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中国组织工程研究与临床康复 2012年第5期16卷 867-870页

作者：李柳侯光辉吴静暨南大学第一临床医院眼科广东省广州市510632 暨南大学第三附属医院眼科广东省广州市519000 暨南大学医学院眼科教研室广东省广州市510632

背景:传统的细胞冻存多采用4,-20℃放置的阶梯式降温方法,程序复杂且浪费时间。目的:比较传统法与改良冻存法对血管内皮细胞的保护效果。方法:将常规培养的人血管内皮细胞用胰酶消化后,用配置好的冻存液(10%二甲基亚砜、体积分数60%胎... 详细信息

背景:传统的细胞冻存多采用4,-20℃放置的阶梯式降温方法,程序复杂且浪费时间。目的:比较传统法与改良冻存法对血管内皮细胞的保护效果。方法:将常规培养的人血管内皮细胞用胰酶消化后,用配置好的冻存液(10%二甲基亚砜、体积分数60%胎牛血清、30%DMEM无血清培养基)调整浓度,将细胞悬液吸入冻存管,分组干预:实验组以纱布包裹,并直接投入-80℃冰箱;对照组按常规冻存法,4℃冰箱和-20℃冰箱分别预冷30min和1h后放入-80℃冰箱。1个月后快速复苏冻存细胞。结果与结论:复苏后实验组细胞存活率及生长曲线与对照组比较差异无显著性意义;复苏后实验组细胞贴壁率、形态学变化及增殖能力明显优于对照组。说明改良的纱布包裹法优于传统的细胞冻存法,且更加方便快捷。

关键词：冻存纱布血管内皮细胞 MTT 保护效果

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CD4、CCR5、CXCR4和DC-SIGN分子在HIV-1感染者及正常人晚孕胎盘及早孕绒毛的表达

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中华疾病控制杂志 2012年第8期16卷 643-646页

作者：董晓梅董杉彭淋蔡卫平禤庆山王辉王自能王声湧暨南大学医学院流行病学教研室广东广州510632 广州市第八人民医院感染科广东广州510060 广州市妇婴医院妇产科广东广州510180 深圳市第三人民医院感染科广东深圳518020 暨南大学附属第一医院妇产科广东广州510630

目的明确CD4、CCR5、CXCR4和DC-SIGN分子在HIV-1不同感染状态晚孕胎盘和早孕绒毛的存在及表达情况,为探索HIV-1宫内传播的分子机制提供理论依据。方法收集11例HIV-1感染孕妇胎盘、13例正常孕妇胎盘和10例早孕流产绒毛,免疫组化检测并比... 详细信息

目的明确CD4、CCR5、CXCR4和DC-SIGN分子在HIV-1不同感染状态晚孕胎盘和早孕绒毛的存在及表达情况,为探索HIV-1宫内传播的分子机制提供理论依据。方法收集11例HIV-1感染孕妇胎盘、13例正常孕妇胎盘和10例早孕流产绒毛,免疫组化检测并比较3组孕妇胎盘或绒毛组织中HIV-1相关受体CD4、CCR5、CXCR4和DC-SIGN分子的存在情况及其表达强度。结果 CD4在早孕绒毛和晚孕胎盘中的表达存在个体差异,早孕组、对照组和病例组CD4阳性率分别为70.00%、61.54%、72.73%,3组阳性率差异无统计学意义(P=0.902)。CCR5、CXCR4和DC-SIGN分子在胎盘均有表达,均定位于滋养细胞和绒毛间质细胞和/或Hofbauer细胞,且在早孕绒毛中的表达强度均低于晚孕胎盘组,差异均有统计学意义(t1=-4.09,P1<0.001;t2=-4.80,P2<0.001;t3=-4.57,P3=0.001)。结论胎盘组织中存在多种HIV-1受体相关分子,具备感染的分子基础。胎盘滋养细胞上是否存在CD4分子具有个体差异;CCR5、CXCR4和DC-SIGN分子在晚孕胎盘中的表达高于早孕的绒毛,可能是HIV-1感染宫内传播多发生于孕晚期的原因之一。

关键词： HIV-1 胎盘抗原,CD4 受体,CCR5 受体,CXCR4

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聚乳酸/壳聚糖纳米纤维/纳米羟基磷灰石支架与兔软骨细胞的相容性

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中国组织工程研究 2012年第8期16卷 1413-1416页

作者：梁鸿志查振刚姚平吴昊刘宁李劼若郇松玮苗贵强赵剑豪暨南大学附属第一医院骨科暨南大学骨科疾病研究所广东省广州市510632 暨南大学医学院生理学教研室广东省广州市510632 暨南大学理工学院材料系广东省广州市510632

背景：传统的支架材料存在疏水性强,材料表面缺乏细胞表面受体特异结合的生物活性分子,材料的酸性降解产物易引发无菌性炎性反应等不足。根据仿生原理及软骨真实结构和构成来选择和制备组织工程软骨支架能够获得理想效果。目的：制备聚... 详细信息

背景：传统的支架材料存在疏水性强,材料表面缺乏细胞表面受体特异结合的生物活性分子,材料的酸性降解产物易引发无菌性炎性反应等不足。根据仿生原理及软骨真实结构和构成来选择和制备组织工程软骨支架能够获得理想效果。目的：制备聚乳酸/壳聚糖纳米纤维/纳米羟基磷灰石支架,评价其与兔膝关节软骨细胞的生物相容性,探讨其应用于关节软骨组织工程的可行性。方法：采用二次相分离技术制备聚乳酸/壳聚糖纳米纤维/纳米羟基磷灰石复合支架,将第3代新西兰兔软骨细胞接种至复合支架材料上复合培养,倒置相差显微镜下观察细胞生长情况。细胞-支架复合物在24孔板中培养5d以后,将其植入裸鼠皮下8周。结果与结论：聚乳酸/壳聚糖纳米纤维/纳米羟基磷灰石支架材料经化学合成后,具有合适的三维多孔结构,孔隙率为90%孔径300-450μm;植入裸鼠皮下8周后Ⅱ型胶原免疫组织化学染色和甲苯胺蓝染色显示细胞-支架复合物中的软骨细胞可以像天然软骨一样分泌黏多糖和Ⅱ型胶原。提示生物材料聚乳酸/壳聚糖纳米纤维/纳米羟基磷灰石对于兔软骨细胞有良好的生物相容性,可作为生物组织工程支架。

关键词：聚乳酸组织工程软骨细胞壳聚糖羟基磷灰石支架

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聚左旋乳酸/壳聚糖纳米纤维三维多孔支架复合骨髓间充质干细胞修复兔骨缺损

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中国组织工程研究 2012年第8期16卷 1331-1335页

作者：王欢林宏生查振刚谭文成郑力恒姚平张嘉晴苗贵强暨南大学骨科疾病研究所广东省广州510632 暨南市大学附属第一医院骨科广东省广州市510630 澳门仁和医疗中心澳门特别行政区999078 澳门仁伯爵医院澳门特别行政区999078 暨南大学医学院生理学教研室广东省广州市510632 暨南大学医学院生物化学教研室广东省广州市510632 佛山市南海区人民医院广东省佛山市528200

背景:骨髓间充质干细胞具有向多种间质细胞谱系分化的能力,且支架材料的性能对骨缺损的修复有重要影响。目的:观察聚左旋乳酸/壳聚糖纳米纤维三维多孔支架复合骨髓间充质干细胞治疗骨缺损。方法:对骨缺损模型兔分别采用空白植入、髂后... 详细信息

背景:骨髓间充质干细胞具有向多种间质细胞谱系分化的能力,且支架材料的性能对骨缺损的修复有重要影响。目的:观察聚左旋乳酸/壳聚糖纳米纤维三维多孔支架复合骨髓间充质干细胞治疗骨缺损。方法:对骨缺损模型兔分别采用空白植入、髂后上棘自体松质骨移植、聚左旋乳酸/壳聚糖纳米纤维多孔支架移植和复合了骨髓间充质干细胞的聚左旋乳酸/壳聚糖纳米纤维多孔支架移植修复缺损部位。结果与结论:至移植12周,移植复合了骨髓间充质干细胞的聚左旋乳酸/壳聚糖纳米纤维多孔支架的实验兔的缺损处有骨组织生成,支架材料降解,已完成缺损修复,其修复情况接近松质骨组;髂后上棘自体松质骨移植的实验兔的缺损修复完好,新形成的骨组织较规则;只植入聚左旋乳酸/壳聚糖纳米纤维多孔支架的实验兔有少量骨组织形成,材料部分降解;空白植入的实验兔缺损处无新生骨组织生成,主要由纤维结缔组织填充。说明新型的生物支架材料聚左旋乳酸/壳聚糖纳米纤维三维多孔支架与来源于新西兰大白兔的骨髓间充质干细胞复合培养后,植入同种异体兔股骨髁缺损处,使骨缺损的修复速度加快,表现为较好的体内诱导成骨的作用。

关键词：纳米纤维聚左旋乳酸骨髓间充质干细胞骨缺损骨组织工程

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伴有颅内动脉狭窄的缺血性脑卒中患者脑血管储备能力研究

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中国神经精神疾病杂志 2011年第3期37卷 154-156页

作者：黄立安董晓梅徐安定宋雪文凌雪英周环暨南大学第一附属医院神经内科广州510632 暨南大学医学院统计学教研室暨南大学第一附属医院影像中心

目的对伴有颅内动脉狭窄的缺血性脑卒中患者采用口服乙酰唑胺实验研究颅内大动脉血流储备能力。方法对17例经磁共振血管显影(magnetic resonance angiography,MRA)/或经颅多谱勒超声(transcranial doppler ultrasonography,TCD)证实颅... 详细信息

目的对伴有颅内动脉狭窄的缺血性脑卒中患者采用口服乙酰唑胺实验研究颅内大动脉血流储备能力。方法对17例经磁共振血管显影(magnetic resonance angiography,MRA)/或经颅多谱勒超声(transcranial doppler ultrasonography,TCD)证实颅内动脉狭窄大于50%的缺血性脑卒中患者,按TOAST分型为动脉粥样硬化性脑梗死,通过TCD共测定187条颅内大血管血流速度,2 d后再口服乙酰唑胺2 g,2 h后再行TCD检查,比较乙酰唑胺前后颅内大血管血流速度改变情况。结果乙酰唑胺实验可使颅内血管血流速度明显增加。右颈内动脉(right internal carotid artery,RICA)、右大脑中动脉(right middle cerebral artery,RMCA)和右大脑后动脉(right posterior cerebral artery,RPCA)在乙酰唑胺后血流速度增加但无统计学差异(P值分别为0.086,0.258,0.084),而其他颅内血管在乙酰唑胺后血流速度显著增加(P值都小于0.05)。非狭窄血管较狭窄血管乙酰唑胺后血流速度增加,但无统计学差异(P=0.08)。中度狭窄血管与重度狭窄血管乙酰唑胺后血流速度改变无差异(P=0.65)。结论乙酰唑胺前后TCD可以准确测定颅内大动脉的血管血流储备能力,颅内狭窄血管较非狭窄血管血流储备能力有下降的趋势,而中度和重度狭窄血管血流储备能力无明显差异,但仍有待进一步的研究。

关键词：血管储备狭窄 TCD 乙酰唑胺

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一例Citrin缺陷病患儿棘形红细胞的扫描电镜观察

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电子显微学报 2011年第3期30卷 250-252页

作者：曹水良宋元宗王自能郭祖文唐福星暨南大学电镜室广东广州510632 暨南大学附属第一医院儿科广东广州510630 暨南大学医学院妇产科教研室广东广州510632

目的:探讨Citrin缺陷导致的新生儿肝内胆汁淤积症(NICCD)红细胞形态变化。方法:抽取一例NICCD患儿治疗前和治疗后的静脉血作为研究对象,应用扫描电镜和透射电镜观察红细胞的超微结构。结果:在扫描电镜下,该NICCD患者治疗前正常红细胞数... 详细信息

目的:探讨Citrin缺陷导致的新生儿肝内胆汁淤积症(NICCD)红细胞形态变化。方法:抽取一例NICCD患儿治疗前和治疗后的静脉血作为研究对象,应用扫描电镜和透射电镜观察红细胞的超微结构。结果:在扫描电镜下,该NICCD患者治疗前正常红细胞数百分比仅为1.4%,而棘形红细胞高达红细胞总数的95.6%,其它异形红细胞为3.2%。治疗后,视野内几乎均为正常红细胞,偶见棘形红细胞。在透射电镜下,治疗前红细胞膜表面有棘状突起,治疗后红细胞膜表面光滑,大部分红细胞切面呈棒状。结论:该例NICCD患儿治疗前棘形红细胞显著增加,治疗后红细胞形态恢复为双凹圆盘形,提示红细胞超微结构改变。可作为Citrin缺陷病的临床病理诊断辅助指征。

关键词： Citrin缺陷红细胞扫描电镜棘形红细胞

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纳米金对表阿霉素的增敏作用

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中华实验外科杂志 2011年第4期28卷 533-535页

作者：潘运龙赵晓旭覃莉杜彬吕荣钊蔡继业暨南大学附属第一医院普外科广州510632 暨南大学医学院组织胚胎学教研室暨南大学医学院病理学教研室暨南大学生命科学技术学院纳米生物技术实验室

目的观察纳米金对表阿霉素在抑制HepG2细胞增殖中如何发挥增敏作用。方法实验组分为纳米金预处理组和单纯表阿霉素组。常规消化HepG2细胞后种板，各组分别加入2μg/L的纳米金溶液和无血清培养液100μl，于设定的时间点（30、60、120和24... 详细信息

目的观察纳米金对表阿霉素在抑制HepG2细胞增殖中如何发挥增敏作用。方法实验组分为纳米金预处理组和单纯表阿霉素组。常规消化HepG2细胞后种板，各组分别加入2μg/L的纳米金溶液和无血清培养液100μl，于设定的时间点（30、60、120和240min）加入1mg／L的表阿霉素溶液100山，继续培养24h后噻唑蓝（MTT）比色法检测两组药物对HepG2细胞的增殖抑制作用；紫外．可见分光光度计（uV—Vis）检测各组HepG2细胞内积聚的表阿霉素量；原子力显微镜（AFM）观察HepG2细胞表面形态及超微结构变化。结果纳米金预处理组各时间点HepG2细胞增殖抑制率[（50．53±1．38）％、（51．83±0．47）％、（48．66±2．21）％、（43．55±1．01）％]均明显高于对应的单纯表阿霉素组[（37．24±3．49）％、（39．42±2．28）％、（34．98±2．27）％、（28．92±3．80）％]，P值〈0．01；纳米金预处理组（60min）表阿霉素在HepG2细胞内积聚的量最多，为（4．01±0．14）p,g；AFM检测到纳米金预处理组HepG2细胞膜内陷，粗糙度增加，表面孔径增大，细胞核的饱满程度减少。结论纳米金可通过增加表阿霉素在HepG2细胞内的积聚量来发挥增敏作用，纳米金预处理60rain对表阿霉素的增敏作用最大。

关键词：纳米金表阿霉素增敏作用

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高浓度葡萄糖对培养兔角膜上皮细胞增殖活性的影响

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广东医学 2011年第10期32卷 1224-1226页

作者：宋子宣陈剑王彦平阮余霞陈建苏吴静唐光霞高松哲暨南大学附属第一医院眼科暨南大学医学院病理生理学教研室广州510630 暨南大学医学院眼科研究室广州510632

目的研究高浓度葡萄糖对体外培养兔角膜上皮细胞增殖活性的影响,建立糖尿病性兔角膜上皮细胞培养模型。方法按照析因设计方法将葡萄糖浓度(25、40、60 mmol/L)和培养时间(24、48、72 h)进行全面组合,应用SunBioTM Am-Blue细胞增殖与活... 详细信息

目的研究高浓度葡萄糖对体外培养兔角膜上皮细胞增殖活性的影响,建立糖尿病性兔角膜上皮细胞培养模型。方法按照析因设计方法将葡萄糖浓度(25、40、60 mmol/L)和培养时间(24、48、72 h)进行全面组合,应用SunBioTM Am-Blue细胞增殖与活性检测试剂检测兔角膜上皮细胞增殖活性,倒置显微镜观察细胞形态。结果高浓度葡萄糖对兔角膜上皮细胞增殖活性的影响有统计学意义(F=276.318,P<0.01),作用时间对细胞增殖活性的影响有统计学意义(F=38.727,P<0.01),葡萄糖浓度和作用时间之间有交互作用(F=2.687,P<0.05)。结论高浓度葡萄糖对体外培养兔角膜上皮细胞增殖活性有抑制作用,随时间的延长抑制作用加强。

关键词：高浓度葡萄糖角膜上皮细胞增殖活性兔

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联合雾化吸入氟碳及中药川芎嗪治疗急性肺损伤的血流动力学及组织病理的改变

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南方医科大学学报 2011年第8期31卷 1382-1386页

作者：彭雪梅谢娟华帅兵李雅兰王仲红王华东王彦平暨南大学附属第一医院麻醉科广东广州510630 番禺区何贤纪念医院麻醉科广东广州511400 暨南大学医学院病理生理教研室广东广州510630

目的探讨联合雾化吸入PFC(perfluorocarbon)与中药川芎嗪治疗急性肺损伤时血流动力学及组织病理的改变。方法采用肺灌洗诱导急性肺损伤(acute lung injury,ALI)后,动物分3组:①雾化吸入PFC(perfluorocarbon group,P组)组;②联合雾化吸入... 详细信息

目的探讨联合雾化吸入PFC(perfluorocarbon)与中药川芎嗪治疗急性肺损伤时血流动力学及组织病理的改变。方法采用肺灌洗诱导急性肺损伤(acute lung injury,ALI)后,动物分3组:①雾化吸入PFC(perfluorocarbon group,P组)组;②联合雾化吸入PFC-川芎嗪(tetramethylpyrazine-perfluorocarbon group,TP组)组;③雾化中药川芎嗪(chinese medicial con-tral group,T组)组。分别在ALI前、灌洗后、ALI及ALI后1、2、3、4 h 7个时段观察MAP、PetCO2、mPAP、CVP以及PAWP等血流动力学指标的变化,实验结束后取肺组织做病理学分析。结果肺灌洗后3组动物MAP、mPAP、CVP以及PAWP显著升高(P>0.05),TP组治疗干预后各时段MAP、mPAP、CVP以及PAWP变化与P、T组相应时段比较具有统计学意义(P<0.05)。组织病理学显示TP组的病理改变最小,T组改变最大。结论联合雾化吸入PFC与中药川芎嗪能有效的改善氧合,显著的降低肺动脉压,减少肺组织损伤。

关键词：雾化氟碳急性肺损伤川芎嗪肺动脉压

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人羊膜上皮细胞的体外培养及标记

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广东医学 2011年第5期32卷 555-558页

作者：阮余霞周清陈剑王彦平杨筱曦李红唐光霞吴静暨南大学附属第一医院眼科广州510630 暨南大学医学院病理生理学教研室广州510632 暨南大学附属第一医院病理科广州510630 暨南大学医学院眼科研究室广州510632

目的改良人羊膜上皮细胞的培养方法,检测生长特性,观察荧光染料4,-6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)标记人羊膜上皮细胞(HAECs)的效率。方法取足月剖宫产术后羊膜经胶原酶和胰蛋白酶消化获得上皮细胞。MTT法绘制细胞生长曲线、流式细胞仪检测细... 详细信息

目的改良人羊膜上皮细胞的培养方法,检测生长特性,观察荧光染料4,-6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)标记人羊膜上皮细胞(HAECs)的效率。方法取足月剖宫产术后羊膜经胶原酶和胰蛋白酶消化获得上皮细胞。MTT法绘制细胞生长曲线、流式细胞仪检测细胞的生长周期,免疫组化对细胞角蛋白进行鉴定。并用DAPI标记,测1、2周荧光阳性率。结果培养的HAECs多角形,生长分为缓滞期、对数增长期和平台期,近80%处于细胞周期的静止期G0。细胞角蛋白keratin阳性表达。DAPI标记1周标记率为100%;2周细胞形态好,标记率不变,荧光强度减弱。结论该实验方法成功培养人羊膜上皮细胞。DAPI短期标记效果理想。

关键词：人羊膜上皮细胞 4,6-联脒-2-苯基吲哚细胞培养

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