗竭维度得分高于非独生子女的MNS研究生(P<0.05);参加临床实践12~24个月的MNS研究生的情绪耗竭维度得分高于≤12个月的MNS研究生(P<0.05)。MNS研究生的去人性化、个人成就感维度及职业倦怠总得分与一般人口社会学资料无关(P>0.05)。心理弹性总分及乐观维度与职业倦怠总分及情绪耗竭、去个性化2个维度得分呈负相关(P<0.01),与个人成就感呈正相关(P<0.05);自强和坚韧2个维度得分与职业倦怠总分及情绪耗竭、去个性化2个维度得分呈负相关(P<0.05),与个人成就感呈正相关(P<0.05)。结论MNS研究生存在一定程度的职业倦怠,提高其心理弹性水平能够预防和降低职业倦怠。

关键词：护理硕士专业学位研究生职业倦怠心理弹性

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氟西汀早期干预对改善APP/PS1小鼠认知障碍和海马突触可塑性的作用

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河南医学高等专科学校学报 2024年第3期36卷 289-294页

作者：王思雨陈佳慧李璐李宜培王黎靳力贾慧婕新乡医学院基础医学院病理学系河南新乡453003 河南医学高等专科学校康复教研室郑州451191 洛阳市妇幼保健院生殖医学科河南洛阳471000 郑州大学第一附属医院神经内科2病区郑州450052 河南医学高等专科学校病理生理学教研室郑州451191 河南医学高等专科学校河南省脑退行性疾病重点实验室郑州451191

目的研究氟西汀早期干预对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)转基因小鼠认知功能障碍和突触可塑性的影响及潜在机制。方法雄性阿尔茨海默病APP/PS1双转基因(APPswePSEN1dE9)小鼠24只,随机分为AD模型组(AD组)和氟西汀干预组(FLX组)... 详细信息

目的研究氟西汀早期干预对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)转基因小鼠认知功能障碍和突触可塑性的影响及潜在机制。方法雄性阿尔茨海默病APP/PS1双转基因(APPswePSEN1dE9)小鼠24只,随机分为AD模型组(AD组)和氟西汀干预组(FLX组),并以12只野生型小鼠作为对照组(Con组)。从2月龄起,FLX组小鼠开始连续15 d的氟西汀水溶液(浓度1 g·L^(-1))腹腔注射给药,AD组和Con组小鼠接受等体积的生理盐水腹腔注射,给药结束4个月后(相当于6月龄时)水迷宫实验检测小鼠认知功能,电生理检测小鼠海马突触可塑性,免疫印迹检测海马中突触相关蛋白表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测海马中淀粉样蛋白-β(Aβ)含量。结果氟西汀早期干预可有效改善AD转基因小鼠的认知功能障碍和海马神经元细胞突触可塑性,增加AD转基因小鼠海马中突触相关蛋白的表达水平,并降低海马Aβ含量。结论氟西汀早期干预能有效改善AD转基因小鼠认知功能和突触可塑性造成的损伤。

关键词：阿尔茨海默病氟西汀小鼠 APP/PS1 认知障碍

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内质网应激对肝癌细胞硼替佐米耐药性的影响

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新乡医学院学报 2021年第2期38卷 106-111页

作者：闫登科陶丽郝洁黄瑞娜钟加滕平顶山第一人民医院消化内二科河南平顶山467000 郑州大学附属肿瘤医院消化内科河南郑州450000 新乡医学院第一附属医院感染疾病科河南卫辉453100 新乡医学院基础医学院病理学教研室河南新乡453003

目的探讨内质网应激对肝癌细胞硼替佐米耐药性的影响。方法将对数生长期HepG2和HuH7细胞分别分为0、5、10、15、20、30 nmol·L^(-1)硼替佐米组,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测硼替佐米干预24 h时各组细胞存活率及干预24、48、72、9... 详细信息

目的探讨内质网应激对肝癌细胞硼替佐米耐药性的影响。方法将对数生长期HepG2和HuH7细胞分别分为0、5、10、15、20、30 nmol·L^(-1)硼替佐米组,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测硼替佐米干预24 h时各组细胞存活率及干预24、48、72、96 h时细胞增殖率。将对数生长期HepG2和HuH7细胞分别分为0、10、15 nmol·L^(-1)硼替佐米组,采用Western blot法检测HepG2和HuH7细胞中凋亡相关蛋白切割片段的半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)和内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、磷酸化真核翻译起始因子2α(p-eIF-2α)、激活转录因子4(ATF4)的表达。构建对硼替佐米耐药的HepG2细胞株(HepG2/Bort细胞),通过抑制生长曲线计算细胞的半抑制浓度(IC 50),并计算细胞耐药指数(RI)。将HepG2/Bort细胞分为对照组、硼替佐米组(给予15 nmol·L^(-1)硼替佐米干预)、硼替佐米+4-苯基丁酸(4-PBA)组(给予15 nmol·L^(-1)硼替佐米和8 mmol·L^(-1)4-PBA干预)、硼替佐米+牛磺脱氧胆酸(TUDCA)组(给予15 nmol·L^(-1)硼替佐米和1 mmol·L^(-1)TUDCA干预),药物作用24 h后,采用CCK-8法检测HepG2/Bort细胞存活率,采用Western blot法检测HepG2/Bort细胞中凋亡相关蛋白cleaved caspase-3和内质网应激相关蛋白GRP78、p-eIF-2α、ATF4的表达。结果硼替佐米干预24 h后,5、10、15、20、30 nmol·L^(-1)硼替佐米组HepG2和HuH7细胞存活率均显著低于0 nmol·L^(-1)硼替佐米组(P<0.05)。硼替佐米干预0、24 h时,5 nmol·L^(-1)硼替佐米组与0 nmol·L^(-1)硼替佐米组HepG2和HuH7细胞增殖率比较差异无统计学意义(P>0.05);硼替佐米干预48、72、96 h时,5 nmol·L^(-1)硼替佐米组HepG2和HuH7细胞增殖率显著低于0 nmol·L^(-1)硼替佐米组(P<0.05)。干预24 h后,10、15 nmol·L^(-1)硼替佐米组HepG2和HuH7细胞内cleaved caspase-3表达显著高于0 nmol·L^(-1)硼替佐米组(P<0.05)。HepG2/Bort细胞和HepG2细胞对硼替佐米的IC 50分别为122.36、13.23 nmol·L^(-1),HepG2/Bort细胞对硼替佐米的RI为9.25。HepG2/Bort细胞中GRP78、p-eIF-2α、ATF4蛋白表达量显著高于HepG2细胞(P<0.05)。硼替佐米组HepG2/Bort细胞存活率显著低于对照组(P<0.05),硼替佐米+4-PBA组和硼替佐米+TUDCA组HepG2/Bort细胞存活率显著低于硼替佐米组(P<0.05)。硼替佐米组HepG2/Bort细胞中cleaved caspase-3相对表达量显著高于对照组(P<0.05),硼替佐米+4-PBA组和硼替佐米+TUDCA组HepG2/Bort细胞中cleaved caspase-3相对表达量显著高于硼替佐米组(P<0.05)。结论硼替佐米可以抑制肝癌细胞增殖,并诱导其凋亡;内质网应激抑制剂可以提高HepG2/Bort细胞对硼替佐米的敏感性,本研究为临床克服肝癌耐药提供了新的治疗策略。

关键词：肝癌内质网应激硼替佐米细胞增殖细胞凋亡耐药性

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“环境-遗传-基因互作”模式中磷脂酶Cε1对食管癌易感性的影响

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郑州大学学报(医学版) 2022年第1期57卷 1-5页

作者：王立东陈瑶徐瑞华宋昕赵学科李留玉雷玲玲周福有常志伟吉佳佳李秀敏杨媛啧魏梦霞王苒高社干鲍启德胡景峰郑州大学第一附属医院省部共建食管癌防治国家重点实验室郑州大学基础医学院病理学与病理生理学教研室安阳市肿瘤医院胸外科新乡医学院新乡市肿瘤分子治疗重点实验室河南科技大学第一附属医院肿瘤内科安阳地区医院肿瘤内科

随着全基因组关联分析（genome-wide association study,GWAS）和后GWAS研究的深入，越来越多的疾病相关单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）被发现。近年的研究[1-3]提示，部分疾病相关SNP可导致其所在基因以及相关... 详细信息

随着全基因组关联分析（genome-wide association study,GWAS）和后GWAS研究的深入，越来越多的疾病相关单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）被发现。近年的研究[1-3]提示，部分疾病相关SNP可导致其所在基因以及相关基因转录和蛋白表达水平发生变化，进一步影响肿瘤的发生和发展，甚至影响肿瘤的转归（预后），这些发现极大丰富了“环境-遗传-基因互作”模式对肿瘤发生、发展和转归影响的新理论;这些SNP可分为增加疾病易感性的SNP和致病性SNP两大类。推测致病性SNP不但影响相关基因的转录和蛋白表达，并且也可能影响驱动基因突变。

关键词：食管癌磷脂酶Cε1 环境-遗传-基因互作

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SIRT6在二乙基亚硝胺诱导小鼠自发肝癌中的作用

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新乡医学院学报 2020年第4期37卷 332-336页

作者：朱会生张翠翠范蕊熊熙文千新来新乡医学院基础医学院病理学教研室河南新乡453003 中国人民解放军陆军第八十三集团军医院普通外科河南新乡453000 新乡医学院法医学院分子代谢实验室河南新乡453003

目的探讨SIRT6在二乙基亚硝胺(DEN)诱导小鼠自发肝癌中的作用。方法选取Huh7-sirt6细胞和Huh7-GFP细胞,常规培养,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测过表达SIRT6对肝癌细胞体外增殖的影响。选取Wt小鼠和TgSIRT6小鼠各1只,Western blot法检测Tg... 详细信息

目的探讨SIRT6在二乙基亚硝胺(DEN)诱导小鼠自发肝癌中的作用。方法选取Huh7-sirt6细胞和Huh7-GFP细胞,常规培养,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测过表达SIRT6对肝癌细胞体外增殖的影响。选取Wt小鼠和TgSIRT6小鼠各1只,Western blot法检测TgSIRT6小鼠肝脏组织中SIRT6表达;另选取15日龄清洁级无病原体全身性过表达SIRT6转基因(TgSIRT6)小鼠20只(雄性14只,雌性6只)和C57BL6/J野生型(Wt)小鼠18只(雄性12只,雌性6只)为研究对象,将小鼠分为TgSIRT6-DEN组16只(雄性10只,雌性6只)、Wt-DEN组14只(雄性8只,雌性6只)、TgSIRT6对照组4只(雄性)和Wt对照组4只(雄性)。TgSIRT6-DEN组和Wt-DEN组小鼠腹腔注射DEN25 mg·kg-1;TgSIRT6对照组和Wt对照组小鼠腹腔注射相同剂量的生理盐水。给药后48周颈椎脱臼法处死各组小鼠,取肝脏,观察肝脏颜色、大小、质地及有无癌变结节,记录肝脏肿瘤的大小、数量,并行肝肿瘤组织苏木精-伊红染色。结果细胞培养第4天,Huh-SIRT6细胞增殖速度显著低于Huh-GFP细胞(P<0.05)。Wt小鼠和TgSIRT6小鼠肝脏组织中SIRT6的表达量分别为0.247±0.055和1.178±0.037,TgSIRT6小鼠肝脏组织中SIRT6的表达量高于Wt小鼠(P<0.05)。TgSIRT6对照组和Wt对照组小鼠肝脏中未观察到肿瘤;TgSIRT6-DEN组雄鼠和雌鼠的致瘤率分别为80%(8/10)和33%(2/6),Wt-DEN组雄鼠和雌鼠的致瘤率分别为100%(8/8)和83%(5/6);TgSIRT6-DEN组雄鼠和雌鼠肿瘤数量及最大肿瘤直径均小于Wt-DEN组(P<0.05)。HE染色结果显示,肿瘤为肝细胞癌。结论肝细胞中SIRT6过表达能抑制DEN诱发的肝脏肿瘤的形成。

关键词：二乙基亚硝胺肝脏自发肿瘤 SIRT6 转基因小鼠

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