检索结果-内蒙古大学图书馆

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2025年第1期43卷 76-83页

作者：邓冰清阿迪莱·多力坤李寅时阿比旦·艾尼瓦尔孙胜肖雯颖葛聪蕙唐娜姜涛王慧张传山李静新疆医科大学基础医学院新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学实验动物中心新疆乌鲁木齐830011 新疆地区高发疾病研究教育部重点实验室(新疆医科大学) 新疆乌鲁木齐830054 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心) 国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室(中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所)上海200025

目的了解多房棘球蚴感染小鼠腹膜腔免疫细胞迁移及分化的变化,探讨其发挥免疫功能的机制。方法裂解增强绿色荧光蛋白(EGFP)小鼠脾组织,分离EGFP示踪免疫细胞。C57BL/6J小鼠腹腔注射2.5×10^(7)个示踪免疫细胞,5 d后经肝门静脉穿刺接... 详细信息

目的了解多房棘球蚴感染小鼠腹膜腔免疫细胞迁移及分化的变化,探讨其发挥免疫功能的机制。方法裂解增强绿色荧光蛋白(EGFP)小鼠脾组织,分离EGFP示踪免疫细胞。C57BL/6J小鼠腹腔注射2.5×10^(7)个示踪免疫细胞,5 d后经肝门静脉穿刺接种3000个多房棘球蚴原头节。感染19周后,取感染小鼠肝、脾组织,冷冻切片后4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色,免疫荧光观察示踪免疫细胞的分布。分离感染小鼠外周血、肝、脾和腹膜腔免疫细胞,流式细胞术检测EGFP示踪免疫细胞在不同组织的迁移分布和细胞分型,以及细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素4(IL-4)的分泌情况。结果免疫荧光结果显示,EGFP示踪细胞主要迁移至小鼠脾组织。肝组织中各型示踪淋巴细胞占比从高到低依次为CD8^(+)T细胞(79.63±5.00)%、CD4^(+)T细胞(7.08±4.00)%、B细胞(2.01±1.00)%(F=396.20,P<0.01);脾组织中各型淋巴细胞占比从高到低依次为CD8^(+)T细胞(73.97±3.56)%、CD4^(+)T细胞(11.92±5.02)%、B细胞(3.86±0.32)%(F=349.00,P<0.01);腹膜腔中各型淋巴细胞占比从高到低依次为CD8^(+)T细胞(45.27±4.53)%、CD4^(+)T细胞(34.60±8.00)%、B细胞(15.03±6.38)%(F=16.90,P<0.05)。肝、脾、腹膜腔中的示踪CD4^(+)T细胞数量分别为2700±3120、14407±11958、3376±1481,示踪CD8^(+)T细胞数量分别为26407±22190、109179±92692、4245±798,示踪B细胞数量分别为698±719、5794±4971、1476±840,3种示踪淋巴细胞均主要分布在脾组织中(F=2.51、3.03、2.62,均P>0.05)。肝组织中各型髓系细胞占比从高到低依次为树突状细胞(3.94±1.33)%、单核细胞(3.79±1.80)%、巨噬细胞(3.13±1.85)%、嗜酸粒细胞(2.40±1.81)%、骨髓来源抑制性细胞(0.76±0.17)%、中性粒细胞(0.67±0.04)%(F=3.21,P<0.05);脾组织中各型髓系细胞占比从高到低依次为树突状细胞(1.86±0.89)%、单核细胞(0.41±0.09)%、巨噬细胞(0.23±0.03)%、中性粒细胞和骨髓来源抑制性细胞[均(0.13±0.14)%]、嗜酸粒细胞(0.04±0.04)%(F=42.70,P<0.01);外周血中组织中各型髓系细胞占比从高到低依次为树突状细胞(0.37±0.28)%、单核细胞(0.22±0.27)%、巨噬细胞(0.22±0.21)%、中性粒细胞和骨髓来源抑制性细胞[均(0.17±0.08)%]、嗜酸粒细胞(0.05±0.08)%(F=0.92,P>0.05)。肝组织的示踪CD4^(+)T细胞中,分泌IFN-γ、TNF-α、IL-4的细胞分别占(41.17±19.92)%、(30.70±3.35)%、(2.78±4.81)%(F=8.22,P<0.05);示踪CD8^(+)T细胞中,分泌IFN-γ、TNF-α、IL-4的细胞分别占(64.17±3.17)%、(24.85±15.66)%、(5.67±6.35)%(F=27.08,P<0.01)。脾组织的示踪CD4^(+)T细胞中,分泌IFN-γ、TNF-α、IL-4的细胞分别占(52.43±19.43)%、(27.67±18.99)%、(4.77±2.23)%(F=6.88,P<0.05);示踪CD8^(+)T细胞中,分泌TNF-α、IFN-γ、IL-4的细胞分别占(40.53±17.79)%、(38.97±18.04)%、(3.23±3.09)%(F=6.15,P<0.05)。腹膜腔的示踪CD4^(+)T细胞中,分泌IFN-γ、TNF-α、IL-4的细胞分别占(64.33±6.82)%、(46.43±13.44)%、(4.03±3.51)%(F=36.04,P<0.01);示踪CD8^(+)T细胞中,分泌IFN-γ、TNF-α、IL-4的细胞分别占(53.57±19.17)%、(21.47±8.54)%、(6.13±8.63)%(F=10.24,P<0.05)。结论多房棘球蚴感染小鼠腹膜腔内免疫细胞主要迁移至脾组织,细胞类型以CD8^(+)T细胞和树突状细胞为主。T细胞主要分泌IFN-γ,呈Th1型免疫应答。

关键词：多房棘球蚴病腹膜腔免疫细胞迁移 CD8^(+)T细胞

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细粒棘球绦虫抗原B重组蛋白的免疫反应性

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2009年第2期27卷 107-110页

作者：吕国栋刘涛林仁勇王星王俊华任智慧温浩卢晓梅新疆医科大学第一附属医院医学研究中心新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054

目的利用基因工程方法表达细粒棘球绦虫抗原B重组蛋白(rAgB),并分析其免疫反应性。方法将rAgB基因片段插入原核表达载体pET41a(+)中,转化大肠埃希菌BL21(DE3)菌株,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,获得重组蛋白rAgB-GST。用... 详细信息

目的利用基因工程方法表达细粒棘球绦虫抗原B重组蛋白(rAgB),并分析其免疫反应性。方法将rAgB基因片段插入原核表达载体pET41a(+)中,转化大肠埃希菌BL21(DE3)菌株,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,获得重组蛋白rAgB-GST。用谷胱甘肽琼脂糖树脂亲和层析柱(GST-sepharose4B)纯化,经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析重组蛋白的表达情况。用蛋白质印迹(Western blotting)分析其免疫反应性,并用免疫胶体金包虫诊断试剂盒作为对照。结果PCR、双酶切及DNA测序结果均显示重组质粒pET41a-rAgB构建成功。SDS-PAGE结果表明,重组蛋白rAgB-GST的相对分子质量(Mr)为40800,纯化蛋白含量为78.4%。Westernblotting分析结果显示,重组蛋白rAgB-GST检测细粒棘球蚴病和多房棘球蚴病患者血清的阳性率分别为79.2%(95/120)和51.1%(23/45),但与卫氏并殖吸虫病患者、华支睾吸虫病患者血清以及健康人血清反应均为阴性。rAgB-GST的敏感性和特异性分别为79.2%(95/120)和81.0%(98/121),均略高于免疫胶体金棘球蚴病诊断试剂盒的敏感性(72.8%,75/103)和特异性(76.9%,30/39)。结论重组rAgB-GST蛋白可被细粒棘球蚴病和多房棘球蚴病患者血清识别,有较好的免疫反应性。

关键词：细粒棘球绦虫重组抗原B 免疫诊断

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999例包虫病住院患者经济负担分析

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中华流行病学杂志 2010年第7期31卷 835-836页

作者：王乐冯晓辉段新宇温浩新疆医科大学第一附属医院乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院医学研究中心新疆包虫病基础医学重点实验室

包虫病为人畜共患寄生虫病，在农、牧区已成为当地居民因病致贫、因病返贫的主要原因之一。为探讨造成包虫病患者经济负担的影响因素和卫生决策者提供参考依据，本研究利用2004--2008年乌鲁木齐市某三级医院包虫病住院患者资料，分析其... 详细信息

包虫病为人畜共患寄生虫病，在农、牧区已成为当地居民因病致贫、因病返贫的主要原因之一。为探讨造成包虫病患者经济负担的影响因素和卫生决策者提供参考依据，本研究利用2004--2008年乌鲁木齐市某三级医院包虫病住院患者资料，分析其经济负担。

关键词：囊型包虫病疾病经济负担人力资本法

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细粒棘球蚴细胞外信号调节激酶基因克隆、序列分析及功能的初步鉴定

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中华传染病杂志 2010年第7期28卷 402-407页

作者：吕国栋纪静王俊华李亮王红丽卢晓梅王星温浩林仁勇新疆医科大学第一附属医院医学研究中心新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054

目的从新疆株细粒棘球蚴中克隆细胞外信号调节激酶（EgERK1）基因，进行序列测定、生物信息学分析，蛋白表达及功能初步鉴定。方法设计特异性引物，从新疆株细粒棘球蚴中提取总RNA，RT—PCR法扩增EgERKl基因，构建pET28a—EgERK1原核表... 详细信息

目的从新疆株细粒棘球蚴中克隆细胞外信号调节激酶（EgERK1）基因，进行序列测定、生物信息学分析，蛋白表达及功能初步鉴定。方法设计特异性引物，从新疆株细粒棘球蚴中提取总RNA，RT—PCR法扩增EgERKl基因，构建pET28a—EgERK1原核表达质粒，测序确定序列并进行生物信息学分析。构建正确的pET28a-EgERK1原核表达质粒，经诱导、表达EgERK1重组蛋白，聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western印迹检测其生物学功能。结果RT-PCR扩增出的条带经测序，结果显示其长度为1125bp，编码374个氨基酸，等电点为6．34，BLAST比对结果提示为一新基因，命名为EgERKl（EU701008）。同源性比较表明，EgERK1与多房棘球绦虫ERK基因（EmMPK1）同源性为95．45％，与线虫、酵母、果蝇和人类等ERK基因的同源性为43．04％～61．88％。进化树分析发现EgERKl和EmMPKl相聚集。功能分析预测EgERKl具有ERK类激酶T—X—Y结构保守区和酶激活功能域。Western印迹显示，原核诱导表达的EgERKl重组蛋白能与抗人ERK1／2抗体发生特异性免疫反应。结论成功克隆细粒棘球蚴EgERKl新基因，发现EgERK1重组蛋白具有与ERK1／2抗体结合的功能，为进一步研究该基因在寄生虫与宿主相互作用中的功能奠定基础。

关键词：细粒棘球绦虫细胞外信号调节MAP激酶类基因克隆分子序列分析质粒

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Fas及Caspase家族在泡球蚴感染宿主肝脏中的表达及其意义

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中华实验外科杂志 2011年第10期28卷 1677-1679,I0002页

作者：王俊华张传山张雪卢晓梅温浩林仁勇新疆医科大学第一附属医院医学研究中心新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054

目的探讨细胞凋亡信号分子Fas及Caspase家族在肝泡球蚴病宿主中的表达及意义。方法16例配对泡型包虫患者（AE）肝脏标本，16只雌性BALB／C小鼠。分析肝脏标本中肝细胞病理变化、凋亡及Fas、Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9的表达。结... 详细信息

目的探讨细胞凋亡信号分子Fas及Caspase家族在肝泡球蚴病宿主中的表达及意义。方法16例配对泡型包虫患者（AE）肝脏标本，16只雌性BALB／C小鼠。分析肝脏标本中肝细胞病理变化、凋亡及Fas、Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9的表达。结果AE患者病灶周围肝细胞水肿，汇管区周围纤维化，肝细胞造型坏死；病灶周围肝细胞发生显著凋亡[（74．0±15．0）％比（4．2±3．3）％]，Fas[（71．3±19．0）％比（5．2±1．6）％]、Caspase-3[（39．4±18．3）％比（3．3±2．9）％]、Caspase-8[（37．6±3．5）％比（4．0±1．8）％]和Caspase-9[（24．7±13．8）％比（2．0±1．4）％]高表达（P〈0．05）。泡球蚴感染小鼠病灶处可见囊泡，肝组织纤维化严重；肝细胞发生显著凋亡[（37．5±5．2）％比（13．9±2．7）％]，Fas[（48．3±6．2）％比（4．6±1．2）％]、Caspase-3[（29．7±6．3）％比（5．2±1．9）％]、Caspase-8[（23．1±2．9）％比（3．5±1．4）％]和Caspase-9[（16．7±3．2）％比（2．3±1．1）％]高表达（P〈0．05）。结论泡球蚴感染引起宿主肝细胞凋亡，提示Fas及Caspase家族介导的细胞凋亡信号通路可能参与了泡球蚴所致肝损伤进程。

关键词：肝泡球蚴病 Fas Caspases

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中华实验外科杂志 2011年第6期28卷 929-931,F0003页

作者：王俊华卢晓梅张传山魏绪法温浩林仁勇新疆医科大学第一附属医院医学研究中心新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054

目的探讨泡球蚴感染宿主病灶旁免疫细胞中转化生长因子-β1（TGF-p1）、凋亡及相关因子Caspase-3的变化及其意义。方法8例配对泡型包虫患者和泡球蚴感染小鼠均采用苏木素-伊红（HE）染色观察病理变化，免疫组织化学技术检测病灶旁免疫细... 详细信息

目的探讨泡球蚴感染宿主病灶旁免疫细胞中转化生长因子-β1（TGF-p1）、凋亡及相关因子Caspase-3的变化及其意义。方法8例配对泡型包虫患者和泡球蚴感染小鼠均采用苏木素-伊红（HE）染色观察病理变化，免疫组织化学技术检测病灶旁免疫细胞TGF-β1以及凋亡相关因子Caspase-3的表达与分布，原位末端标记技术（TUNEL）检测病灶旁免疫细胞凋亡。结果泡型包虫患者及泡球蚴感染小鼠病灶旁及汇管区均有大量炎性细胞灶性浸润，TGF—β1（P〈0．01）和凋亡相关因子Caspase-3（P〈0．01）高表达，TUNEL结果表明病灶旁免疫细胞发生凋亡，与对照比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论泡球蚴在感染宿主过程中可能通过引起宿主TGF—β1高表达，造成免疫细胞发生凋亡而达到逃避宿主免疫反应长期寄生的目的。

关键词：肝泡球蚴免疫细胞转化生长因子-β1

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白细胞介素-17和白细胞介素-6在泡球蚴感染小鼠中的变化特点及作用

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中华实验外科杂志 2011年第12期28卷 2131-2133页

作者：庞楠楠丁剑冰赵慧李玉娇李亮马海梅马秀敏新疆医科大学第一附属医院医学研究中心新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054 新疆医科大学基础医学院

目的观察泡球蚴（Em）感染小鼠肝脏过程中白细胞介素（IL）-17和IL-6的动态变化特点。方法实验组小鼠腹腔接种泡球蚴原头蚴，持续观察10个月，取肝脏组织和收集各组血清，通过苏木素-伊红（HE）染色观察肝脏病理改变，免疫组织化学和酶... 详细信息

目的观察泡球蚴（Em）感染小鼠肝脏过程中白细胞介素（IL）-17和IL-6的动态变化特点。方法实验组小鼠腹腔接种泡球蚴原头蚴，持续观察10个月，取肝脏组织和收集各组血清，通过苏木素-伊红（HE）染色观察肝脏病理改变，免疫组织化学和酶联免疫吸附试验（ELISA）法观察IL-17在Em感染不同阶段的动态变化特点。结果与对照组小鼠比较，Em感染小鼠的肝组织汇管区周围出现炎细胞浸润、肝细胞坏死等多种病理改变；肝组织IL-17和IL-6在感染1个月出现阳性表达，3个月达到高峰，其中IL-17在感染3个月以后与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；IL-6在感染1～6月与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；Em感染小鼠血清IL-17的含量明显升高，在感染2、3、8个月时与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论IL-17和IL-6的表达随着泡球蚴感染加重而增高，并随着感染时间延长一直保持较高的水平，可能与泡球蚴感染小鼠时造成免疫紊乱及宿主免疫病理损伤有关。

关键词：泡球蚴感染白细胞介素-17 白细胞介素-6

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多房棘球蚴感染对小鼠肝脾淋巴细胞及其亚群的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2020年第1期38卷 30-35页

作者：章宁张传山李智德李亮王慧谭雅超尚琳琳温浩新疆医科大学第一附属医院中亚高发病病因预防治疗国家重点实验室乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院/临床医学研究院新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054

目的探讨多房棘球蚴感染对C57BL/6小鼠肝和脾淋巴细胞及其亚群的影响。方法 32只C57BL/6小鼠随机分为4组,每组8只,对照组、低数量组(50个原头节/鼠)、中数量组(500个原头节/鼠)、高数量组(2 000个原头节/鼠),实验组取200μl含不同数量... 详细信息

目的探讨多房棘球蚴感染对C57BL/6小鼠肝和脾淋巴细胞及其亚群的影响。方法 32只C57BL/6小鼠随机分为4组,每组8只,对照组、低数量组(50个原头节/鼠)、中数量组(500个原头节/鼠)、高数量组(2 000个原头节/鼠),实验组取200μl含不同数量多房棘球蚴原头节的混悬液,采用门静脉注射法建立多房棘球蚴感染小鼠模型,对照组注射等量生理盐水。感染后4周,每组各取4只小鼠,取肝脏组织,常规Masson染色,观察病理变化。剩余4只小鼠取肝脏和脾脏,制备肝、脾细胞悬液,流式细胞术检测肝、脾CD3^+T细胞、B细胞、NK细胞、NKT细胞、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、CD4^+CD69^+T细胞、CD8^+CD69^+T细胞绝对数以及初始型CD4^+T (CD4^+Tn)细胞、效应记忆性CD4^+T (CD4^+Tem)细胞、初始型CD8^+T (CD8^+Tn)细胞、效应记忆性CD8^+T(CD8^+Tem)细胞和中心记忆性CD8^+T(CD8^+Tcm)细胞比例的变化。检测数据采用Flow-Jo软件分析,并做流式图。采用Graphad Prism 7.0软件进行作图和统计学分析。结果感染后4周,对照组小鼠肝无明显变化,低、中数量组小鼠肝组织出现急性炎症反应减弱,部分病灶炎性反应逐渐转变为纤维化修复,形成小肉芽肿结节,呈点状或灶状坏死。高数量组小鼠肝内出现小囊泡,可见生发层结构,周围大量炎性细胞浸润。小鼠肝CD3^+T细胞绝对数高、中、低数量组和对照组分别为(4.10±0.04)×10^5、(3.81±0.14)×10^5、(3.02±0.12)×10^5、(2.98±0.03)×10^5,高数量组高于其他3组(P<0.05或0.01)。小鼠脾CD3^+T细胞绝对数高、中、低数量组和对照组分别为(16.01±0.40)×10^5、(11.03±1.21)×10^5、(10.10±1.01)×10^5、(9.71±0.90)×10^5,高数量组高于其他3组(P<0.01)。小鼠肝CD4^+T、CD8^+T细胞和脾B细胞、CD8^+T绝对数高数量组高于其他3组(P<0.05或0.01)。小鼠肝CD4^+CD69^+T细胞绝对数高、中、低数量组和对照组分别为(3.23±0.10)×10^4、(1.98±0.11)×10^4、(1.51±0.26)×10^4、(1.19±0.21)×10^4,高数量组高于其他组(P<0.05)。小鼠脾CD4^+CD69^+T细胞绝对数高、中、低数量组和对照组分别为(10.10±0.41)×10^4、(8.91±0.80)×10^4、(8.20±0.41)×10^4、(6.81±0.50)×10^4,高数量组高于对照组(P<0.01)。肝、脾CD8^+CD69^+T细胞绝对数高数量组高于其他3组(P<0.05或0.01)。小鼠肝CD4^+Tn细胞比例高、中、低数量组和对照组分别为(15.52±1.51)%、(19.3±2.09)%、(20.66±1.28)%、(23.62±2.84)%,对照组高于其他组(P<0.05或0.01)。肝、脾CD8^+Tn细胞比例对照组高于其他组(P<0.05或0.01)。肝、脾CD8^+Tcm细胞比例高数量组高于对照组(P<0.05)。结论高数量多房棘球蚴感染C57BL/6小鼠,肝区域以CD4^+T细胞和CD8^+T细胞募集为主,而脾以B细胞和CD8^+T细胞募集为主。

关键词：多房棘球蚴 T淋巴细胞早期流式细胞术

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新疆株细粒棘球绦虫不同发育阶段95抗原基因克隆及序列分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2003年第3期21卷 170-172页

作者：林仁勇丁剑冰温浩张文宝李君卢晓梅新疆医科大学第一附属医院新疆包虫病基础医学重点实验室乌鲁木齐830054 新疆医科大学免疫学教研室乌鲁木齐830054 昆士兰医学研究所

目的研究细粒棘球绦虫95抗原(Eg95)基因在新疆株细粒棘球绦虫不同发育阶段的表达及其基因序列差异。方法根据Eg95基因序列设计引物,用PCR方法分别从新疆株细粒棘球绦虫3个不同发育阶段(原头蚴、六钩蚴和成虫)所构建的cDNA文库中克隆获... 详细信息

目的研究细粒棘球绦虫95抗原(Eg95)基因在新疆株细粒棘球绦虫不同发育阶段的表达及其基因序列差异。方法根据Eg95基因序列设计引物,用PCR方法分别从新疆株细粒棘球绦虫3个不同发育阶段(原头蚴、六钩蚴和成虫)所构建的cDNA文库中克隆获得Eg95目的基因,将其克隆至pUCm-T载体、测序并进行序列分析。结果从3个不同发育阶段的新疆株细粒棘球绦虫cDNA文库中均克隆出Eg95基因,其基因片段长度为402bp,同源性比对分析(BLAST)结果表明,所克隆的新疆株Eg95基因与GenBank中的Eg95基因序列一致。结论 Eg95基因在新疆株细粒棘球绦虫不同发育阶段均有表达,其基因序列无差异。

关键词：细粒棘球绦虫 95抗原基因克隆序列分析棘球蚴病

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重组泡球蚴Em18蛋白不同纯化方法的比较

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生物技术 2009年第6期19卷 45-48页

作者：王慧王红丽王俊华吕国栋卢晓梅王星温浩林仁勇新疆医科大学第一附属医院医学研究中心新疆包虫病基础医学重点实验室新疆乌鲁木齐830054

目的：比较不同方法纯化重组泡球蚴Em18的效果。方法：进一步对BL21-pET41a-Em18重组菌的诱导表达条件进行摸索优化,采用改良的超声程序破碎大肠杆菌细胞,分别经不同的纯化方法进行蛋白纯化,通过SDS-PAGE对纯化结果进行比较分析,Western... 详细信息

目的：比较不同方法纯化重组泡球蚴Em18的效果。方法：进一步对BL21-pET41a-Em18重组菌的诱导表达条件进行摸索优化,采用改良的超声程序破碎大肠杆菌细胞,分别经不同的纯化方法进行蛋白纯化,通过SDS-PAGE对纯化结果进行比较分析,Western blot进行活性鉴定。结果：①在菌液OD600为0.8-1.0,加IPTG终浓度为1 mmol/L,37℃诱导3h,rEm18-GST重组蛋白得到成功高表达,在相对分子量为50kDa处有表达条带。②超声程序为：工作3 s,间歇4s,功率200~300W,超声体系中加入溶菌酶和蛋白酶抑制剂作用,可促进大肠杆菌细胞的破碎,降低目的蛋白的降解;加入终浓度为1%的Triton-X100作用可增加融合蛋白的可溶性。③通过比较不同方法纯化重组泡球蚴Em18的效果表明采用单纯His柱纯化可获得浓度高、纯度高的rEm18-GST重组蛋白。Western blot分析表明该蛋白能与泡型包虫病（AE）患者血清特异性反应。结论：建立了一种纯化原核表达Em18融合蛋白的较为经济和有效的方法,得到大量有生物学活性的Em18融合蛋白,为包虫病诊断试剂盒的研制奠定基础。

关键词：泡球蚴 Em18重组蛋白表达和纯化鉴定

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