检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2011年第11期31卷 1041-1045页

作者：李忠玉吴移谋黄秋林粟盛梅周洲陈超群周辉钟光明南华大学医学院微生物学与免疫学教研室衡阳421001 南华大学第一附属医院普外科美国德克萨斯大学健康科学中心

目的纯化抗沙眼衣原体pORF5单克隆抗体2H4并鉴定其免疫学特性.方法大量培养pORF5单克隆抗体阳性杂交瘤细胞株并收集培养上清,采用G蛋白免疫亲和层析法纯化2H4单克隆抗体；酶联免疫吸附试验（ELISA）测定2H4效价及抗体亚类；Western b... 详细信息

目的纯化抗沙眼衣原体pORF5单克隆抗体2H4并鉴定其免疫学特性.方法大量培养pORF5单克隆抗体阳性杂交瘤细胞株并收集培养上清,采用G蛋白免疫亲和层析法纯化2H4单克隆抗体；酶联免疫吸附试验（ELISA）测定2H4效价及抗体亚类；Western blot鉴定其特异性；免疫荧光试验（IFA）检测2H4单克隆抗体的衣原体种属特异性.结果纯化后2H4抗体的纯度高达93％；效价为1：1024,免疫球蛋白类型为IgG2a;2H4抗体不仅能特异性识别pORF5融合蛋白,而且能特异性识别Ct血清型A、D、L2、鼠农原体（MoPn）、鹦鹉热嗜农原体（6BC）质粒所编码的内源性pORF5蛋白,但不识别衣原体其他质粒蛋白和肺炎嗜衣原体（Cpn）.结论获得了高纯度的能特异识别pORF5质粒蛋白的单克隆抗体,为进一步研究pORF5蛋白结构和功能以及沙眼衣原体诊断试剂盒的研制奠定了良好的基础.

关键词：沙眼衣原体 pORF5质粒蛋白单克隆抗体免疫学特性

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一种高效准确定量计数噬菌体肽库目标分子的方法

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2011年第3期29卷 236-238页

作者：王可耕曾庆仁禹正杨曾铁兵刘彦南华大学医学院寄生虫学教研室衡阳421001 中南大学医学细胞与分子生物学实验中心长沙410013 南华大学附属第一医院肿瘤外科衡阳421001 南华大学医学院微生物学和免疫学教研室衡阳421001

利用双层琼脂平板法与荧光实时定量PCR(Real-time PCR)技术分别测定少量、中量和大量噬菌体的效价。结果显示,双层琼脂平板法与Real-time PCR法均可准确测定噬菌体效价。双层琼脂平板法所得符合条件的平板约为总数的1/3,需重复测定10次... 详细信息

利用双层琼脂平板法与荧光实时定量PCR(Real-time PCR)技术分别测定少量、中量和大量噬菌体的效价。结果显示,双层琼脂平板法与Real-time PCR法均可准确测定噬菌体效价。双层琼脂平板法所得符合条件的平板约为总数的1/3,需重复测定10次,每次消耗噬菌体10μl,测得噬菌体效价的组内变异系数为4.93%～30.38%。Real-timePCR法重复测定3次即可,每次消耗噬菌体1μl,其组内变异系数仅为0.02%～0.25%,明显低于双层琼脂平板法。提示,Real-time PCR技术可简单、迅速地测定噬菌体效价。

关键词：噬菌体效价双层琼脂平板法荧光实时定量PCR

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沙眼衣原体CT058蛋白在感染细胞中的定位分析

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微生物学通报 2011年第12期38卷 1863-1868页

作者：陈超群吴移谋任林李忠玉南华大学医学院微生物学与免疫学教研室/病原生物学研究所湖南衡阳421001 南华大学附属第一医院检验科湖南衡阳421001

分析沙眼衣原体CT058蛋白在感染细胞中的定位。克隆表达CT058蛋白;纯化的CT058融合蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体;间接免疫荧光法对CT058蛋白在沙眼衣原体感染细胞中的定位进行分析;Western blot检测CT058蛋白在原体和网状体中的表达情况... 详细信息

分析沙眼衣原体CT058蛋白在感染细胞中的定位。克隆表达CT058蛋白;纯化的CT058融合蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体;间接免疫荧光法对CT058蛋白在沙眼衣原体感染细胞中的定位进行分析;Western blot检测CT058蛋白在原体和网状体中的表达情况。间接免疫荧光染色实验显示CT058蛋白位于包涵体内;鼠抗GST-CT058抗体与GST-CT058融合蛋白吸附后特异性染色消失,而与GST-CT232融合蛋白吸附后仍然可见GST-CT058抗体的包涵体染色特征;Western blot证实CT058蛋白在纯化的原体和网状体上均有表达。CT058蛋白定位于沙眼衣原体感染细胞的包涵体内。

关键词：沙眼衣原体 CT058 亚细胞定位

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沙眼衣原体质粒蛋白pORF5生物学特性初步研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2011年第2期31卷 124-128页

作者：李忠玉吴移谋黄秋林钟光明南华大学医学院微生物学与免疫学教研室衡阳421001 南华大学第一附属医院普外科美国德州大学圣安东尼奥医学研究中心

目的分析沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis,Ct）隐蔽性质粒编码的质粒蛋白pORF5在感染细胞中的定位并初步探讨其生物学特征.方法 PCR扩增pORF5质粒蛋白编码基因,构建pORF5原核表达重组体并诱导表达融合蛋白融合蛋白经Glutathione S... 详细信息

目的分析沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis,Ct）隐蔽性质粒编码的质粒蛋白pORF5在感染细胞中的定位并初步探讨其生物学特征.方法 PCR扩增pORF5质粒蛋白编码基因,构建pORF5原核表达重组体并诱导表达融合蛋白融合蛋白经Glutathione Sepharose亲和层析纯化后免疫小鼠,制备单克隆抗体和多克隆抗体,间接免疫荧光技术及免疫印迹鉴定抗体的特异性分析pORF5质粒蛋白在感染细胞中的分布及表达模式特征.采用ELISA分析pORF5质粒蛋白在自然感染状态下的表达情况及免疫原性.结果 pORF5主要分布于宿主细胞质,但也少量分布在原体（EB）和网状体（RB）上,在细胞质中的分布模式与衣原体分泌蛋白酶样活性因子（CPAF）基本相似,激光共聚焦结果显示两者并不重叠 pORF5能与Ct生殖道感染患者血清发生强烈的免疫应答.结论 pORF5为衣原体分泌蛋白,并具有很强的免疫原性在自然感染状态下,pORF5质粒蛋白基因被激活产生内源性靶蛋白.

关键词：沙眼衣原体质粒分泌蛋白 pORF5

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衡阳地区儿童血培养病原菌的分布及耐药性分析

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中华医院感染学杂志 2011年第19期21卷 4160-4162页

作者：任林陈超群张秋桂李晓丽南华大学附属第一医院检验科湖南衡阳421001 南华大学医学院微生物学与免疫学教研室湖南衡阳421001

目的了解医院2007-2009年小儿血培养病原菌菌群分布及其耐药性。方法 3522份小儿血标本经BACTEC 9120全自动血培养仪培养检测,分离出的病原菌用API半自动微生物鉴定系统进行鉴定及药敏试验。结果共分离出212株病原菌,血培养阳性率6.02%... 详细信息

目的了解医院2007-2009年小儿血培养病原菌菌群分布及其耐药性。方法 3522份小儿血标本经BACTEC 9120全自动血培养仪培养检测,分离出的病原菌用API半自动微生物鉴定系统进行鉴定及药敏试验。结果共分离出212株病原菌,血培养阳性率6.02%,其中革兰阳性菌145株,占68.4%,革兰阴性菌67株,占31.6%,检出前5位的病原菌依次为:凝固酶阴性葡萄球菌、沙门菌属、大肠埃希菌、肠球菌属、克雷伯菌属,分别占49.5%、10.8%、8.0%、7.6%、6.6%;各主要致病革兰阳性菌对万古霉素敏感;葡萄球菌属的耐药情况严重,对苯唑西林、青霉素、红霉素及庆大霉素的耐药率>75.0%,肠球菌属对青霉素与左氧氟沙星耐药率为100.0%,链球菌属对克林霉素和红霉素的耐药率为100.0%;常见革兰阴性菌对头孢呋辛与头孢噻吩均耐药,各主要致病革兰阴性菌对亚胺培南、美罗培南、奈替米星、头孢他啶、阿莫西林/克拉维酸及哌拉西林/他唑巴坦敏感。结论小儿血培养病原菌以革兰阳性菌占优势,凝固酶阴性葡萄球菌居首位,检出菌均存在严重耐药问题,及时监测病原菌变化及耐药趋势以指导临床用药至关重要。

关键词：血培养儿童病原菌耐药性

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质粒蛋白pORF5在沙眼衣原体感染细胞中的定位及免疫原性研究(英文)

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免疫学杂志 2011年第2期27卷 93-97,104页

作者：李忠玉吴移谋黄秋林钟光明周洲粟盛梅南华大学医学院微生物学与免疫学教研室衡阳421001 南华大学附属第一医院普外科衡阳421001 University of Texas Health Science Center at San Antonio TX USA78229

目的分析沙眼衣原体隐蔽性质粒编码的质粒蛋白pORF5在感染细胞中的定位并初步探讨免疫原性特征。方法 PCR扩增pORF5质粒蛋白编码基因,构建原核表达重组体pGEX-6p/pORF5,重组体转化大肠杆菌XL1-blue中诱导表达融合蛋白;融合蛋白经Glutath... 详细信息

目的分析沙眼衣原体隐蔽性质粒编码的质粒蛋白pORF5在感染细胞中的定位并初步探讨免疫原性特征。方法 PCR扩增pORF5质粒蛋白编码基因,构建原核表达重组体pGEX-6p/pORF5,重组体转化大肠杆菌XL1-blue中诱导表达融合蛋白;融合蛋白经Glutathione Sepharose亲和层析纯化后免疫小鼠,制备单克隆抗体和多克隆抗体,间接免疫荧光技术及免疫印迹鉴定抗体的特异性,并分析pORF5质粒蛋白在感染细胞中的分布特征。采用ELISA方法分析pORF5质粒蛋白的免疫原性。结果 pORF5原核表达重组体成功构建,融合蛋白在大肠杆菌中可溶性表达;pORF5主要分布于宿主细胞胞浆,但也少量分布在EB、RB上;pORF5能与衣原体患者血清及鼠免疫血清发生强烈地免疫反应。结论 pORF5为衣原体分泌蛋白,并具有很强的免疫原性。

关键词：沙眼衣原体质粒分泌蛋白 pORF5 免疫原性

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苏木乙酸乙酯提取物对溃疡性结肠炎大鼠T淋巴细胞亚群的影响

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黑龙江畜牧兽医 2011年第1期 114-116页

作者：于艳房勇华北煤炭医学院秦皇岛分院免疫学教研室河北秦皇岛066000 哈尔滨医科大学医学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

为了观察苏木乙酸乙酯提取物对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠T淋巴细胞亚群的影响,试验采用兔黏膜免疫法造模,将Wistar大鼠随机分成正常对照组、模型组、苏木低剂量组、苏木中剂量组、苏木高剂量组、柳氮磺胺吡啶组(SASP组)... 详细信息

为了观察苏木乙酸乙酯提取物对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠T淋巴细胞亚群的影响,试验采用兔黏膜免疫法造模,将Wistar大鼠随机分成正常对照组、模型组、苏木低剂量组、苏木中剂量组、苏木高剂量组、柳氮磺胺吡啶组(SASP组),除正常对照组外,其余各组均造模。造模后各组分别以生理盐水、苏木乙酸乙酯提取物、SASP灌胃给药21 d,运用流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群的表达。结果表明:模型组CD4+及CD4+/CD8+升高,与正常对照组相比差异均有统计学意义;苏木高、中、低剂量组、SASP组CD4+及CD4+/CD8+降低,与模型组相比差异均有统计学意义;苏木高、中、低剂量组与SASP组相比无统计学差异。说明苏木乙酸乙酯提取物通过调节UC大鼠的细胞免疫功能发挥对UC大鼠的保护作用。

关键词：苏木乙酸乙酯提取物溃疡性结肠炎 T淋巴细胞亚群

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医学微生物学课程中经典PBL的实施、评价与思考