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中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会

作者：熊丽霞李文林蔡震宇石小玉蔡伟邹芳芳南昌大学医学院病理生理学教研室南昌大学医学院江西省医学科学研究所江西省医学生物高技术重点实验室南昌大学医学院基础医学院

目的:观察重组白细胞介素13(rIL-13)对瘢痕成纤维细胞株(CRL-1762)的胶原合成作用,探讨其作用机制。方法:RT-PCR检测细胞IL-13受体的表达;CRL-1762细胞分为实验组和对照组,实验组加入rIL-13(100μg/L),用细胞计数和HE染色观察细胞增殖... 详细信息

目的:观察重组白细胞介素13(rIL-13)对瘢痕成纤维细胞株(CRL-1762)的胶原合成作用,探讨其作用机制。方法:RT-PCR检测细胞IL-13受体的表达;CRL-1762细胞分为实验组和对照组,实验组加入rIL-13(100μg/L),用细胞计数和HE染色观察细胞增殖和细胞形态;检测细胞培养上清液中羟脯氨酸(Hyp)含量;用Western blotting检测STAT6蛋白磷酸化情况。结果:CRL-1762细胞表达IL-13受体α1;实验组细胞数量显著增加(P<0.01),上清液中Hyp含量显著高于对照组(P<0.01);IL-13作用CRL-1762细胞2h后磷酸化STAT6蛋白表达最强,4h后衰减。结论:CRL-1762细胞表达IL-13受体α1,rIL-13通过STAT6途径促进CRL-1762细胞胶原合成。

关键词：瘢痕成纤维细胞 CRL 胶原合成细胞表达 STAT6 白细胞介素

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高胆红素血症大鼠脑干听觉诱发电位与脑组织NO含量及Na^+-K^+ATP酶活性的变化

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中国病理生理杂志 2008年第6期24卷 1101-1105页

作者：何斯纯刘文勤周丽丽王子栋暨南大学医学院生理学教研室广东广州510632

目的:探讨脑干听觉诱发电位(BAEP)在早期监测高胆红素血症听力和脑损伤中的作用及脑组织一氧化氮(NO)与胆红素诱导的听力和脑损伤的关系。方法:15dSD大鼠腹腔注射不同剂量(30mg/kg、60mg/kg、90mg/kg、120mg/kg和150mg/kg)胆红素溶液以... 详细信息

目的:探讨脑干听觉诱发电位(BAEP)在早期监测高胆红素血症听力和脑损伤中的作用及脑组织一氧化氮(NO)与胆红素诱导的听力和脑损伤的关系。方法:15dSD大鼠腹腔注射不同剂量(30mg/kg、60mg/kg、90mg/kg、120mg/kg和150mg/kg)胆红素溶液以制备高胆红素血症动物模型,微量胆红素测定仪测定血清胆红素浓度,重氮法测定脑组织胆红素浓度,定磷法测定脑组织中Na+-K+ATP酶活性,硝酸酶还原法测定脑组织NO含量,诱发电位仪检测BAEP。结果:建模后高剂量组(120mg/kg和150mg/kg)部分大鼠出现异常神经行为活动;建模6h后,除低剂量(30mg/kg)组外,各实验组大鼠血清和脑组织胆红素浓度及脑组织NO含量显著升高,脑组织Na+-K+ATP酶活性显著降低,BAEP的波峰潜伏期(PL)和波峰间潜伏期(IPL)显著延长;且BA-EP的PL与IPL和脑组织NO含量与Na+-K+ATP酶活性的变化均与脑组织胆红素水平显著相关。结论:BAEP的PL和IPL是早期监测高胆红素血症听力和脑损伤的无创性指标,NO的过量产生可能参与了胆红素诱导的听力和脑损伤的发病过程。

关键词：高胆红素血症诱发电位听觉脑干一氧化氮 Na(+)-K(+)交换ATP酶

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损害性因素对乳鼠心肌细胞甘氨酸受体α_1亚基表达的影响

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中国病理生理杂志 2008年第5期24卷 843-848页

作者：陈楚天陆大祥戚仁斌王华东付咏梅王彦平暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632

目的:研究脂多糖(LPS)、缺氧/复氧(H/R)、异丙肾上腺素(ISO)以及高糖(HG)对乳鼠心肌细胞甘氨酸受体α1亚基(GlyRα1)表达的影响。方法:体外培养乳鼠心肌细胞,分别用LPS、H/R、ISO以及HG处理,采用CCK-8试剂检测细胞活力,RT-PCR方法检测... 详细信息

目的:研究脂多糖(LPS)、缺氧/复氧(H/R)、异丙肾上腺素(ISO)以及高糖(HG)对乳鼠心肌细胞甘氨酸受体α1亚基(GlyRα1)表达的影响。方法:体外培养乳鼠心肌细胞,分别用LPS、H/R、ISO以及HG处理,采用CCK-8试剂检测细胞活力,RT-PCR方法检测心肌细胞上GlyRα1亚基mRNA的表达。结果:LPS(5mg/L、10mg/L、20mg/L、40mg/L、80mg/L)、ISO(20μmol/L、100μmol/L、500μmol/L)以及HG(25mmol/L、50mmol/L)处理心肌细胞24h与心肌细胞缺氧3h/复氧3h、单纯缺氧3h对心肌细胞存活率无明显影响(P>0.05);LPS(5mg/L、10mg/L、20mg/L、40mg/L、80mg/L)、缺氧(3h)/复氧(3h)、单纯缺氧(3h)以及ISO(20μmol/L、100μmol/L、500μmol/L)组心肌细胞上GlyRα1亚基mRNA表达均高于对照组(P<0.01),而HG(25mmol/L、50mmol/L)组心肌细胞上GlyRα1亚基mRNA表达均低于对照组(P<0.01)。结论:一定浓度的LPS、ISO与一定时间的H/R、单纯缺氧均可上调乳鼠心肌细胞GlyRα1亚基mRNA的表达,而HG可下调乳鼠心肌细胞GlyRα1亚基mRNA的表达。

关键词：受体甘氨酸脂多糖类缺氧异丙肾上腺素高糖

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高胆红素血症新生大鼠听觉诱发电位的研究

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2008年第2期29卷 134-138页

作者：马宁何斯纯陈中婕暨南大学医学院生理学教研室广东广州510632

目的:探讨高胆红素血症新生大鼠脑干听觉诱发电位快成分(FC-BAEP)、脑干听觉诱发电位慢成分(SC-BAEP)和听觉中潜伏期反应(MLR)的异常变化。方法:7日龄SD大鼠随机分为对照组(C组,17只)和两个实验组(T1和T2组,各17只)。T1组和T2组大鼠于7... 详细信息

目的:探讨高胆红素血症新生大鼠脑干听觉诱发电位快成分(FC-BAEP)、脑干听觉诱发电位慢成分(SC-BAEP)和听觉中潜伏期反应(MLR)的异常变化。方法:7日龄SD大鼠随机分为对照组(C组,17只)和两个实验组(T1和T2组,各17只)。T1组和T2组大鼠于7和10日龄腹腔注射胆红素溶液建模,累积剂量分别为90和120 mg/kg,C组大鼠于7日龄和10日龄腹腔注射生理盐水0.5 mL。对照组和实验组10日龄大鼠腹腔注射6 h后随机抽出7只断头取血检测血清胆红素;其余大鼠分别于12、14、17和20日龄检测FC-BAEP、SC-BAEP和MLR。结果:T1和T2组10日龄大鼠腹腔注射6h后,血清胆红素浓度明显升高;T1组和T2组大鼠FC-BAEP和SC-BAEP延迟出现;T1和T2组17、20日龄大鼠FC-BAEP除Ⅱ-ⅣIPL外,各波PL和IPL均显著延长,且T2组17日龄大鼠FC-BAEP各波PL均较T1组显著延长;T1和T2组17、20日龄大鼠SC-BAEP的PL显著延长,且T2组17日龄大鼠SC-BAEP的PL较T1组显著延长;T1和T2组17、20日龄大鼠MLR各波PL和IPL显著延长,除Pa-Pb IPL外,T2组大鼠MLR各波PL和IPL较T1组显著延长。结论:高胆红素血症新生大鼠FC-BAEP、SC-BAEP和MLR基本呈同步一致的异常变化,SC-BAEP和MLR也是早期监测胆红素诱发的听力和脑损伤的客观灵敏指标。

关键词：高胆红素血症大鼠脑干听觉诱发电位快成分脑干听觉诱发电位慢成分中潜伏期反应

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活性氧及能量代谢障碍在体外培养肝细胞脂肪变性中的作用

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中国病理生理杂志 2008年第7期24卷 1373-1377页

作者：胡巢凤陆大祥孙丽萍暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632

目的:探讨细胞活性氧(ROS)及线粒体能量代谢障碍在乙醇和小牛血清诱导的体外培养肝细胞脂肪变性中的作用。方法:将人肝细胞株L02进行细胞培养,加入不同浓度的乙醇,采用MTT法确定乙醇作用的最佳浓度;用2%乙醇和50%小牛血清(A+CS)诱导L02... 详细信息

目的:探讨细胞活性氧(ROS)及线粒体能量代谢障碍在乙醇和小牛血清诱导的体外培养肝细胞脂肪变性中的作用。方法:将人肝细胞株L02进行细胞培养,加入不同浓度的乙醇,采用MTT法确定乙醇作用的最佳浓度;用2%乙醇和50%小牛血清(A+CS)诱导L02细胞,以油红O染色观察细胞内脂滴形成状况,并检测细胞TG的含量;用流式细胞仪(FCM)测定细胞活性氧及线粒体膜电位的改变;采用反相高效液相色谱分析法测定细胞ATP含量。结果:2%乙醇和50%小牛血清作用36h,肝细胞内有典型的脂滴形成,与对照组相比,细胞内TG含量及ROS水平明显增加;而细胞线粒体膜电位及肝细胞ATP的含量则显著降低(P<0.01)。结论:在乙醇和小牛血清诱导肝细胞脂肪变过程中,细胞ROS的增加及线粒体能量代谢障碍可能发挥了重要的作用。

关键词：肝细胞脂肪变性活性氧线粒体膜电位能量代谢

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甘氨酸对缺氧/复氧离体大鼠心脏功能的作用

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中国病理生理杂志 2008年第9期24卷 1682-1685页

作者：李晓娟陆大祥戚仁斌王华东付咏梅王彦平新乡医学院生理学与神经生物学教研室河南新乡453003 暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632

目的:观察甘氨酸(glycine,GLY)对缺氧/复氧离体心脏功能的影响,探讨甘氨酸对心肌缺血-再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤的防治作用及其机制。方法:利用Langendorff灌流装置复制心肌缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)模型,观察不同浓度GLY处理后心脏左室收缩压(left ventricular systolic pressure,LVSP)、左室舒张末压(left ventricular end diastolic pressure,LVEDP)、左室发展压(left ventricular developed pres-sure,LVDP=LVSP-LVEDP)、左室收缩压最大上升/下降速率(the maximum rising and dropping rates of left ventricular pressure,dp/dtmaxand dp/dtmin),并在相应的时点分别测定冠脉流出液中的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平。结果:H/R后各时点大鼠心功能各指标均低于缺氧前;GLY处理组复氧后心功能各指标均高于H/R组,并拮抗损伤导致的SOD减少和MDA升高。结论:一定浓度的GLY能显著改善缺氧/复氧心肌的舒缩功能,其机制可能与其提高SOD活性抑制脂质过氧化反应有关。

关键词：甘氨酸心肌再灌注损伤心功能

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NOD突变在遗传性疾病中的作用

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第四军医大学学报 2008年第2期29卷 181-183页

作者：孙丽萍胡巢凤暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632

核苷酸结合寡聚化结构域(nucleotide-binding oligomerization domain,NOD)蛋白是一个胞浆蛋白家族,参与对细胞内病原相关分子模式(pathogen-associated molecular pat-terns,PAMPs)的识别,作为细胞内受体能识别高度保守的细菌细胞壁成分肽聚糖,并诱导炎症反应.NOD基因突变是某些遗传性疾病的易感原因,本文对NOD突变在相关疾病中的作用进行综述.

关键词： NOD突变遗传性疾病先天性

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广东省新型农村合作医疗现状调查

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中国公共卫生 2008年第2期24卷 177-178页

作者：涂荣波范存欣吴晓明郭莹暨南大学医学院病理生理学教研室广州510632 暨南大学医学院公共卫生学教研室暨南大学医学院统计学教研室暨南大学医学院口腔系

目的了解现阶段广东省新型农村合作医疗制度建设、发展情况及存在问题，并提出建议。方法采取目的抽样方法对粤中、粤东、粤西、粤北共500名农民进行入户调查。结果64．8％的调查对象参加了当年的合作医疗，男女之间合作医疗参加率差异... 详细信息

目的了解现阶段广东省新型农村合作医疗制度建设、发展情况及存在问题，并提出建议。方法采取目的抽样方法对粤中、粤东、粤西、粤北共500名农民进行入户调查。结果64．8％的调查对象参加了当年的合作医疗，男女之间合作医疗参加率差异无统计学意义（x^2=0．34，P=0．558）。各年龄组合作医疗参加率差异有统计学意义（x^2=22．88，P=0．000），以30～44岁年龄组最高（67．2％），15～29岁年龄组最低（51．1％）。不同文化程度农民的合作医疗参加率差异有统计学意义（x^2=17．86，P=0．001），小学文化组最高（74．3％），文盲组最低（47．1％）。不同地区的合作医疗参加率差异有统计学意义（x^2=11．40，P=0．010），以粤东和粤中地区较高（74．4％，71．4％），粤西、北地区较低（57．1％，60．2％）。结论在广东省，新型农村合作医疗存在宣传力度不够，合作医疗参加率较低，农民缺乏信任，具体措施不合理，参保费用混乱等情况。

关键词：农民新型农村合作医疗参加率

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人NOD2基因启动子的绿色荧光蛋白表达载体的构建

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现代免疫学 2008年第3期28卷 219-223页

作者：孙丽萍胡巢凤周羽竝暨南大学医学院病理生理学教研室发热研究室广州510632 暨南大学医学院生化教研室广州510632

人NOD2基因启动子的绿色荧光蛋白表达载体的构建。以人基因组DNA为模板,PCR扩增含有人NOD2基因启动子不同长度的4段序列,利用特定的限制性内切酶位点,以切除启动子的pEGFP-N3作为框架结构,将这4个序列片段进行酶切并插入表达载体pEGFP-N... 详细信息

人NOD2基因启动子的绿色荧光蛋白表达载体的构建。以人基因组DNA为模板,PCR扩增含有人NOD2基因启动子不同长度的4段序列,利用特定的限制性内切酶位点,以切除启动子的pEGFP-N3作为框架结构,将这4个序列片段进行酶切并插入表达载体pEGFP-N3中,用Vsp I和Pst I双酶切和PCR鉴定重组质粒,再将重组质粒进行DNA序列分析。构建的重组质粒经脂质体LipofectamineTM2000介导转染HTK293T细胞,转染24 h后加入TNF-α持续刺激细胞24 h或不加TNF-α刺激,在倒置荧光显微镜下观察其能否在NOD2基因启动子的调控下表达报告基因绿色荧光蛋白(green fluores-cent proteins,GFP)。结果:pEGFP-N3-NOD2(617 bp)、pEGFP-N3-NOD2(747 bp)、pEGFP-N3-NOD2(1 136 bp)、pEG-FP-N3-NOD2(1 387 bp)分别经酶切鉴定和序列测定证实目的基因已插入重组质粒;细胞转染结果表明,构建的4段重组质粒pEGFP-N3-NOD2(617 bp)、pEGFP-N3-NOD2(747 bp)、pEGFP-N3-NOD2(1 136 bp)、pEGFP-N3-NOD2(1 387 bp)转染的HTK293T均能表达绿色荧光,其中构建pEGFP-N3-NOD2(1 387 bp)重组质粒经TNF-α持续刺后激绿色荧光表达最强。4段不同长度的人NOD2基因启动子绿色荧光蛋白表达载体成功构建,这为进一步研究NOD2基因表达及调控机制奠定了良好的基础。

关键词： NOD2启动区载体基因表达

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纤维蛋白胶与兔角膜3种细胞构建组织工程细胞片研究

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中国病理生理杂志 2008年第4期24卷 797-801页

作者：梁晓东陈建苏郑佩娥陈小琳暨南大学附属第一医院眼科广东广州510632 暨南大学医学院眼科研究室广东广州510632 暨南大学医学院病理学教研室广东广州510632 暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632

目的:观察兔角膜3种细胞能否在体外构建的纤维蛋白胶体上良好生长,探讨纤维蛋白胶作为组织工程细胞片支架材料的可行性。方法:将培养扩增的兔角膜3种细胞分别接种于纤维蛋白胶表面,采用倒置显微镜,HE染色和扫描电子显微镜,观察兔角膜3... 详细信息

目的:观察兔角膜3种细胞能否在体外构建的纤维蛋白胶体上良好生长,探讨纤维蛋白胶作为组织工程细胞片支架材料的可行性。方法:将培养扩增的兔角膜3种细胞分别接种于纤维蛋白胶表面,采用倒置显微镜,HE染色和扫描电子显微镜,观察兔角膜3种细胞在纤维蛋白胶表面生长情况。结果:制备的薄层纤维蛋白胶支架光滑、透明,随培养细胞的生长部分降解,可获得仅带少量纤维蛋白胶的细胞片。角膜3种细胞在纤维蛋白胶表面生长良好,可保持生理状态的细胞形态。角膜上皮细胞可形成单层和复层,细胞间连接紧密。角膜内皮细胞呈圆形或多角形,细胞大小一致,排列紧密。角膜基质细胞拉长生长,呈三角形或树枝状,细胞间连接明显,可形成网状连接。结论:体外构建的纤维蛋白胶与角膜3种细胞有组织相容性,纤维蛋白胶有望作为角膜3种细胞的生长载体构建可供移植的组织工程细胞片。

关键词：纤维蛋白组织黏着剂角膜细胞培养组织工程

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